组织蛋白酶B在脑胶质瘤中表达研究

目的：探讨组织蛋白酶B（cathepsin B,catB）在脑胶质瘤中表达,为判断胶质瘤良恶性程度以对胶质瘤诊断、治疗及预后提供新思路、新方法。方法：2003年1月-2007年7月在我院神经外科住院的60例经手术病理检查证实的胶质瘤标本;另选颅脑损伤内减压手术切除的10例脑组织标本作为正常对照。采用免疫组织化学方法检测60例胶质瘤组织与10例正常脑组织中组织蛋白酶B表达情况,收集各病例的临床病理资料,用统计学软件SPPS10．0对实验结果进行分析。结果：60例胶质瘤组织中有49例CatB表达,阳性表达率为81．7％（P〈0．05）。CatB的表达与患者的年龄、性别和肿瘤部位、大小、形状无关（P〉0．05）。结论：CatB胶质瘤中表达水平明显高于正常对照组,说明CatB与胶质瘤的发病相关。     

组织蛋白酶B对肿瘤血管生成的诱导作用

肿瘤的发展与其侵袭程度密切相关。人体内参与肿瘤侵袭的蛋白酶主要有：基质金属蛋白酶、丝氨酸蛋白酶及组织蛋白酶（Cat）。组织蛋白酶是人体内的一类蛋白质水解酶,根据其催化中心的不同分又为半胱氨酸组织蛋白酶、天门冬氨酸组织蛋白酶、丝氨酸蛋白酶。其中半胱氨酸组织蛋白酶包括有木瓜蛋白酶家族和钙离子激活蛋白酶家族。木瓜蛋白酶家族主要存在于溶酶体内,故又称为溶酶体组织蛋白,包括CatB、D、H、S、L。     

Girdin 与VEGF在胶质瘤中的表达及其与血管生成的关系

目的：研究胶质瘤中Girdin与血管内皮细胞生长因子（VEGF）的表达及二者与胶质瘤血管生成的关系,探讨Girdin与VEGF在胶质瘤血管生成中的作用。方法：应用免疫组化Envision法分别检测Girdin和VEGF在正常脑组织和不同级别胶质瘤组织中的表达;同时应用CD34抗体标记胶质瘤血管内皮细胞,计数肿瘤微血管密度（MVD）,并分析Girdin、VEGF及MVD三者之间的关系。结果：Girdin和VEGF在正常脑组织中均不表达,在胶质瘤中的表达均高于正常脑组织;随着胶质瘤WHO分级的升高,两者表达均呈升高趋势(P＜0.05）。随着胶质瘤分级的升高,MVD计数呈上升趋势。高、低级别胶质瘤之间的MVD计数比较,差异有统计学意义(P＜0.05）。胶质瘤中Girdin表达与MVD呈正相关（P＜0.01）,VEGF表达与MVD呈正相关（P＜0.01）,Girdin表达与VEGF表达亦呈正相关（P＜0.01）。Girdin表达与胶质瘤KPS评分、切除范围和胶质瘤分级相关（P＜0.05）,与年龄、性别无相关性。结论：胶质瘤中Girdin和VEGF高表达,两者表达与胶质瘤血管生成之间均有相关性,且Girdin与VEGF表达正相关,提示Girdin与VEGF在胶质瘤的血管生成过程中,促进胶质瘤新生血管的形成,引起胶质瘤细胞增殖、浸润、侵袭及转移,促进胶质瘤的发生发展。Girdin表达与胶质瘤的生物学行为相关,可成为胶质瘤预后的预测因子。     

人脑胶质瘤中Ets-1表达与肿瘤血管生成、癌细胞增殖浸润的关系

目的:研究胶质瘤组织中原癌基因蛋白Ets-1、微血管密度(MVD)和细胞增殖核抗原(k-i 67)的表达及其关系,探讨Ets-1在胶质瘤发生、发展、侵袭转移中的作用及临床意义。方法:采用免疫组化双染法和SP法检测Ets-1表达及MVD和K-i67在63例胶质瘤(实验组)和10例正常脑组织(对照组)中的表达,并进行相关性分析。结果:实验组中Ets-1表达阳性率为38.1%,高于对照组(χ2=5.204,P<0.05),Ⅲ～Ⅳ级组织中的Ets-1表达随临床分级(R=0.59,P<0.001)的增高而呈增高趋势。实验组MVD计数(33.7±20.4)明显高于对照组(5.6±3.9)(F=18.31,P<0.001),MVD值随Ets-1表达的增强而增高(P<0.001)。实验组中K-i67表达率为61.9%,与对照组比有统计学意义(χ2=13.29,P<0.001)。K-i67表达随Ets-1表达增强而增高(R=0.46,P<0.001)。结论:Ets-1、MVD、k-i67可作为胶质瘤恶性程度,浸润转移等生物学行为的重要参考指标。     

