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1.
PMA对THP-1细胞和RA患者单核细胞及培养上清中CD147表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:研究豆蔻佛波醇乙酯(PMA)刺激前后,体外培养的人单核细胞系THP-1细胞和类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞(human peripheral blood monocytes,HPBM)上及培养上清中CD147的表达.方法:以贴壁法分离RA患者HPBM.用PMA刺激体外培养的RA患者HPBM和THP-1细胞,采用流式细胞术动态检测THP-1细胞、RA患者HPBM膜表面CD147的表达.用双抗体夹心ELISA法检测培养上清中CD147分子的含量.结果:PMA刺激前,THP-1细胞膜及RA患者HPBM表面CD147分子的表达均较高,培养上清中均可检测到CD147分子.PMA刺激后,THP-1细胞培养上清中CD147的含量升高,THP-1细胞上CD147的表达先升高后降低,最后进入稳定期;RA患者的HPBM上CD147的表达下降,培养上清中CD147的含量升高,于刺激后2 d进入稳定期.结论:THP-1细胞、RA患者HPBM膜表面CD147分子可从细胞上脱落或由细胞直接分泌到培养液中.PMA可上调可溶性CD147的表达. 相似文献
2.
目的观察类风湿关节炎(RA)滑膜组织中CD147表达强度与血管内皮生长因子(VEGF)表达水平间的相关性,并探讨成纤维样滑膜细胞(FLS)表面CD147的水平变化对VEGF表达的影响。方法收集15例RA患者滑膜,以4例骨关节炎(OA)患者滑膜作对照,采用免疫组织化学SP染色方法检测滑膜组织中CD147和VEGF的表达;体外原代培养FLS细胞,分别加入CD147抗体,PI3K通路阻断剂,MAPK通路的ERK1/2、P38及JNK阻断剂等作用FLS细胞,ELISA检测细胞培养上清中VEGF的表达水平。结果与4例OA滑膜组织CD147和VEGF表达相比,15例RA滑膜组织中均有CD147、VEGF均高表达。其中,表达CD147的细胞主要为成纤维样滑膜细胞、单核-巨噬细胞和淋巴细胞;表达VEGF的细胞主要为成纤维样滑膜细胞、微血管周围成纤维样细胞及血管平滑肌细胞。滑膜组织中CD147和VEGF的表达强度间具有统计学意义。ELISA结果显示,在使用LY294002或抗HAb18GmAb阻断CD147表达后,VEGF的表达量显著下降(P<0.05);而MAPK阻断剂(PD98059、SP600125和SB203580)等对VEGF表达水平无统计学意义(P>0.05)。结论CD147经PI3K-Akt信号通路在RA滑膜组织中上调VEGF促进血管新生。提示CD147在RA血管新生和血管翳形成中有重要意义。 相似文献
3.
背景:已有研究表明滑膜炎持久反复发作,最终导致关节内软骨和骨的破坏,国内关于类风湿性关节炎滑膜组织的蛋白质组学研究报道较少。
目的:通过比较类风湿性关节炎患者和无关节滑膜损伤患者滑膜组织蛋白质表达的差异,探讨类风湿性关节炎可能的发病机制,寻找类风湿性关节炎致病相关蛋白。
方法:选取6例无关节滑膜损伤患者及6例活动期类风湿性关节炎患者行关节镜手术得到的滑膜组织,提取总蛋白质后进行双向凝胶电泳,考马斯亮蓝染色,PDQUEST软件分析,对差异蛋白质点采用基质辅助激光解析电离质谱(MALDI-TOF-MS)技术进行鉴定,并用Mascot软件在SwissProt和NCBInr数据库中进行同源比较和分析鉴定。
结果与结论:建立了类风湿性关节炎组及对照组滑膜组织双向凝胶电泳图谱,获得130个差异在2倍以上的蛋白质点数,选取其中分辨清楚的39个点进行鉴定,初步鉴定出29个蛋白质,其中21个蛋白质点在类风湿性关节炎组中表达上调,8个表达下调,其功能涉及功能代谢、细胞信号传导、抗氧化、分子伴侣等。结果表明类风湿关节炎滑膜病变是一个多种蛋白质参与的复杂过程,这些表达差异蛋白质可能是类风湿性关节炎发病的内在因素。 相似文献
4.
