经前期综合征肝气郁证大鼠血清对海马神经元5-HT1AR信号转导通路的影响

目的:研究经前期综合征(PMS)肝气郁证大鼠血清对大鼠原代海马神经元的5-羟色胺1A受体(5-HT1AR)信号转导通路相关基因5-羟色胺转运蛋白(SERT)、单胺氧化酶(MAO)-A、MAO-B表达的影响。方法:采用慢性束缚应激法复制PMS肝气郁证大鼠模型;高效液相色谱(HPLC)法检测血清中5-HT的含量;运用RT-PCR半定量和Westernblot法检测正常、模型、经前舒干预大鼠的血清对海马神经元中5-HT1AR、SERT、MAO-A、MAO-B表达的影响。结果:加入模型大鼠血清的大鼠海马原代神经细胞中MAO-A表达较正常大鼠显著升高(P<0.05),5-HT1AR、SERT表达显著降低(P<0.05),MAO-B表达无显著性差异。而加入经前舒干预大鼠血清后,5-HT1AR、SERT、MAO-A表达均趋于正常。结论:PMS肝气郁证的发生与海马神经元中MAO-A、SERT、5-HT1AR表达异常相关,可能是PMS肝气郁证发病的微观机制。     

舒郁胶囊及主要组份对PMS肝气郁证大鼠海马中CACNA1C蛋白表达和功能的影响

<正>CACNA1C基因编码L型钙通道α1C亚基,其基因多态性与多种情感障碍类疾病如精神分裂症和重度抑郁等发生有关[1]。经前期综合征(premenstrual syndrome,PMS)发生的易感神经生物学因子与重度抑郁症相似[2],该基因与PMS的关系如何?尚未见报道。因此,本研究从PMS肝气郁证入手,以舒郁胶囊及主要组份进行药物干预,采用Western blot和全细胞膜片钳技术,探索CACNA1C与PMS肝气郁证的关系和舒郁胶囊的干预机制。     

D2/5-HT2A双重激动剂SOMCL-171对帕金森病运动障碍的治疗作用及机制的研究

目的 L-左旋多巴是目前治疗帕金森病(PD)的最常用药物。但是,长期应用左旋多巴会诱发运动障碍(LID)。最近的研究发现,5-HT1A激动剂可以改善PD动物模型的症状及减缓LID的发生。因此,开发同时激动多巴胺系统和5-HT1A的药物成为PD治疗领域的新方向。化合物SOMCL-171是阿朴吗啡的类似物;初步药理实验表明,该化合物具有D2/5-HT1A双层激动活性。在本项研究中,我们观察了该化合物对PD及LID的治疗作用。方法应用6-OH-DA损毁大鼠单侧前脑内侧束的方法,建立大鼠PD模型;并且,连续给予L-DOPA处理3周,建立LID模型。然后,给予不同剂量的SOMCL-171处理,观察该化合物对PD及LID的治疗作用。结果 SOMCL-171(1～2 mg·kg-1,ip)可以引起大鼠持续稳定的对侧旋转行为;而且可显著减缓LID的进程。上述作用可被5-HT1A受体阻断剂WAY100635阻断。另外,我们还发现,在毁损5-HT1A受体mRNA水平显著下降,而SOMCL-171可以逆转上述变化。结论 SOMCL-171具有改善PD症状和减缓LID进展的双重作用;进而提示,阿朴吗啡的同系化合物在PD药物开发中具有巨大的研究的开发价值。     

柴胡提取物对PMS肝气郁证模型大鼠额叶5-HT_(3A/3B)R分布与蛋白表达的影响

<正>经前期综合征肝气郁证(premenstrual syndrome,PMS)症状表现类似于现代医学中的抑郁样情绪改变,前期研究证明PMS肝气郁证的发生与脑内5-HT系统及其受体密切相关[1],柴胡提取物通过不同分子机制干预PMS肝气郁证的抑郁情绪[2-3]。但是柴胡提取物在5-HT3R水平对PMS肝气郁证经前抑郁情绪的干预机制尚未见报道,因此,本实验选取PMS肝气郁证为动物模型初步探讨柴胡提取物调控抑郁情绪的微观作用机制。     

