高效液相色谱测定牛奶中黄曲霉毒素M1

黄曲霉毒素 (ａｆｌａｔｏｘｉｎ ,ＡＦＴ)是一类由真菌产生的二次毒性代谢产物 ,现已证实有数十种存在形式。由于黄曲霉毒素具有致癌、致畸及致基因突变等危害[1] ,尤其随着近年来国际贸易中非关税壁垒的广泛使用 ,世界各国包括我国在内纷纷制订了食品及牛奶中黄曲霉毒素的卫生限量标准加以控制 ,其中最低限量达 0 .0 5 μｇ/ｋｇ[2 ] 。黄曲霉毒素在牛奶及奶制品中 ,通常以Ｍ1的形式存在 ,ＡＦＴＭ1是ＡＦＴＢ1在生物体内的羟化产物 ,世界卫生组织 (ＷＨＯ)将ＡＦＴＭ1列为ⅡＢ类可疑致癌物。由于儿童和老人是牛奶消费的重要人群 ,因此加…     

高效液相色谱法测定玉米中黄曲霉毒素B1的方法探讨

目前黄曲霉毒素Ｂ1的测定方法有多种 ,概括起来有化学分析法、仪器分析法、生物鉴定法及免疫分析法等〔1～ 4〕。ＧＢ/Ｔ5 0 0 9 2 2 - 1996方法中制定了薄层法及酶联免疫吸附法测定ＡＦＴＢ1。薄层法操作繁杂 ,且耗费试剂较多 ,耗时。而酶联免疫吸附法则需要酶标试剂盒 ,价格较高 ,一般实验室难以接受。本文探讨了高效液相色谱法测定玉米中黄曲霉毒素Ｂ1含量。其方法最低检出限为 0 1ｍｇ/ｋｇ,3次测定的ＲＳＤ %为 2 3;样品加标回收率在 74 2 %～ 91 6 %以上。现报告如下。实验部分　 (1)实验原理 :样品中ＡＦＴＢ1经提取、浓缩、衍生、…     

黄曲霉毒素检测方法研究的概述

黄曲霉毒素是由黄曲霉菌和寄生曲霉菌产生的一类二次代谢产物。这些霉菌在全世界范围内存在 ,但只在热带地区产生毒素。因为气温 2 7℃左右 ,相对湿度 85 %左右的气候条件有利于这些真菌生长并产毒。在热带许多食物受到黄曲霉毒素的污染 (范围包括花生、落地花生、杏仁、谷物包括玉米、大米、小麦 ) ,食品如牛奶、肉、蛋也受到ＡＦ的间接污染。在中国 ,食物和花生油中黄曲霉污染水平达 2 3～ 5 0 0 μｇ/ｋｇ.ＰｅｔｅｒＭ .ｓｃｏｔｔ报告称ＡＦ在酿制的啤酒也达到相当水平。在美国和欧洲的啤酒生产过程中无论是加入麦芽或谷沙还是在非洲本…     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇、黄曲霉毒素G_1对体外培养人外周血淋巴细胞凋亡影响的研究

以细胞培养、流式细胞仪ＤＮＡ含量分析及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）和黄曲霉毒素Ｇ１（ＡＦＧ１）对人淋巴细胞凋亡的影响。流式细胞术（ＦＣＭ）检测结果显示,ＤＯＮ、ＡＦＧ１处理组淋巴细胞出现了典型的亚二倍体凋亡细胞峰,凋亡百分率与毒素作用时间（ＤＯＮ：２～７２小时;ＡＦＧ１：２～２４小时）及剂量（ＤＯＮ：５０～２０００μｇ／Ｌ;ＡＦＧ１：３．１２～２０００μｇ／Ｌ）呈正相关关系。ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳结果表明,ＤＯＮ（１０００μｇ／Ｌ）、ＡＦＧ１（１０００μｇ／Ｌ）处理２４小时淋巴细胞出现特征性的ＤＮＡ＂Ｌａｄｄｅｒ＂条带。因此表明,ＤＯＮ、ＡＦＧ１可诱导和促进体外培养的人外周血淋巴细胞发生凋亡。     

