乙型肝炎患者957例血清学标志分析

目的　探讨乙型肝炎（ 乙肝） 病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 血清学标记的表现模式。方法　共９５７ 份乙肝患者血清标本,均以 Ａｂｂｏｔｔ 多功能全自动酶免疫快速分析仪进行检测。以聚合酶链反应（ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ。为表述方便,设定血清病毒学标记检测项目第１ ～５ 项的排列顺序为（１） 乙肝表面抗原（ Ｈ Ｂｓ Ａｇ） ,（２） 乙肝表面抗体（ 抗 Ｈ Ｂｓ） ,（３） 乙肝ｅ 抗原（ Ｈ Ｂｅ Ａｇ） ,（４） 乙肝ｅ 抗体（ 抗 Ｈ Ｂｅ） 和（５） 乙肝核心抗体（ 抗 Ｈ Ｂｃ） ,并以出现阳性项目的序号为该模式的代码。结果　本组血清病毒学标记模式可分为感染期模式组和恢复期模式组,两组共１６ 种模式。感染期模式组以“１４５”和“１３５”模式为主,占全部病例的４７ ％ 。恢复期模式组以“２４５”和“２５”模式为主,占全部病例的３５６ ％ 。随访结果表明,模式改变大致可分为５ 种类型。结论　本组 Ｈ Ｂ Ｖ 血清免疫学标记的模式较为复杂。除了检验误差外,产生少见模式的主要原因有低滴度抗 Ｈ Ｂｃ ,低滴度抗 Ｈ Ｂｓ 等。推测 Ｈ Ｂ Ｖ 血清免疫标志模式转换的顺序依次为ｅ 系统的转换,ｓ 系统的转换,抗 Ｈ Ｂｅ 消失或抗 Ｈ Ｂｅ 和抗 Ｈ Ｂｓ     

急性白血病细胞谱系的不纯一性

本文报告应用细胞谱系特异分化标记的抗体对20例急性白血病病人的原始细胞进行研究。根据FAB分类13例为AML,7例为ALL。取病人外周血或骨髓单个核细胞,使用一组单克隆抗体和高度特异性的异体血清以测定细胞的表现型,用之作细胞表面及胞浆荧光标记染色,以识别细胞的谱系。采用3个混合的表面染色试剂,以检测双标记细胞的特殊类别。第一筛选,找寻具有胞浆为Spectrin的表面标记,去除红系特异性。第二筛选,检测出因子Ⅷ阳性表面标记细胞去除An51。第三筛选,检测出胞浆为免疫球蛋白的非     

介绍一种乙肝两对半检测的快速温育法

介绍一种乙肝两对半检测的快速温育法郑喜江，杨东瑛（黑龙江省七台河矿务局总医院检验科，１５４６００）在酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）检测乙肝两对半的方法中，加入待测血清和酶联试剂后，需置３７℃温育１小时，以促进抗原（或抗体）和酶标记抗体（或抗原）的结合...     

恶性淋巴增殖性疾病患者血清可溶性细胞间粘附分子-1的检测

目的观察恶性淋巴细胞增殖性疾病患者血清可溶性细胞间粘附分子１（ｓＩＣＡＭ１）水平的变化及其与病情、疗效的关系。方法采用亲合素和生物素标记的酶联免疫法,对多发性骨髓瘤（ＭＭ）、恶性淋巴瘤（ＭＬ）及急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）患者化疗前后血清ｓＩＣＡＭ１水平进行检测。结果２２例ＭＭ患者中９例（４１％）、３２例非霍奇金淋巴瘤（ＮＨＬ）患者中１７例（５３％）、１９例ＡＬＬ患者中１２例（６３％）的血清ｓＩＣＡＭ１水平高于正常。血清ｓＩＣＡＭ１水平,ＭＭ患者中受Ｃ反应蛋白和β２微球蛋白为依据的Ｂａｔａｉｌｅ分期的影响,与Ｄｕｒｉｅ分期无关;ＮＨＬ患者中,与病理类型、ＡｎｎＡｒｂｏｒ分期、Ｂ症状有关,与血清乳酸脱氢酶无关;ＡＬＬ患者中,合并中枢神经系统白血病者明显高于未合并者。血清ｓＩＣＡＭ１升高者与血清ｓＩＣＡＭ１正常者比较,前者疗效较差。动态观察发现,随着病情缓解,血清ｓＩＣＡＭ１水平亦降至正常。结论血清ｓＩＣＡＭ１水平的检测有助于判断患者的病情及疗效。     

