不同激素组合对唐古特大黄愈伤组织的影响

目的通过研究不同激素对唐古特大黄愈伤组织的影响,探讨培养唐古特大黄愈伤组织最佳培养基。方法选用唐古特大黄种子萌发的无菌苗为材料,诱导愈伤组织,研究2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),6-苄基氨基乙酸(6-BA),萘乙酸(NAA)3种激素组合对唐古特大黄愈伤组织诱导及愈伤组织蒽醌产量的影响。结果 2,4-D对愈伤诱导起主导性作用,2 mg/L的2,4-D最有利于愈伤组织的形成,但更高质量浓度的2,4-D会影响诱导效果。2 mg/L的6-BA有利于愈伤组织的快速诱导。对于愈伤组织中的蒽醌产量,2,4-D在2 mg/L时效果最好,6-BA无明显作用,1.0 mg/L以上质量浓度的NAA对2,4-D有增效作用。结论唐古特大黄愈伤组织的最佳培养基是MS培养基(MS)+2,4-D(2 mg/L)+6-BA(2 mg/L)+NAA(1 mg/L),在此培养基上,愈伤组织的生长速率和蒽醌的产量都有较佳的表现。     

白芨愈伤组织诱导、增殖与分化研究

目的 建立白芨愈伤组织诱导、增殖和分化再生体系.方法 以MS为基本培养基,应用正交试验方法设计植物生长调节剂组合和质量浓度配比,研究不同外植体及植物生长调节剂对白芨愈伤组织形成、增殖和分化的影响.结果 白芨假鳞茎为诱导愈伤组织形成的最佳外植体;1.0 mg/L 6-苄氨基嘌呤(6-BA)与2.0 mg/L 2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)组合不仅可诱导白芨愈伤组织形成,还有利于愈伤组织分化成芽.1.0 mg/L 6-BA与3.0 mg/L 2,4-D的组合促进愈伤组织增殖,增殖系数为7.8;在分化培养基中附加0.5 mg/L噻二唑苯基脲(TDZ),可提高愈伤组织分化率.结论 白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L;最佳增殖培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 3.0 mg/L;分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L+TDZ 0.5 mg/L.     

鉴别闭鞘姜及其组织培养物中薯蓣皂甙元的分布

体外培养:取闭鞘姜(Costus speciosus)的茎愈伤组织、根、枝叶、小植株分别以MS+0.2ppm激动素+1ppm2,4-D+3％蔗糖+0.7％琼脂、MS+5ppmIBA+0.5ppm激动素+3％蔗糖+0.7％琼脂,MS+2ppmBAP+3％蔗糖+0.7％琼脂,MS+1ppmNAA+0.2ppm激动素+3％蔗糖+0.7％琼脂的培养基在25±1℃,700lux连续光下培养5周(愈伤组织)、8周(器官培养)。GC-MS分析     

正交法优化植物生长调节剂在黄芪愈伤组织生长中的应用

目的 研究膜荚黄芪叶愈伤组织诱导、生长及黄芪多糖合成的最佳生长调节剂组合.方法 以膜荚黄芪叶为外植体,运用正交设计研究 6-BA、2,4-D 和 NAA 等3种植物生长调节剂组合对愈伤组织诱导、培养及黄芪多糖合成的影响.结果 分别以诱导率、相对生长速率和黄芪多糖含量为指标,结果表明 NAA 和 6-BA 对愈伤组织诱导率影响显著,6-BA、2,4-D 和 NAA 都对愈伤组织的生长影响显著,2,4-D 和 NAA 对黄芪多糖合成影响显著.结论 诱导愈伤组织的最佳培养基为:MS 2,4-D(0.5 mg·L-1) 6-BA(1.0 mg·L-1) NAA(2.0 mg·L-1);愈伤组织生长的最佳培养基为:MS 2,4-D(0.5 mg·L-1) 6-BA(2.0 mg·L-1) NAA(2.0 mg·L-1);促进黄芪多糖合成的最佳培养基为:MS 2,4-D(1.0 mg·L-1) 6-BA(1.0 mg·L-1) NAA(1.0 mg·L-1).     

