冬凌草甲素对肺动脉高压大鼠肺动脉压的调控作用及机制研究

目的:探讨冬凌草甲素对低氧高二氧化碳肺动脉高压大鼠肺动脉压的调控作用及机制研究。方法:清洁SD大鼠随机分为3组,正常对照组、低氧高二氧化碳组、低氧高二氧化碳加冬凌草甲素组。低氧高二氧化碳时间为4周。测定各组的平均肺动脉压(mPAP)、右心室重量比[LV/(RV S)]、管壁面积/管总面积(WA%)、管壁厚度/血管外径(WT%)、门冬氨酸特异半胱氨酸蛋白酶(caspase)3及9的活力、细胞色素C(Cyt-c)的表达。并用透射电镜观察其超微结构变化。结果:低氧高二氧化碳组mPAP、LV/(RV S)、WA%、WT%均高于正常对照组(P<0.01),caspase3、9活性,Cyt-c表达均低于正常对照组(P<0.01);冬凌草甲素干预组mPAP、LV/(RV S)、WA%、WT%均低于低氧高二氧化碳组(P<0.01),caspase3、9活性,Cyt-c高于低氧高二氧化碳组(P<0.01)。冬凌草甲素组可以发现肺小动脉平滑肌细胞核固缩,核膜间隙增大,线粒体浓聚,部分线粒体肿胀。结论:冬凌草甲素可以有效降低肺动脉压。其机制可能系通过诱导肺动脉平滑肌细胞线粒体途径凋亡,从而抑制肺动脉重构。     

葛根素对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠的保护作用

目的:观察葛根素对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠的影响及探讨其作用机制。方法:将30只 SD 大鼠分为正常对照组(正常组)、低氧高二氧化碳组(模型组)和低氧高二氧化碳加葛根素组(葛根素组)。观察各组大鼠平均肺动脉压(mPAP),右心室/(左心室+室间隔重量)比[RV/(LV+S)],血浆内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)含量,肺组织匀浆超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及肺细小动脉显微结构变化。结果:(1)葛根素组 mPAP、RV/(LV+S)比模型组明显下降(P<0.01);而平均颈动脉压两组间无差别。(2)葛根素组血浆 ET-1浓度比模型组降低,NO 含量升高。(3)葛根素组肺组织匀浆 SOD 活性比模型组明显升高(P<0.01),MDA 含量降低(P<0.01)。(4)光镜下模型组肺细小动脉内弹力板扭曲,中膜平滑肌细胞增生,管腔明显狭窄;葛根素组肺细小动脉内弹力板扭曲明显减轻,中膜平滑肌层变薄,管壁较均匀一致。结论:预防性使用葛根素注射液可以降低低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠的肺动脉压,减轻肺血管重构及右心室肥厚。其机制可能与抗氧化作用以及调节 ET-1/NO 的失衡等有关。     

红景天苷对常压肺心病大鼠保护作用的研究

目的:研究红景天苷对常压慢性低O2诱发的肺动脉高压、肺心病的保护作用。方法:将SD大鼠50只随机分为正常对照组、低O2、低O2+红景天苷(低、中、高)组。采用图像分析、免疫组化技术,透射电镜等方法,检测各组大鼠肺动脉平均压(mPAP)、右心指数、肺小动脉显微和超微结构,Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的变化。结果:低氧组mPAP、右心指数、肺小动脉显微结构指标:管壁面积/管总面积、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度、肺细小动脉中膜厚度较对照组明显升高,肺血管重建,肺小动脉Ⅰ型胶原表达增加。红景天苷可减轻上述改变,高剂量组尤为显著;但Ⅲ型胶原各组间无明显差别。结论:红景天苷可降低慢性低O2诱导的肺动脉高压,减轻肺血管结构重建,其机制与抑制肺动脉Ⅰ型前胶原增殖有关。     

