产志贺样毒素大肠埃希菌的分子生物学鉴定

目的　探讨产志贺样毒素大肠埃希菌（ Ｓ Ｌ Ｔ Ｅ Ｃ） 在小儿腹泻中的病原学地位。方法　根据肠出血性大肠埃希菌（ Ｅ Ｈ Ｅ Ｃ） Ｏ１５７ ： Ｈ７ 的 Ｓ Ｌ Ｔ１ 、 Ｓ Ｌ Ｔ２ 、ｅａｅ Ａ 基因片段设计了３ 对引物,采用聚合酶链反应检测大肠埃希菌中 Ｓ Ｌ Ｔ１ 、 Ｓ Ｌ Ｔ２ 和ｅａｅ Ａ 毒力基因。结果　２９ 株标准致泻大肠埃希菌（ Ｅ Ｈ Ｅ Ｃ、 Ｅ Ｐ Ｅ Ｃ、 Ｅ Ｔ Ｅ Ｃ） 和１０ 株其他肠道病原菌中,只有１ 株 Ｅ Ｈ Ｅ Ｃ检出 Ｓ Ｌ Ｔ１ 、 Ｓ Ｌ Ｔ２ 、ｅａｅ Ａ 毒力基因,其他均为阴性。从１ ０３２ 例腹泻患儿粪便中分离的４７４ 株未定型大肠埃希菌中,检出 Ｓ Ｌ Ｔ１ ２０ 株（４２ ％ ） , Ｓ Ｌ Ｔ２ ７ 株（１５ ％ ） ;７４ 株肠产志贺样毒素且具侵袭力的大肠埃希菌（ Ｅ Ｓ Ｉ Ｅ Ｃ） 中检出 Ｓ Ｌ Ｔ１ １５ 株（２０３ ％ ） , Ｓ Ｌ Ｔ２ ５株（６８ ％ ） 。结论　 Ｓ Ｌ Ｔ Ｅ Ｃ 是太原地区引起小儿腹泻的一种重要的致泻病原菌。     

从小儿粪便中分离出一株O_(157):H_7型大肠埃希菌

肠出血性大肠埃希菌（ＥＨＥＣ）Ｏ１５７：Ｈ７是１９８３年发现的一种致泻性大肠埃希菌。我国１９８８年首次从出血性结肠炎（ＨＣ）患者中分离到该菌。ＥＨＥＣ　Ｏ１５７：Ｈ７引起的ＨＣ，可并发肾病（血尿素大于７．１４ｍｍｏｌ／Ｌ，并有尿管型）即表现为溶血性尿毒综合症（ＨＵＳ）。１９９８年４月我们从一例临床表现为ＨＵＳ小儿患者的血水样便中检出该菌。一、病例患者女，２岁，因腹痛、腹泻、发热伴双侧肾区叩痛入院。粪便呈血水样，镜检红细胞满视野，白细胞少许。血液检查Ｈｂ６５ｇ／Ｌ，ＲＢＣ２．３ｘ１０１２／Ｌ，ＷＢ…     

肠道聚集性－粘附性大肠埃希菌的简易筛查试验

肠道聚集性－粘附性大肠埃希菌的简易筛查试验王梅蔡军冯丽芳孙岩肠道聚集性－粘附性大肠埃希菌（ＥＡｇｇＥＣ）的重要特征是在ＨＥｐ－２细胞周围形成特征性的聚集性粘附。我们对３０株Ｍ－Ｈ液体培基的菌块形成试验与经典的ＨＥｐ－２细胞粘附试验进行了比较，以验证其...     

超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌对19种抗生素的耐药性

为了解产超广谱β内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)大肠埃希菌耐药特征,以期为临床合理选择抗生素和有效控制产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌感染提供依据,我们测定了40株产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌对19种抗生素的敏感性,并将产ＥＳＢＬｓ和不产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌的耐药性进行对比分析,报告如下。一、材料与方法1菌株:受试大肠埃希菌共82株,其中40株产ＥＳＢＬｓ,42株ＥＳＢＬｓ阴性,均为临床分离株。质控菌株:大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922;产ＴＥＭ3酶和ＴＥＭ1酶Ｅｃｏｌｉ分别作为ＥＳＢＬｓ阳性和ＥＳＢＬｓ阴性对照菌,由美国Ｊａｃｏｂｙ教授惠赠。2ＭＨ琼脂和…     

