罗格列酮对高尿酸性肾病大鼠肾形态和肾功能的影响

随着生活水平的提高,高尿酸血症的发病率明显增加[1],与之密切相关的痛风性肾病的发病率也明显增加[2].降低血尿酸水平可明显缓解肾脏疾病的发展和转归[3].罗格列酮是一种过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂,不但降低血糖水平,而且可降低代谢综合征患者血尿酸水平[2].25周龄OLETF大鼠是目前国际公认的自发2型糖尿病伴代谢综合征动物模型.我们选择25周龄OLETF大鼠为实验对象,观察罗格列酮干预能否改善痛风性肾病大鼠肾形态和功能,并对其机制进行初步探讨.     

罗格列酮对高尿酸性肾病大鼠肾形态和肾功能的影响

随着生活水平的提高,高尿酸血症的发病率明显增加[1],与之密切相关的痛风性肾病的发病率也明显增加[2].降低血尿酸水平可明显缓解肾脏疾病的发展和转归[3].罗格列酮是一种过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)激动剂,不但降低血糖水平,而且可降低代谢综合征患者血尿酸水平[2].25周龄OLETF大鼠是目前国际公认的自发2型糖尿病伴代谢综合征动物模型.我们选择25周龄OLETF大鼠为实验对象,观察罗格列酮干预能否改善痛风性肾病大鼠肾形态和功能,并对其机制进行初步探讨.     

罗格列酮对慢性环孢素肾病大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的 探讨罗格列酮(RGZ)对环孢素A(CsA)所致慢性环孢素肾病(CCN)大鼠肾间质纤维化的保护作用.方法 28只健康雄性SD大鼠被随机分成4组:(1)对照组(n=6):低盐饮食(LSD); (2)RGZ组(n=6):LSD+RGZ(5 mg·kg-1·d-1);(3)CsA组(n=8):LSD+CsA(15 mg·kg-1·d-1),(4)RGZ+CsA组(n=8):LSD +CsA(15 mg·kg-1·d-1)+RGZ(5 mg·kg-1 ·d-1).实时荧光定量PCR观察骨调素(OPN)及RANTES表达量;RT-PCR法检测MMP-9和TIMP-1的表达量;常规染色观察肾脏病理改变.结果 RGZ可改善CsA所致大鼠肌酐清除率的降低[(0.253±0.027)比(0.133±0.018) ml/min,P＜0.05];降低CCN大鼠肾间质单个核细胞浸润[(22.50±2.71)比(30.38±3.11),P＜0.05];减轻肾间质纤维化程度[(1.707±0.019)比(2.335±0.022),P＜0.05].与CsA组比较,RGZ+CsA组大鼠肾组织中OPN和RANTES mRNA表达量和MMP-9、TIMP-1 mRNA表达量降低(均P＜0.05).结论 RGZ可能通过下调趋化因子OPN、RANTES及MMP-9、TIMP-1的表达,改善CCN大鼠肾间质纤维化.     

罗格列酮对糖尿病肾病大鼠足细胞nephrin和podocin表达的影响

本研究采用糖尿病肾病（DN）大鼠模型，通过观察肾组织足细胞超微结构及其相关分子表达的变化，以及罗格列酮对其的影响，进一步揭示足细胞相关分子在实验性DN发病中的作用及脂质过氧化物增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂治疗DN的分子机制．为DN的预防和治疗提供理论依据。     

罗格列酮对高血压大鼠肾间质纤维化的影响及其机制

目的探讨罗格列酮改善高血压肾间质纤维化（RIF）的机制。方法高血压大鼠随机分为阳性对照组（2K1C组）和罗格列酮治疗组（RGL组）,另设假手术组（SHAM组）,比较三组大鼠的尾动脉收缩压（SBP）、尿β-微球蛋白（β2-MG）、血肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、肾组织纤维化半定量评分以及BMP7、CTGF的表达及肾脏病理改变。结果①治疗前,2K1C组及RGL组的SBP与尿β2-MG均较SHAM组明显增加。自第4周起,RGL组SBP和尿β2-MG较2K1C组也明显降低。②2K1C组及RGL组RIF程度较SHAM组明显加重,RGL组较2K1C组减轻。③与SHAM组比较,2K1C组及RGL组BMP-7表达减少,CTGF的表达显著增加。④RGL组较2K1C组BMP7表达升高,CTGF的表达减少。⑤BMP-7及CTGF与RIF程度分别呈负相关和正相关。结论罗格列酮可能通过上调高血压大鼠肾问质BMP-7的表达、下调CTGF的表达,发挥对肾脏的保护作用。     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾保护机制的研究