目的探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中Connexin43(Cx43)和CD147蛋白的表达及意义。方法采用免疫组化PV6000法检测74例HCC和20例正常肝组织中Cx43和CD147的表达。结果 Cx43和CD147在HCC组织中阳性率分别为27.03%、63.51%,在正常肝组织中阳性率分别为95.00%、30.00%,Cx43在正常肝组织中的阳性率明显高于HCC组织中的阳性率,差异有显著性(P<0.01);CD147在HCC组织中阳性率明显高于正常肝组织的阳性率,差异有显著性(P<0.01)。Cx43和CD147阳性表达与肝细胞癌的肿瘤大小、分化程度、TNM分期及肝内血管癌栓具有相关性(P<0.05),与患者的年龄、性别、有无伴肝硬化、门静脉癌栓及术前血清甲胎蛋白水平无相关性(P>0.05)。肝癌组织中Cx43表达下调,CD147表达上调,两者呈负相关(P<0.01)。结论联合检测HCC组织中Cx43和CD147的表达情况,可预测HCC的浸润和转移,对指导临床治疗和判断预后有重要意义。 相似文献
5.
类风湿关节炎患者滑膜组织和外周血CD4+T细胞的凋亡分析 总被引:1,自引:0,他引:1
类风湿关节炎 (RheumatoidArthritis ,RA)是一种累及全身多关节的自身免疫性炎症性疾病 ,其病理特征之一为炎性滑膜浸润大量CD4 + T细胞 ,滑膜细胞增生及血管翳形成 ,其机理仍未阐明。有学者认为RA的发病与细胞凋亡过程异常有关 ,并有多种细胞参与 ,包括滑膜细胞、成纤维细胞、淋巴细胞、软骨细胞等[1] 。本实验应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术 ,探讨细胞凋亡在RA发病机制中的作用。1 材料与方法1 1 标本 RA患者滑膜组织和外周血取自 8例RA病人 ,RA诊断根据 1987年美国风湿病学会(ACR)修订… 相似文献
6.
目的:分析CD147在不明原因自然流产患者绒毛组织中的表达水平,并探讨其生物学功能。方法:收集人早孕期正常和不明原因自然流产妇女的绒毛组织,采用免疫组织化学、RT-PCR和Westernblotting法检测CD147的表达,比较CD147在正常早孕与不明原因自然流产妇女绒毛组织的表达差异。体外分离纯化获得正常人早孕期滋养细胞,采用免疫细胞化学验证CD147在滋养细胞的表达,引入抗CD147中和性抗体处理人滋养细胞,采用BrdU增殖实验和Transwell侵袭实验分析滋养细胞增殖和侵袭能力的变化。结果:正常早孕期绒毛组织和滋养细胞高表达CD147,不明原因自然流产绒毛组织CD147的mRNA和蛋白表达水平均低于正常早孕期绒毛组织。抗CD147中和性抗体处理原代人滋养细胞后,滋养细胞的增殖能力未发生明显变化,侵袭能力下降。结论:人绒毛组织CD147的异常低表达可能与不明原因早期妊娠失败相关,CD147通过调控滋养细胞的侵袭能力参与正常妊娠的维持。 相似文献
7.
类风湿关节炎患者CD62P、CD41/CD61的表达及意义 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:通过检测类风湿关节炎(RA)患者血小板表面活化标志物CD41/CD61、CD62P的表达,研究血小板活化与RA及RA活动性的关系。方法:采用流式细胞技术检测RA患者及健康对照组血小板CD41/CD61、CD62P的表达阳性率。结果:血小板CD62P阳性率在RA活动组及RA组患者分别高于缓解组和健康对照组,CD41、CD61阳性率差别在各组间无统计学意义。结论:(1)RA患者血小板CD62P表达增高与疾病活动有关;(2)血小板CD62P高表达可能是RA患者好发心血管疾病的原因之一;(3)CD41/CD61可能与RA炎症及其好发心血管病无关。 相似文献
8.