用DNA杂交技术检测产β—内酰胺酶的临床分离菌株的TEM—1基因

为了探求院内感染革兰氏阴性杆菌产生超广谱β内酰胺酶的基因决定机制，我们采用ＤＮＡ斑点杂交技术对所选临床分离的产β内酰胺的大肠埃希氏菌、克雷伯氏菌等进行了其质粒介导的β内酰胺酶基因类型分析。对２０株菌质粒用ＴＥＭ１探针检测的结果如下：１１株大肠埃希氏菌全与ＴＥＭ１探针杂交；６株肺炎克雷伯氏菌有３株与ＴＥＭ１探针杂交；１株已证明含有ＳＨＶ２超广谱β内酰胺酶的日勾维肠杆菌未与ＴＥＭ１探针杂交；２株不动杆菌有１株（溶血不动杆菌）与ＴＥＭ１探针杂交。     

多聚酶链反应检测LT—大肠埃希菌A亚基基因

用多聚酶链反应检测ＬＴ－大肠埃希菌，使用二个寡核苷酸引物，对该毒素的Ａ亚基基因一段高度保守区域的ＤＮＡ进行扩增，经琼脂糖凝胶电泳检测。３０株肠道常见细菌中，只有ＬＴ＾＋－大肠埃希菌、ＬＴ＾＋／ＳＴ＾＋－大肠埃希菌为阳性，其余均为阴性。最低检测靶细菌量为５０ＤＦＶ。６８例婴幼儿腹泻粪便检得５例阳性。并作了方法改进。     

产Vero毒素大肠埃希菌感染状况的调查

为了解引起Ｖｅｒｏ细胞病变的毒素（ＶＴ）的大肠埃希菌（ＶＴＥＣ）。在我国人群中的感染状况，我们对１９９７年１５１２例急性腹泻患者进行了ＶＴＥＣ的检测及流行病学分析，现报道如下。一、材料与方法１－标本来源：我院门诊患者的急性腹泻粪便标本。２－培养基：ＳＳ琼脂本室自制，山梨醇麦康凯（ＳＭＡＣ）、伊红美蓝（ＥＭＢ）琼脂购自上海市卫生防疫站，胰酶大豆肉汤培基为法国梅里埃公司产品。３－诊断试剂：ＳＰＡ抗Ｏ１５７试剂本室制备，抗Ｏ１５７乳胶试剂Ｏｘｏｉｄ公司生产。４－Ｖｅｒｏ细胞：从我院病毒室引进。５－分…     

产超广谱β-内酰胺酶菌株检出方法的探讨

目的 提高产超广谱β－内酰胺酶（ＥＳＢＬｓ）细菌的检出率。方法 采用标准纸片扩散法、筛选法、确认法和双纸片协同法进行试验。结果 头孢他啶（ＣＡＺ）、头孢噻肟（ＣＴＸ）、氨曲南（ＡＺＴ）对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌筛选率分别为１１．２％、１８．５％、１８．５％。ＣＡＺ／克拉维酸（ｃｌａｖ）对产ＥＳＢＬｓ大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌确认率分别为７２．３％（３４／４７）、７５．０％（１２／１６）;     

肠出血性大肠埃希菌O157：H7致溶血性尿毒综合征一例

肠出血性大肠埃希菌Ｏ１５７：Ｈ７致溶血性尿毒综合征一例李景学，周国清，温宪芹，崔树玉，孟蔚，孙启华，刘宗东，刘典奎肠出血性大肠埃希菌（ＥＨＥＣ）Ｏ１５７：Ｈ７引起的溶血性尿毒综合征（ＨＵＳ）国外文献已有描述。我们从一例临床诊断为出血性结肠炎（ＨＯ和急...     

大肠埃希菌O111:K58致急性肾功能衰竭一例

大肠埃希菌Ｏ１１１：Ｋ５８致急性肾功能衰竭一例井良义刘军沈宗林大肠埃希菌Ｏ１５７：Ｈ７常可以使患者引起急性出血性肾功能衰竭综合征（ＨＵＳ）。现报告一例由大肠埃希菌Ｏ１１１：Ｋ５８引起的ＨＵＳ死亡，报告如下患者，女，３４岁，已婚。腹泻４日，无尿３日入院...     