兴奋剂促红细胞生纱免疫检测方法的研究

目的 探索兴奋剂促红细胞生成素（ＥＰＯ）的检测方法。方法 制备了抗重组ＥＰＯ（ｒＨｕＥＰＯ）的两株单无隆抗体：ＭｃＡｂＦ８和ＭｃＡｂＦ１１,同时纯化了天然螺旋藻中的藻胆蛋白。以ＭｃＡｂＦ８作包被抗体,建立了检测血清中ＥＰＯ浓度的竞争ＥＬＩＳＡ法;并将藻胆蛋白作为荧光探针标记ＭｃＡｂＦ８,建立了检测血清中ＥＰＯ浓度的荧光免疫检测法,其检测线性范围为１０＾－１０￣１０＾－１２ｍｏｌ／Ｌ。特异性等方面,     

两种量子点标记用于抗核抗体检测的对比研究与评价

目的对比研究两种不同粒径量子点(QDs)标记抗体在抗核抗体(ANA)检测中的成像效果,评价其在临床样本检测中的应用价值。方法 Hep-2细胞为抗原片,分别以QD655和QD605标记第二抗体(二抗),用间接免疫荧光分析(IIFA)检测114例自身免疫病患者和30例健康对照者血清ANA,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记的二抗为对照。单特异性ANA用免疫印迹法(IBT)确认。比较和评价各法应用效果。结果经对114例患者血清研究发现,两种QD标记二抗均可见与FITC标记二抗检测ANA结果相同或类似的荧光模式,但ANA滴度略显不同,对核颗粒型与胞浆颗粒型ANA测定灵敏度以QD655为最高,QD605次之,FITC标记二抗相对较弱。而对核均质型、核仁型与核着丝点型ANA测定灵敏度高低依次为FITC、QD655和QD605标记二抗。相关分析结果显示,两种QD与FITC标记物检测ANA滴度结果均呈高度正相关,r值分别为0.834、0.832(P均<0.01)。两种QD标记二抗对核颗粒型、胞浆颗粒型荧光模式与FITC标记二抗检测结果阳性符合率均为100%;而核均质型与核仁型检测,阳性结果符合率为80.6%～84.4%。30例用FITC标记二抗检测ANA阴性血清中,两种QD标记二抗检测均见1例ANA阳性。两种QD与FITC标记物检测ANA总符合率均超过90.0%,有高度的一致性(Kappa值均>0.75)。结论 QD655和QD605标记二抗用于ANA检测总体结果稳定、灵敏、可行;QDs粒径越大其标记二抗测定ANA灵敏度越高,但对某些低滴度免疫荧光核型(包括核均质型、核仁型与核着丝点型)ANA有漏检可能。     

双单链抗体夹心法诊断汉坦病毒感染的初步研究

目的制备检测汉坦病毒感染的双单链抗体夹心ELISA诊断试剂,并予以评价。方法以抗汉坦病毒NP抗原单链抗体包被反应板,以辣根过氧化物酶(HRP)标记大肠埃希菌表达的抗NP抗原单链抗体,并制成双单链抗体夹心诊断试剂,检测56份早期肾综合征出血热(HFRS)患者血清及66份非HFRS对照血清。结果56份HFRS患者血清中,检测出29例阳性,阳性率为51.8%,对照组66例,检测结果均为阴性。结论研制的试剂特异性好,价格低廉。     

新型抗狂犬病病毒核蛋白抗体进行RFFIT检测效果评估

目的评价自主研发的荧光标记抗狂犬病病毒核蛋白单克隆抗体用于快速荧光灶抑制试验(RFFIT)的效果。方法将狂犬病病毒核蛋白的一段线性表位肽与KLH耦联后免疫Balb/c小鼠制备的高效价单克隆抗体抗-RVNP-Mcl,经浓缩、纯化、异硫氰酸荧光素(FITC)标记用于RFFIT检测,以Millipore公司DFA5100为对照试剂,对200例人血清进行平行RFFIT检测,将结果进行统计学分析。结果两种抗体检测结果的线性相关分析显示相关系数(r)=0.980;两种抗体检测定性结果一致率为96.83%,卡方检验显示两种抗体检测定性结果差异无统计学意义(χ2=0.098,P>0.05),发生定性结果不一致的6例(3.00%)血清两种抗体检测结果均小于1 IU/mL;68例两种抗体检测结果均小于或等于1 IU/mL的血清样品中有6例(8.82%)发生结果定性不一致,其余样品均未发生不一致的情况。结论使用荧光标记抗-RVNP-Mcl与DFA5100进行RFFIT检测时结果高度一致,荧光标记抗-RVNP-Mc1可供RFFIT检测使用。     