目的构建表达细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147,EMMPRIN)基因序列特异性的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)载体。方法根据CD147基因序列及shRNA设计原则,化学合成两段编码短发夹RNA寡核苷酸序列,将其定向克隆到pGenesil-1.1质粒表达载体中,重组构建RNAi质粒,并对重组质粒进行酶切分析。结果限制性内切酶Eco31I和SacI酶切显示设计合成的shRNA编码序列被成功插入pGenesil-1.1质粒载体中,酶切结果证实插入片段与设计序列完全一致,成功构建针对基因CD147的shRNA质粒表达载体。结论成功构建人CD147基因重组载体,为研究CD147蛋白的生物学效应和骨肉瘤的治疗提供实验依据。 相似文献
9.
HLA-DR4基因检测与类风湿性关节炎活动的关系 总被引:5,自引:0,他引:5
类风湿性关节炎(RA)是一种常见的以关节滑膜慢性炎症病变为主要表现的自身免疫性疾病,它的发生属遗传与外界环境共同作用所致。近年研究表明,HLA-DR4为其发病易感基因,有学者提出HLA-DR4基因影响了RA的活动度及其严重程度。本研究检测了502例类风关患者的红细胞沉降率(ESR)、c反应蛋白(CRP)、类风湿因子(RF)指 相似文献
10.
在多数动物体内,G蛋白偶联受体(G proteincoupled receptors,GPCRs)构成了绝大部分的基因家族,并且绝大部分的细胞表面受体家族属于GPCRs[1].通过与相应的配体结合,GPCRs可以被激活并启动细胞内的信号转导系统,将配体包含的胞外信息传递到胞内,从而成为细胞内外的一个"门户"[2].由于GPCRs具有广泛存在性,多样的分子识别功能和信号始动等作用,使其成为临床治疗的重要靶标,在目前的药物市场份额中,靶向GPCRs的药物占据了约40%的市场份额[3].GPCRs在先天性、获得性和病理性的免疫系统反应中都具有重要作用,可以被广泛的免疫炎症调节因子,如前列腺素、白细胞三烯和组胺等调控[4].类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以慢性滑膜炎和侵袭性关节炎为主要表现的慢性自身免疫性疾病,其基本的病理改变是关节滑膜炎[5-6]. 相似文献
11.
CD4~+CD25~+调节性T细胞(Treg)在维持机体自身耐受和预防自身免疫性疾病方面发挥重要作用,其功能失调在类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)发病中同样起重要作用。因此,对CD4~+CD25~+Treg在RA中的深入研究不仅能进一步了解RA的发病机制,也为治疗RA提供了新的途径。 相似文献
12.
目的:探讨CD64在类风湿关节炎(RA)患者外周血单核细胞亚群上的表达及临床意义,以阐明其在RA发生和发展中的作用。方法:应用流式细胞仪检测44例RA患者和22例正常对照者外周血单核细胞亚群的比例及其CD64的表达,比较RA组和正常对照组之间各单核细胞亚群的比例及其表面CD64表达水平,并分析各单核细胞亚群表面CD64表达与实验室检查数据的相关性。两组间比较采用t检验或者非参数检验,两变量之间相关性采用Pearson或Spearman相关分析。结果:(1)RA组中间型单核细胞比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);RA组经典型单核细胞比例和非经典型单核细胞比例低于对照组(P<0.05),差异有统计学意义。(2)RA组各单核细胞亚群CD64表达(MFI)显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)RA患者外周血经典型单核细胞和中间型单核细胞CD64表达(MFI)与DAS28呈正相关(rs=0.308,P=0.044;rs=0.302,P=0.049)。(4)RA患者各单核细胞亚群CD64表达(MFI)与ESR,CRP呈正相关(rs=0.410,P=0.008;rs=0.475,P=0.003;rs=0.448,P=0.003;rs=0.473,P=0.004;rs=0.348,P=0.026;rs=0.340,P=0.042)。(5)RA患者RF阳性组、ACPA阳性组外周血经典型单核细胞、中间型单核细胞上CD64表达(MFI)明显高于对应的阴性组,差异有统计学意义(P<0.05)。(6)中间型单核细胞CD64高表达组血清细胞因子IL-6水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RA患者外周血单核细胞亚群CD64表达异常,经典型单核细胞和中间型单核细胞CD64表达与炎症水平、自身抗体产生和疾病活动性有明确的相关性。以外,中间型单核细胞CD64的表达与细胞因子相关。 相似文献
13.