高效液相色谱法测定酱菜中EDTA—Na2的含量

乙二铵四乙酸二钠简称ＥＤＴＡ -Ｎａ2 。ＥＤＴＡ是络合剂 ,可与多种金属离子结合形成络合物。我国食品卫生标准 (ＧＢ2 76 0- 96 ) 〔1〕中允许其添加于酱菜中 ,并且规定了最大使用量为0 2 5ｇ/ｋｇ。其作用为防止食品变色和氧化〔2〕。目前尚无国家标准检验方法 ,同时国内也未见相关检验方法的报道〔3 ,4〕。我们采用高效液相色谱法测定酱菜中的ＥＤＴＡ -Ｎａ2 ,检测快速 ,操作简便 ,结果准确。现将研究结果报告如下。实验部分　 (1)仪器与试剂 :ＬＣ - 4Ａ高效液相色谱仪 (日本岛津 ) ,ＳＰＤ - 2ＡＳ紫外检测器。 772 5进样阀 (Ｒｈ…     

脱氧雪腐镰刀菌烯醇,黄曲霉毒素G1对体外培养人外周血淋巴细胞凋？…

以细胞培养、流式细胞义ＤＮＡ含量分析及ＤＮＡ琼脂糖凝胶电泳方法研究了我国食管癌高发区磁县居民粮食中优势污染霉菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）和黄曲霉毒素Ｇ１（ＡＦＧ１）对人淋巴细胞凋亡的影响,流式细胞术（ＦＣＭ）检测结果显示,ＤＯＮ、ＡＦＧ１处理组淋巴细胞出现了典型的亚二倍体凋亡细胞峰,凋亡百分率与毒素作用时间（ＤＯＮ,２－７２小时;ＡＦＧ１;２－２４小时）及测量（ＤＯＮ;５０－２０００μｇ／Ｌ     

测定花生及花生制品中黄曲霉毒素:免疫亲和柱净化·光化学在线衍生·高效液相色谱-荧光

〔目的〕建立免疫亲和柱净化、柱后光化学在线衍生、高效液相色谱-荧光法测定花生及花生制品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检测方法。〔方法〕样品粉碎、由甲醇/水提取、Afla-P黄曲霉毒素免疫亲和柱净化、光化学衍生器在线衍生、高效液相色谱-荧光法检测。〔结果〕黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检出限分别为0.5、0.15、0.5、0.15μg/kg,相对标准偏差低于15%,回收率为64%～97%。〔结论〕该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,能够满足出入境检验检疫工作的需要。     

食品中黄曲霉毒素限量标准中的成本-效益分析

目的通过成本-效益分析,探讨建立保护中国人群健康的合理的食品中黄曲霉毒素限量标准。方法利用传统数学模型方法和暴露限值(MOE)方法评估花生及其制品、玉米、大米中不同膳食总黄曲霉毒素和黄曲霉毒素B1限量标准下的健康影响,同时计算各限量水平下的食品损失。结果花生及其制品、玉米中总黄曲霉毒素、黄曲霉毒素B1限量水平的改变对减少我国人群肝癌患病数的作用没有显著差别,但不同的限量水平却可导致显著不同的食品损失。大米中总黄曲霉毒素、黄曲霉毒素B1限量水平的改变对减少我国人群肝癌患病数的作用以及导致的食品损失有较显著的影响。结论花生及其制品中总黄曲霉毒素20μg/kg、黄曲霉毒素B1 15μg/kg;玉米中总黄曲霉毒素20μg/kg、黄曲霉毒素B1 15μg/kg;大米中总黄曲霉毒素10μg/kg、黄曲霉毒素B1 5μg/kg或10μg/kg的限量标准比较合适。     