吗啡对急性心肌缺血期大鼠丘脑束旁核神经元5-HTA受体mRNA表达的影响

目的：观察吗啡对急性心肌缺血期大鼠丘脑束旁核神经元5-HT1A受体mRNA表达的影响,探讨吗啡对急性心肌缺血伤害性刺激的作用及其机制.方法：将体重260g～280 g的健康成年雄性SD大鼠18只,随机分为三组：对照组,即非冠状动脉扎闭组（C组）,开胸后冠状动脉左前降支下穿线,不结扎;扎闭冠脉组（CAO组）,扎闭冠脉6 h;吗啡＋CAO组（MCAO组）,CAO前15 min静脉注射吗啡1.25 mg/kg,然后CAO 6 h.CAO 6 h处死动物,取含有大鼠丘脑束旁核的脑片行原位杂交.5-HT1A受体mRNA杂交结果检测采用IDA-2000数码显微图像分析系统进行半定量分析.结果：与C组比较,CAO组大鼠丘脑束旁核5-HT1A受体mRNA的表达增强（P＜0.05）,与CAO组比较,MCAO组5-HT1A受体mRNA表达降低（P＜0.05）.结论：急性心肌缺血可诱发大鼠丘脑束旁核5-HT1A受体mRNA表达增强,5-HT1A受体参与急性心肌缺血伤害性刺激在丘脑束旁核的调制,吗啡可抑制急性心肌缺血诱发的大鼠丘脑束旁核5-HT1A受体mRNA的表达增强.     

背侧海马CA_1区5-HT_(2A)受体超微分布以及对神经元电活动影响

目的探讨背侧海马CA1(dCA1)区5-HT2A受体的亚细胞定位及与谷氨酸NMDA受体空间关系,观测系统性激活5-HT2A受体对dCA1区主神经元和中间神经元放电频率的影响。方法采用包埋后免疫电镜技术,观测dCA1区神经元内5-HT2A受体和NMDA受体的分布,采用多通道记录技术,记录腹腔注射TCB-2激活5-HT2A受体后主神经元和中间神经元放电频率的变化。结果 5-HT2A受体在海马dCA1区神经元的粗面内质网、线粒体等处广泛分布,并在突触、突触小泡和神经丝等处与NMDA受体共区域表达;激活5-HT2A受体可致dCA1区主神经元的放电频率明显升高,而对中间神经元的放电频率无明显影响。结论 dCA1区5-HT2A受体可能通过与NMDA受体的协同作用,以增加谷氨酸能神经元的兴奋性,从而达到促进学习和记忆的作用。     

吗啡对原代培养大鼠海马神经元CCK受体mRNA表达的影响

目的探讨原代培养大鼠海马神经元上胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)受体CCK-AR及CCK-BR mRNA表达及吗啡对其表达的影响。方法采用新生大鼠海马神经元无血清原代培养技术,用吗啡(100μmol·L-1培养基)孵育3,6,12,18,24,36,48,72h,以及采用不同浓度吗啡(10,100,150μmol·L-1)孵育6、30h后,RT-PCR及测序方法观察CCK-AR及CCK-BR mRNA表达及吗啡对其表达的影响。结果RT-PCR结果显示,CCK-AR和CCK-BR mRNA在原代大鼠海马神经元上均有表达;CCK-AR mRNA RT-PCR扩增产物为218bp,CCK-BR mRNA RT-PCR扩增产物为444bp,经测序证实结果的可靠性;CCK-BR mRNA的表达量明显高于CCK-AR。吗啡作用后可使2种CCK受体mRNA表达上调。吗啡浓度及作用时间的不同对CCK-AR和CCK-BRmRNA表达的影响不同。结论原代大鼠海马神经元上有CCK-AR和CCK-BR,以CCK-BR为主;吗啡可使2种CCK受体mRNA表达上调。     