目的探讨罗格列酮对糖尿病肾损害的保护作用机制。方法单次腹腔注射50mg/kg链脲佐菌素制备糖尿病大鼠模型,糖尿病大鼠随机分成糖尿病组、罗格列酮治疗组(5mg·kg-1·d-1),和正常对照组。用免疫组化、RT-PCR及Western印迹的方法检测8周后过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ、TGF-β1表达的改变。结果与正常对照组相比,糖尿病组及治疗组PPARγ及TGF-β1表达增加(P<0.05);而治疗组PPARγ及TGF-β1表达显著低于糖尿病组(P<0.05)。结论罗格列酮可通过活化PPARγ,下调TGF-β1,显著减少糖尿病大鼠尿蛋白,从而延缓肾脏损伤。     

罗格列酮对阿霉素肾病大鼠肾脏保护作用的研究

目的探讨过氧化物酶体增殖激活受体-γ激动剂-罗格列酮（RSG）对阿霉素（ADR）肾病大鼠肾脏的保护作用。方法通过一次性静脉注射盐酸阿霉素6mg／kg,制备肾病综合征模型大鼠。30只SD雄性大鼠随机分为正常组、模型组和罗格列酮治疗组（治疗组）。实验周期4周。免疫组化方法检测肾皮质过氧化物酶体增殖激活受体-γ（PPARγ）、转化生长因子（TCF-β1）的表达;检测血清生化指标及24h尿蛋白定量。结果模型组出现高脂血症、低蛋白血症及大量蛋白尿;治疗组血清总蛋白（TP）、白蛋白（Alb）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）及24h尿蛋白水平与模型组相比,差异有统计学意义;肾组织病理损害明显减轻,PPARγ表达上调,TGF-β1表达下调。结论RSG对ADR肾病大鼠的肾脏有保护作用,其机制可能是通过上调PPARγ,下调TGF-β1发挥作用。     

罗格列酮对肾大部切除大鼠残肾细胞外基质的影响及其机制

目的：观察罗格列酮对肾大部切除大鼠残肾的细胞外基质（ECM）的影响并探讨其可能的机制。方法：将大鼠随机分为4组，每组8只：假手术组（SHAM组）、肾大部切除组（NX组）、肾大部切除加小剂量罗格列酮治疗组（XL组，罗格列酮5mg.kg^-1·d^-1）和肾大部切除加大剂量罗格列酮治疗组（DL组，罗格列酮15mg·kg^-1·d^-1）。8周后观察大鼠尿蛋白、血BUN、Scr和肾脏病理改变，用免疫组化检测基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在肾组织中的表达。用天狼星红染色半定量法检测肾脏胶原纤维含量。用RT～PCR的方法测定肾组织中纤连蛋白（FN）的表达。结果：（1）罗格列酮能降低大鼠24h尿蛋白定量、血BUN、Scr，与NX组比较有统计学差异（P〈0.01，P〈0．05）。（2）NX组可见肾小球硬化，ECM增生，肾组织大量胶原纤维沉积。用药后病变减轻，其中大剂量罗格列酮组肾小球MMP-2明显增多；肾小管、间质MMP-9明显减少；肾小球囊壁、肾小球基底膜及肾小管基底膜、血管周围胶原纤维沉积减少。（3）与SHAM组相比，NX组残肾组织FN mRNA的表达均明显升高（P〈0.05），XL组FN mRNA的表达较NX组有所降低，以大剂量XL组为明显（P〈0．01）。结论：罗格列酮可剂量依赖性地降低尿蛋白，改善肾功能肾脏病理损害；减少肾脏胶原纤维沉积和FN的表达；这可能与罗格列酮能抑制肾组织MMP-9表达和上调MMP-2表达有关。     