外源激素配比对药用植物锁阳愈伤组织诱导的影响

目的 筛选最佳激素组合,提高锁阳组织培养效率.方法 以锁阳肉质茎维管组织作为外植体,以MS为基本培养基,基于正交实验设计研究三种外源激素配比(NAA、2,4-D和6-BA)以及蔗糖和琼脂浓度对锁阳愈伤组织诱导的影响.结果 NAA、2,4-D和6-BA三种激素对锁阳愈伤组织诱导均有显著影响,不同激素之间对出愈率的作用效应大小为2,4-D ＞NAA＞6-BA,诱导锁阳愈伤组织最佳激素配比为MS+NAA (1.0mg/L)+2,4-D (1.5mg/L)+6-BA(2.0mg/L).培养基中琼脂浓度和蔗糖浓度对锁阳愈伤组织诱导率有一定影响,蔗糖浓度以30g/L,琼脂浓度以4.5g/L时愈伤组织诱导率最高.结论 锁阳愈伤组织诱导最适培养基为MS+NAA (1.0mg/L)+2,4-D (1.5mg/L)+6-BA (2.0mg/L)+蔗糖(30g/L)+琼脂(4.5 g/L).     

狭叶柴胡愈伤组织诱导的研究

目的:研究诱导狭叶柴胡愈伤组织产生的条件。方法:通过使用不同激素(6-BA,2,4-D,KT)不同配比,优选诱导愈伤组织的最佳培养基。结果:最佳诱导条件为:MS培养基+6-BA 3 mg/L,2,4-D 0.1 mg/L,KT 0.6 mg/L,在最佳诱导条件下,愈伤组织生长良好。结论:调节植物激素的配比,可有效的诱导植物愈伤组织的产生。     

阳春砂愈伤组织的诱导

目的:通过阳春砂组织培养获得愈伤组织,建立阳春砂愈伤组织的诱导体系。方法:将阳春砂根状茎芽及阳春砂试管苗的茎段、根尖作为愈伤组织诱导的外植体材料,接种到以MS为基本培养基,分别添加不同浓度的6-苄基腺嘌呤(6-BA),ɑ-萘乙酸(NAA)及2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的培养基中(各培养基的p H约为5. 8),探讨不同外植体材料及不同培养基对阳春砂愈伤组织诱导的影响。结果:研究结果显示,阳春砂根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体材料均能有效地诱导产生愈伤组织;其中阳春砂根状茎芽、试管苗茎段2种外植体材料诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(1. 5 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(0. 5 mg·L-1),最高诱导率分别为15%和60%;试管苗根尖诱导产生愈伤组织的最适培养基为MS+6-BA(2. 0 mg·L-1)+2,4-D(1. 0 mg·L-1)+NAA(1. 0 mg·L-1),最高诱导率76%,为阳春砂愈伤组织诱导的最佳外植体材料。结论:该研究初步建立了阳春砂的根状茎芽及试管苗的茎段、根尖3种外植体的愈伤组织诱导体系,试管苗根尖为愈伤组织诱导的最佳外植体。     

射干叶片愈伤组织诱导及植株再生研究

目的:建立射干叶片再生植株系列体系。方法:利用植物组织培养技术,研究2,4-D、AgNO3对射干叶片愈伤组织诱导的影响;BA对愈伤组织分化的影响。结果:射干愈伤组织诱导的最佳培养基是:MS+2,4-D2mg/L+AgNO310mg/L+糖3%+琼脂5%,愈伤组织分化的最佳培养基是MS+BA1.0mg/L+糖3%+琼脂5%,生根的最佳培养基是:1/2MS+NAA1.0mg/L+糖2%+琼脂5%。结论:2,4-D是愈伤组织诱导的主要因素,AgNO3对胚性愈伤组织的影响较大,BA是愈伤组织分化的主要因素。初步建立射干愈伤组织的再生植株系列体系。     

南方红豆杉外植体母株来源与培养基成分对愈伤组织生长和紫杉醇的影响

目的建立和优化获得量大而高紫杉醇愈伤组织的培养技术和方法。方法以山西陵川县野生和在西安栽培的南方红豆杉为材料,就最佳母株、外植体种类、基本培养基、植物激素种类及浓度对愈伤组织诱导、生长和紫杉醇的影响等因素进行了系统研究。结果幼茎外植体因诱导的愈伤组织时间早、频率高而最佳;培养基Y 5:M S 2,4-D 4.0 m g/L K IN 1.0 m g/L或B 5Ⅲ:B 5 2,4-D 3.0 m g/L K IN 0.1 m g/L Phe 0.1 m o l/L为最佳诱导愈伤培养基,其诱导频率高达100%。继代培养基中质量浓度2,4-D(0.5~3 m g/L)促进愈伤组织增殖;高质量浓度(8 m g/L)则有抑制作用。当2,4-D质量浓度适宜时,愈伤组织在B 5培养基上较在M S培养基上褐化轻、生长快。HPLC分析表明紫杉醇最高的继代培养基为M SⅢ,其紫杉醇质量分数高达干重的0.004%;野生母株幼芽来源的愈伤组织,其紫杉醇普遍高于栽培母株幼茎来源的愈伤组织。结论以5月份野生红豆杉幼茎为外植体,以Y 5或B 5Ⅲ为诱导培养基和继代培养基,继代8~10代,每代培养30~35 d;用M SⅢ培养基再培养1~2代,收获愈伤组织或细胞培养物,并从中提取紫杉醇是获得大量高紫杉醇愈伤组织的较佳培养程序。     