白香丹含药血清对大鼠海马神经元中5-羟色胺2C受体的表达及其下游信号通路中IP_3的影响

目的观察白香丹胶囊含药血清对原代海马神经元中5-羟色胺2C受体(5-HTR2C)蛋白表达水平及下游信号通路中IP3含量的影响,探讨其可能的中枢作用机制。方法采用情志刺激为主多因素造模法制备经前期综合征(PMS)肝气逆证大鼠模型,给予白香丹干预,制备大鼠含药血清,结合中药血清药理学,对体外培养的新生大鼠原代海马神经元进行不同血清干预,运用Western blot方法检测海马神经元中5-HTR2C蛋白表达水平,运用ELISA法检测各组海马神经细胞内IP3的含量。结果与正常血清组相比,PMS肝气逆模型血清组海马神经元的5-HTR2C蛋白表达水平和下游信号通路中IP3含量均明显升高(P<0.01,P<0.01),白香丹含药血清能够明显降低5-HTR2C蛋白表达水平和IP3的含量(P<0.01,P<0.01)。结论 PMS肝气逆证模型大鼠血清使海马神经元中5-HTR2C蛋白表达异常升高,同时,可引起第二信使IP3含量升高;白香丹胶囊可能通过降低5-HTR2C蛋白表达水平,改变其下游信号通路中IP3的含量而发挥疗效。     

吗啡对急性心肌缺血期大鼠丘脑束旁核神经元5-HT_(1A)受体mRNA表达的影响

目的:观察吗啡对急性心肌缺血期大鼠丘脑束旁核神经元5-HT1A受体mRNA表达的影响,探讨吗啡对急性心肌缺血伤害性刺激的作用及其机制。方法:将体重260g~280g的健康成年雄性SD大鼠18只,随机分为三组:对照组,即非冠状动脉扎闭组(C组),开胸后冠状动脉左前降支下穿线,不结扎;扎闭冠脉组(CAO组),扎闭冠脉6h;吗啡+CAO组(MCAO组),CAO前15min静脉注射吗啡1.25mg/kg,然后CAO6h。CAO6h处死动物,取含有大鼠丘脑束旁核的脑片行原位杂交。5-HT1A受体mRNA杂交结果检测采用IDA-2000数码显微图像分析系统进行半定量分析。结果:与C组比较,CAO组大鼠丘脑束旁核5-HT1A受体mRNA的表达增强(P<0.05),与CAO组比较,MCAO组5-HT1A受体mRNA表达降低(P<0.05)。结论:急性心肌缺血可诱发大鼠丘脑束旁核5-HT1A受体mRNA表达增强,5-HT1A受体参与急性心肌缺血伤害性刺激在丘脑束旁核的调制,吗啡可抑制急性心肌缺血诱发的大鼠丘脑束旁核5-HT1A受体mRNA的表达增强。     

经前舒颗粒对郁怒反应模型大鼠海马脑区基因表达谱的影响

目的在基因水平上探索经前舒颗粒对郁怒反应模型大鼠海马脑区基因表达谱影响的药物作用靶点和机制。方法采用社会隔离和居住入侵方法制备郁怒反应大鼠模型,分别取正常组、郁怒反应模型组和经前舒颗粒用药组大鼠海马脑区进行基因芯片检测和生物信息学分析。用RT-PCR方法对差异表达基因Htr3b和GABABR2进行验证。结果与正常组相比,郁药组/郁模组比较共检出127个差异表达基因,其中郁模组/正常组上调而郁药组/正常组基因下调基因有55个,郁模组/正常组下调而郁药组/正常组基因上调基因有72个,主要有各类激素受体、信号转导蛋白、代谢酶、转运蛋白、细胞因子受体等,涉及神经活化配体-受体交互作用、甘油磷脂代谢和促分裂原活化蛋白激酶等调控路径。差异表达基因Htr3b和GABABR2的RT-PCR验证结果与基因芯片数据表达的趋势一致。结论郁怒情志刺激可导致大鼠海马Htr3b、Fgfr2、Grm8、Gmeb2等较多基因的表达水平改变,经前舒颗粒通过上调或下调这些差异基因表达,进而参与神经活化配体-受体交互作用等调控路径,使郁怒反应模型大鼠行为学异常变化得到一定程度地改善,以上结果为探讨经前舒颗粒的药物作用靶点和机制提供方向和线索。     

