牛磺酸镁配合物对乌头碱诱发心律失常大鼠心肌细胞钙通道的影响

目的研究牛磺酸镁配合物(TMCC)对乌头碱诱发心律失常大鼠心肌细胞L型钙电流(I_(Ca,L))的影响。方法酶解法分离大鼠单个心室肌细胞,乌头碱诱导大鼠心律失常模型,胺碘酮作为阳性对照,100、200和400μmol·L~(-1)TMCC作用于心肌细胞。应用全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞I_(Ca,L)的变化。结果 400μmol·L~(-1)TMCC显著增加大鼠正常心肌细胞I_(Ca,L),胺碘酮则使之减小。1μmol·L~(-1)乌头碱使I_(Ca,L)电流密度由(4.3±1.6)pA·pF~(-1)增加到(6.4±1.9)pA·pF~(-1)(p<0.01),400μmol·L~(-1)TMCC能显著降低乌头碱诱导的I_(Ca,L)增加。胺碘酮则能使之恢复为(3.7±1.4)pA·pF~(-1)。结论 400μmol·L~(-1)TMCC能增加正常细胞的I_(Ca,L),对钙内流有促进作用,并可减少乌头碱诱导的心律失常大鼠心肌细胞异常增加的电流。     

蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞钾电流的阻断作用(英文)

目的:研究蝙蝠葛碱对豚鼠心室肌细胞快激活(I_(Kr))和慢激活(I_(Ks))延迟整流钾电流及内向整流钾电流(I_(K1))的作用。方法:酶解法制备单个心室肌细胞。电压箝制方式下全细胞记录豚鼠单个心室肌细胞钾通道电流。结果:蝙蝠葛碱1-100μmol·L~(-1)浓度依赖性阻断I_(Ks),I_(Ks-tail)[IC_(50)=33(95 ％可信限:24-46)μmol·L~(-1)]及I_(Kr),I_(Kr-tail)[IC_(50))=16 (95％可信限:13-22)μmol·L~(-1)]。对I_(Ks-tail),I_(Kr-tail)的去激活过程无明显影响,给药前的时间常数分别为(92±18)ms和(140±38)ms,给药后分别为(84±16)ms和(130±26)ms(P>0.05)。蝙蝠葛碱对I_(Ks)的抑制作用具有电压依赖性。 蝙蝠葛碱20μmol·L~(-1)对I_(K1)的内向部分具有阻断作用。结论:蝙蝠葛碱对I_(Kr)和I_(Ks)具有阻断作用,但不影响此两种成分的去激活过程. 蝙蝠葛碱同时具有阻断I_(K1)的作用。     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的Ito,研究苄基四氢巴马汀 (BTHP)对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (Ito)的影响 .结果显示 ,5 .0 μmol·L- 1BTHP可以降低Ito,使Ito幅值从 (13.8± 2 .2 )pA·pF- 1降至 (5 .1± 1.4 )pA·pF- 1(P <0 .0 1) .在 1～ 10 0μmol·L- 1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性 ,IC50 为3.6μmol·L- 1,该药不改变Ito电流 电压曲线的形状 ,而使电流幅值减少 .5 .0 μmol·L- 1BTHP使稳态激活曲线右移 ,半激活电压 (V1/2 )从 (- 6.8±0 .2 )mV移至 (- 1.5± 0 .1)mV ,但曲线斜率基本不变 .BTHP对失活曲线影响不大 ,5 .0 μmol·L- 1BTHP使通道失活后恢复时间常数从 (75± 19)ms延长为(119± 2 1)ms(P <0 .0 1) .结果说明 ,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的Ito.     

赛庚啶对豚鼠心室肌细胞钙电流的影响

应用全细胞记录式膜片钳技术研究了赛庚啶(Cyp)对豚鼠心室肌细胞慢钙电流(I_(Ca))的影响,Cyp 3和8μmol·L~1对I_(Ca)的电流-电压关系曲线(I-V曲线)之各电流均有降低作用,使I-V曲线上抬;在指令电位0 mV时,I_(Ca)为次最大值,Cyp 0.3～10μmol·L~1使该I_(Ca)呈浓度依赖性降低,IC_(50)值为1.98μmol·L~1,还观察到Cyp 1μmol·L~1明显增加外向电流(I_(out)),且四乙基铵(TEA)1 mmol·L~1对其有显著的拮抗作用,但对控制电位从80 mV跃升至-40 mV时所出现的瞬时快内向电流,无明显影响.以上结果直接证明了Cyp对心室肌细胞钙跨膜转运有明显降低作用,还可能增加钾外流。     