腹泻患儿粪便中分离出吲哚阴性的致病性大肠埃希菌

腹泻患儿粪便中分离出吲哚阴性的致病性大肠埃希菌李珍大张晓民①秦卫松邵海枫（南京军区南京总医院检验科，南京２１０００２）关键词腹泻ＥＰＥＣ吲哚〗致病性大肠埃希菌（ＥＰＥＣ）临床常见的血清型为Ｏ５５、Ｏ１１１、Ｏ１１９、Ｏ１２６、Ｏ１２８，血清型Ｏ１２７...     

ipaH基因扩增诊断志贺菌和肠侵袭性大肠埃希菌

我们应用聚合酶链反应 (ＰＣＲ)直接检测 189份腹泻患者粪便标本的ｉｐａＨ基因。一、材料和方法1.菌株来源 :取自我院腹泻患者的粪便标本 189份。标准菌株 :福氏志贺菌 (卫生部质控菌株 ) ,大肠埃希菌 (ＥＩＣＥ) ,小肠结肠炎耶尔森菌 (中国药品生物制品检定所 ) ;阴沟肠杆菌、奇异变形杆菌、伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌、不凝集弧菌、绿脓假单胞菌为本室保存菌株。2 .培养基及诊断血清 :中国蓝蔷薇色酸琼脂培养基 ;志贺菌属诊断血清 ,肠侵袭性大肠埃希菌诊断血清 (11种 )。3.志贺菌和ＥＩＥＣ的检出 :将可疑粪便接种于ＳＳ平板和中国蓝…     

聚合酶链反应同时检测五种腹泻致病菌的初步研究

目的探索一种快速、经济、敏感的诊断方法，对常见的腹泻致病菌进行基因检测研究。方法建立一种快速标本处理和多重聚合酶链反应（ｍｕｌｔｉｐｌｅｘＰＣＲ）诊断方法，在一次ＰＣＲ反应中同时扩增５种菌的致病基因：志贺菌及侵袭性大肠埃希菌的侵袭性质粒（ｉａｌ）基因、副溶血性弧菌的热稳定直接溶血素（ｔｄｈ）基因、Ｏ１群霍乱弧菌的霍乱毒素Ａ亚单位（ｃｔｘＡ）基因和产不耐热肠毒素大肠埃希菌的不耐热肠毒素Ｂ亚单位（ＬＴ－Ｂ）基因。扩增产物经电泳，出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的条带即判断为该标本阳性。结果对一组常规培养生化鉴定法诊断为霍乱的２６份腹泻患者标本检测后，ＰＣＲ法有２４份检测到ｃｔｘＡ基因，ＰＣＲ阴性的２份为非Ｏ１群；另一组５６份粪标本分别检测到了ｉａｌ、ｔｄｈ、ＬＴ－Ｂ基因，ＰＣＲ法较培养法阳性率高。结论该方法具有简便、快速、特异、经济和不需培养等特点，适于临床应用。     

对出血性大肠杆菌O_(157):H_7的实验室监测与体会

ＥＨＥＣＯ１５７：Ｈ７是肠出血性大肠埃希氏菌（ｅｎ－ｔｏｒｏｈｅｍｏｒｒｈａｇｉｃ　Ｅ·ｃｏｌｉ，ＥＨＥＣ）的一个血清型。继１９９６年日本发生大规模暴发感染后，去年在安徽省萧县、江苏省徐州地区又发生较大规模的流行。其上要致病因素是类志贺毒素，感染潜伏期３～５ｄ，初期可引起无症状感染、腹泻，以致发展为血便，有２％～７％发展为溶血性尿毒综合征（ＨＵＳ），出现溶血性贫血、血小板减少性紫癜和急性肾衰。故本室于２０００年５月至１０月间在淮南市八公山区范围内对此进行了实验室监测。１ 材料 本院所有腹泻病人的送…     