染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束体内外抗肿瘤作用

目的 探讨染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束对人肝癌SMMC-7721细胞的体内外抗肿瘤作用。方法 采用MTT法、Annexin V-FITC/PI染法分别考察染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束对人肝癌SMMC-7721细胞的细胞毒性、细胞凋亡、细胞周期的影响;通过荷肝SMMC-7721瘤裸鼠体内抗肿瘤试验,考察染料木素胶束的体内抗肿瘤效应。结果 染料木素胶束对肝癌SMMC-7721细胞的抑制率均高于染料木素,最高抑制率分别可达83.26%,78.25%。流式细胞仪检测结果显示,染料木素胶束组能够提高染料木素对SMMC-7721细胞凋亡的诱导能力,并且呈浓度依赖性。5,10,20 μg·mL^-1的染料木素组和染料木素胶束组药物作用于SMMC-7721细胞48 h时,染料木素胶束能够明显提高染料木素对细胞G₂/M期细胞的阻滞作用,并且呈现浓度依赖性。体内抗肿瘤试验结果表明,相同浓度的染料木素胶束组的抑瘤效果显著强于染料木素乳剂组,呈浓度依赖性,最高抑瘤率可达55.41%。结论 染料木素MePEG-PLGA共聚物胶束在体内和体外均有显著的抗肝癌作用。     

丙泊酚对血红蛋白氧亲和力影响的体外研究

目的:探讨体外丙泊酚对红细胞血红蛋白氧亲和力(OHA)的影响.方法: 取择期手术患者(ASAⅠ-Ⅱ)抗凝全血样本,随机分为5组:丙泊酚4 μg·mL-1组、丙泊酚16 μg·mL-1组、脂肪乳0.4 μL·mL-1组、脂肪乳1.6 μL·mL-1组、空白对照组,在相应药物应用后采用混合法测定各组标本SatO2和PO2,利用Logistic方程拟合血红蛋白氧解离曲线(OHDC),计算血红蛋白氧饱和度为50%时相应的氧分压(P50)和Hill系数,比较各组P50、pH值、Hill系数等参数的差异.结果:与脂肪乳组以及空白对照组相比较,丙泊酚各组的P50、pH值和Hill系数均无显著变化(P>0.05).结论:丙泊酚对离体红细胞血红蛋白的携氧释氧能力无影响.     

姜黄素体内外逆转结肠癌的5-氟尿嘧啶耐药研究及机制探讨

目的 探究姜黄素在体内外对结肠癌5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）耐药的逆转作用及其相关机制。方法 以SW480结肠癌细胞为亲代细胞,构建5-FU耐药细胞株SW480R,采用MTT法检测SW480R细胞的耐药指数以及不同浓度的姜黄素对SW480R细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测姜黄素对SW480R细胞周期和凋亡的影响;Western blotting检测姜黄素对SW480R细胞上皮-间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白以及Wnt信号通路相关蛋白的影响;采用裸鼠移植瘤模型检测肿瘤体积变化情况,计算姜黄素的体内抑瘤率,Western blotting检测肿瘤组织中相关蛋白变化。结果 SW480R的耐药指数为12.16,姜黄素能够剂量依赖性地抑制SW480R细胞的增殖,阻滞SW480R细胞周期于G₀/G₁期,以及诱导SW480R细胞凋亡;Western blotting结果表明姜黄素能够在体内外抑制EMT和Wnt信号通路的活性;体内试验表明姜黄素能够有效抑制裸鼠移植瘤的生长。结论 姜黄素能够在体内外逆转结肠癌的5-FU耐药,可能是通过调控Wnt信号通路从而抑制EMT的发生。     