维生素D3促进大鼠胃癌血管新生机制的探讨

.方法 :经饮水摄入Ｎ 甲基 Ｎ′ 亚硝基 Ｎ 硝基胍(ＭＮＮＧ) (15 0ｍｇ/Ｌ)诱发大鼠胃腺癌。 12 0只大鼠经饮水摄入ＭＮＮＧ 4周后 ,按体重均匀分为 3组。第 1组动物食常规饲料 ,第 2组动物食 1,2 5 二羟基维生素Ｄ3[1,2 5 (ＯＨ) 2 Ｄ3](2 .5 μｇ/ｋｇ)添加饲料 ,第 3组食 1,2 5 (ＯＨ) 2 Ｄ3(5 0 μｇ/ｋｇ)添加饲料。空白对照组 (12只 ) ,饮自来水 ,饲常规饲料。实验16、32周处死动物 ,处死前行活体心血管内墨汁灌注。血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)免疫组织化学染色采用ＡＢＣ法。2 .结果 :ＶＥＧＦ免疫组织化学染色结果显示 …     

生物学法降解花生油中黄曲霉毒素的研究

以Ｆ２５（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）为出发菌株制备的生物制剂ＢＤＡ，在使用量为油样的５％～１０％时，能使花生油中的ＡＦＢ１由１００～２０μｇ／ｋｇ降至２２．３～１．９μｇ／ｋｇ。在放大试验中，ＢＤＡ能使花生油中的ＡＦＢ１含量从２０μｇ／ｋｇ降至５μｇ／ｋｇ以下，ＢＤＡ的最适解毒温度为４５～４８℃，解毒时间２小时。ＢＤＡ选择谷壳等为解毒酶和水份的共同载体，通过固体发酵方式制备，经解毒处理的花生油样保持浓郁的花生油香味，对其酸价、过氧化值、折光系数、含水量几项指标均无明显的影响     

N-1-萘基-乙二胺法测定聚合硫酸铁中亚硝酸盐

聚合硫酸铁是常用的净水剂 ,在其生产过程中需加入一定量的亚硝酸钠 ,以增加聚合度。为了监控亚硝酸盐的加入量和残留量 ,在聚合硫酸铁的生产、产品成型及销售过程中常需监测亚硝酸盐含量 ,以防止亚硝酸盐对水体的污染。在卫生分析中 ,亚硝酸盐测定方法较多〔1〕,主要用于水、食品等样品。由于聚合硫酸铁样品基体复杂 ,给测定带来较大影响。我们在尝试了多种测定方法基础上选择了Ｎ 1 萘基 乙二胺法 (ＮＥＤＡ法 ) ,采取多种抗干扰措施 ,取得理想效果 ,现介绍如下。材料　 ( 1)试剂 :氢氧化铝悬浊液〔2〕,2 0 ｇ/ＬＮａＯＨ溶液 ,10 ｇ/Ｌ…     

熊胆冻干粉针剂对内毒素休克大鼠血浆NOx及IL-10水平的影响

目的探讨熊胆冻干粉针剂(BBI)对内毒素休克大鼠血浆NOx及IL-10等细胞因子的影响。方法SD大鼠随机分为内毒素(ETX)组、BBI ETX(BE)组和乳酸林格尔液 ETX(LE)组,观察BBI对大鼠血浆NO代谢产物NOx浓度和IL-10等细胞因子水平的影响。结果ETX注射5hBE组血浆NOx浓度〔(84.21±17.11)μmol/L〕低于ETX组〔(353.05±48.09)μmol/L〕,高于LE组〔(54.01±11.44)μmol/L〕;ETX注射2h、5hBE组血浆IL-10水平〔(540.39±78.18)pg/mL和(450.83±59.17)pg/mL〕高于LE组〔(428.04±99.09)pg/mL和(348.83±108.23)pg/mL〕,差异均有显著性(P<0.05)。结论BBI预处理可轻度提高内毒素休克大鼠血浆NOx及IL-10水平,维持了轻度的血管扩张促进了毒素的排除及炎症因子的清除,从而减轻了组织细胞的炎症损伤,提示静点BBI具有保护机体的免疫防御作用。     