芝麻素对野百合碱诱导的肺动脉高压大鼠肺血管重构的影响

目的:观察芝麻素(Ses)对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压(PH)大鼠肺血管重构的影响.方法:雄性Sprague-Dawley (SD)大鼠48只适应性喂养1周,随机分为正常对照组、MCT组、Ses低、高剂量组(50,100 mg·kg-1),每组12只.MCT(60 mg·kg-1)皮下注射诱导PH大鼠模型.连续给药4周后,右颈外静脉插管测定大鼠右心室收缩压(RVSP)、平均肺动脉压(mPAP).分离大鼠右心室(RV)、左心室+室间隔(LV+S)并称重,剥离大鼠胫骨并测量其长度,计算RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值.HE染色观察肺小动脉病理学变化,Masson染色观察肺小动脉胶原沉积的变化.免疫组化检测肺动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达.比色法测定肺动脉总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量.Real-time PCR和Western blot检测肺动脉collagen Ⅰ,NOX2及NOX4 mRNA和蛋白表达.结果:Ses连续给药4周后能明显降低MCT诱导的PH大鼠RVSP及mPAP,减轻RV/(LV+S)及RV/胫骨长度的比值,降低肺动脉α-SMA,collagen Ⅰ表达、减轻肺血管及右心室重构.同时,Ses还能明显抑制肺动脉NOX2及NOX4的表达,降低其MDA含量及提高T-AOC水平.结论:Ses能够缓解MCT诱导的PH大鼠肺血管重构,其机制可能与抑制NOX2及NOX4的表达、进而降低氧化应激损伤有关.     

延胡索乙素对低O2高CO2肺动脉高压大鼠c-jun、c-fos表达的影响

目的: 研究延胡索乙素(dl-THP)对慢性低O2高CO2性肺动脉高压大鼠血管重构的影响及其机理.方法: 大鼠每天置于低O2高CO2舱中8小时造型.4周后,右心导管法测肺动脉压(mPAP);光镜下测定肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA )、肺细小动脉中膜平滑肌细胞核密度(SMC)、肺细小动脉中膜厚度(PAMT )等反映肺血管重建情况的指标;免疫组化法检测Ⅰ型胶原的表达量;原位杂交法检测c-jun mRNA、c-fos mRNA的表达量.结果:模型组的mPAP显著增高,光镜下WT/TA 、PAMT、SMC显著增高;肺细小动脉I型胶原的相对含量显著增高;肺细小动脉c-jun mRNA、c-fos mRNA的表达显著增高.dl-THP治疗可抑制上述病变发生.结论:延胡索乙素能明显抑制肺动脉血管的重构,而抑制c-jun mRNA、c-fos mRNA表达可能是其重要的机制之一.     

茶多酚对缺氧诱导的大鼠肺动脉高压及右心室肥厚的影响

目的:探讨茶多酚对缺氧诱导的大鼠肺动脉高压及右心室肥厚的干预作用。方法:24只SD大鼠随机均分为正常对照组、缺氧组和茶多酚组。缺氧前茶多酚组大鼠每日予茶多酚[200 mg/(kg·d)]灌胃,正常对照组和缺氧组大鼠给予等体积生理盐水灌胃,随后茶多酚组和缺氧组大鼠置于常压低氧舱内间断缺氧4周(8 h/d,6 d/w)。4周后比较各组的平均肺动脉压(m PAP)、右心室肥厚指数(RVHI)及肺小动脉管壁厚度,比较肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡情况。结果:缺氧组大鼠的m PAP、RVHI及肺小动脉管壁厚度均比正常对照组显著升高(均P<0.01),且PASMCs凋亡明显减少(P<0.01);茶多酚组m PAP及RVHI与缺氧组相比均明显降低(P<0.05或P<0.01),肺小动脉管壁增厚程度减轻,而PASMCs凋亡明显增加(P<0.05)。结论:茶多酚能降低肺动脉高压大鼠的肺动脉压,促进肺动脉平滑肌细胞凋亡,改善右心室肥厚,具有抗肺动脉高压的作用。     