白血病患者WT1基因微卫星不稳定性和杂合性缺失的研究

微卫星是一种新型的遗传学标记，构成了第２代基因图谱上的图标。以微卫星作为分子标记检测微卫星不稳定性（ＭＳＩ）和杂合性缺失（ＬＯＨ），为揭示肿瘤的发病机制及寻找新的抑癌基因开辟了新的途径。ＷＴ１基因是ＷｉｌｍｓＴｕｍｏｒ的相关基因，是一种抑癌基因。在血液系统恶性肿瘤中ＷＴ１基因失活还未见报道。我们利用微卫星标记技术，选用了ＷＴ１基因附近２个微卫星位点检测ＭＳＩ和ＬＯＨ，旨在探索ＷＴ１基因与白血病的关系。１材料与方法１．１病例选择与标本采集共检测成人患者２５例，其中ＡＬ１４例（ＡＭＬ１１例，ＡＬＬ３…     

胶体金免疫层析法检测乙型肝炎病毒表面抗原

目的建立一种简易快速、自测式胶体金免疫层析法（ＧＩＣＡ）用于检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原（ＨＢｓＡｇ）。方法采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒、标记乙型肝炎病毒表面抗体（抗ＨＢｓ），制成免疫层析检测试条。血清中ＨＢｓＡｇ与测试条上金标记抗体结合后沿着硝酸纤维素膜移动，与膜上的固相抗体结合形成肉眼可见的红色线条。结果ＧＩＣＡ试条只与ＨＢｓＡｇ有特异性反应，与乙型肝炎病毒核心抗原、ｅ抗原等无交叉反应。检测中国药品生物制品检定所ＨＢｓＡｇ标准品，灵敏度可达１ｎｇ／ｍｌ。用ＧＩＣＡ与酶免疫法比较检测了３９５份不同血清标本中ＨＢｓＡｇ，两法符合率为９９．０％。结论ＧＩＣＡ检测血清中的ＨＢｓＡｇ特异性强、灵敏度高、简便快速，无需特殊仪器设备，有广泛应用价值。     

化学发光酶免疫分析法检测人血清中的铁蛋白

[目的]建立一种以辣根过氧化物酶标记铁蛋白单抗为标记物的化学发光免疫分析方法,用于检测血清样品中铁蛋白的水平。[方法]采用双抗体夹心法,将辣根过氧化物酶标记一株铁蛋白单克隆抗体,另一株铁蛋白单克隆抗体包被到不透明微孔板上,它们可以与血清样品中的铁蛋白抗原形成双抗体夹心复合物,洗涤后加入发光底物液,用发光分析仪进行检测。[结果]该方法的灵敏度为0．10ng／ml,批内变异为5．4％,批间变异为8．9％。[结论]利用此方法研制的试剂与进口试剂盒对796例血清样品进行测定,其相关系数为0．9063。表明该方法可应用于诊断试剂中,并且能够满足临床检测的要求。     

以PreS_1合成肽为抗原检测PreS_1抗体

为判断乙型肝炎临床阶段和预测患者预后，以ＰｒｅＳ＿１（Ｐ＿（２１～４７））合成肪抗原包被酶联板、辣根过氧化物酶标记的羊抗人（兔或鼠）ＩｇＧ为第二抗体建立酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测ＰｒｅＳ＿１抗体。结果，ＰｒｅＳ＿１合成肽抗原可以检测到ＰｒｅＳ＿１合成肽免疫血清及乙型肝炎患者血清中ＰｒｅＳ＿１抗体；中和试验结果提示这种抗体可被ＰｒｅＳ＿１合成肽中和，中和抑制率大于７０％，而不被血蓝蛋白、戊型肝炎病毒合成肽及丙型肝炎病毒合成肽中和。用Ｄａｎｅ颗粒和基因表达ＰｒｅＳ＿１蛋白为抗原也可以检测到ＰｒｅＳ＿１合成肽免疫血清中的ＰｒｅＳ＿１抗体。结果表明ＰｒｅＳ＿１抗体力一保护件抗体，反映肝细胞损伤和病毒清除，其阳转时间越短，急性乙型肝炎病程就越短（ｒ＝０．６７，Ｐ＜０．００１），示预后良好。     

人血清apoM的ELISA检测方法评价

目的 建立并评价检测人血清载脂蛋白M(apo M)浓度的双抗体夹心ELISA法.方法 用抗apo M单克隆抗体作包被抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗apo M单克隆抗体作酶标记抗体,建立检测apo M的双抗体夹心ELISA法.检测483例体检健康者的血清apo M浓度,建立本实验室的参考值.结果 线性范围为31....     

