性联免疫缺陷症的分子和遗传基础

本文介绍导致人类３种性联免疫缺陷症的特异性基因缺陷，其中无γ球蛋白血症（ＸＬＡ）由编码Ｂ细胞的特异性的酪氨酸激酶（ＢＴＫ）基因突变所致。高ＩｇＭ综合征（ＨＩＧＭ）系编码Ｔ细胞ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）基因突变引起，而严重联合免疫缺陷症（ＸＳＣＴＤ）则源自编码ＩＬ－２受体Ｖ链基因的突变，对这些患者分析所得的结果，既对遗传学诊断和处理该类疾病有所启迪，又是分析相关蛋白分子功能区和了解基因产物生理功能的     

性联免疫缺陷症的分子和遗传基础

本文介绍导致人类３种性联免疫缺陷症的特异性基因缺陷，其中无γ球蛋白血症（ＸＬＡ）由编码Ｂ细胞的特异性的酪氨酸激酶（ＢＴＫ）基因突变所致。高ＩｇＭ综合征（ＨＩＧＭ）系编码Ｔ细胞ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）基因突变引起，而严重联合免疫缺陷症（ＸＳＣＴＤ）则源自编码ＩＬ－２受体Ｖ链基因的突变，对这些患者分析所得的结果，既对遗传学诊断和处理该类疾病有所启迪，又是分析相关蛋白分子功能区和了解基因产物生理功能的重要资料。     

抗CD4及抗CXCR4抗体阻断HIV—1感染细胞作用的研究

为探讨抗ＣＤ４ 及抗ＣＸＣＲ４ 抗体在阻断Ｉ型人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－ １） 感染应用中的意义, 本文应用上述两种抗体分别与ＳｕｐＴ１ 细胞及人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ） 共培育, 以封闭ＨＩＶ－ １ 在上述细胞上的受体。然后, 以ＨＩＶ１ ＮＬ４３ 病毒株感染上述细胞, 通过测定感染细胞上清中ＨＩＶ－ １ 的Ｐ２４ 蛋白含量, 观察上述抗体对ＨＩＶ－ １ 感染细胞的阻断作用。结果显示, 无论是抗ＣＤ４ 或抗ＣＸＣＲ４ 的抗体单独应用或是两者联合应用, 均可明显地抑制ＨＩＶ－ １ 感染细胞的作用。该结果为今后开拓ＡＩＤＳ的抗体治疗提供了理论基础。     

163体外培养的人胸原上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥＣ）的体外培养和传代。使研究人ＴＥＣ的特性和功能成为可能。人ＴＥＣ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的ＴＥＣ除表达角蛋外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原，ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ＿ＣＳＦ，Ｇ＿ＣＳＦ和Ｍ＿ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ     

CD40和CD40配体的研究进展

ＣＤ４０是一种存在于Ｂ淋巴细胞、树突状细胞、造血前体细胞、上皮细胞及某些癌细胞表面的跨膜糖蛋白。由２７７个氨基酸组成，分子量为４５～５０ＫＤａ，是ＴＮＦ－Ｒ超家族成员。人ＣＤ４０基因定位于２０号染色体ｑ１１－３，小鼠基因位于２号染色体上。ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）由２６１个氨基酸构成，分子量为３４ＫＤａ，是ＴＮＦ超家族成员。基因位于ｘｑ２４。主要存在于活化的ＣＤ４＋Ｔ细胞表面，在ＣＤ８＋、嗜碱／肥大细胞表面也有表达。ＣＤ４０与ＣＤ４０Ｌ间的反应与Ｂ细胞活化、增殖、抗体的产生、生发中心的形成有关。反应的中断可导致免疫耐受，ＣＤ４０Ｌ缺陷可造成性联高ＩｇＭ综合征（ＨＩＭ）。     

氧化修饰的低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白对单核细胞MCP—1…

为了研究氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对单核细胞的单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ和蛋白表达的影响，在单核细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的ＬＤＬ，ＯＸ－ＬＤＬ，ＶＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ，培养２４小时后分别收集单核细胞及其条件培养基，对照异硫氰酸胍法提取单核细胞总ＲＮＡ，并用γ＾３２Ｐ末端标记ＭＣＰ－１寡核苷酸探针，进行ｓｌｏｔｂｌｏ     

体外培养的人胸腺上皮细胞与胸腺细胞的相互作用

人胸腺上皮细胞（ＴＥｃ）的体外培养和传代，使研究人ＴＥｃ的特性和功能成为可能。人ＴＥｃ体外培养成功的关键是抑制成纤维细胞的生长。体外培养的人ＴＥｃ除表达角蛋白外，还表达ＨＬＡ－Ｉ类抗原、ＬＦＡ－３，ＩＣＡＭ－１和ＣＤ４０等表面抗原；可分泌ＩＬ－１，ＩＬ－６，ＩＬ－８，ＧＭ－ＣＳＦ，Ｇ－ＣＳＦ和Ｍ－ＣＳＦ等多种细胞因子和胸腺素；静息的胸腺细胞与ＴＥＳ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３介导，激活的胸腺细胞与ＴＥＣ的结合由ＣＤ２／ＬＦＡ－３和ＬＦＡ－１／ＩＣＡＭ－１共同介导；ＴＥＣ对成熟的胸腺细胞有辅助增殖的作用，对不成熟的胸腺细胞有直接激活作用：胸腺细胞可通过直接作用和分泌细胞因子的间接作用来调节ＴＥＣ的细胞因子分泌和表面抗原表达。     