ADAMTS4、5蛋白酶在人脑胶质瘤中表达及与其恶性程度的关系

目的 研究人脑胶质瘤中含血小板结合蛋白基序的解聚素金属4(ADAMTS4)蛋白酶和ADAMTS5蛋白酶的表达及其与胶质瘤病理分级之间的关系.方法 采用免疫组化Envision二步法检测ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在44例不同级别脑胶质瘤、11例瘤周脑组织中的表达,计算阳性细胞百分率,并通过Image Pro Plusversion 6.0(IPP)图像分析软件测量计算其平均光密度(MOD)值.结果 ① ADAMTS4和ADAMTS5蛋白酶在瘤周脑组织中不表达或极低表达,而在胶质瘤组织中高表达,为棕黄色,主要表达定位于细胞外基质及细胞质中,两组差异有统计学意义(P<0.05).进一步研究显示,其蛋白表达量随着肿瘤级别的升高而升高,WHO分级中低级别、高级别间差异有统计学意义(P<0.05).② ADAMTS4与ADAMTS5蛋白酶在胶质瘤中表达呈正相关性(x2=5.614,r=0.357,P<0.05).结论 ① ADAMTS4、ADAMTS5蛋白表达量随着胶质瘤级别的升高而升高,提示了ADAMTS4及ADAMTS5蛋白酶在胶质瘤的进展、侵袭中发挥着重要作用.② ADAMTS4与ADAMTS5蛋白表达呈正相关性,揭示了在胶质瘤的发生发展中这两种蛋白酶可能互相协同,两者的过表达共同促进了胶质瘤的侵袭.     

慢性肾炎患者肾组织蛋白酶B的表达与尿蛋白的关系

目的 探讨慢性肾炎患者肾组织蛋白酶B(cathepsin B,CB)的表达及其与尿蛋白的关系.方法 对肾活检组织病理切片进行形态计量,对病变肾小管肾间质进行半定量积分,分为轻度损害组、中度损害组和重度损害组.采用免疫组织化学SP法和计算机图像分析系统检测肾组织CB的表达情况,并检测24h尿蛋白和NAG酶(N-乙酰-β-D氨基葡萄糖苷酶).结果 CB在近曲小管表达最高,在其他部位表达较少.中度损害组和重度损害组CB的表达明显低于轻度损害组(P＜0.01).24h尿蛋白定量和NAG随肾小管损害程度加重逐渐升高,3组相比差异有统计学意义(P＜0.05).CB表达与肾小管肾间质损害积分、24h尿蛋白量和NAG呈显著负相关(r分别为-0.89、-0.23和-0.75,P均＜0.01).结论 CB主要在肾近曲小管表达,可能参与了肾小管中尿蛋白的降解.其表达减少,将导致肾小管上皮细胞中蛋白的堆积,加重肾小管间质的损害.     

基质金属蛋白酶-2及其组织抑制因子表达失衡与卵巢上皮性肿瘤血管生成的关系

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物-2(TIMP-2)在卵巢上皮性肿瘤血管生成中的作用及临床意义。方法应用免疫组化SABC法检测20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、20例卵巢交界性上皮性肿瘤组织、50例卵巢上皮性癌组织中MMP-2及TIMP-2的表达及微血管密度(MVD)。结果MMP-2阳性表达组的MVD值明显高于阴性表达组的MVD值(P=0.000),卵巢肿瘤组织中MMP-2的表达水平与TIMP-2的表达呈负相关。结论MMP-2和TIMP-2表达失衡可能在卵巢上皮性肿瘤血管生成中起重要作用,检测MMP-2和TIMP-2的表达可作为反映卵巢癌侵袭和转移潜能的生物学指标。     