罗格列酮对雌性大鼠骨代谢的影响

目的观察马来酸罗格列酮对雌性大鼠骨代谢的影响。方法 3月龄雌性Wistar大鼠40只随机分为4组,正常对照组(NC组)、低剂量(3mg.kg-1.d-1)罗格列酮组(Ros-1组)、中剂量(10mg.kg-1.d-1)罗格列酮组(Ros-2组)和高剂量(30 mg.kg-1.d-1)罗格列酮组(Ros-3组)。每日定时按照每公斤体重6ml灌胃,NC组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液灌胃作为对照,干预12周。处死后,测定右侧股骨骨密度、血清骨代谢标记物和相关激素及细胞因子水平。结果 Ros-3组的股骨骨密度较其他三组显著降低,反映骨形成的血清骨钙素水平在Ros-2及Ros-3组显著降低,而其他骨代谢标记物无显著变化。各组的雌二醇、睾酮、瘦素水平无差异。Ros-3组IGF-1水平降低。各组炎症因子的水平无有意义的变化。结论较大剂量的罗格列酮能减少正常雌性大鼠的骨形成,降低骨密度,对循环中雌二醇、睾酮及多数细胞因子无显著性影响。     

高尿酸血症和高尿酸性肾病的治疗进展

尿酸是人类嘌呤代谢的终末产物,由次黄嘌呤、黄嘌呤在黄嘌呤氧化酶的作用下生成.由于灵长类缺乏尿酸氧化酶,不能将其分解成可溶性的尿囊素,因此极易形成高尿酸血症.在正常嘌呤饮食情况下,非同日2次空腹血清尿酸水平男性和绝经期女性〉420μmol/L,绝经前女性〉360μmol/L,称之为高尿酸血症.由于高尿酸血症造成的肾脏损伤称为高尿酸性肾病.     

烟碱预先给药对心肌缺血再灌注大鼠心功能的影响

目的 评价烟碱预先给药对心肌缺血再灌注大鼠心功能的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠60只,体重200 ～ 250 g,采用随机数字表法,将其分为3组(n=20)∶假手术组(S组)、心肌缺血再灌注组(IR组)和烟碱预先给药组(N组).S组丝线穿过冠状动脉前降支但不结扎;IR组采用丝线结扎左冠状动脉前降支30 min后再灌注120 min的方法制备大鼠心肌缺血再灌注模型.N组结扎前30 min,经右颈静脉注射烟碱400μg/kg,余操作同IR组,S组和IR组右颈静脉注射等量生理盐水.各组随机取10只大鼠于缺血前(T0)、缺血30 min(T1)和再灌注30 min(T2)、120 min(T3)时经生物机能实验系统记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张压(LVDP)、左室内压上升/下降最大变化速率(±dp/dtmax)、HR和MAP.各组其余10只大鼠于再灌注60 min时采集右颈动脉血样,采用ELISA法测定血浆肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和TNF-α浓度.结果 与S组比较,IR组T23时MAP和LVSP、T13时HR、LVDP和±dp/dtmax降低,血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度升高,N组T1-2时LVDP、T1-3时HR和±dp/dtmax降低,血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度升高(P＜0.05);与IR组比较,N组T3时MAP、HR、LVSP、LVDP和±dp/dtmax升高,血浆CK-MB活性、cTnI和TNF-α浓度降低(P＜0.05).结论 烟碱预先给药通过激活胆碱能抗炎通路,抑制炎性反应,可显著减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤,从而改善心功能.     

帕瑞昔布钠对急性心肌梗死大鼠心功能的影响

目的 评价帕瑞昔布钠对急性心肌梗死大鼠心功能的影响.方法 成年雄性SD大鼠24只,体重230～250 g,随机分为3组(n=8):假手术组(S组)、急性心肌梗死组(AMI组)和帕瑞昔布钠组(P组).AMI组和P组采用结扎左冠状动脉前降支的方法制备大鼠急性心肌梗死模型,S组冠状动脉穿线但不结扎;24 h后P组腹腔注射帕瑞昔布钠8 mg/kg,1次/d,连续3 d,AMI组用生理盐水替代.术后第4天测定并记录左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室收缩压最大上升速率(+dp/dtmax)和左心室收缩压最大下降速率(-dp/dtmax);采集颈总动脉血样3 ml,采用放射免疫法测定血浆血栓素A2(TXA2)和前列腺素I2(PGI2)的浓度,并计算PGI2/TXA2;采血后取左心室心肌组织,测定梗死面积,计算心肌梗死体积.结果 与S组比较,AMI组和P组LVSP、±dp/dtmax、血浆PGI2浓度和PGI2/TXA2降低,LVEDP和血浆TXA2浓度升高(P＜0.05).与AMI组比较,P组LVSP、±dp/dtmax、血浆PGI2浓度和PGI2/TXA2升高,LVEDP和血浆TXA2浓度降低(P＜0.05).AMI组和P组心肌梗死体积比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 帕瑞昔布钠可改善急性心肌梗死大鼠左心室功能,其机制与调节PGI2/TXA2相对平衡有关.     