1—（2，6—二甲基苯氧基）—2—（3，4—二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐抑制豚鼠心室肌细胞内向整流和延迟整流钾电流

目的:研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对心室肌细胞动作电位(AP)、内向整流钾通道电流(I_(K1))及延迟整流钾通道电流(I_K)的影响。方法:全细胞膜片箝技术。结果:DDPH 10,100μmol·L~(-1)使豚鼠心室肌细胞AP时程APD_(50)明显缩短;但DDPH(>1μmol·L~(-1))延长APD_(90)。DDPH浓度依赖性地抑制I_K尾电流(I_(K·tail)),EC_(50)为13.3(11.6.6-16.7)μmol·L~(-1)。DDPH(>1.0μmol·L~(-1))明显抑制I_(Kl);同时,DDPH使I_(Kl)翻转电位向正电位方向移动。结论:DDPH对豚鼠心室肌细胞I_(Kl)和I_K具有明显的抑制作用。     

DDPH抑制豚鼠单个心室肌细胞L-钙电流和钠电流(英文)

目的:研究1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和钠电流的作用。方法:全细胞膜片箝技术。结果:(1)DDPH(3-300μmol·L~(-1))浓度依赖性地抑制L-型钙电流,IC_(50)为28.5μmol·L~(-1)(95％可信限:14.3-42.7μmol·L~(-1))。维拉帕米0.3-30μmol/L浓度依赖性地抑制钙电流,IC_(50)为1.8μmol·L~(-1)(95％可信限:1.3-2.3μmol·L~(-1))。美西律100μmol·L~(-1)对钙电流无影响。DDPH30μmol·L~(-1)使用依赖性阻滞钙电流,1Hz时抑制率为58％±13％(n=5,P<0.01),3Hz时为76％±11％(n=5,P<0.01)。(2)DDPH(20-320μmol·L~(-1))浓度依赖性抑制钠电流,IC_(50)为89.0μmol·L~(-1)(95％可信限:68.7-109.3μmol·L~(-1))。美西律抑制钠电流的IC_(50)为32.2μmol·L~(-1)(95％可信限:11.7-52.7μmol·L~(-1))。维拉帕米10μmol·L~(-1)对钠电流无影响(P>0.05).DDPH80μmol·L~(-1)对钠电流无使用依赖性阻滞。结论:DDPH抑制豚鼠心室肌细胞L-型钙电流和钠电流,但抑制钙电流的作用弱于维拉帕米,抑制钠电流的作用弱于美西律。     

苦参碱、青蒿素和粉防己碱对豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响

目的:比较苦参碱、青蒿素和粉防己碱对分离的豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响。方法:用酶解法急性分离的豚鼠心室肌细胞先用Fluo 3-AM负载,然后用激光扫描共聚焦法检测单个豚鼠心室肌细胞胞浆钙的荧光强度。结果:(1)KCl 60mmol·L~(-1)可升高心室肌细胞胞浆钙荧光强度,其荧光强度从299±19升高到1389±325(P<0.01)。(2)苦参碱和青蒿素在浓度为100μmol·L~(-1)可使KCl 60mmol·L~(-1)引起的外钙内流增多,其荧光强度分别从301±14和299±16升高到1495±320和1646±308(P<0.05)。(3)粉防己碱1、10及100μmol·L~(-1)和维拉帕米10μmol·L~(-1)可抑制KCl引起的外钙内流。(4)在正常细胞外液中,苦参碱1、10和100μmol·L~(-1)可使细胞内荧光强度增强,其荧光强度分别从303±27,300±32,296±19上升到441±96,504±112,643±126(P<0.05)。(5)在无钙细胞外液中,粉防己碱1和10μmol·L~(-1)可明显抑制咖啡因20mmol·L~(-1)引起的胞浆钙升高(P<0.05)。结论:苦参碱、青蒿素和粉防己碱对豚鼠心室肌细胞胞浆钙的影响不同。青蒿素和苦参碱可加强电压依赖性钙内流,而粉防己碱与维拉帕米作用相似,抑制这种钙内流。苦参碱本身可以促进外钙内流。     

