胰腺癌组织中细胞凋亡及相关基因bcl-2和bax表达的研究

为了探讨细胞凋亡及相关基因ｂａｘ和ｂｃｌ 2表达在胰腺癌形成和发展中的作用 ,我们对 31例胰腺癌和 14例慢性胰腺炎组织中细胞凋亡情况及ｂａｘ和ｂｃｌ 2基因表达产物进行检测 ,现报告如下。资料与方法1.一般资料 :收集 1990年 1月至 1998年 7月手术切除的胰腺癌标本 31例 ,其中男 2 1例 ,女 10例 ,平均年龄 5 4岁。其中高分化腺癌 15例 ,中度分化腺癌 6例 ,低分化腺癌 9例 ,未分化腺癌 1例。按ＴＮＭ进行临床分期 ,Ⅰ期 5例 ,Ⅱ期6例 ,Ⅲ期 11例 ,Ⅳ期 9例。选取同期 14例慢性胰腺炎标本作对照研究。2 .染色方法 :检测细胞凋亡采用ＩＳ…     

生长抑素类似物诱导胆管癌细胞凋亡和bcl-2/bax表达的研究

目的探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995 (SMS)对人胆管癌SK ChA 1细胞凋亡和凋亡调控基因bcl 2和bax的影响。方法用DNA凝胶电泳、流式细胞仪检测AnnexinV标记凋亡细胞、免疫组化和原位杂交方法研究SMS(10 0ng/ml)处理 6、12和 2 4h后人胆管癌SK ChA 1细胞凋亡和bcl 2 /bax表达的变化。结果SMS作用SK ChA 1细胞 6h对DNA无明显影响 ,作用 12和 2 4h后DNA凝胶电泳出现呈典型梯状条带。SMS作用 6、12和 2 4h后 ,AnnexinV标记的凋亡细胞分别为 (2 2±5 ) % ,(39± 7) %和 (5 8± 10 ) %。同时 ,SMS可使细胞bcl 2蛋白表达下降 ,使bax蛋白和mRNA表达升高。结论SMS能诱导SK ChA 1细胞发生凋亡 ,bax和bcl 2凋亡基因介导了SMS对SK ChA 1细胞凋亡的发生     

大肠癌及癌旁组织中抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax的表达及意义

目的：研究抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因bax在大肠癌及癌旁组织中的表达及意义。方法：应用免疫组织化学S－P法对31例大肠癌患者的癌组织及距癌组织外缘3cm内的癌旁组织和3cm以远的正常大肠组织中bcl-2和bax基因的表达进行检测。结果：大肠癌及其癌旁组织中bcl-2蛋白表达阳性率分别为64．5％和60．0％，显著高于正常组织（35．0％），P＜0．05；bax蛋白表达阳性率分别为45．2％和45．0％，显著低于正常组织（60．0％），P＜0．05；大肠癌组织与癌旁组织中bcl-2和bax蛋白表达阳性率的差异无显著性意义（P＞0．05）。bcl-2和bax蛋白在大肠癌组织中的表达与其病理类型和临床分期无明显关系（P＞0．05）。结论：大肠癌及其癌旁组织中有不同水平的bcl-2蛋白过度表达和bax蛋白低表达，两者通过参与调节细胞凋亡而与大肠癌的发生有关，但与大肠癌的病理类型、临床分期无关。距大肠癌组织外缘3cm以内的癌旁组织应视为癌前期组织，手术时应切除。     

区域性动脉灌注化疗对胰腺癌bcl-2、bax基因的影响

目的　探讨区域性动脉灌注化疗对胰腺癌bcl-2、bax基因表达的影响,寻找胰腺癌治疗的新手段。方法　应用TUNEL法检测32例未经区域性动脉灌注化疗和19例经区域性动脉灌注化疗的胰腺癌细胞凋亡指数(AI);并采用免疫组织化学方法检测区域性动脉灌注化疗对胰腺癌细胞bcl、bax基因表达的影响。结果　区域性动脉灌注化疗组胰腺癌细胞AI比未区域性动脉灌注化疗组明显升高(0.65%vs1.10%,P＜0.05);与未区域性动脉灌注化疗组相比,区域性动脉灌注化疗组肿瘤细胞bcl-2基因表达明显减少(36.7%vs75.0%,P＜0.05),而bax基因的表达显著增加(73.6%vs34.0%,P＜0.05)。结论　区域性动脉灌注化疗可以诱导胰腺癌肿瘤细胞凋亡的增加,是胰腺癌综合治疗的有效措施之一。     

胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响

目的 探讨胃液对膀胱癌生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。方法 采用细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃细胞培养、四唑盐比色试验（MTT）、DNA提取及电泳、流式细胞仪和免疫组织化学等方法,观察胃液对膀胱癌细胞系生长抑制、细胞凋亡及bcl-2/bax表达的影响。结果 高浓度胃液（19-38mmol/L）抑制膀胱癌细胞系的生长繁殖,低浓度胃液（0.594-9.500mmol/L)则促进膀胱癌细胞系的生长繁殖,胃液能诱导体外培养的膀胱癌细胞凋亡,膀胱癌细胞系BIU-87中bcl-2、bax均有表达（分别为63.5%和41.4%),经胃液、稀盐酸或阿霉素处理后,bcl-2表达下降（分别为34.8%、37.3%和29.6%),bax表达上升（分别为49.3%、47.1%和52.2%),bcl-2/bax比值小于1。结论 胃液能抑制膀胱癌的生长,诱导其凋亡。     

bcl-2和bax基因与细胞凋亡的关系及在脊髓损伤中的作用

目的探讨bcl2和bax基因与细胞凋亡的关系及在脊髓损伤中的作用。方法采用Allen法挫伤大鼠T10节段脊髓,随机分为7组,其中6组为实验组,1组为对照组,每组在SCI后2、4、8、24h、3、7d取材,每一时间点4只。免疫组织化学法检测bax和bcl2基因表达,采用原位末端标记法检测凋亡细胞。结果正常组大鼠脊髓中未见凋亡细胞。实验组在损伤2h出现阳性细胞,伤后8h阳性细胞数目达高峰为84.53±8.00,以后逐渐减少。bax基因表达的高峰也在伤后8h为0.311±0.012,说明bax基因促进了细胞的凋亡,而此时bcl2基因开始出现表达增多,至伤后24h表达达高峰,之后缓慢降低,而与此相对应的是细胞凋亡开始逐渐减少(P<0.01)。结论凋亡相关基因bax与bcl2可能参与了脊髓继发性损伤,细胞凋亡在脊髓继发性损伤过程中起着关键性作用。     

胰腺癌中bcl-2的表达与细胞凋亡及癌基因c-myc表达的关系

目的：探讨人胰腺癌中bcl-2的变化情况与细胞凋亡及c-myc表达的关系。方法：采用免疫组织化学（SP法）和分子原位杂交法检测bcl-2及c-myc在胰腺癌病人癌组织（50例）和胰腺癌转移灶组织（15例）中的表达。采用TUNEL法检测细胞凋亡。结果：细胞凋亡的变化规律与胰腺癌的发生发展和临床病理特征有着内在联系。在mRNA和蛋白水平上bcl-2基因和c-myc基因分布一致。bcl-2蛋白的表达影响胰腺癌中细胞凋亡,并与c-myc蛋白在胰腺癌和胰腺癌转移灶组中的表达协同关系。结论：bcl-2和c-myc基因在胰腺癌发生和发展过程中发挥着重要作用。     

人参总皂甙对高能冲击波肾细胞凋亡相关基因bcl-2和bax表达的影响及其临床意义

目的探讨人参总皂甙对高能冲击波肾细胞凋亡相关基因的影响。方法选用成年大耳白兔制备动物模型,将动物分为人参皂甙组、对照组,每组8只,冲击波次数为2300～2500次,工作电压10.5～12.0kV。体外冲击波碎石(ESWL)后48h分别处死动物,取右肾行免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白过氧化物酶连结法(SP)染色。结果bcl-2的表达,用药组肾曲管上皮阳性细胞数为(87.6±17.1)个,而对照组为(22.6±8.2)个(P＜0.05）。Bax表达用药组阳性细胞数为(46.3±11.7)个,对照组(81.7±9.6)个（P＜0.05)。结论人参总皂甙可促使细胞凋亡抑制基因bcl-2高表达,相对抑制促进基因bax的表达,减少肾曲管上皮细胞凋亡。     