大肠癌组织蛋白酶B和FasL表达临床意义的研究

目的探讨组织蛋白酶B（CatB）和FasL在大肠癌组织中表达及其对患者预后的影响。方法采用免疫组化方法，检测78例大肠癌原发灶、正常结肠黏膜中CatB、FasL表达。用Kaplan—Meier生存分析对比CatB、FasL表达对患者生存率的影响。结果在大肠癌原发灶、正常肠黏膜中CatB表达阳性率分别为51．3％、26．9％,FasL表达阳性率分别为43．6％、19．2％。大肠癌原发灶中CatB、FasL阳性率高于正常肠黏膜组织。Dukes’c期CatB、FasL表达阳性率高于Dukes A、B期（X^2=11．3267、8．2659，P〈0．01），低分化腺癌和黏液腺癌的CatB、FasL表达阳性率高于高分化和中分化腺癌（X^=-10．1584、7．2096，P〈0．01）。CatB和FasL表达双阳性组患者生存率低于CatB或FasL单一阳性组及两者表达均为阴性组。结论CatB和FasL增强表达与大肠癌的发生、发展有关，检测CatB、FasL表达对判断大肠癌预后有重要意义。     

组织蛋白酶与脑胶质瘤

组织蛋白酶(cathepsin,Cat)是一类溶酶体蛋白酶,近年来发现的与肿瘤增殖、浸润、转移和复发关系较密切.本文就组织蛋白酶的家族成员、理化性质,结构与功能,以及在脑胶质瘤中的表达及转移机制中的研究作简要综述.     

组织蛋白酶B在肿瘤分子靶向治疗中的意义

组织蛋白酶B是半胱氨酸蛋白酶的一种,与肿瘤进展高度相关,其在多种恶性肿瘤中高表达。组织蛋白酶B在肿瘤分子靶向治疗中具有重要意义。本文从组织蛋白酶B生物学特性,内、外源性抑制剂以及基于其特性的前体药化合物等方面最新研究进展进行综述。     

组织蛋白酶B在肝星状细胞HSC-T6中的动态表达和意义

目的观察组织蛋白酶B在肝星状细胞(hepatic stellate cell,HSC-T6)中的表达并探讨其在肝纤维化过程中的意义。方法向HSC-T6细胞中加入组织蛋白酶B抑制剂(Z-FA-FMK),作用12、24、36、48h后,用倒置显微镜分别观察各时间点细胞生长状态的差异并拍照。分别提取Z-FA-FMK作用前后12、24、36、48h的蛋白和RNA,用Western blotting法检测各时间点组织蛋白酶B(cathepsin B)和α-SMA的表达量,用反转录定量PCR(RT-PCR)方法测定各时间点cathepsin B mRNA、TGF-βmRNA和α-SMA mRNA的表达。统计学处理采用配对t检验和Pearson直线相关分析。结果显微镜观察Z-FA-FMK作用后细胞的增殖分化作用减慢。Western blotting结果显示,对照组和抑制剂组中cathepsin B的表达量随时间的延长而增加,抑制剂组cathepsin B的表达量(0.49±0.04)较对照组(0.68±0.09)有所减少,差异具有统计学意义(t=-6.31,P<0.05);α-SMA表达量的变化与cathepsin B的变化平行,抑制剂组α-SMA表达量(0.64±0.03)较对照组(0.79±0.01)有所减少,差异具有统计学意义(t=-6.18,P<0.05)。RT-PCR结果显示抑制剂组cathepsin B mRNA表达量(2.00±0.11)较对照组(2.24±0.47)减少,差异均具有统计学意义(t=-3.41,P<0.05);抑制剂组α-SMA mRNA的表达量(0.40±0.06)较对照组(0.81±0.08)减少,差异具有统计学意义(t=-4.28,P<0.05);抑制剂组TGF-βmRNA的表达量(1.43±0.16)较对照组(1.81±0.21)减少,差异均具有统计学意义(t=6.44,P<0.05)。结论组织蛋白酶B可抑制HSC的增殖和转分化,同时可降低肝纤维化指标如TGF-β和α-SMA的表达量,因此,组织蛋白酶B可作为今后治疗肝纤维化的治疗靶点。     