苄基四氢巴马汀对大鼠心室肌细胞瞬时外向钾电流的影响

利用全细胞膜片钳技术测定大鼠心室肌细胞的I_to, 研究苄基四氢巴马汀（BTHP）对大鼠心室肌瞬时外向钾电流 (I_to) 的影响. 结果显示,5.0 μmol·L^-1 BTHP可以降低I_to, 使I_to幅值从（13.8±2.2）pA·pF^-1降至（5.1±1.4）pA·pF^-1（P＜0.01）. 在1～100 μmol·L^-1范围内BTHP的作用呈浓度依赖性,IC₅₀为3.6 μmol·L^-1,该药不改变I_to 电流-电压曲线的形状,而使电流幅值减少. 5.0 μmol·L^-1 BTHP使稳态激活曲线右移,半激活电压（V_1/2）从（－6.8±0.2）mV移至（－1.5±0.1）mV,但曲线斜率基本不变. BTHP对失活曲线影响不大,5.0 μmol·L^-1 BTHP使通道失活后恢复时间常数从（75±19）ms延长为 （119±21）ms（P＜0.01）. 结果说明,BTHP浓度依赖地阻滞大鼠心室肌细胞的I_to.     

甘草次酸对大鼠心室肌细胞L型钙离子电流的影响

目的观察甘草次酸（glycyrrhetic acid ，Gta）对大鼠单一心室肌细胞L型钙离子电流（ICa L）的影响。方法以Langendoff匀速灌流体外大鼠心脏，Ⅰ型胶原酶酶解分离单一大鼠心室肌细胞， 将心室肌细胞悬液放入容积为0.2～0.3 mL的浴槽内，间隔相同时间分别向浴槽内加入0.1，1.0，10.0 μmol·L^-1 Gta，应用全细胞膜片钳技术记录不同浓度Gta对单一大鼠心室肌细胞ICa-L的影响；保持电位为－30 mV、指令电位为－40～＋60 mV、步阶脉冲为10 mV、时程为300 ms、刺激频率为0.5 Hz的条件下，引出钙离子电流，取指令电位与相对应的钙离子通道电流作用结果制作不同浓度Gta下L型钙离子通道的电流-电压(I-V)关系曲线。结果Gta浓度分别为0.1，1.0， 10.0 μmo1·L^-1 时可剂量依赖性地降低ICa-L，分别使ICa-L从加入Gta前的（2.30±0.29） nA降至(1.96±0.34) ，(1.37±0.24) ，（0.66±0.20） nA（与加入Gta前比较，均P＜0.01）；Gta 0.1，1.0， 10.0 μmo1·L^-1 也可抑制L型钙离子I-V曲线，使I V曲线上移，但峰值电流不变。结论Gta通过阻滞L型钙通道抑制L型钙离子内流，这种机制可能与Gta抗心律失常作用有关。     

雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞内向整流和延迟整流钾通道电流

目的:研究雌二醇(Estradiol,Est)对心室肌细胞动作电位(AP)、内向整流钾通道电流(I_(K1))及延迟整流钾通道电流(I_K)的影响。方法:全细胞膜片箝技术。结果:EST 10μmol·L~(-1)使豚鼠心室肌细胞AP时程明显缩短,APD_(50)由给药前(474±71)ms缩短至(330±75)ms(P<0.05),Est 100μmol·L~(-1)使APD_(50)缩短至(229±67)ms(P<0.01),使APD_(90)由(587±60)ms缩短至(418±79)ms(P<0.05)。Est浓度依赖性地抑制I_K尾电流(I_K·tail),10μmol·L~(-1)浓度下,I_K·tail减少53％(P<0.05),100μmol·L~(-1)浓度下,I_K·tail减少80％(P<0.05)。10μmol·L~(-1)以上浓度Est明显抑制I_(K1),在-100mV刺激电压下,内向电流最大抑制为49％(P<0.01);在-40mV刺激电压下,外向电流最大抑制为72％(P<0.01)。同时,Est使I_(K1)翻转电位向负电位方向移位(由-70mV变为-76mV)。结论:Est对豚鼠心室肌细胞I_(K1)和I_K通道具有明显的抑制作用。     

N-甲基小檗胺对大鼠肠系膜动脉平滑肌细胞钙激活钾电流的作用

目的研究N-甲基小檗胺对大鼠肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙激活钾电流(IK·Ca)的作用,以阐明其降血压的离子机制。方法膜片钳技术全细胞记录模式记录IK·Ca。结果指令电位为+60mV时,N-甲基小檗胺0·1,1,10μmol·L-1使IK·Ca幅值分别由给药前的(33·6±2·0)pA·pF-1增至给药后的(35·7±1·9),(42·9±2·7)和(59·4±1·4)pA·pF-1(n=6,P<0·01)。结论N-甲基小檗胺可以增加大鼠肠系膜阻力血管平滑肌细胞钙激活钾电流,这可能是其降压机制之一。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响