凋亡相关基因 bcl-2、bax、bad与乳腺癌

目的探讨乳腺癌发生、发展过程中bcl-2、bax及bad基因表达水平变化及与乳腺癌其他生物因素的相关性。方法复习国内、外相关文献并进行综述。结果在从正常乳腺组织到乳腺癌逐渐演化的过程中凋亡抑制基因bcl-2的表达水平变化尚有待进一步研究,而凋亡促进基因bax、bad的表达水平呈递减趋势。bcl-2基因表达水平与乳腺癌中一些公认的正性因子如雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)呈正相关,与其他一些负性因子如p53、表皮生长因子受体、c-erbB-2、腋窝淋巴结转移情况等呈负相关。bax基因的表达水平与乳腺癌ER、PR水平以及p53表达水平等无关。对于bad基因与乳腺癌其他生物因素的相关性尚未见报道。结论乳腺癌中bcl-2基因表达水平的变化对乳腺癌预后以及治疗的作用尚存在争议,bad基因与乳腺癌预后的关系亦不清楚,而bax基因表达水平与乳腺癌的预后呈正相关。对于它们的研究将为我们评价乳腺癌的预后提供新的指标,为乳腺癌的治疗开辟新的思路。     

直肠粘液腺癌bax及bcl-2基因的表达及意义

目的：观察直肠粘液腺癌组织中bax和bcl-2基因的表达并探讨其临床意义，方法：应用免疫组织化学ABC法，以bax及bcl-2单克隆抗体标记38例直肠粘液腺癌组织，并分析与临床病理学指标及预后的关系。结果：bax的阳性表达率在Dukes A 和B期为77．8％，在Dukes C期为45．0％，二者相比差异有显著意义（χ^2=4.260,P=0\039);bcl-2的表达与各病理学指标无明显关系，但bax与bcl-2阳性表达强度之比值与Dukes分期（P=0.04)和病人5年生存率（P＝0．001）相关，结论：bax及bcl-2在直肠粘液腺癌中普遍表达。术后检测癌组织中这类基因的表达对判断预后有积极作用。     

氯沙坦对体外培养的犬胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的探讨血管紧张素受体I拮抗剂(AT1Ra)氯沙坦对体外培养的犬胰岛细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响。方法机械自动化分离胰岛,纯化系统获得高纯度胰岛后,分为3组进行培养。(1)单纯培养组;(2)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组:培养基中加入不同浓度的AngⅡ(0.1、1.0和10.0μmol/L);(3)氯沙坦组:在加人不同浓度的AngⅡ前30min给予氯沙坦10.0μmol/L。各组胰岛培养48h后,采用透射电镜观察胰岛细胞凋亡情况;原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法(TUNEL)检测胰岛细胞凋亡百分率;免疫组织化学法和流式细胞术检测胰岛细胞凋亡相关基因(Bax和Bcl-2)的表达。结果单纯培养组胰岛细胞凋亡百分率为(5.70±1.18)%,AngⅡ组在AngⅡ浓度为0.1μmol/L、1.0μmol/L和10.0μmol/L时,胰岛细胞凋亡百分率分别为(9.77±1.95)%、(16.42±3.01)%和(18.22±2.31)%,氯沙坦组分别为(6.56±1.85)%、(9.25±1.58)%和(11.20±2.48)%,AngⅡ组与单纯培养组和氯沙坦组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AngⅡ组Bax和Bcl-2基因表达增强,荧光指数(FI)分别为1.86±0.15和1.43±0.07,Bax/Bcl-2比值(1.30)升高;而氯沙坦组Bax表达下调至1.56±0.14,Bcl-2表达上调至1.67±0.09,Bax/Bcl-2比值(0.93)降低,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ可以诱导体外培养的犬胰岛细胞凋亡;而氯沙坦对胰岛细胞具有保护作用,其可能机制是通过影响凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达实现的。     

