短暂脑缺血对大鼠海马脑区锥体神经元外向整流氯通道功能的影响

目的研究短暂前脑缺血对大鼠海马CA1和CA3脑区锥体神经元外向整流氯通道功能的影响。方法采用膜片钳全细胞技术,在成年大鼠海马脑区锥体神经元上记录到可以被氯通道阻断剂DIDS阻断,具有外向整流特性的氯通道。结果 15min前脑缺血再灌注6h和24h后,海马CA1区锥体神经元氯通道电流持续性增强,而CA3区锥体神经元活动无明显改变。结论氯通道功能增强可能参与海马CA1区锥体神经元在脑缺血后的迟发性死亡过程,并且为治疗缺血性脑损伤提供了新的手段。     

柴胡疏肝散对肝郁证模型大鼠脑海马ERK及其磷酸化的影响

目的:研究柴胡疏肝散对肝郁证模型大鼠脑海马CA1、CA3、DG区ERK及其磷酸化免疫阳性神经元的影响。方法:将大鼠分为空白对照组、肝郁模型组、柴胡疏肝散组,运用模具束缚结合孤养的方法制备肝气郁结证候动物模型,采用免疫组化法检测大鼠脑海马CA1、CA3、DG区ERK及其磷酸化免疫阳性神经元的细胞数。结果:柴胡疏肝散可增高ERK1/2、P-ERK在海马CA3、DG区的阳性细胞数。结论:柴胡疏肝散具有抗肝郁作用,其机制可能与通过上调肝郁大鼠海马CA3、DG区ERK1/2、P-ERK信号通路的活动而起到保护受损神经元,改善大脑功能,缓解肝郁症状的作用。     

生脉饮与六味地黄丸改善慢性应激所致学习记忆障碍的作用研究

选用氢化可的松 (HC)慢性注射制备慢性应激致Wistar大鼠学习记忆障碍的动物模型。通过用Y 迷宫测定学习记忆成绩观察生脉饮与六味地黄丸合用对慢性应激所致学习记忆障碍模型鼠的作用 ,并用H .E染色法观察海马CA1区锥体神经元形态、数量变化以及免疫组织化学方法观察海马CA1区神经型一氧化氮合酶(nNOS)阳性神经元的数量变化来探讨其可能作用机制。结果表明 ,生脉饮与六味地黄丸合用能改善Wistar大鼠因慢性应激所致学习记忆障碍。其机制可能与其对海马CA1区锥体神经元 ,尤其是nNOS阳性神经元的保护作用有关。     

百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马、皮质显微结构的协同保护效应

目的:探讨百事乐胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马、皮质显微结构的保护作用。方法:将SD大鼠随机分为6组,即空白对照、抑郁模型、氟西汀(5.4 mg/kg)、百事乐胶囊高、中、低(2.88、1.44、0.72 g/kg)剂量组,采用慢性不可预见性温和应激的方法建立抑郁模型,于造模同时给药,连续21 d。采用新奇摄食实验、强迫游泳实验观察模型动物的行为学变化,Golgi-Cox染色观察大鼠皮质、海马病理结构的变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠摄食潜伏期、强迫游泳不动时间增长(P0.01),皮质区分子层、外粒层、外锥体层神经元丢失严重,外锥体层、内粒层、内锥体层的神经元排列呈混乱和无序状态;海马CA1、CA3、DG区神经元数目明显减少,核固缩,细胞质萎缩;氟西汀、百事乐胶囊高、中剂量能显著降低模型大鼠的摄食潜伏期、强迫游泳不动时间(P0.01或P0.05);氟西汀、百事乐胶囊高剂量可增加皮质区分子层、外粒层、外锥体层及海马CA1区神经元存活的数量,减少细胞核深染和固缩,并能促进外锥体层、内粒层、内锥体层神经元的有序排列、致密;同时氟西汀、百事乐胶囊高剂量可显著减少海马CA3、DG区神经元细胞黑色深染及胞体形态的畸变。结论:百事乐胶囊可通过协同保护海马、皮质的显微结构而实现其抗抑郁的作用。     