目的研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞L型钙通道的影响,探讨心肌肽素在离子通道水平的药理作用机制。方法用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞,标准的全细胞膜片钳技术记录L型钙电流(ICa-L)。结果心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg.L-1使豚鼠心室肌细胞ICa-L分别增加(5±4)%、(21±5)%、(30±5)%、(55±8)%、(76±11)%、(80±9)%,半最大效应浓度(EC50)为(18±6)mg.L-1。心肌肽素50 mg.L-1使ICa-L激活时间(TTP)从(6.7±0.9)m s缩短为(5.9±0.7)m s(P<0.01);使ICa-L电流密度-电压曲线下移,但激活电压、峰电压和I-V曲线的形状不变;激活曲线向负电压方向变化,半数激活电压从(-4.3±0.4)mV减少至(-8.6±0.4)mV(P<0.05);不影响稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。结论心肌肽素浓度依赖性增强豚鼠心室肌细胞ICa-L。     

苄基四氢巴马汀对心室肌动作电位和延迟整流钾电流的频率依赖性作用

目的　研究BTHP对豚鼠乳头状肌动作电位及单个心室肌细胞延迟整流钾电流影响的频率依赖性。方法　用标准微电极方法在不同基础周长 (BCL)时测定动作电位 ;采用全细胞膜片钳技术测定延迟整流钾电流 (IK:IKr、IKs)。结果　 10 0 μmol·L-1BTHP在BCL为 :2 0 0 0、2 5 0ms时 ,使APD2 0 分别延长 11 35 %和 2 5 5 5 % ;使APD90 分别延长15 97%和 32 5 6 %。 30 μmol·L-1BTHP在刺激频率为 :0 2 5和 2 0Hz时分别使Ikr,tial从 (0 94± 0 .44 ) pA·pF-1和(0 92± 0 31) pA·pF-1降至 (0 6 0± 0 32 ) pA·pF-1和 (0 43± 0 18)pA·pF-1。在刺激频率为 :0 1和 2 0Hz时分别使Iks,tial从 (4 2 2± 0 5 6 ) pA·pF-1和 (5 14± 0 2 8)降至 (2 5 8±0 41)pA·pF-1和 (2 6 2± 0 37)pA·pF-1。结论　BTHP可频率依赖性地阻滞IKr、IKs,其延长动作电位也呈频率依赖性     

碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心室肌细胞L型钙通道的阻断作用

目的研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心室肌细胞L-型钙通道(ICa)的影响。方法采用酶急性分离的单个大鼠心室肌细胞,应用膜片钳全细胞记录技术,观察F2对ICa的影响。结果F20.1,1,10×10-6mol.L-1可剂量依赖地抑制ICa,抑制率分别为40%,72%,84%,IC50为1.19×10-6mol.L-1。F2上移ICa的I-V曲线,但不改变ICa的最大锋电位和翻转电位;F2对ICa稳态激活曲线无明显改变;F2可使得ICa稳态失活曲线左移;延长ICa失活恢复时间。结论F2对心肌细胞ICa具有阻断作用。     

17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的抑制作用

目的观察17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞L型钙电流的影响及其与雌激素受体(estrogen receptor,ER)的关系。方法酶机械法分离豚鼠单个心室肌细胞;膜片钳全细胞模式观察17β-雌二醇对单个心室肌细胞L型钙电流(ICa-L)的影响,并通过加入雌激素受体阻断剂tamoxifen(TAM)研究该作用与雌激素受体的关系。结果 17β-雌二醇(10-9～10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1分别减少至(-2.4±0.3)pA.pF-1、(-1.9±0.3)pA.pF-1和(-1.1±0.3)pA.pF-1(与对照组比较,均为P<0.01,n=5)。TAM(10-7 mol.L-1)预处理后,17β-雌二醇(10-7mol.L-1)使ICa-L峰电流密度值从(-3.5±0.6)pA.pF-1减少到(-1.0±0.2)pA.pF-1(与对照组比较,P<0.01,n=5),与未应用TAM(10-7 mol.L-1)预处理时比较,ICa-L峰电流密度值无变化(P>0.05,n=5)。结论 17β-雌二醇抑制豚鼠心室肌细胞ICa-L的作用呈浓度依赖性,雌激素受体阻断剂TAM不能阻断17β-雌二醇对豚鼠心室肌细胞ICa-L的抑制作用,提示17β-雌二醇对ICa-L的抑制作用可能与ER作用无关。     