槲皮素对肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和重构的影响

目的:研究槲皮素对野百合碱(MCT)诱导的肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖和肺动脉结构重建的调节作用。方法:成年雄性SD大鼠40只随机分为4组:正常对照组(对照组)、MCT诱导的肺动脉高压组(MCT组)、槲皮素预防组(预防组)和槲皮素治疗组(治疗组),每组10只。测量各组大鼠干预后平均肺动脉压力(mPAP);测定肺小动脉管壁厚度(WT)占动脉外径(ED)的百分比(WT%)及管壁面积(WA)占血管总面积的百分比(WA%);采用免疫组化和Western blot检测肺小动脉平滑肌细胞增殖细胞核抗原(PCNA)和平滑肌细胞抗体(α-SMA)的表达。结果:野百合碱组50mg/kg,再以生理盐水2ml/d每日灌胃一次,共20天,与对照组(生理盐水,再以生理盐水2ml/d每日灌胃一次,共20天)、预防组(MCT 50mg/kg,同时给予槲皮素100mg/kg每日灌胃一次,共20天)和治疗组(MCT 50mg/kg饲养20天后,以槲皮素100mg/kg每日灌胃一次,共20天)相比,mPAP、WT%、WA%、PCNA阳性率显著升高及PCNA、α-SMA的表达显著增多。结论:槲皮素对野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压有预防和治疗作用,其机理可能是通过抑制肺血管中小动脉平滑肌细胞增殖,改善肺血管重构。     

肺心汤对低氧性肺动脉高压模型大鼠低氧诱导因子-1α及血管内皮生长因子的影响

目的探讨肺心汤对低氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)模型大鼠低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的影响及其治疗HPH的作用机制。方法将40只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、肺心汤组和硝苯地平组,每组10只。采用常压间断缺氧法复制HPH大鼠模型。除正常对照组外,其余各组均置于自制的有机玻璃缺氧舱中饲养,每天缺氧8h,持续14天后,正常对照组及模型组以30mL/kg蒸馏水灌胃;肺心汤组及硝苯地平组以相应药物灌胃(28g/kg、20mg/kg),均每天1次,连续灌胃14天,且在给药同时继续间断缺氧14天。末次给药后次日行平均肺动脉压力(mean pulmonary arter ypressure,mPAP)检测、肺小动脉形态学检测,测定肺动脉管壁面积/管总面积比值(WA%);分别采用免疫组织化学及原位杂交技术检测HIF-1α和VEGF的蛋白及mRNA表达。结果与正常对照组比较,模型组mPAP、WA%、HIF-1α和VEGF蛋白及mRNA表达明显增加(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,肺心汤组mPAP、WA%、HIF-1α和VEGF蛋白及mRNA表达明显减少(P<0.01,P<0.05)。结论肺心汤通过降低HIF-1α的表达而下调其靶基因VEGF的表达,部分逆转肺血管平滑肌重塑可能是其治疗HPH的作用机制之一。     

保肺定喘汤对肺心病大鼠病理形态学影响的实验研究

目的:观察保肺定喘汤对肺心病大鼠肺血管重构的影响。方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、保肺定喘汤高、中、低剂量组和硝苯地平组(n=10)。采用野百合碱(60mg/kg)腹腔注射建立肺心病大鼠模型,造模后连续用药28天后处死大鼠,称取RV和LV S重量,计算右心肥厚指数(RV/LV S),右下肺行HE染色、Masson染色及免疫组织化学染色观察肺小动脉病理改变。结果:(1)模型组大鼠右心肥厚指数比正常对照组明显增加(P<0.01),各治疗组右心肥厚指数与模型组比较均明显降低(P<0.01～0.05)。(2)与正常对照组比较,模型组肺小动脉管壁变厚、管腔变小,管壁内胶原纤维及α-SMA表达明显增加(P均<0.01),各治疗组与模型组比较肺小动脉管壁变薄,管腔变大,管壁内胶原纤维及α-SMA表达明显减少(P<0.01～0.05)。结论:保肺定喘汤可以明显减轻肺血管重构,其机制可能与调节胶原纤维和α-SMA在肺小动脉的表达有关。     