Glomerular function and morphology in puromycin aminonucleoside nephropathy in rats.

BACKGROUND: The most characteristic manifestation of minimal-change nephropathy is podocyte cell process broadening. In a previous study in children from our unit, we found an inverse correlation between foot process width, glomerular filtration rate (GFR), and filtration fraction. The aim of the present study was to determine whether this relationship also existed in the puromycin aminonucleoside (PAN) experimental model. METHODS: Sixteen Munich-Wistar-Fr?mter male rats initially weighing median 247 g (range 171-286) were used. Four rats served as controls. The other 12 rats were divided into three groups receiving daily subcutaneous injections of 1, 1.67, and 2.5 mg PAN/100 g body weight respectively, for 6 days. GFR was determined by clearance of inulin and the fractional urine albumin excretion was measured. Standard stereological methods were used to estimate the glomerular volume, the mean foot process width and the length density of slit pores. RESULTS: GFR decreased with increasing PAN doses. The glomerular volume was increased in the group receiving the lowest PAN dose, while it was decreased in the group with the highest PAN dose, compared with controls. The fractional albumin excretion and the foot process width increased and the total slit pore length decreased with increasing doses of PAN. GFR correlated directly with the glomerular volume as did the foot process width with the fractional albumin excretion. The foot process width correlated inversely with the glomerular volume as did the glomerular volume with the fractional albumin excretion, and GFR with foot process width. CONCLUSIONS: The decreased GFR found in the nephrotic rats was inversely related to foot process width and directly related to glomerular volume, confirming our previous results in children in an early stage of the nephrotic syndrome.     

由胚胎干细胞分化的心肌细胞移植对心肌梗死大鼠左心室重构及心功能的影响

目的探讨小鼠胚胎干细胞（ES）分化的心肌细胞移植对SD大鼠心肌梗死后左心室重构及心功能的影响。方法采用悬滴-悬浮培养法诱导ES分化形成拟胚体。其中包含有大量心肌细胞。将雄性SD大鼠冠状动脉左前降支结扎。制成急性心肌梗死模型。1周后再次开胸。实验组于梗死区域注入心肌细胞悬液150μl（含细胞5×10^5个），梗死对照组于梗死区域注入等体积细胞培养液，另设假手术组，不结扎冠状动脉。心肌梗死后1周和细胞移植后4周，采用超声心动图评价大鼠左心室形态和功能，用免疫荧光技术检测移植细胞的存活及其表型。结果免疫荧光技术检测到分化的心肌细胞表达特异性转录因子α辅肌动蛋白、α肌球蛋白重链和肌钙蛋白1；逆转录聚合酶链反应检测到有心肌特异性转录因子Nkx-2．5、GATA-4及α肌球蛋白重链基因的表达；膜片钳记录显示所得到的分化的心肌细胞包括窦房结样起搏细胞、心房样细胞和心室样细胞。细胞移植后4周。与梗死对照组相比，实验组左心室收缩末期容积和舒张末期容积均显著缩小，左心室前壁舒张末期厚度明显增加（P〈0．01）。左室长轴缩短率显著升高（P〈0．01）。心脏组织冰冻切片可见4,6-联脒-2-苯基吲哚标记的呈蓝色荧光的移植细胞核。移植细胞表达肌钙蛋白I，移植细胞与受者的心肌细胞间有连接蛋白-43的表达。实验组中有2只（12．5％。2／16）出现了心脏畸胎瘤。结论由胚胎干细胞分化的心肌细胞移植可逆转心肌梗死大鼠左心室重构。改善左心室功能。     