多功能柱净化-光化学柱后衍生高效液相色谱测定食品中黄曲霉毒素

目的:研究建立了光化学柱后衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的方法。方法:乙腈/水提取样品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2,经多功能柱净化、高效液相色谱分离、光化学柱后衍生,荧光检测器测定。结果:黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的检出限分别为0.50μg/kg、0.15μg/kg、0.50μg/kg和0.15μg/kg,回收率为86.7%～97.2%,相对标准偏差(RSD)0.41%～2.40%。结论:该方法简便快速、灵敏度高、重现性好,满足食品中黄曲霉毒素检测的需要。     

市售食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2污染情况分析

目的了解市售谷物、坚果和食用油等7类食品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2污染情况。方法建立高效液相色谱-串联质谱法检测黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2。结果共检测266份样品,黄曲霉毒素的总检出率为4.5%,最高总含量为72.8μg/kg。在7类样品中,以花生油、玉米粉和花生受污染情况较为严重,其中,花生油的检出率为75.0%,明显高于其他类食品。所采集的266份样品黄曲霉毒素总检出率为:黄曲霉毒素B_1(4.5%)黄曲霉毒素G_1(0.8%)黄曲霉毒素B_2(0.4%)黄曲霉毒素G_2(0.0%)。4种黄曲霉毒素中以黄曲霉毒素B_1的污染情况最为严重,共检出1份花生样品含量为58.4μg/kg,为黄曲霉毒素B_1含量超标样品。结论黄曲霉毒素在食品中的污染情况仍然存在,相关管理部门应加强监控,以保证消费者的身体健康。     

超高效液相色谱-大体积流通池荧光法检测食品中的4种黄曲霉毒素

目的建立具有大体积流通池的荧光检测超高效液相色谱法测定食品中4种黄曲霉毒素(B_1、B_2、G_1、G_2)的方法。方法食品经乙腈水提取液超声提取30 min,免疫亲和柱净化,氮气吹干,10%乙腈溶液定容,C_(18)反相色谱柱分离,采用具有大体积流通池的荧光检测器检测,激发波长为365 nm,发射波长为450 nm。结果 4种黄曲霉毒素在C_(18)高效液相色谱柱上得到了很好的分离,5 min内完成检测,方法的检出限为0.010μg/kg(黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素G_1)和0.003μg/kg(黄曲霉毒素B_2、黄曲霉毒素G_2),平均回收率为77.55%~102.89%,RSD为1.2%~4.4%,4种黄曲霉毒素在0.1 ng/ml~10 ng/ml时线性关系良好(相关系数r0.999)。采用大体积流通池的荧光检测器后,灵敏度提高5倍~20倍。结论采用免疫亲和柱净化有效去除了基质中的杂质,改用大体积流通池的荧光检测器,省去了衍生步骤,简单快速,提高了黄曲霉毒素检测的灵敏度及准确度,适用于食品中黄曲霉毒素的测定。     

食品中无机砷定量分析方法的优化

砷以无机砷和有机砷不同的化学形式存在于食品和环境中 ,无机砷和有机砷的毒性有着显著的差异 ,一般来说无机砷的毒性远大于有机砷。砷及其化合物已被国际癌症研究机构确认为致癌物[1] ,ＦＡＯ/ＷＨＯ(世界粮食组织 /世界卫生组织 )于 1988年建议以无机砷形式暂定每周最大可耐受量(ＰＴＷＩ)为 15 μｇ/ｋｇ(ｂ .ｗ) ,即 6 0ｋｇ的人最大日均耐受量 (ＡＤＩ)为 0 12 8ｍｇ ,比以前总砷的标准提高 2 5倍 ,目前国际上提出以无机砷的形式进行卫生学评价。因此研究测定食品中砷的不同形态的含量尤为重要。但我国还没有公布测定无机砷的标准方法…     