延胡索乙素对肺动脉高压大鼠血管重构及IGF表达的影响

目的：研究延胡索乙素时慢性低O2高CO2性肺动脉血管的重构的影响，并探讨其机理。方法：36只SD大鼠随机分为三组：正常对照组（A组）、慢性低O2高CO2组（B组）及慢性低O2高CO2＋延胡索乙素组（C组）。右心导管法测肺动脉压；电镜观察肺小动脉超微结构；免疫组化法检测Ⅰ型胶原、胰岛素样生长因子（IGF）的表达量。结果：B组的mPAP显著高于A组和C组；C组大鼠肺细小动脉内皮细胞基本扁平，结构基本正常，中膜平滑肌细胞增生较轻，胶原少见；外膜胶原纤维较明显少于B组大鼠。外膜仅有少量胶原纤维。免疫组化发现B组肺细小动脉ERK2、Ⅰ型胶原的相对含量显著高于A组和C组。结论：延胡索乙素能明显抑制肺动脉高压的形成，延缓肺动脉血管的重构；抑制IGF表达、减少Ⅰ型胶原生成可能是其重要的机制之一。     

延胡索乙素对大鼠低O_2高CO_2肺动脉高压及FAK、ERK和Caspase 3表达的影响

目的:研究延胡索乙素对慢性低O2高CO2性肺动脉高压的作用及粘着酶激酶FAK、ERK和凋亡蛋白酶Caspase 3表达的影响。方法:常压低O2高CO2舱制备低O2高CO2肺动脉高压大鼠模型,延胡索乙素ip 40mg/kg。右心导管法测肺动脉压;光镜下测定肺细小动脉管壁面积/管总面积(WA/TA)、肺细小动脉中膜厚度(PAMT);免疫组化法检测细胞外信号调节激酶(ERK2)、Ⅰ型胶原的表达量;原位杂交法检测FAKmRNA、Caspase3 mRNA的表达量。结果:延胡索乙素组mPAP显著低于低O2高CO2组;延胡索乙素组的WT/TA、PAMT也显著低于低O2高CO2组;延胡索乙素组肺细小动脉ERK2、I型胶原的相对含量、FAKm-RNA、Caspase3 mRNA的表达均显著低于低O2高CO2组。结论:延胡索乙素能明显抑制肺动脉高压的形成,延缓肺动脉血管的重构,抑制FAK表达、增强Caspase3的表达可能是其重要的机制之一。     

764-3对不同类型慢性肺动脉高压大鼠右心室肥厚胶原的影响

目的：观察胶原合成抑制剂７６４－３对低压缺氧和野百合碱（ＭＣＴ）引起的肺动脉高压大鼠右心室胶原的影响。方法：将雄性Ｗｉｓｔａｒ大志随机分为１０组。低人药组大鼠皮下注射７６４－３ ２０ｍｇ／ｋｇ，每日１次ＭＣＴ治疗组大鼠皮下注射７６４－３４０ｍｇ／ｋｇ，每日１次。实验终点测定血流动力学及生化指标。结果：缺氧２周、４周及ＭＣＴ大志肺动脉压升高，右心室胶原含量明显增加；７６４－３能降低缺氧及ＭＣＴ大鼠肺     