2型糖尿病大鼠前额叶皮质及海马神经元形态的改变研究

目的探讨2型糖尿病大鼠前额叶皮质及海马神经元形态的改变及其意义。方法利用链脲佐菌素加高脂喂养制作2型糖尿病大鼠模型,利用Golgi-cox染色观察模型大鼠前额叶皮质及海马CA1区神经元树突形态及树突棘密度。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠额叶皮质及海马CA1区神经元出现树突减少,树突棘密度降低。结论额叶皮质及海马神经元形态的改变是导致糖尿病患者出现神经系统功能障碍的形态学基础。     

海马CA1区缺血再灌注损伤的形态学改变及三七总皂苷的影响

目的 :探讨大鼠海马CA1区神经元缺血再灌注损伤的病理学改变及三七总皂苷 (PNS)的影响。方法 :线栓法制备大鼠左侧大脑中动脉阻断局灶性脑缺血模型。以临床神经症状缺损程度、海马CA1区组织学分级、海马CA1区神经元密度等为评价指标。结果 :三七总皂苷组神经症状明显减轻 ,海马CA1区组织学分级降低、神经元密度增加 ,与模型组间差异有显著性意义。结论 :三七总皂苷能明显减轻脑缺血再灌注引起的神经损伤症状及海马CA1区神经元损伤的程度。     

槐定碱对大鼠海马CA3区神经元超微结构的影响

目的观察槐定碱对大鼠脑电、行为的改变及其对海马CA3区神经元超微结构的影响.方法采用电生理学方法观察槐定碱对清醒大鼠自由活动时行为的影响,并记录脑电图;采用电镜观察给予槐定碱0.5、1.5、8 h后,大鼠海马CA3区神经元线粒体和细胞核超微结构的改变.结果对照组大鼠未见痫样脑电波型及痫性行为,海马CA3区神经元细胞超微结构正常.槐定碱组大鼠腹腔注射槐定碱(55 mg/kg)后,海马区出现痫样放电并伴有惊厥行为发作,在电镜下可见各时间点海马CA3区神经元不同程度线粒体嵴肿胀及轴突末梢变性等改变,以1.5 h组表现最为明显.结论槐定碱可诱发大鼠出现急性癫痫发作,并出现线粒体超微结构的损伤,其损伤早于细胞核的改变,提示线粒体的损伤可能是槐定碱引起神经元损伤的关键环节.     

三七皂苷Rg1对脑缺血后海马CA1和CA3区BDNF蛋白的干预

三七总皂苷及三七皂苷Rg1对脑缺血有肯定的保护作用[1-2]。但对于其作用机制却知之甚少。脑缺血损伤的重要部位位于大脑皮质和海马。许多研究发现,脑缺血时海马区域细胞对缺血缺氧的反应不一,CA1区神经元最为敏感,损伤最重;CA2和CA3区也有较为严重的神经损害。Arai[3]和Kokaia[4]等在一侧大脑中动脉阻塞(MCAO)动物模型上发现,双侧海马BDNF和TrkB mRNA表达均增加,而众多研究表明[5,6],BDNF参与脑缺血的损伤保护过程。那么三七皂苷Rg1对海马缺血缺氧损伤时CA1和CA3区BDNF蛋白有何影响,以及两者有无差异性,这是本实验着重探讨的…     

当归补血汤对局灶性脑缺血再灌注损伤后大鼠神经功能影响

目的:探讨当归补血汤对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法:雄性SD大鼠36只随机分为正常组、模型组、治疗组各12只。模型组和治疗组采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉栓塞缺血再灌注模型。治疗组术后连续15天以0.36g/mL浓度当归补血汤3.6g/kg灌胃,每日2次(早、晚各1次)。治疗10天后进行各组大鼠神经行为学测试,用Nissl染色法观察大鼠海马CA1区神经元的形态和数量。结果:与模型组比较,治疗组神经功能评分增高,海马CA1区神经元数量增加(P0.05)。结论:当归补血汤可改善脑缺血再灌注损伤大鼠的神经功能,减少大鼠海马CA1区神经元的死亡,对海马CA1区神经元具有保护作用。     