用计算机辅助精子分析系统测定TCDD对大鼠精子运动能力的影响

利用计算机辅助的精子分析系统（ＣＡＳＡ）研究了２,３,７,８—四氯二苯－Ｐ－二口恶口英（ＴＣＤＤ）对大鼠精子运动能力的影响。给２１天龄幼鼠腹腔注射ＴＣＤＤ０．１、１．０和５．０μｇ／ｋｇ,对照组注射等量体积的溶媒。在性成熟后（９０天）,用扩散法收集附睾尾精子,测定其运行速度（ＶＣＬ、ＶＳＬ、ＶＡＰ）、运动方式（ＳＴＲ、ＬＩＮ、ＢＣＦ、ＡＬＨ、ＭＡＤ等）及活动精子的比率（Ｍｏｔ％）。结果表明,ＴＣＤＤ１．０μｇ／ｋｇ组,精子的运动速度明显低于对照组（ＶＣＬＰ＜０．０５;ＶＡＰ、ＶＳＬ、ＢＣＦＰ＜０．０１）,０．５μｇ／ｋｇ时精子的运动速度、及前向性和直线性运动性能均明显降低（Ｐ＜０．０１）,活动精子的比率也明显低于对照组（Ｐ＜０．０１）。本研究结果为ＴＣＤＤ的男性生殖毒理学研究,以及ＣＡＳＡ在男性生殖毒理学研究中的应用提供了进一步参考依据     

两种方法综合评价碘缺乏病防治效果的对比分析

密切值法和秩和比法已被运用到医学科学的若干领域〔1～ 5〕,作为评价工作质量优劣的理论依据。但应用在碘缺乏病 (ＩＤＤ)防治效果评价中的报导尚不多见 ,本文试图采用两法进行对比分析 ,以期达到综合评价ＩＤＤ防治工作质量 ,提高ＩＤＤ防治效果之目的。实例介绍本文应用密切值法〔1〕和秩和比法〔3〕对我县 1995～ 1999年五个ＩＤＤ监测点监测结果进行综合评价 ,以8～ 10岁在校学生甲状腺肿大率 (% )、尿碘≥ 10 0 μｇ/Ｌ比例 (% )、碘盐合格率 (% )、ＴＳＨ >5 μＩＵ/ｍｌ比例(% )、水碘均数 (μｇ/Ｌ)作为综合评价指标 (表 1)。其中 …     

电子捕获检测器测定1605、六六六、DDT的气相色谱法

气相色谱法测定六六六、ＤＤＴ常用电子捕获检测器(ＥＣＤ) ,测定 160 5常用火焰光度检测器 (ＦＰＤ)或氮磷检测器(ＮＰＤ) 〔1,2〕。本文探讨了用ＥＣＤ同时测定水中 160 5、六六六、ＤＤＴ的气相色谱法。选用内装 1 5 9%ＯＶ - 17+2 2 1%ＱＦ - 1/ＧａｓｃｈｒｏｍＱ(60～ 80目 )的 1 5ｍ× 3ｍｍ玻璃柱 ,将甲基 160 5、乙基 160 5、六六六、ＤＤＴ8个异构体等 10个组分分离 ,用ＥＣＤ测定各组分含量。实验证明 ,ＥＣＤ对 160 5有机磷农药有较高的敏感度 (10 -12 ｇ/ｍｌ) ,最低检出量可达 10 -11ｇ。1　实验部分1 1　试剂与仪器　 (1)Ｏ…     

某部不同采购食品中黄曲霉毒素B1含量测定及分布调查

目的检测某部采购食品中黄曲霉毒素B1的含量,了解黄曲霉毒素B1在不同种类食品间的分布情况。方法选取5个食堂3大类食品(谷物、植物油和酿造类)共计68份样本,用酶联免疫吸附法(ELISA)进行定量测定,用统计学方法对数据结果进行分析。结果黄曲霉毒素B1 ELISA标准曲线相关系数r在0.99以上,样本加标回收率在96.22%~115.09%之间;68份样本合格率为98.53%;谷物、植物油和酿造类食品黄曲霉毒素B1含量均值分别为0.168 7、0.125 7、0.323 1μg/kg,差异有统计学意义(F=16.96,P0.01),其中谷物类食品中黄曲霉毒素B1含量显著高于其他两类。结论该部采购食品中黄曲霉毒素B1含量合格率高,但仍有个别食品存在安全隐患,应加强食品采购、储存和加工等各个环节的监督管理,重视食品安全监测。