曼陀罗愈伤组织培养及药用成分莨菪碱探讨

目的:探究曼陀罗愈伤组织的培养条件,并对愈伤组织中的莨菪碱成分进行研究。方法:使用不同的培养基条件对曼陀罗嫩茎进行体外培养,并对愈伤组织中所含有的莨菪碱进行有效分析。结果:与其他培养基比较,MS、1.0mg·L~(-1) 2,4-D条件下,曼陀罗愈伤组织的诱导和继代培养情况较好,且愈伤组织中的主要生物碱成分为东莨菪碱和莨菪碱。结论:MS、1.0mg·L~(-1) 2,4-D是诱导和继代培养曼陀罗愈伤组织的理想条件,工业上可利用该条件进行愈伤组织培养,以便提取更多的莨菪碱供医药上使用。     

何首乌茎愈伤组织的诱导和大黄素、大黄酸含量的检测

目的研究何首乌茎愈伤组织的诱导和大黄素、大黄酸的检测。方法以何首乌茎为外植体,在26℃和暗培养条件下,在含有1 mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和0.4 mg·L-1萘乙酸(NAA)的MS诱导培养基中进行诱导,15 d后把诱导出的愈伤组织转接到相同培养基中培养15 d,共转接3次,通过HPLC测定大黄素和大黄酸的含量。结果茎愈伤组织的大黄素和大黄酸含量分别为0.036 mg·g-1和0.019 mg·g-1。结论何首乌愈伤组织诱导培养基为含有1 mg·L-12,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和0.4 mg·L-1萘乙酸(NAA)的MS培养基,茎愈伤组织中存在大黄素和大黄酸。     

野藤茶愈伤组织的诱导研究

目的探讨影响野藤茶愈伤组织诱导因素,建立野藤茶愈伤组织培养方法。方法以生长旺盛的野藤茶的叶、茎为外植体,采用组织培养方法,观察不同外植体、光照和植物生长物质种类及其配比对野藤茶愈伤组织诱导的影响。结果叶和茎都能诱导愈伤组织,25℃、暗培养有利于愈伤组织生长,6-苄氨基嘌呤(6-BA)与α-萘乙酸(NAA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的配合使用有利于愈伤组织的诱导,出愈率可达86.1%。结论野藤茶愈伤组织的最适宜培养基为MS+6-BA 1.5 mg.L-1+NAA 8 mg.L-1+2,4-D 40 mg.L-1(pH 5.8)。     

龙脑樟愈伤组织的诱导及龙脑的产生

目的:优化龙脑樟愈伤组织的诱导条件。方法:采用植物组织培养方法和气相色谱方法进行。结果:MS培养基中添加不同浓度配比的激素,愈伤组织的诱导效果不同,愈伤细胞生长状况也不一样,其中在培养基上添加2,4-D4 mg.L-1+6-BA 0.2 mg.L-1愈伤组织的诱导率最高,细胞生长旺盛。同时,发现采用嫩叶为外植体诱导出的愈伤组织中含有龙脑,而采用茎为外植体诱导出的愈伤组织中不含龙脑。结论:龙脑樟愈伤组织诱导适宜的培养基为MS+2,4-D 4 mg.L-1+6-BA 0.2 mg.L-1,龙脑的生成则以嫩叶为外植体。     

长春花愈伤组织诱导及培养条件优化

目的：通过愈伤组织的诱导、增殖与培养条件的优化建立长春花愈伤组织培养体系。方法：以长春花的幼嫩叶片为外植体,在不同激素组合的脱分化、分化培养基上培养。考察抗氧化剂Vc对愈伤组织褐化的影响。结果：最佳诱导培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/L 2,4-D;最佳继代培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋0.5 mg/LNAA＋0.5 mg/L 2,4-D,并在该条件下进一步悬浮继代培养。10 mg/L Vc可有效抑制长春花愈伤组织的褐化。结论：激素KT对该愈伤组织的诱导效应不明显,NAA、2,4-D和6-BA均有一定的诱导效应;Vc具有抑制长春花愈伤组织褐化的作用。     