Dot—ELISA诊断丝虫病方法学的研究

本研究观察了影响Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测丝虫病人血清抗体方法的有关因素，认为以ｐＨ９．６碳酸盐缓冲液稀释抗原，以国产硝酸纤维素膜反面为载体，３７℃干燥１小时，ｐＨ７．４ＰＢＳ－Ｔ为封闭剂，血清、酶结合物孵育１小时，二氨基联苯胺为底物，为Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ方法检测丝虫病血病抗体的最优条件选择。     

^14C标记合成脂蛋白样颗粒法测定血清中胆固醇酯转运蛋白活性

目的 建立测定血清中胆固醇脂转运蛋白（ＣＥＴＰ）活性的方法。方法 用＾１４Ｃ标记的胆固醇酯合成高密度脂蛋白（ＨＤＬ）样颗粒作为反应基质,检测了４５例健康人,５２例冠心病（ＣＨＤ）患者血清ＣＥＴＰ活性。结果 该方法线性范围为０￣３１．８％,高（２６．４％）、低（６．８３％）活性批内变异系数（ＣＶ）分别为６．１％,７．６％,批间ＣＶ分别为１１．７％、１２．１％,５２例ＣＨＤ患者血清ＣＥＴＰ活性（Ｘ＾－     

2型糖尿病患者血清β2-GPI/ox-LDL复合物水平

目的 检测分析2型糖尿病(T2DM)患者血清β2-糖蛋白I/氧化低密度脂蛋白(β2-GPI/ox-LDL)复合物水平.方法 以抗人β2-GPI抗体为包被抗体、酶标记抗apo B为检测抗体的血清β2-GPl/ox-LDL ELISA检测法,对42例T2DM患者和41例年龄、性别匹配的健康对照者检测分析.用ELISA方法检...     

胶体金免疫比色法测定血清h-FABP水平的初步研究

目的初步建立一种基于胶体金均相免疫比色技术定量检测血清心脏型脂肪酸结合蛋白(hFABP)的方法。方法依据均相比色原理定量测定样本中抗原或抗体水平的免疫学检测技术原理,制备直径为80nm左右的胶体金颗粒并标记抗体,利用胶体金吸附标记物在540、660nm处吸收峰的变化初步建立用于检测血清h-FABP水平的方法。结果制备的胶体金颗粒液相分布均匀,制备的胶体金颗粒标记抗体呈均相分布,符合检测实验要求。通过实验确定反应体系组成为标本用量为30μL,h-FABP抗体标记量为100μg/100mL胶体金溶液,反应时间为10min,反应温度为37℃,以实验确定h-FABP≤3.6ng/mL为界限值,对临床标本进行初步分析并与免疫比浊的检测结果比较,符合率达95.09%。结论初步完成了h-FABP的胶体金免疫比色法的建立,与成熟的免疫比浊方法检测结果具有一定的符合性,有必要进行更深一步的研究。     

化学发光免疫定量检测狂犬病毒抗体方法的建立

目的建立化学发光免疫法检测人血清中狂犬病毒抗体。方法以纯化抗原包被固相,配以碱性磷酸酶标记抗原及金刚烷胺作为发光底物,采用双抗原夹心法检测血清中抗体。结果该方法的敏感性为0.2 IU/m l,线性范围为0~200 IU/m l,变异系数<10%,回收率在90%~110%之间。结论化学发光法定量测定人血清中狂犬病毒抗体是一种灵敏、准确、重复性好,操作简单的方法,适用于临床检测。     

双标记液相免疫放射分析技术的实验研究

[目的]通过双标记液相IRMA方法的建立，探讨其技术主要优点及临床应用价值。[方法]选择垂体前叶糖蛋白激素TSH和51个氨基酸组成的INS作为实验研究对象，对标记试剂中两种标记McAb的最佳比例，免疫反应温育时间，抗FITC作分离剂的用量进行优化，并和常规包被管检测血清TSH及竞争法检测血清INS作了方法学参数对比分析。[结果]本法在液相中生成双标记夹心免疫复合物时间短，精密度高于常规法，特异性在INS检测中显著较竞争法更强。测值为竞争法的75％。检测样品TSH值，双标记液相IRMA与固相包被法高度相关，r为0．9855。[结论]对比分析显示本法所设计的免疫反应模式新颖，检测方法简便快速，磁性微粒子抗FITC可共用，各项技术参数优于常规法。     

生物素标记检测乙肝病毒去氧核糖核酸205例临床分析

检测血清乙型肝炎病毒去氧核糖核酸(HBV-DNA)是乙肝病毒感染的特异性诊断方法,它最能代表乙肝病毒复制情况。生物素标记系统,可免除放射同位素标记的弊病,其探针可保存1年,敏感度高,为普及开展HBV-DNA检测,开拓了一个新途径,现将我科检测的205例报告如下。