小鼠乳腺癌中p53与bcl-2/bax基因表达的相关性研究

目的探讨p53基因和bcl-2/bax基因在乳腺癌发病机制中的作用以及它们之间的相互关系。方法以小鼠乳腺癌BCML-TA299可移植模型为研究对象,用免疫组织化学染色法观测α-干扰素(INF-α)干扰后p53基因与bcl-2/bax表达的关系。结果实验性乳腺癌BCML-TA299治疗组荷瘤鼠生存期较对照组延长,且随着时间的推延治疗组肿瘤的体积明显低于对照组的肿瘤体积;治疗组与对照组比较,肺转移率低。对照组p53蛋白阳性表达率为92.01±0.48,而治疗组中p53呈阴性表达。对照组瘤组织bcl-2蛋白表达为50.21±0.52,bax蛋白表达为12.08±0.13;治疗组瘤组织bcl-2蛋白表达为12.01±0.2,bax蛋白表达为48.19±0.57。对照组p53蛋白表达与bcl- 2呈正相关,而与bax呈负相关(P<0.05);治疗组中p53呈阴性表达,bcl-2和bax表达与对照组结果相反。结论bcl-2和bax的表达受p53调节。p53、bcl-2/bax在乳腺癌发病机制中起着较重要的作用。     

反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl-2基因的表达并增强凋亡的研究

目的　观察反义寡核苷酸抑制结肠癌细胞bcl 2基因的表达并诱导凋亡和增强化疗的敏感性。方法　应用反义硫代寡核苷酸 (bcl 2SON)和顺铂共同处理结肠癌细胞系SW62 0 ,通过流式细胞仪观察其bcl 2蛋白表达的变化 ,并通过原位末端标记法 (TUNEL)染色和流式细胞仪检测细胞凋亡指数。结果　用bcl 2SON处理过的SW62 0细胞其bcl 2蛋白平均荧光强度 (MFI)为(40 .3± 8.7) %与空白对照及随机链对照组相比 ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1 ) ,表明导入反义bcl 2后可明显抑制结肠癌细胞的bcl 2蛋白的表达。经bcl 2SON和 1 0mg/L顺铂共同处理的SW62 0细胞凋亡指数为 (64 .7± 8.4) % ,显著高于单纯顺铂处理组的 (2 3 .6± 6 .3) % (n =5 ,P <0 .0 1 )以及单纯bcl 2SON处理组的 (2 7.5± 5 .1 ) % (n =5 ,P <0 .0 1 )。而未经处理的对照组SW62 0细胞凋亡指数则为 (8.5± 1 .2 ) % ,显著低于后两组 (n =5 ,P <0 .0 5)。结论　bcl 2SON可通过抑制结肠癌细胞 (SW 62 0 )bcl 2蛋白的表达 ,诱导其凋亡 ,增强对化疗药物的敏感性     

bcl-2/bax mRNA在三氧化二砷体外诱导人胆管癌细胞株凋亡中的表达

目的 观察bcl-2、bax mRNA在三氧化二砷(As2O3)诱导人类胆管癌株QBC939、RBE细胞凋亡中的表达.方法 Rhodamine123染色检测线粒体膜通透性变化;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2、bax mRNA的表达.结果 As2O3干预,实验组Rhodamine123荧光染色强度较对照组明显减弱;凝胶成像检测bcl-2/β-actin mRNA A比值,QBC939、RBE细胞对照组分别为0.41±0.03、0.84±0.03;24 h实验组为0.01±0.01、0.43±0.02.bax/GAPDHmRNAA比值QBC939、RBE细胞对照组分别为0.21±0.01、0.42±0.04;24 h实验组为1.44±0.16、1.15±0.21,对照组与实验组比较差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 As2O3可能增加胆管癌细胞株线粒体膜的通透性,下调bcl-2mRNA表达,上调bax mRNA的表达,可能启动了线粒体凋亡信号传导途径.     