目的:研究CD147蛋白、MMP-9在子宫腺肌病患者组织中的表达及血清中可溶性CD147(sCD147)蛋白水平,探讨其在子宫腺肌病中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测37例子宫腺肌病患者(子宫腺肌病组)子宫异位内膜、在位内膜及20例子宫肌瘤患者(对照组)子宫内膜组织中CD147蛋白和MMP-9的表达,并对其蛋白表达量进行相关性分析;采用ELISA双抗体夹心法检测37例子宫腺肌病患者血清sCD147蛋白的水平,20例子宫肌瘤患者和20例女性健康体检者设为对照。结果:子宫腺肌病组异位与在位子宫内膜组织腺上皮细胞、间质细胞均有CD147蛋白、MMP-9表达,且明显高于对照组(P<0.01),其中异位内膜CD147蛋白、MMP-9表达量高于在位内膜(P<0.01);子宫腺肌病组CD147蛋白与MMP-9的表达量成正相关,对照组两者则无相关性。子宫腺肌病组血清sCD147蛋白的水平高于子宫肌瘤组(P>0.05)和健康体检者组(P<0.05)。结论:子宫腺肌病患者异位与在位内膜组织中CD147蛋白和MMP-9高表达及血清sCD147蛋白高水平可能与子宫腺肌病发生发展有关,且CD147蛋白可能通过促进MMP-9合成与分泌而发挥其作用。 相似文献
14.
目的:观察研究人诱骗受体3(DcR3)在类风湿关节炎(RA)关节液及滑膜组织中的表达及其与滑膜炎性病变程度的相关性.方法:用免疫组织化学的方法对12例RA患者、6例骨关节炎(OA)患者及4例无关节病变的骨折患者滑膜组织中DcR3的表达进行描述分析,并对DcR3表达情况与RA患者滑膜炎性病变程度相关性进行分析.同时用ELISA的方法检测了26例RA及19例OA患者关节液中DcR3的表达.结果:DcR3在RA滑膜组织主要分布于血管翳周围炎性细胞及部分滑膜细胞中,DcR3阳性细胞数约为72%.OA滑膜组织细胞中DcR3也呈现少量的阳性表达,但与RA比较阳性程度较弱,阳性细胞数量较少:对DcR3表达与RA滑膜炎性程度的相关性分析发现,DcR3与RA滑膜炎性程度呈正相关(r=0.832,P<0.01),同时发现RA患者关节液中表达也明显高于OA患者.结论:DcR3在RA滑膜组织炎性细胞及滑膜细胞上的异常表达可能是其参与RA滑膜炎及滑膜组织侵袭等病理过程,从而导致滑膜损伤的一个重要机制. 相似文献
15.