四嗪二甲酰胺对肺癌细胞株A549的体内外作用

为了观察四嗪二甲酰胺(ZGDHu-1)体外抑制肺癌细胞株A549增殖、诱导细胞凋亡和体内抗肿瘤活性的作用及其机制，将不同浓度的ZGDHu-1与A549细胞在体外培养，用台盼蓝染色、SRB法、5′-溴-2′脱氧尿苷-ELISA法，观察ZGDHu-1对A549细胞增殖的作用；用细胞形态学、DNA凝胶电泳、DNA含量及细胞周期分析、Annexin V/PI双标记、Hoechst 33258荧光染色等技术检测细胞凋亡。腹腔注射ZGDHu-1后观察其对裸鼠移植瘤生长的抑制作用。用RT-PCR和流式细胞术观察A549细胞bcl-2，bax，p53基因和蛋白质的表达改变。结果表明，ZGDHu-1能抑制A549细胞的增殖和活力，呈现作用时间和剂量的依赖关系。A549细胞经ZGDHu-1作用后，大部分细胞阻滞于G₂-M期；出现DNA片段化，亚G₁峰显著增加，Annexin V+/PI-表达升高，Hoechst 33258荧光染色后出现凋亡细胞的特征性改变等。ZGDHu-1以10，20及40 mg·kg^-1剂量给裸鼠体内用药14 d后，移植瘤生长抑制率分别为43.7%，56.9%和60.0%。A549细胞经ZGDHu-1作用后，bcl-2基因和蛋白有所下调，但主要是上调bax基因和蛋白，导致bax/bcl-2比值明显增高，p53基因和蛋白表达也上调，均呈现剂量依赖性。ZGDHu-1在体内能明显抑制移植瘤的生长，体外通过诱导细胞凋亡抑制A549细胞增殖，其机制可能与上调bax和p53基因的表达有关。     

刺五加苷B、苷E在体外大鼠肠道菌群中的代谢

目的：观察体外大鼠肠道菌群对刺五加苷B、苷E的代谢。方法：收集大鼠新鲜粪便在厌氧培养基37℃培养24h,分别加入刺五加苷B、刺五加苷E,培养后加甲醇提取离心,取上清液采用HPLC及UPLC/MS方法对代谢成分进行分离和定性分析。结果：刺五加苷B、苷E在大鼠粪便孵育液中代谢,24h后样本中能检测出较高浓度代谢物。在离体条件下,刺五加苷B、苷E可以被大鼠的肠道菌群代谢,经过UPLC/MS的检测,刺五加苷B代谢物的分子离子峰[M＋H]~＋为193.08,推测为刺五加苷B的苷元再脱一分子水;刺五加苷E代谢物的分子离子峰[M＋H]~＋为417.17,推测为刺五加苷B的苷元。结论：刺五加苷B、苷E可以被大鼠肠道菌群代谢。     