氧化修饰极低密度脂蛋白对单核和巨噬细胞趋化蛋白1mRNA表…

近年来的研究发现，单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种极为强烈的单核细胞趋向因子。本研究着重观察了极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对单核细胞和巨噬ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的影响。在单核核和巨噬细胞的培养基中分别中入２５μｇ／ｍｌ的ＶＬＤＬ或ＯＸ－ＶＬＤＬ，培养２４ｈ提取单核细胞和巨噬细胞总ＲＮＡ用ＭＣＰ－１的寡核苷酸探针，进行Ｎｏｒｔｈｅｍｂｌｏｔ分析。结果显     

单核细胞趋化蛋白－1在大肠杆菌中的表达

将人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ插入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，构建成质粒ｐＧＥＸ／ＭＣＰ转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经ＩＰＴＧ诱导后合成ＧＳＴ－ＭＣＰ－１融合蛋白。用１２％ＳＤＳ－ＰＡＧＥ检测在３０ｋＤ左右有新生蛋白条带出现，表达量约占菌体总蛋白的３１．７％。趋化实验证明，该产物具备明确的单核细胞趋化活性。     

分泌抗人IL—3,IL—5和GM—CSF受体β链人工合成多肽McAb杂交…

制备抗人ＩＬ－３，ＩＬ－５和ＧＭ－ＣＳＦ受体β链人工合成多肽ＤＩ，Ｄ２，Ｄ３和Ｄ４共３９株ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系，并对其分泌ＭｃＡｂ的类与亚类，效价性和上滑的阻断活性进行了初步分析，ＭｃＡｂ上清阻断活性效果提示，至少部分ＭｃＡｂ可与天然的受体β链发生免疫反应，并可能有阻断ＧＭ－ＣＳＦ与β链结合作用，此外，还应用人工合成多肽片段，确定了２３株抗Ｄ１ＭｃＡｂ的大致识别表位，这些ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系的获得     

抗人CD4单链抗体的表达及其分离纯化

本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现的一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的４０％。经初步纯化和复性后，用ＧＳＴ亲和色谱纯化，再经凝血酶水解获得抗人ＣＤ３ＳｖＦｖ，竞争结合抑制实验证明，该表达产物具有ＣＤ３亲和活性。     

Epstein—Barr病毒潜伏膜蛋白2A重组痘苗病毒转染DC及特异性CTL的体外诱导

通过ＥＢ病毒ＬＭＰ２Ａ重组痘苗病毒转染的ＤＣＳ体外诱导ＬＭＰ２Ａ特异性ＣＴＬ,并通过ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４和ＴＮＦ－ａ培养体系,我们诱导出了人外周血单核细胞来源的ＤＣ。同时选用在鼻咽癌患者中表达的ＥＢ病毒潜伏蛋白之一ＬＭＰ２Ａ作为靶基因,利用重组痘苗病毒转染诱导的ＤＣＳ。ＤＣＳ与自体ＰＢＭＣＳ混合培养,在ＩＬ－２的刺激作用下获得特异性ＣＴＬ。结果如下：１．人外周血单核细胞经ＧＭ－ＣＳＦ、ＩＬ－４、ＴＮＦ－ａ的混合培养,１０天可获得成熟的功能性ＤＣＳ。ＦＡＣＳ检测显示ＤＣ表面相对特异性标志ＣＤ８３…     

抗人CD3单链抗体的表达及其分离纯化

本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的４０％。经初步纯化和复性后，用ＧＳＴ亲和色谱纯化，再经凝血酶水解获得抗人ＣＤ３ＳｃＦｖ，竞争结合抑制实验证明，该表达产物具有ＣＤ３亲和活性     

中国人肢带型肌营养不良症粘附蛋白基因突变鉴定

目的肢带型肌营养不良症（ＬＧＭＤ）是常见的常染色体遗传肌肉病，特点为髋肩带肌无力、萎缩，进行性发展至远端肌肉，男女均可受累，有明显的遗传异质性，国外研究发现重型ＬＧＭＤ分别涉及１３ｑ１２、１７ｑ２１、４ｑ１２、５ｑ３３区域编码γ－、α－、β－、δ－糖蛋白的４个基因座位。中国人群中ＬＧＭＤ的致病基因研究尚无报道，拟通过粘附蛋白（ａｄｈａｌｉｎ）基因突变的检测，鉴定其致病基因。方法用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ及ＤＮＡ测序法对ａｄｈａｌｉｎ基因第２、３外显子进行了突变检测及鉴定。结果发现１例散发的９岁女患者ａｄｈａｌｉｎ第２、３外显子存在纯合Ａｒｇ７７Ｃｙｓ突变，此突变在本实验的４０条野生染色体中未发现。结论发现中国人群中重型ＬＧＭＤ（ＤＬＭＤ）存在ａｄｈａｌｉｎ基因突变。提示１７ｑ２１区的ａｄｈａｌｉｎ基因是中国人ＬＧＭＤ的一个致病基因。     