目的:本研究利用新型半导体免疫荧光标记试剂-量子点(QDs)结合组织芯片技术检测CD147和增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白在人肺癌组织中的表达,并与免疫酶法对比,探讨量子点免疫荧光组织化学技术的有效性和实用性。方法:利用QDs免疫荧光组织化学(QDs-IHC)技术分别检测人肺癌组织芯片中CD147和PCNA的蛋白表达,同时检测了CD147与PCNA的共表达,并与传统免疫酶法的结果对比。结果:QDs-IHC和传统IHC检测结果显示:CD147和PCNA蛋白表达在对照组和肺癌组之间相比,差异均显著(P<0.05)。CD147和PCNA蛋白表达之间呈显著正相关(r=0.533,P<0.01)。QDs-IHC检测2种蛋白表达的阳性率均高于IHC所检测的结果,但差异无显著(P>0.05)。结论:QDs-IHC和传统IHC均能检测到CD147和PCNA蛋白在肺癌组织中的表达,但QDs-IHC的灵敏性稍高于IHC,背景更干净。CD147与PCNA协同促进肺癌的恶性进展。 相似文献
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目的:探讨外周血及关节液中浆细胞样树突状细胞(Plasmaetoid dendritic cell,pDC)的数量在初发类风湿关节炎(RA)患者中的表达,进一步明确pDC在类风湿关节炎发病机制中的作用.方法:采集RA组患者(30人),骨关节炎(0A)组(25人),健康对照组(25人)抗凝外周血及关节液,流式细胞术检测CD123+ CD11c-pDC的表型及数量.结果:活动性RA患者外周血中CD123+ CD11c-pDC(1.69%±0.97%)与OA组(5.38%±2.31%)相比含量减少,差异具有统计学意义(P<0.05),与健康对照组(5.63%±2.33%)相比含量减少,差异具有统计学意义(P<0.05),后两者相比差异无统计学意义(P>0.05).关节液中两组CD123+ CD1 1c-pDC含量差异无统计学意义(P>0.05),pDC与DAS28评分及疾病的活动度指标RF、ESR、CRP无相关性.结论:初发RA患者体内外周血中CD123+ CD1 1c pDC含量减少与机体免疫功能紊乱有关,这对进一步阐明RA的发病机制及探索新的靶向治疗起到一定的积极作用. 相似文献
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<正> 自身免疫是类风湿性关节炎(RA)发病中的重要因素,患者血清中存有抗自身IgG的抗体——类风湿因子。1977年,David和Threntham首次发现了50%的患者血清中存有抗Ⅱ型胶原的抗体,此种抗体与类风湿的发病和反复出现的症状有明显联系,我们应用ELISA检测,并对实验条件做了优选,取得满意结果。 相似文献
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GM-CSF对类风湿性关节炎患者单核细胞合成MMP的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
观察GM-CSF刺激前后,类风湿性关节炎(RA)患者单核/巨噬细胞基质金属蛋白酶(MMP-2、MMP-9)合成及CD147表达的变化。从RA患者外周血及滑液分离单核细胞。RPMI1640培养液中培养,加入不同剂量的GM-CSF,用明胶酶谱法测定刺激24h、48h、72h后MMP-2、MMP-9的活性。用流式细胞术测定刺激前后细胞表面CD147表达量。GM-CSF刺激后,细胞呈多形性的巨噬细胞样改变,MMP-2,MMP-9合成增加,而且这种刺激作用与GM-CSF的剂量相关,100ng/ml时刺激作用显著高于12.5ng/ml及25ng/ml;而与作用时间无显著相关性;滑液单核细胞MMP-2、MMP-9表达水平高于外周血单核细胞。GM-CSF刺激后,单核细胞表面CD147的表达显著高于刺激前;滑液单核细胞表达量高于外周血。GM-CSF刺激后,RA患者外周血及滑液单核细胞MMP-2、MMP-9表达增加,同时伴随细胞表面CD147表达增加。 相似文献
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目的:运用免疫荧光组织化学和免疫共沉淀技术(Co IP),探讨快速老化小鼠(SAMP8)海马组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)和单过性跨膜蛋白(NCT)间的表达情况,为寻找阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)相关的治疗策略和方向提供理论依据。方法:3月龄雄性SAMP8小鼠6只。3只小鼠用于免疫荧光组织化学实验,经4%多聚甲醛灌注、取脑、石蜡包埋后,冠状面切片进行组织化学染色,观察CD147与NCT在海马区是否存在共定位的关系。3只用于Co IP实验,提取海马组织蛋白,与CD147抗体孵育后加入琼脂糖微珠A/G孵育过夜,离心后上清用于Western Blot实验检测CD147与NCT间的相互作用关系。结果:SAMP8海马区,CD147和NCT的阳性表达部位主要分布于CA1、CA3、CA4区的锥体细胞层和齿状回颗粒细胞层,二者在CA1、CA3区表达较强;标记部位为胞膜、胞浆,部分神经元在胞浆进核周处存在不连续的点、线状共标记部位。Co IP实验显示CD147与成熟型NCT相互作用,不与非成熟型NCT相互作用。结论:CD147和NCT在SAMP8小鼠海马区锥体细胞层表达较高,推测二者可能与海马的学习记忆功能密切相关;CD147与NCT存在相互作用的关系,推测CD147可能参与调节γ-分泌酶活性。 相似文献