不同粒径聚乙二醇化维生素K1脂质体的制备及体内外评价

目的 制备不同粒径聚乙二醇化维生素K₁（VK₁）脂质体,并对其进行制剂学表征,考察体内药动学和促凝药效。方法 采用薄膜分散法制备不同粒径的VK₁脂质体,采用马尔文粒径仪测定粒径、聚合物分散性指数（PDI）、Zeta电位;透射电子显微镜观察形态;以粒径为指标,考察脂质体在4℃下储存1个月、在磷酸缓冲液（PBS,pH 6.8）及pH 1.2水溶液中48 h的稳定性;采用超滤离心法测定包封率与载药量;采用大鼠在体肠吸收模型考察肠吸收特性;ig给药考察脂质体在大鼠体内药动学行为;以华法林钠诱导大鼠低凝血酶原血症,采用ELISA试剂盒检测血浆中凝血因子II、V、VII和IX含量,检测凝血酶原时间（PT）,评价不同粒径VK₁脂质体（2 mg·kg^-1）促凝效果。结果 制备了3种VK₁脂质体（Lip-180、Lip-120、Lip-60）,粒径分别为（182.40±2.17） nm、（114.38±0.60） nm和（68.42±0.73） nm,PDI分别为0.21±0.01、0.12±0.00和0.17±0.01 ,电位分别为（-27.67±1.58）、（-22.93±1.81）、（-26.63±1.37）mV,脂质体均呈球形,分布均匀,包封率均>90%,载药量均>2.90%,稳定性良好。与Lip-180相比,Lip-120和Lip-60表现出更缓慢的释放性能和更好的跨膜吸收速率。Lip-120及Lip-60的药时曲线下面积（AUC_0-∞）分别是Lip-180的1.52和1.80倍,并且Lip-120与Lip-60的AUC_0-∞分别是维生素K₁注射剂（市售对照）的1.24与1.46倍。与低凝血酶原血症模型大鼠比较,经ig给药Lip-180、Lip-120、Lip-60及维生素K₁注射剂后,PT显著降低（P<0.001）,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ水平均升高,其中,Lip-60作用最显著,除给药后6 h的凝血因子Ⅹ外,均差异显著（P<0.05、0.01、0.001）。结论 聚乙二醇化VK₁脂质体分布均匀,稳定性高,释放缓慢,口服生物利用度高,体内促凝效果较好,优选粒径最小的Lip-60。     

Comparative effects of butylated hydroxyanisole on hepatic in vivo DNA binding and in vitro biotransformation of aflatoxin B1 in the rat and mouse

To determine the mechanisms which mediate species- and treatment-related differences in susceptibility to aflatoxin B1 (AFB), we conducted a comparative study of the effects of dietary butylated hydroxyanisole (BHA) on the hepatic in vivo DNA binding and in vitro biotransformation of AFB in the rat and mouse. Mice are resistant to the hepatocarcinogenic effects of AFB, and BHA pretreatment has been shown to inhibit the carcinogenic effects of AFB in the highly susceptible rat. Rats and mice were fed a control diet or an identical diet containing 0.75% BHA for 10 days. On the 11th day, one-half of the control and BHA animals were administered [3H]AFB (0.25 mg/kg in dimethyl sulfoxide) via intraperitoneal injection. Animals were killed 2 hr later and covalent binding of AFB to hepatic DNA was determined. The remaining animals were killed for preparation of hepatic subcellular fractions used in in vitro assays. BHA treatment resulted in a decrease in in vivo hepatic AFB-DNA adduct formation in mice to 68% of control, but, in rats, treatment decreased AFB-DNA binding to 18% of control. Furthermore, hepatic AFB-DNA binding in control mice was only 1.2% of that measured in control rats. The rate of in vitro activation of AFB to the epoxide was 3.4-fold greater in control mice relative to control rats. BHA pretreatment increased the activation of AFB in mice 3.3-fold, but had no effect on oxidative metabolism in rats. Control mice had 52 times greater glutathione S-transferase (GST) activity toward the AFB-epoxide, but only 2.6 times greater GST activity toward 1-chloro-2,4-dinitrobenzene (CDNB), compared to that of control rats. In mice, BHA did not significantly increase GST activity toward the AFB-epoxide, but increased GST activity toward CDNB 3.1-fold. In rats, BHA increased GST activity toward the AFB-epoxide and CDNB by 3.2- and 2.1-fold, respectively. Epoxide hydrolase activity toward p-nitrostyrene oxide in mice was only 52% of the activity in rats. BHA increased epoxide hydrolase activity 3.8- and 2.5-fold in mice and rats, respectively. These data indicate that mice have high levels of an AFB-epoxide-specific GST activity relative to that of the rat. The rate of formation of the AFB-epoxide and the activity of epoxide hydrolase appear to be relatively unimportant under conditions of high GST activity, whereas elevated GST activity, and thus inactivation of the AFB-epoxide, appears to be the critical component in species- and BHA-induced differences in AFB-DNA adduct formation and, presumably, AFB hepatocarcinogenicity.     