人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子在重组痘苗病毒中的 …

目的 观察人ＧＭ－ＣＳＦ（粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子）对重组痘苗病毒免疫效果的影响。方法 大鼠体内观察。结果 从核酸和蛋白水平均证实重组痘苗病毒ＲＶＪＳＢ１１７５Ｄ／ＧＭ－ＣＳＦ可同时表达ＧＭ－ＣＳＦ及ＨＳＶ－１ｇＤ（单纯疱疹病毒ｇＤ糖蛋白），但ＲＶＪＳＢ１１７５Ｄ／ＧＭ－ＣＳＦ免疫大鼠产生的抗－ＨＳＶ１ｇＤ特异性抗体水平与ＲＶＪＳＢ１１７５Ｄ组相比无显著性差异。结论 人ＧＭ－ＣＳＦ在大鼠体内对     

TNF族成员增加到10：新成员在凋亡中起作用

ＴＮＦ族成员增加到１０：新成员在凋亡中起作用［英］／ＷｉｌｅｙＳＲ…ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＴｏｄａｙ．一１９９６，１７（２）．一５３细胞因子中肿瘤坏死因子家族包括ＴＮＦａ和ＴＮＦβ、淋巴细胞毒素β及ＣＤ４０，ＣＤ３０，ＣＤ２７，ＯＸ４０，４－１ＢＢ和Ｆ...     

CD40分子在树突状细胞抗人多发性骨髓瘤免疫应答中的作用及 …

目的：为研究ＣＤ４０分子在人树突状细胞（ＤＣ）抗多发性骨髓瘤（ＭＭ）中的作用及其机制。方法：采用ＣＤ４０配体（ＣＤ４０Ｌ）转基因细胞及抗ＣＤ４０的激发型单克隆抗体在体外激发ＤＣ，并通过ＤＣ计数，形成学和细胞表型分析，ＩＬ－１２定量检测、ＤＣ对ＭＭ抗原的摄取及混合淋巴细胞反应等手段对其进行研究。结果：ＣＤ４０分子配基化可促进ＤＣ的体外增殖和分化，使ＤＣ增加分泌ＩＬ－１２，并下调ＤＣ摄取抗原的能力，促     

单核细胞趋化蛋白—1在大肠杆菌中的表达

将人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）的ｃＤＮＡ插入融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，构建成质粒ｐＧＥＸ／ＭＣＰ转化大肠杆菌ＪＭ１０９，经ＩＰＴＧ诱导后合成ＧＳＴ－ＭＣＰ－１融合蛋白。用１２％ＳＣＳ－ＰＡＧＥ检测在３０ｋＤ左右有新生蛋白条带出现，表达量约占菌体总蛋白的３１．７％，趋化实验证明，该产物具备明确的单核细胞趋化活性。     

分泌抗人IL－3、IL－5和GM－CSF受体β链人工合成多肽McAb杂交瘤细胞系的建立

制备抗人ＩＬ－３、ＩＬ－５和ＧＭ－ＣＳＦ受体β链人工合成多肽Ｄ１、Ｄ２、Ｄ３和Ｄ４共３９株ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系，并对其分泌ＭｃＡｂ的类与亚类、效价、特异性和上清的阻断活性进行了初步分析。ＭｃＡｂ上清阻断活性结果提示，至少部分ＭｃＡｂ可与天然的受体β链发生免疫反应，并可能有阻断ＧＭ－ＣＳＦ与β链结合作用。此外，还应用人工合成多肽片段，确定了２３株抗Ｄ１ＭｃＡｂ的大致识别表位。这些ＭｃＡｂ杂交瘤细胞系的获得为进一步研究受体β链的表达与调控、β链的结构与功能以及对于诊断和研究髓样白血病细胞的病理等均有十分重要的意义。     

单抗免疫导向药物3Al—DM对CFU—GM的效应试验

应用抗Ｔ淋巴细胞单抗（ＭｃＡｂ）３Ａｌ－柔霉素（ＤＭ）免疫结合物，在体外对骨髓粒－单核细胞集落形成单位（ＣＦＵ－ＧＭ）进行导向杀伤效应试验。结果与Ｂ细胞单抗－ＤＭ结合物十分近似。说明单抗３Ａｌ－ＤＭ对ＣＦＵ－ＧＭ没有影响，不损伤正常骨髓造血干细胞，为３Ａｌ－ＤＭ用于体外骨髓净化提供实验依据。