大肠埃希菌耐环丙沙星gyrA基因突变的研究

目的了解临床分离大肠埃希菌耐环丙沙星ｇｙｒＡ基因突变情况。方法用环丙沙星浓度梯度法试条检测临床分离大肠埃希菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ），聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增ｇｙｒＡ基因喹诺酮耐药决定区，扩增产物片段长度为６６８ｂｐ，用限制性内切酶ＨｉｎｆⅠ消化ＰＣＲ产物，行８％聚丙烯酰胺凝胶电泳。结果共检测大肠埃希菌４１株，１４株ＭＩＣ在０．２５～０．５μｇ／ｍｌ的菌株，未检出耐药性突变位点；４株ＭＩＣ在１～２μｇ／ｍｌ的菌株（２株ＭＩＣ为１μｇ／ｍｌ、１株为１．５μｇ／ｍｌ，１株为２μｇ／ｍｌ）均出现ｇｙｒＡ基因突变；耐药菌２３株（１株ＭＩＣ为１６μｇ／ｍｌ，其余≥３２μｇ／ｍｌ）也均发生ｇｙｒＡ基因突变。结论临床分离大肠埃希菌对环丙沙星耐药性与ＨｉｎｆⅠ酶切位点突变密切相关，低水平耐药菌株ｇｙｒＡ基因发生突变具有一定临床意义。     

婴幼儿腹泻与病原菌感染关系的调查分析

１９９０￣１９９７年从门诊和住院腹泻患儿的粪便中共分离培养出２３０株病原菌，其中志贺菌属１５株（６．５％），沙门菌属２０株（８．７％），产肠毒素型大肠埃希菌（ＥＴＥＣ）１０株（４．３％），肠致病性大肠埃希菌（ＥＰＥＣ）１１５株（５０％），肠侵袭性大肠埃希菌（ＥＩＥＣ）２０株（８．７％），耶尔森菌属１５株（６．５％）和念珠菌３５株（１５．３％），这些菌株引起的主要临床表现除腹泻外，有发热（９６．５％     

超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌大肠埃希菌耐药监测

肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌是产超广谱 β 内酰胺酶(ＥＳＢＬｓ)的代表菌种。本研究对上海地区 4家医院分离的930株肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌做药敏监测 ,并用双纸片协同扩散法 (ＤＤＳ)检测ＥＳＢＬｓ,以了解上海部分地区肺炎克雷伯菌和大肠埃希菌产ＥＳＢＬｓ及耐药情况。一、材料与方法1.菌株来源 :1999年 3～ 10月上海长海医院、长征医院、肺科医院和华山医院 4家医院提供从住院患者的各种临床标本中分离出的肺炎克雷伯菌 5 99株 ,大肠埃希菌 331株。2 .抗生素纸片 :头孢呋新 (ＣＸＭ 30 μｇ)、头孢噻肟 (ＣＴＸ30 μｇ)、头孢他啶 (Ｃ…     

扩散法细菌药物敏感试验质量控制监测及其评价

我们对北京地区卫生部属、市属、部队及卫生系统外的中央部属、厂矿、区县医院药敏试验质量控制情况进行了质量评价(1230药次),现报告如下。一、材料和方法1标准菌株:大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922,绿脓假单胞菌ＡＴＣＣ27853。2抗菌药物:1999年美国临床实验室标准化委员会(ＮＣＣＬＳ)[1]推荐的代表性药物。检测大肠埃希菌ＡＴＣＣ25922的5种抗菌药物:氨苄西林、庆大霉素、头孢他啶、ＴＭＰＳＭＺ和环丙沙星;检测绿脓假单胞菌ＡＴＣＣ27853的5种抗菌药物:哌拉西林、庆大霉素、头孢他啶、阿米卡星和环丙沙星。2方法:将大肠埃希菌和绿脓假单胞菌以…     

产H_2S大肠埃希菌术后致脑膜炎败血症一例

产Ｈ_２Ｓ大肠埃希菌术后致脑膜炎败血症一例山西省儿童医院（太原０３００１３）武素梅近年来院内感染越来越受到临床关注。我院外科收治一先天性骶尾部脊膜膨出患儿，术后感染产Ｈ２Ｓ大肠埃希菌所致化脓性脑膜炎及败血症，血中同时检出金黄色葡萄球菌。病例摘要患儿，...     

用头孢西丁三相试验检测质粒AmpCs

为了解大肠九希菌和肺炎克雷伯菌产质粒介导的１型β－内酰胺酶（ＡｍｐＣ）的情况,利用头孢西丁三相试验的直接法和间接法,对５５株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行检测,结果有２株阳性,３株可疑。