血小板源性生长因子A在大鼠移植心脏血管病变及纤维化中的作用

目的 探讨血小板源性生长因子A(PDGF-A)在移植心脏血管病变及心肌纤维化中的作用.方法 选择近交系健康雄性Wistar大鼠及SD大鼠,建立大鼠异位心脏移植模型.实验分为四组,每组8只.正常对照组:取正常Wistar大鼠的心脏作为空白对照.无排斥组:心脏移植的供、受者均为Wistar大鼠,移植后第60天取移植心脏.急性排斥组和慢性排斥组:心脏移植的供者均为Wistar大鼠,受者均为SD大鼠;急性排斥组术后未行免疫抑制治疗,术后第5天取移植心脏;慢性排斥组术后给予环孢素A 10 mg·kg-1·d-1,皮下注射,移植后第60天取移植心脏.采用免疫组织化学染色法检测移植心脏的巨噬细胞浸润(CD68阳性细胞数)情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)分析PDGF-A mRNA的表达水平.结果 正常对照组和无排斥组未见巨噬细胞浸润;急性排斥组巨噬细胞浸润主要见于心肌及冠状血管周围;慢性排斥组巨噬细胞浸润见于心肌及血管周围,在心肌坏死纤维化较严重的区域,巨噬细胞浸润尤为明显;正常对照组、无排斥组、急性排斥组和慢性排斥组移植心组织中PDGF-A mRNA的相对表达量分别为:0.26±0.06、0.31±0.04、0.88±0.12和0.94±0.11,慢性排斥组和急性排斥组中PDGF-A mRNA的相对表达量明显高于正常对照组和无排斥组(P＜0.01).结论 巨噬细胞浸润及血小板源性生长因子表达水平与移植心脏血管病变及心肌纤维化有关.     

异丙酚对急性心肌梗死大鼠心脏功能的影响

目的 观察异丙酚对急性心肌梗死大鼠血液动力学影响的量-效关系以及心肌梗死范围和心肌超微结构的变化。方法 将急性心肌梗死模型的大鼠随机分为5组（n=8）,对照组（Ⅰ）,其余大鼠分别持续静脉输注30（Ⅱ）、45（Ⅲ）、60（Ⅳ）、75（Ⅴ）mg·kg-1·h-1异丙酚30min。测定输注异丙酚30min血药浓度,观察血液动力学、心肌梗死范围和心肌超微结构的变化。结果 血药浓度为（3.4±0.9）～（12.9±2.4）μg/ml时,平均动脉压（MAP）、心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室内压力变化最大速率（±dp/dtmax）、心肌耗氧指数（MOCI）均呈剂量依赖性下降（P<0.05）,左心室舒张末压（LVEDP）无明显变化（P>0.05）,心肌梗死面积为23.7％～29.2％（P>0.05）,心肌超微结构无显著性差异。结论 在血药浓度（3.4±0.9）～（12.9±2.4）μg/ml范围内,异丙酚对血液动力学及心收缩功能呈剂量依赖性抑制,对心肌梗死范围和心肌细胞超微结构无明显影响。     

罗格列酮对实验性慢性环孢素肾病的作用

目的 探讨罗格列酮（RSG）对慢性环孢素肾病（CCN）大鼠模型的肾保护作用。 方法 低盐饮食基础上建立CCN大鼠模型，其中1组模型鼠用RSG同时灌胃。分别在实验开始后第14天和第35天处死动物，检测血浆和肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、AngⅡ1型受体(AT1R)、转化生长因子β1(TGF-β1)、细胞外调节蛋白激酶（p-ERK）、α-SMA和纤连蛋白（FN）的表达。在体外用不同浓度的CsA和RSG孵育NRK细胞。RT-PCR检测肾皮质TGF-β1，Western印迹分析检测FN、AT1R、p-ERK水平。 结果 RSG可改善环孢素A导致的大鼠肌酐清除率的下降[（0.586±0.094）比(1.072±0.105)ml&#8226;min^-1&#8226;kg^-1，P < 0.01]、血浆和肾组织AngⅡ水平增加（P < 0.01）、肾间质单核细胞浸润（P < 0.01）、肾间质纤维化（1.707±0.019 比 2.335±0.022，P < 0.01）、肾组织α-SMA表达增加（P < 0.01）、肾皮质TGF-β1 mRNA水平增加（P < 0.01）、NRK细胞FN、AT1R和p-ERK蛋白水平增加（P < 0.05）。 结论 RSG可能通过减轻炎细胞浸润、影响AngⅡ作用和下调TGF-β1等途径减轻CsA所致的肾组织损伤。