日立7150型生化仪双缩脲法测定脑脊液蛋白

随着自动生化分析仪的广泛使用,越来越多的生化检验项目可以用仪器测定,大大提高了工作效率和检验质量.脑脊液中蛋白质由于其含量低,目前大多只能使用传统的硫酸钠-磺基水杨酸比浊法[1]测定,此法不便于自动分析.笔者通过修改参数,在日立7150型生化分析仪上用测定血清总蛋白的双缩脲试剂测定脑脊液中蛋白质,实现了此项目的自动分析,现报道如下:     

双试剂双缩脲法测定血清总蛋白的探讨

目的 将双缩脲单试剂改为双试剂法，观察高脂、高胆红素、溶血标本对血清总蛋白测定的干扰。方法用二种不同试剂对高脂,高胆红素．溶血及外观正常标本用原法及本法同在全自动生化分析仪上测定血清总蛋白。结果脂血标本对原法干扰十分明显，本法可完全消除脂血的干扰；总胆红素每增加50μmol／L，原法总蛋白增加0．4g／L，本法不受影响；溶血标本中血红蛋白对原法结果明显影响，1g／L血红蛋白对原法总蛋白增加2．85g／L。对本法总蛋白增加0．93g／L；外观正常标本二种方法无显著差异。结论双试剂法在保持原法的反应原理的基础上，消除了脂血、黄疸的干扰，明显减少溶血的影响，有利于自动生化仪的分析。     

用高浓双缩脲试剂直接测定脑脊液总蛋白

脑脊液总蛋白测定的方法虽有多种但各有其缺点.如比浊法灵敏度低,并在高浓度(1g/L 以上)时蛋白沉淀极易聚合不稳定.染料结合法都有与白、球蛋白呈色不一致及比色皿难洗净的缺点。免疫学方法虽灵敏高度、特异性强、但不适用于常规工作.我们配制的高浓双缩脲试剂可直接测定脑脊液中总蛋白,适用于手工及自动分折仪法,现报道如下.     

双剂型双缩脲法测定血清总蛋白

目的为克服乳浊、黄疸、溶血对血清总蛋白测定的影响，将双缩脲法改为双剂型方法。方法第一试剂为不含硫酸铜的双缩脲空白试剂，第二试剂系将原双缩脲试剂中的硫酸铜增加一倍，二者等量混合即成原法试剂。选取乳浊、黄疸、溶血及外观正常标本用新法与原法同时在日立7060自动生化分析仪上测定总蛋白含量。结果血清总胆红素每增加100μmol／L，原法总蛋白增加0．7g／L，新法不受干扰；乳浊血清对原法结果影响十分明显，新法完全可排除乳浊干扰；标本溶血时，血红蛋白中的血红素与珠蛋白均对总蛋白测定结果造成明显影响，每1g／L血红蛋白可使原法总蛋白结果增加2．2g／L，可使新法增加0．8g／L；外观基本正常标本二法结果无显著差别。结论双剂型双缩脲法在不改变原法反应原理，保留原法优点的基础上，能克服黄疸、乳浊的干扰，明显减少溶血的干扰，而且适合于自动分析。     

自动生化分析仪定量测定脑脊液总蛋白

目的 应用双缩脲法快速定量测定脑脊液总蛋白.方法 用双缩脲法测定脑脊液总蛋白的重复性、回收率、线性范围.结果 批内重复性实验的平均变异系数为1.7%,批间重复性实验的平均变异系数为2.3%,平均回收率为99.3%,线性范围为100～7 500 mg/L,该法与邻苯三酚红法的结果相比差异无统计学意义(P＜0.05).结论 本方法结果准确、重复性好、线性范围宽,并且可以快速得到结果.     

改良双缩脲法测定血清总蛋白

目的研究建立改良双缩脲试剂二点速率法测定血清总蛋白的方法,以消除标本溶血、黄疸、脂浊、含葡聚糖的干扰。方法进行方法参数选择试验、方法学评价试验和方法间比较试验。结果改良试剂反应液吸收峰530～560nm,最大峰值540nm。在反应进行的初期,吸光度变化率与蛋白质浓度成正比,可用速率法测定,线性范围142g/L。高、低值血清的批内、批间、日间和总CV均<5%。回收率为98.6%～100%,平均99.3%。检测限0.4g/L。血红蛋白9.5g/L以下、胆红素370μmol/L以下、三酰甘油200.0mmol/L以下、葡聚糖30g/L以下无显著性干扰。改良法与Doumas法测定外观正常标本结果高度相关,回归方程:y=2.7147+0.9658x,r=0.9633,P=0.000。配对t检验:t=0.907,P=0.370。测定高脂、黄疸、含葡聚糖标本两种方法间有非常显著性差异。结论采用改良法单试剂二点速率法测定血清总蛋白,能有效消除溶血、黄疸、高脂和葡聚糖的干扰。     

一例日立生化仪故障排除的心得体会

我科生化室有两台日立7060生化全自动分析仪,分别购于1996年和2000年。仪器的准确性和重复性良好,运行稳定,在每年的全省质控检查中,都能获得优秀成绩。但在一次日常工作中,发现在旧的7060生化仪上,一批病人的甘油三酯的检测结果连续超过正常参考值的上限。将该批病人标本放到另一台新7060生化仪上检测,甘油三酯的结     