直肠癌新辅助化疗对凋亡相关基因bel-2、bax的影响

目的 探讨直肠癌新辅助化疗对凋亡相关基因bcl-2、bax的影响。方法 对43例局部进展期直肠癌患者,术前通过结肠镜活检证实为直肠癌,采用免疫组化SP法检测bcl-2、bax蛋白的表达,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术（TUNEL）检测直肠癌细胞的凋亡指数。新辅助化疗NCT采用FOLFOX-4两天方案,每2周重复1次,28天为1个化疗周期,完成2个周期进行临床疗效评价后行手术治疗,术后标本应用免疫组化SP法、TUNEL技术观察bcl-2、bax蛋白和AI的变化。结果化疗后直肠癌组织中bcl-2、bax阳性细胞率和细胞凋亡指数分别为（43.29±7.42）%、（72.9±9.18）%和（10.79±3.05）%,与化疗前（65.7±8.53）%、（54.8±7.86）%和（5.38±2.24）%相比较差异有统计学意义（P〈0.01）;化疗后部分缓解（PR）病例bcl-2、bax阳性细胞率与无效（NC）病例相比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论 新辅助化疗可明显促进直肠癌细胞的凋亡。而且这两种基因的表达水平与新辅助化疗疗效具有显著的相关性;而且这两种基因的表达水平有可能成为进展期直肠癌化疗疗效的预测指标。     

白藜芦醇对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡bax及bcl-2表达的影响

[目的]探讨白藜芦醇对硝普钠诱导的软骨细胞凋亡及凋亡调控基因bax及bcl-2表达的影响。[方法]常规培养关节软骨细胞后,按不同浓度白藜芦醇(分别为25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L)处理后分组并用硝普钠(SNP)(2.5 mmol/L)诱导细胞凋亡。采用MTT法检测各组软骨细胞活性、DAPI染色和流式细胞术检测各组细胞凋亡,采用western-blot技术检测各组细胞sirt1、bax、bcl-2的表达,RT-PCR法检测各组细胞sirt1mRNA的表达。[结果]随着白藜芦醇浓度的升高,MTT法结果显示处理后细胞活性依次增高;DAPI染色、流式细胞术检测显示处理后细胞凋亡相对较少;western-blot检测显示随着白藜芦醇浓度的升高,处理后细胞sirt1、bcl-2依次增高,而bax逐渐降低;RT-PCR法检测显示白藜芦醇处理后细胞sirt1 mRNA表达随浓度逐渐增高。[结论]白藜芦醇激活sirt1,使bcl-2/bax表达增高,是白藜芦醇抑制软骨细胞凋亡、预防骨关节炎的机制之一。     

多囊卵巢综合征中卵巢初级小卵泡bcl-2、bax的表达

目的 :探讨凋亡调节蛋白 bcl-2及 bax在多囊卵巢综合征 ( PCOS)患者的卵泡选择、发育的作用。方法 :1 8例 PCOS患者及 1 3名正常人 2 40个小卵泡按直径分为 4个组 ,采用免疫组织化学方法及 Konton Ibas灰度值的定量测定 ,用 SPSS软件统计 ,定量分析凋亡调节蛋白 bcl-2及 bax在 PCOS各级初级小卵泡中的表达。结果 :PCOS组各级窦前卵泡组间 bax蛋白表达有显著差异 ,随着卵泡直径的增加 bax表达明显增多 ,但直径 >1 2 0 μm的卵泡 bax表达减少 ,bcl-2 / bax灰度比值显著变小。 bcl-2蛋白表达相对稳定 :PCOS组直径在 60～ 1 2 0μm的卵泡 bcl-2表达显著高于正常对照组 ( P<0 .0 5 )。结论 :正常人及 PCOS卵巢组织各级窦前卵泡和窦卵泡均表达 bcl-2及 bax,随着卵泡的增大 ,bcl-2的表达增加 ,当卵泡直径 >1 2 0 μm时 ,细胞凋亡减弱 ,卵泡的增长加速。PCOS患者卵巢中各级窦前卵泡和窦卵泡凋亡蛋白 bcl-2及 bax的表达是正常的。