芍药苷对大鼠心肌细胞L钙通道的阻断作用

目的　在单个大鼠心肌细胞上 ,研究芍药苷对L型钙通道的阻断作用。方法　采用全细胞膜片钳技术。结果　芍药苷浓度依赖性阻断ICa ,L,其IC50 为 387μmol·L- 1 。应用 40 0 μmol·L- 1 芍药苷后 ,ICa,L最大电流幅度下降 51 % ,但I U曲线的形态和反转电位没有变化 ,激活曲线也没有明显的改变 ;失活曲线向较负电压的方向偏移约 8 3mV ,通道从失活中恢复的时间明显延长 ,由给药前的 (96± 1 7)ms增至 (1 85± 2 8)ms ;芍药苷的阻断作用没有显示出频率依赖性。结论　芍药苷对心肌细胞ICa ,L有阻断作用     

牛磺酸镁对缺氧/复氧致大鼠心肌细胞内向整流钾通道异常的影响

目的观察牛磺酸镁配合物(taurine magnesium coordi-nation compound,TMCC)对缺氧/复氧损伤所致大鼠心肌细胞异常内向整流钾通道电流(Ik1)的影响。方法采用Lan-gendorff逆行主动脉灌流酶溶液消化法急性分离大鼠单个心肌细胞,在电压钳模式下,应用全细胞膜片钳技术记录不同浓度TMCC对正常细胞和不同浓度TMCC及胺碘酮对缺氧/复氧模型细胞内向整流钾通道电流Ik1的变化。结果不同浓度TMCC对正常大鼠心肌细胞的Ik1无明显性影响。缺氧/复氧能使Ik1内向电流峰值从(-13.05±1.43)pA.pF-1降至(-6.94±0.59)pA.pF-1(n=6,P<0.01),内向电流曲线上移。与缺氧/复氧组相比,TMCC(100、200、400μmol.L-1)可使减小的内向电流峰值分别恢复为(-7.21±0.79)pA.pF-1、(-7.28±0.22)pA.pF-1、(-10.96±0.78)pA.pF-1(n=6,P<0.01),24.24μmol.L-1胺碘酮使其恢复为(-8.80±0.97)pA.pF-1。TMCC(100、200、400μmol.L-1)和胺碘酮均可使上移的内向电流曲线下移。缺氧/复氧使大鼠心肌细胞Ik1外向电流峰值从(2.43±0.32)pA.pF-1降至(1.31±0.28)pA.pF-1,I-V曲线下移。与缺氧/复氧组相比,TMCC(100、200、400μmol.L-1)可使减小的外向电流分别恢复为(0.90±0.14)pA.pF-1、(1.84±0.46)pA.pF-1、(2.36±0.40)pA.pF-1、24.24μmol.L-1胺碘酮使其恢复为(2.16±0.69)pA.pF-1。TMCC(100、200、400μmol.L-1)和胺碘酮均可使下移的外向电流曲线上移。结论 TMCC对正常心肌细胞Ik1无影响,但能恢复缺氧/复氧减小的Ik1内向电流和外向电流峰值。提示TMCC对Ik1的作用可能是其发挥抗心律失常的机制之一。     

川芎嗪对大鼠背根神经节细胞P2X嘌呤受体介导反应的作用

目的探讨川芎嗪(tetram ethy1pyrazine,TMP)对嘌呤2X(P2X)受体介导反应的作用。方法在大鼠新鲜分离的背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)神经元标本上应用全细胞膜片钳技术记录川芎嗪对P2X受体激动剂激活电流的影响。结果外加ATP(1~1 000μmol.L-1)可引起DRG神经元产生激活电流(n=102),ATP-激活电流(IATP)显示快失敏和慢失敏两种形式的内向电流。预加川芎嗪(0.1~10mmol.L-1)后,大部分(89.2%,91/102)受检细胞可观察到ATP(100μmol.L-1)-激活电流出现明显的抑制作用。川芎嗪(1 mmol.L-1)使α,-βm eATP(10μmol.L-1)-激活电流减小。预加川芎嗪(1 mmol.L-1)后ATP(1~1 000μmol.L-1)激活电流的剂量-效应曲线明显下移。预加川芎嗪(1 mmol.L-1)前后ATP(100μmol.L-1)的I-V曲线反转电位值不变,均接近0 mV。川芎嗪(1 mmol.L-1)可明显抑制被前列腺素E2(100μmol.L-1)或P物质(0.1μmol.L-1)增大的ATP激活电流。通过微电极胞内透析注入PKA抑制剂H89(10μmol.L-1)至胞内,使川芎嗪(1 mmol.L-1)抑制ATP(100μmol.L-1)激活电流的作用减小。结论川芎嗪可能是通过PKA系统以及P2X受体离子通道复合体细胞外环的变构调制点影响P2X受体激动剂在大鼠DRG神经元的激活电流。