缺氧性肺动脉高压大鼠中介素、肾上腺髓质素及内皮素水平的研究

目的探讨缺氧对肺动脉高压大鼠中介素(IMD)、肾上腺髓质素(ADM)及内皮素(ET)合成与分泌的影响。方法复制肺动脉高压大鼠模型,随机分成对照组和低氧1周、2周、3周组各6只。应用放射免疫法观察血浆IMD、ADM及ET水平的动态变化。结果缺氧大鼠血浆IMD、ADM及ET含量升高,与对照组比较有显著性差异(P均<0.05)。除ADM外,低氧组间比较无显著性差异(P均>0.05)。结论EMD、ADM及ET参与了肺动脉高压的病理生理过程,其比例失衡可能是导致缺氧性肺动脉高压发生发展的因素之一。     

肺康颗粒对缺氧大鼠肺动脉高压血管内皮损伤的保护作用

目的：研究肺康颗粒对缺氧性肺动脉高压血管内皮损伤的保护作用。方法：以缺氧叠加静脉注射三氯化铁建立缺氧性肺动脉高压动物模型，治疗于每天缺氧后ig给予肺康颗粒。7d后测定血浆内皮素(ET)、血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力。结果：(1)缺氧组大鼠上述检测指标较对照组显著升高。提示缺氧导致大鼠体内参与氧化反应系列酶水平明显失衡，发生较明显肺动脉高压及血管内皮损伤。(2)洽疗后ET和MDA水平，SOD含量和GSH-PX活力有明显回落。提示治疗组大鼠肺动脉高压显著下降，内皮细胞损伤、参与氧化反应系列酶水平失衡等病理改变有所改善。结论：肺康颗粒对缺氧性肺动脉高压血管内皮损伤有一定的保护作用。     

香青兰总黄酮对低氧环境所致大鼠肺损伤的保护作用

目的探讨香青兰总黄酮对低氧环境所致大鼠肺损伤的保护作用。方法将60只SD大鼠随机分为正常组(CG)、高原组(MG)、阳性组(NE)、香青兰总黄酮高剂量组(DML.H)、香青兰总黄酮中剂量组(DML.M)、香青兰总黄酮低剂量组(DML.L)。除正常组(10只)外,其余50只大鼠建立慢性高原病模型。各组进行相应干预。测定各组大鼠肺动脉压力,血清中EPO、VEGF及肺组织SOD、MDA和GSH-Px活性,观察大鼠肺组织病理学改变。结果与正常组比较,慢性高原病大鼠肺动脉压力升高,血清EPO、VEGF含量上升,肺组织中SOD、GSH-Px含量降低,MDA含量升高(P0.05)。与高原组比较,香青兰总黄酮各剂量组大鼠肺动脉压力不同程度下降(P0.05),血清中EPO、VEGF含量降低(P0.05),肺组织SOD、GSH-Px含量升高(P0.05),MDA含量降低(P0.05)。结论香青兰总黄酮可改善由缺氧引起的肺动脉高压,减少氧化应激,增强抗氧化机制,对低氧环境所致肺损伤具有一定的保护作用。     

黄芪对低氧性肺动脉高压大鼠肺组织血栓素A_2及肺血管结构的影响

目的:探讨黄芪对低氧性肺动脉高压(HPH)大鼠肺腺泡内肺动脉结构重建及肺组织血栓素(TXA2)的影响。方法:雄性Wistar大鼠21只,随机分为3组,每组7只。对照组:室内空气正常饲养;低氧组:在常压低氧舱内(10±0.5)%饲养;治疗组:缺氧+黄芪(12g/kg)。低氧30天分别用右心导管法测定肺动脉平均压(mPAP),放射免疫法测定肺组织中TXA2含量,计算MA、PMA、NMA比例及肺中、小肌型动脉相对中膜厚度(RMT)与相对中膜面积(RMA)。结果:低氧组mPAP、RVHI、TXA2含量较对照组明显升高(P<0.01或P<0.05),治疗组较低氧组明显减少(P<0.05)。低氧组肺小动脉肌化程度、RMT(%)、RMA(%)较对照组明显增多(P<0.01),治疗组较低氧组明显减少(P<0.01)。结论:慢性低氧可引起大鼠肺血管结构重建,黄芪注射液可降低肺组织TXA2含量,可部分逆转肺血管结构重建,降低肺动脉高压。     