c-myb在人脑胶质瘤中阳性表达的意义及相关因素分析

目的　探讨 c- myb癌基因在人脑活体胶质瘤中的作用和地位。方法　用免疫组化法检测 6 1例活体胶质瘤标本以及正常和胎儿脑组织中 c- myb癌基因的表达水平 ,并分析其表达与胶质瘤恶性级别和其它临床因素的相关性。结果　 c- myb癌基因在恶性胶质瘤中有高水平表达 ,其表达水平与肿瘤级别和年龄有关 (P<0 .0 5 ) ,与性别、病程无关 (P>0 .0 5 )。 c- m yb的表达水平在 、 级明显高于 级 (P<0 .0 5 ) , 、 级之间无显著性差异 (P>0 .0 5 ) ,在 级毛发细胞型星形细胞胶质瘤表达极低 ,在正常胶质细胞内未见表达 ,在胎儿脑组织内有高水平表达。结论　 c- myb在胶质瘤的发生、发展过程中具有重要意义 ,可作为判断胶质瘤的恶性程度的一项生化指标。     

大肠癌组织蛋白酶B表达及其与肿瘤微血管密度和生物学行为的关系

目的:探讨不同类型大肠癌组织蛋白酶()表达及其与肿瘤微血管密度(BCathepsinB,CBmicrovesseldensity,)和生物学行为的关系。MVD方法:采用免疫组化方法对例不同类型大肠癌及进行半定量和定量研究。47CBMVD结果:CB在大肠癌粘液性癌表达高于非粘液性癌,差别具显著性(P<),强阳性组值高于阴性组,二者具有显著差异0.05CBMVD(P<)。大肠癌表达与淋巴结转移关系密切(0.05CBP<)。0.05结论:结果提示,大肠癌表达与值和肿瘤浸润转CBMVD移有关,在粘液性大肠癌浸润转移中作用可能更为重要。CB     

原发性食管癌中胸苷磷酸化酶表达和血管生成的临床意义

目的　观察原发性食管癌中胸苷磷酸化酶 (thymidinephosphorylase,TP)的表达情况 ,探讨肿瘤组织中胸苷磷酸化酶表达、肿瘤微血管密度 (microvesseldensity ,MVD)和临床病理特征之间的关系 ,分析TP表达和肿瘤MVD的预后意义。方法　应用单克隆抗体对 6 5例食管癌标本进行免疫组化染色 ,测定TP表达及MVD。结果　TP在食管癌中的表达 (4 5 / 6 5 ,6 9.2 % )明显 (P <0 .0 0 1)高于正常食管粘膜 (4 / 2 4 ,16 .7% )。食管癌的MVD(4 5 .0 9± 8.76 )与正常食管粘膜的MVD(2 7.4 8± 8.4 4 )的差别显著 (P <0 .0 0 1)。食管癌TP阳性的MVD的均值是 (4 6 .5 3± 7.18) ,TP阴性的MVD的均值是 (4 1.85± 11.0 8) ,前者明显 (P =0 .0 4 6 ) 高于后者。食管癌的TP表达与临床病理特征无相关性 ,MVD却与肿瘤的浸润深度(P =0 .0 35 ) 及分期(P =0 .0 18) 有关 ,而且只有MVD才是食管癌的一个预后指标(P <0 .0 0 1)。结论　食管癌的TP表达与MVD密切相关。TP表达与食管癌的临床病理特征无关。MVD与肿瘤的浸润发展有关 ,同时只有MVD才是食管癌的一个预后指标     

胃腺癌组织KAI1的表达及与血管、淋巴管生成的关系

目的 寻找能预测胃腺癌（gastric adenocarcinoma,GAC）浸润、转移及预后的指标。方法 采用免疫组织化学法检测145例胃腺癌和50例癌旁正常胃黏膜组织抗癌1号(KAI1)、CD34及D2-40的表达。通过CD34的阳性表达计数微血管密度（microvessel density,MVD）,通过D2-40的阳性表达计数淋巴管密度（lymph vessel density,LVD）。分析KAI1、MVD及LVD之间的相互关系,以及它们与胃腺癌浸润、转移及预后的关系。结果 在癌旁正常胃黏膜组织中,KAI1的阳性表达率、MVD和LVD分别为92.0%、 (9.2±7.8)/低倍镜(LP)和 (7.5±7.6)/LP;在GAC组织中,KAI1、MVD和LVD分别为37.2%、 (21.6±9.1)/LP和 (22.6±12.7)/LP,两组之间差异均有统计学意义（P<0.05）。KAI1的表达水平、MVD及LVD的高低与肿瘤细胞的pTNM分期、浸润深度、淋巴结转移与否有关（P<0.05）;KAI1的表达与MVD及LVD呈负相关,MVD与LVD呈正相关（P均<0.05）。Cox回归分析示KAI1的表达、MVD及pTNM分期是影响GAC患者术后生存时间的独立因素。Kaplan-Meier生存分析表明,MVD≥22组和LVD≥23组患者其术后5年生存率低于MVD<22组和LVD<23组的患者（P<0.01）;KAI1表达阳性的患者其术后5年生存率高于阴性患者（P<0.01）。结论 早期联合检测KAI1、CD34及D2-40对GAC的浸润、转移及预后判断有重要意义。     