秦艽愈伤组织的培养及其龙胆苦苷含量的研究

目的:为扩大和提高甘肃道地药材秦艽资源的利用效率。方法:以秦艽种子的萌发所获得的幼芽作为外植体,诱导形成愈伤组织;筛选诱导愈伤组织产生的不同培养基和培养条件,并继代培养;应用HPLC法测定龙胆苦苷的含量。结果:秦艽愈伤组织生长的最佳培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L),最佳继代培养基为MS+2,4-D(1.0 mg/L)+6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.5 mg/L),最佳继代时间为30 d。龙胆苦苷积累量在指数生长后期(28～30 d)达最高,为0.78 mg/g DW。结论:筛选出了适宜的秦艽愈伤组织培养方法。秦艽愈伤组织在固体培养基上的生长曲线呈"S"型,且愈伤组织中龙胆苦苷的积累量随愈伤组织增殖而不断增加。     

滴水珠组织培养及快速繁殖的实验研究

目的:通过滴水珠组织培养及快速繁殖,解决滴水珠的资源匮乏问题。方法:以滴水珠的叶片及叶柄为外植体,探索滴水珠愈伤组织诱导与增殖的最佳培养基,并对滴水珠愈伤组织的分化、生根诱导及组培苗的移栽进行研究。结果:滴水珠在不同浓度2,4-D与6-BA或KT的培养基上可以较好地诱导出滴水珠的愈伤组织,MS+2.0mg/L6-BA+0.2mg/L 2,4-D是滴水珠愈伤组织最佳诱导和增殖培养基;在含不同浓度NAA与6-BA的MS培养基中,滴水珠能快速生长。结论:本研究初步建立了完整的滴水珠的组织培养体系,具有开发利用潜力。     

喜树愈伤组织的诱导与培养

目的：研究喜树叶片、茎段和带芽茎段的愈伤组织诱导效果以及愈伤组织继代培养条件。方法：以MS为基本培养基,附加不同质量浓度6-BA,NAA和2,4-D,通过正交试验研究愈伤组织继代培养的适宜条件。结果与结论：MS+6-BA 2 mg·L^-1+NAA 2 mg·L^{-1+2,4-D 2 mg·L-1的诱导效果较好,容易诱导出愈伤组织,其中叶片的诱导率可达80%以上。愈伤组织在MS+６-BA 1 mg·L-1+2,4-D 1 mg·L-1培养基上继代培养生长快速,疏松易分散,适合用于细胞培养。}     

闭鞘姜根茎和茎愈伤组织中甾体皂甙元的分离鉴定

取闭鞘姜(Costus speciosus)的嫩茎和根茎片浸入0.1％氯化汞液10～12分钟消毒,然后用无菌蒸馏水洗3～4次,置入含1ppm 2,4-二氯苯氧醋酸(2,4-D)和1％琼脂的35毫升改良的Murashige ＆ Skoog’s烟草培养基(RT)的100毫升烧瓶中,35～40日后愈伤组织分化。保持在26±1°c,55％相对湿度和室内光线(300勒克司)条件下培养;18个月后,再转移到新鲜的RT培养基上,让其在静态培养下生长。2,4,6     

紫花鄂北贝母愈伤组织诱导及总生物碱的测定

目的研究紫花鄂北贝母Fritillaria ebeiensis var.purpurea外植体愈伤组织诱导的激素组合和配比,并考察原药材及愈伤组织中总生物碱的量。方法以紫花鄂北贝母新鲜鳞茎为外植体,用抗生素和NaCIO组合作消毒剂,基于MS固体培养基添加激素2,4-D+6-BA、2,4-D+KT设计正交试验进行离体培养;采用可见-紫外分光光度法测定总生物碱量。结果外植体适宜灭菌条件是以5%NaClO溶液消毒8 min:愈伤组织诱导激素水平为2,4-D 0.5 mg/L+6-BA2.0mg/L;原药材及其愈伤组织中总生物碱量分别为1.46%、1.09%。结论愈伤组织质地疏松,适合继代培养,其有效成分总生物碱量低于原药材。     

三角叶黄连愈伤组织诱导和培养条件的优化

目的:对三角叶黄连愈伤组织的培养条件进行优化,建立三角叶黄连组织培养的技术体系.方法:采用响应面方法( RSM)中的Box-Behnken设计方法优化三角叶黄连愈伤组织增殖的最佳激素配比;考察不同培养基、外植体、温度、光照条件对三角叶黄连愈伤组织诱导的影响.结果:以茎尖为外植体愈伤组织诱导率最高,为12.67％,最佳培养条件为(15±2)℃,暗培养.2,4-D,KT是影响三角叶黄连愈伤组织形成的主要因素,其次为NAA.结论:三角叶黄连愈伤组织诱导的最适培养基为6,7-V +2,4-D0.5 mg·L-1+KT 2.0 mg·L-1,增殖的最适培养基为6,7-V +2,4-D 4.6 mg·L-1+KT3.8 mg·L-1+NAA2.4 mg·L-1.