益肺活血颗粒对缺氧培养大鼠肺动脉 平滑肌细胞NO,iNOS的影响

目的:观察益肺活血颗粒对缺氧条件下大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)一氧化氮(NO)产生及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响。方法:采用组织块贴壁法培养大鼠PASMCs,取对数生长期PASMCs随机分为常氧组,缺氧组,缺氧+益肺活血颗粒组(7.5,1.5,0.15 g.L-1)。利用硝酸还原酶法测定各组PASMCs NO的产生,RT-PCR测定iNOS mRNA的水平,免疫组化法测定胞内iNOS蛋白的表达量。结果:与单纯常氧组相比,缺氧组PASMCs iNOS转录和翻译增强,NO生成显著升高(P<0.05);且与单纯缺氧组相比,益肺活血颗粒组随着药物浓度的增加,可进一步提高PASMCs iNOS的活性和NO的生成(P<0.05)。结论:益肺活血颗粒可以促进缺氧条件下PASMCs NO产生及iNOS活性和表达,其可能是通过提高iNOS基因的转录和蛋白的表达来实现,从而抑制PASMCs的增殖及介导血管的舒张,在缺氧性肺动脉高压方面有着独特的疗效。     

肺康宁合剂治疗慢性阻塞性肺疾病肺动脉高压的临床研究

目的研究肺康宁合剂治疗慢性阻塞性肺疾病肺动脉高压患者的临床疗效。方法将平均肺动脉压高于20 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)的慢性阻塞性肺疾病患者49例随机分成治疗组29例和对照组20例,对照组予常规方法治疗,治疗组则加服肺康宁合剂治疗,测定2组治疗前后平均肺动脉压及内皮素水平,并进行临床疗效指标的比较。结果2组患者经过2周治疗后,治疗组综合疗效及对氧分压的改善优于对照组(P均<0.05)。结论肺康宁合剂治疗慢性阻塞性肺疾病肺动脉高压发作期有较好的临床疗效,并能有效地降低肺动脉压,其作用机制可能与改善缺氧,改善血液流变学指标,影响D-二聚体、ET水平有关。     

Effects of San-Huang-Xie-Xin-Tang on U46619-induced increase in pulmonary arterial blood pressure

ETHNOPHARMACOLOGICAL RELEVANCE: San-Huang-Xie-Xin-Tang (SHXT), composed of Coptidis rhizoma, Scutellariae radix and Rhei rhizoma, is traditionally used to treat hypertension. AIM OF THE STUDY: Our aim was to investigate the pharmacology effect of SHXT on a thromboxane A(2) analogue U46619-induced increase in pulmonary hypertension and protein expression in primary pulmonary smooth muscle cells (PASMCs). MATERIALS AND METHODS: Arterial blood pressure and isometric tension in the aorta and pulmonary artery of rats were measured by pressure and force transducers, respectively. Protein expressions on PASMCs were detected by Western blotting. RESULTS: SHXT significantly attenuated U46619-induced increase in arterial blood pressure. The inhibitory effect of SHXT on pulmonary arterial pressure was greater than systemic arterial pressure in U46619 treated rats. Similarly, the inhibitory effect of SHXT on U46619-induced vasoconstriction in rat pulmonary arterial rings was greater than that in aortic rings. In U46619 treated PASMCs, SHXT down-regulated expression of phosphodiesterase type 5 (PDE5), Rho-kinase (ROCK) II, cyclooxygenase-2 (COX-2) and up-regulated expression of soluble guanylyl cyclase (sGC) alpha(1) and sGCbeta(1). CONCLUSIONS: SHXT attenuated U46619-induced increase in systemic and pulmonary arterial blood pressure. Inhibition of PDE5, ROCK-II, COX-2 and stimulation of sGC may play important roles in the cardiovascular effects of SHXT.