GAS41在神经胶质瘤中的表达

目的:探讨GAS41在神经胶质瘤中的表达及意义。方法:收集不同等级新鲜胶质瘤标本30例,用免疫组化染色法检测GAS41基因在这些标本中的表达情况。结果:GAS41在人高级别神经胶质瘤(III,IV级)中表达水平明显高于低级别神经胶质瘤(I,II级)(P<0.05)。结论:GAS41在神经胶质瘤中的表达水平随着肿瘤恶性程度的增高而增强,提示GAS41的表达量可以作为高级别神经胶质瘤的一个判断标准。     

BDNF在人脑胶质瘤的表达

目的 探讨脑源性神经营养因子(BDNF) 在人脑胶质瘤内的分布与表达,并探讨它们与肿瘤病理分级的关系及其在肿瘤发生过程中的作用.方法 用免疫组织化学SP染色方法和免疫印迹技术检测了5例正常人脑组织和20例胶质瘤样本中BDNF的分布及表达水平.结果 正常人脑和胶质瘤组织内均有BDNF表达,阳性反应物主要位于胞浆.免疫印迹结果显示,BDNF在胶质瘤中的蛋白水平高于正常脑组织(P<0.05),且随肿瘤病理级别的增加BDNF水平逐渐增高 (P<0.05).结论 胶质瘤内的BDNF表达明显高于其在正常脑组织内的表达, 且随病理级别的增高而增加,提示BDNF在胶质瘤的发生过程中起重要作用,并与胶质瘤的病理分级有密切的关系.     

Ang-2在胃癌组织中表达与胃癌新生血管形成的关系

目的研究Ang-2(angiopoietin-2)在胃癌组织中的表达与胃癌新生血管形成的关系,并探讨其临床意义。方法用Western Blot法检测Ang-2蛋白在10例胃癌组织及10例正常胃组织中的表达;用免疫组化法检测53例胃癌组织中Ang-2蛋白的表达。结果①Ang-2蛋白在正常胃组织中不表达,胃癌组织中呈阳性表达;②Ang-2蛋白在胃癌的不同临床病理分期中表达强度不同,且随病程进展表达呈增强趋势,各组间差异有统计学意义;③胃癌组织中微血管密度(13±2/HP)和新生血管的数量(8±3/HP)明显高于正常胃组织(4±1/HP,阴性)。结论Ang-2参与了胃癌组织新生血管的形成及维持,该蛋白可以作为监测胃癌进展及评价预后的指标之一。     

黏液表皮样癌中TSP-1表达与肿瘤血管生成及其生物学行为的关系研究

目的 探讨黏液表皮样癌中凝血酶敏感蛋白-1(TSP-1)与肿瘤血管生成及其生物学行为之间的关系.方法 采用免疫组织化学SP法检测45例黏液表皮样癌中微血管密度(MVD)值和TSP-1的表达.结果 黏液表皮样癌中TSP-1阳性表达率为57.78%(26/45), 绝大多数表达于肿瘤细胞的胞浆中,少数表达于肿瘤细胞外基质.在45例黏液表皮样癌组织中平均MVD为(60.68±19.84)/100倍视野,具有TSP-1强表达的肿瘤组织中显示MVD值较低, TSP-1的免疫活性与MVD间呈显著负相关(rs=-0.942, P<0.001).结论 TSP-1在黏液表皮样癌中呈较高表达与黏液表皮样癌中的血管生成呈负相关,可能有抑制黏液表皮样癌中血管生长的作用.