红细胞分散对奥沙利铂体外溶血试验的影响研究

目的： 通过分散红细胞改良体外溶血试验方法,探索奥沙利铂临床与非临床相一致的溶血性结果。方法： 在标准的体外溶血试验方案基础上,通过改变反应介质考察奥沙利铂的溶血结果;显微镜观察各试验方法中的红细胞分布,探索不同介质下体外溶血试验机制;酶标仪检测溶血试验试管中上清液吸光度计算溶血率;通过温和摇晃方式改变奥沙利铂对红细胞的药物暴露。结果： 以葡萄糖作为体外溶血试验介质时多类溶血制剂药物产生假阴性结果,在体外溶血试验中葡萄糖介质内红细胞发生细胞间黏附、聚集成团现象;通过持续温和摇晃方法,以葡萄糖为介质的奥沙利铂体外溶血试验产生阳性结果。结论： 体外溶血试验使用葡萄糖为实验介质时,可以通过温和分散红细胞的方式充分暴露奥沙利铂与红细胞的接触,展示更为客观的溶血实验结果。     

Effects of Apigenin on Glutamate-induced [Ca2+]i Increases in Cultured Rat Hippocampal Neurons

Flavonoids have been shown to affect calcium signaling in neurons. However, there are no reports on the effect of apigenin on glutamate-induced calcium signaling in neurons. We investigated whether apigenin affects glutamate-induced increase of free intracellular Ca²⁺ concentration ([Ca²⁺]_i) in cultured rat hippocampal neurons, using fura-2-based digital calcium imaging and microfluorimetry. The hippocampal neurons were used between 10 and 13 days in culture from embryonic day 18 rats. Pretreatment of the cells with apigenin (1 µM to 100 µM) for 5 min inhibited glutamate (100 µM, 1 min) induced [Ca²⁺]_i increase, concentration-dependently. Pretreatment with apigenin (30 µM) for 5 min significantly decreased the [Ca²⁺]_i responses induced by two ionotropic glutamate receptor agonists, alpha-amino-3-hydroxy-5-methyl-4-isoxazolepropionic (AMPA, 10 µM, 1 min) and N-methyl-D-aspartate (NMDA, 100 µM, 1 min), and significantly inhibited the AMPA-induced peak currents. Treatment with apigenin also significantly inhibited the [Ca²⁺]_i response induced by 50 mM KCl solution, decreased the [Ca²⁺]_i responses induced by the metabotropic glutamate receptor agonist, (S)-3,5-dihydroxyphenylglycine (DHPG, 100 µM, 90 s), and inhibited the caffeine (10 mM, 2 min)-induced [Ca²⁺]_i responses. Furthermore, treatment with apigenin (30 µM) significantly inhibited the amplitude and frequency of 0.1 mM [Mg²⁺]_o-induced [Ca²⁺]_i spikes. These data together suggest that apigenin inhibits glutamate-induced calcium signaling in cultured rat hippocampal neurons.     

奈福泮缓释胶囊体内外试验的相关性研究

目的 :评价奈福泮缓释胶囊的体外释放与体内吸收的相关性 ,为其质量控制提供实验依据。方法 :用反相高效液相色谱法测定血浆中的奈福泮浓度 ,按Wagner -Nelson公式计算一定时间内奈福泮缓释胶囊的体内吸收百分率。在释放介质中进行体外释放度试验 ,计算相应时间内的累积释放百分率。结果 :奈福泮缓释胶囊在体外缓慢释放 ,体内血药浓度维持时间长。结论 :奈福泮缓释胶囊的体内吸收百分率与体外释放百分率间存在良好的相关关系