血清总蛋白双试剂双缩脲法消除脂浊和胆红素的干扰

建立血清总蛋白双试剂双缩脲自动分析法。以氢氧化钠和硫酸钠溶液作第一试剂 ,浓缩双缩脲试剂作第二试剂 ,在自动分析仪上用两点终点法测定。结果 ,在 0 6mol/L氢氧化钠中加入 7mmol/L的硫酸钠使脂浊血清的空白吸光度稳定 ,蛋白质与双缩脲双试剂的反应在 7分钟内完成 ;线性范围 0～ 140g/L ,平均回收率 99 8% ,低蛋白含量和正常蛋白含量的批内CV为 0 5 2 %和 0 40 % ,批间CV为 0 80 %和 0 77% ;双试剂法与参考方法比较 ,r =0 9984,Y=0 982 5X 0 783,t =0 5 2 2 ,P>0 5 ,n=90 ;脂肪乳糜、高胆红素、血红蛋白颜色对测定无干扰。结果表明 :双试剂法能去除样品中脂浊、高胆红素及血红蛋白的干扰 ,具有很好的准确度和精密度 ,适合在自动分析仪上使用。     

血清和血浆总蛋白双缩脲法测定结果的比较

目前，多数实验室测定血中总蛋白通常采用双缩脲法。样品用血清或血浆。我们在多年的工作实践中，发现用双缩脲法测定血清总蛋白的值较血浆高，从而导致了Ａ／Ｇ比值的不一致性，影响了临床的诊断和治疗。为此我们对１００例正常人的血清和血浆用双缩脲法同时测定其总蛋白...     

血清总蛋白测定下不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。     

双缩脲法与考马斯亮蓝法测定母乳总蛋白的应用比较

双缩脲法与考马斯亮蓝法测定母乳总蛋白的应用比较宋景秋王以立（南京鼓楼医院检验科，南京２１０００８）关键词双缩脲考马斯亮蓝消化定氮母乳总蛋白母乳喂养已被广泛认同，其中蛋白质是主要营养成份，因此母乳总蛋白的测定显得非常重要。母乳中乳糖浓度较高，实验发现乳...     

减少日立7060、7180型生化仪试剂浪费的方法

随着医学科学技术的飞速发展．全自动生化分析仪在越来越多的医院得到广泛应用。我院也先后引进了日立7060型、7180型全自动生化分析仪，它们的应用提高了检测速度和准确性，取得了很好的经济和社会效益。但近年来大型仪器检查费用被大幅度下调，为此降低实验成本已成为增效节支的一个重要环节．而节约试剂是降低实验成本的一种有效办法。如何操作才能节约试剂呢？我院检验科应用日立全自动生化仪已有多年，积累了一些经验，现介绍如下。     

血清总蛋白测定不同双缩脲试剂及标准化评价

在１２家医院考察了国内三种高ＮａＯＨ浓度的双缩脲试剂的应用效果。用这些双缩脲试剂测定的血清总蛋白结果偏高，精密度不如Ｄｏｕｍａｓ配方。用Ｄｏｕｍａｓ双缩脲试剂测得蛋白原始标准（ＳＲＭ９２７ａ）和二份蛋白次级标准的吸光系数均为０．２９８２±０．００１６Ｌｇ￣（－１）（５４０ｎｍ），２５Ｃ时呈色曲线在６０分钟达到平衡。用吸光系数法测定三份定值冻干质控血清的总蛋白值，均较厂方标定值略高。表明有必要统一双缩脲试剂配方和方法，吸光系数法可作为蛋白次级标准的定标方法。     

双缩脲反应测定血清总蛋白方法的标准化

双缩脲法定量测血清总蛋白已有70余年的历史.1974年,美国临床化学协会(AACC)标准化委员会的总蛋白研究组,用双缩脲法进行了血清总蛋白的室间研究.1978年,国际临床化学协会(IFCC)标准委员会在提出人血清蛋白标准74/1的暂     

改良双缩脲双试剂与单试剂法测定脂浊标本血清总蛋白对比分析

目的 探讨改良双缩脲双试剂法在全自动生化分析仪中直接测定脂浊标本血清总蛋白.方法 用酒石酸作为络合剂防止形成氢氧化铜沉淀,血清空白增加方法的敏感性而同时使脂血症对光普的最小干扰.结果 改良双缩脲双试剂法测定脂浊标本血清总蛋白与单试剂法测定结果差异有统计学意义(P<0.001).结论 改良双缩脲双试剂法能有效的清除脂肪的干扰,具有很好的准确度和精密度,适合于自动分析,提高工作效率.     

日立7600-020型全自动生化仪性能验证

目的对日立7600-020型全自动生化仪装机性能进行验证测试。方法根据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)制定的评价标准,用日立7600-020型自动生化仪配套生化试剂对该仪器的精密度、准确性、线性范围、回收率和交叉污染率等进行验证性试验。结果通过对钾(K)、葡萄糖(GLU)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总蛋白(TP)、三酰甘油(TG)的检测,精密度实验总CV值均小于5%;线性实验相关系数r分别是:0.995 00、.984 90、.989 9、0.995 0、0.984 9;回收率分别为:101.2%、100.7%、98.3%、99.5%、98.9%;交叉污染率为0.63%、0.87%、0.77%、0.82%、0.56%。结论日立7600-020型全自动生化仪交叉携带污染率低,精密度和线性好,各项指标参数均符合仪器设定的要求,达到国家规定的标准。     

不受高脂血症影响的双缩脲试剂

历来所用的双缩脲试剂(BR),在遇到某些高脂血清时,因脂血增加540nm 处的内源性吸光度而产生正干扰.而这种干扰常用Chromy 报道的用丙酮处理脂血标本.鉴于处理脂血标本手续较烦,我们通过实验用KOH 代替NaOH,按Doumas 配方配制