桃红四物汤对雄性SD大鼠脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元的作用研究

目的:探讨桃红四物汤对雄性SD大鼠脑缺血再灌注损伤海马CA1区神经元的作用。方法:采用改良后的新式线栓法建模,随机分为大脑中动脉阻塞再灌注组、正常组、桃红四物汤低、中、高剂量治疗组,每组各20只。治疗组连续7d灌胃治疗,每日两次,早、晚各一次;模型组和正常组正常喂养。自第8天,对各实验组大鼠进行神经功能评分并处死取脑,用Nissl染色法观察海马CA1区神经元的形态和数量。结果:与模型组比较,桃红四物汤治疗组的神经功能评分明显增加(P0.01);Nissl染色治疗组显示海马CA1区神经元数量明显增加,随给药剂量增加而增加(P0.01)。结论:脑缺血再灌注后,给予桃红四物汤能显著改善损伤大鼠的大脑神经功能,增加海马CA1区神经元数量,并且其治疗效果随桃红四物汤给药剂量的增加而增强。     

去大脑皮层血管痴呆模型的建立及评价

目的：建立血管性痴呆模型。方法：采用Wistar成年大鼠,去除大鼠脑左侧皮层血管建立模型。并结合行为学、神经组织病理学、AchE组化染色和ChHAT、BDNF、trkB免疫组化染色等方法对此模型进行了评价。结果：去除脑左侧皮层血管后,大鼠跳台及水迷官成绩显著下降。HE及Nissl染色观察到损伤侧皮质、海马CAI－CA4区的锥体细胞层及齿状回的颗粒细胞层细胞呈萎缩或呈空泡状的变性。大细胞基底核以及丘脑等处理细胞也呈萎缩变性。大鼠损伤侧皮质AchE阳性纤维分布稀疏,数量明显减少,海马CA1－CA4区 AchE阳性纤维都有不同程度的减少,CA1区减少最明显。大鼠皮质、海马BDNF、trKB表达降低,大细胞基底核AchE、ChAT、BDNF、trkB阳性神经抑数目减少,神经元明显萎缩。结论：去大鼠脑皮层血管痴呆模型,能充分模拟血管性痴呆的病理改变,且损害部位恒定,损及学习、记忆功能,实验结果重复性强,是研究血管性痴呆较理想的动物模型。     

脑通胶囊对VD大鼠海马NMDA受体 mRNA表达及锥体细胞的影响

目的:观察脑通胶囊对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆、海马N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体及锥体细胞的影响.方法:随机抽取大鼠19只作为假手术组,其余采用改良的四血管法(4-VO)制备VD模型并随机分为模型组、尼莫地平组( 12 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊高剂量组(1 200 mg· kg-1·d-1)、脑通胶囊中剂量组(600 mg·kg-1·d-1)、脑通胶囊低剂量组(300mg·kg-1·d-1).Morris水迷宫测定各组大鼠学习记忆能力,实时荧光定量PCR检测NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA的表达情况,光镜观察海马CA1区锥体细胞形态及数量变化.结果:与模型组比较,脑通胶囊高、中剂量组逃避潜伏期缩短(P＜0.01),穿越原平台次数增加(P＜0.01,P＜0.05),NMDA受体1亚基mRNA表达降低(P＜0.01),2B亚基mRNA表达升高(P＜0.01,P＜0.05);海马CA1区锥体细胞形态未见明显病变现象,锥体细胞数量增多,锥体细胞丢失比率减少.与尼莫地平组比较,脑通胶囊高、中剂量组穿越原平台次数增加(P＜0.01),NMDA受体1亚基mRNA相对表达量降低(P＜0.01),高剂量组NMDA受体2B亚基mRNA相对表达量增加(P＜0.05),CA1区锥体细胞增多(P＜0.01).结论:脑通胶囊可降低海马NMDA受体1亚基mRNA的表达,提高2B亚基mRNA的表达,减轻海马CA1区锥体细胞损伤,减少锥体细胞丢失比率,从而改善VD大鼠学习记忆能力,这可能是其治疗VD的作用机制之一.     

穴位埋线对衰老模型大鼠慢性应激下海马神经元结构的影响

目的:通过观察穴位埋线对衰老模型大鼠慢性应激下海马神经元结构的影响,探讨慢性应激对衰老机体的促衰老作用及穴位埋线的抗衰机制。方法:雄性SD大鼠随机分为空白组、衰老组、应激组、埋线组,每组12只。采用D-半乳糖溶液腹腔注射制作衰老模型,采用长期制动应激造成慢性应激,埋线组分别于"百会""肾俞""内关""肝俞"交替埋线8次,1次/周。HE染色,于光镜下对大鼠海马锥体细胞进行计数,并于电镜下观察海马神经元细胞结构的变化。结果:光镜下空白组大鼠海马锥体细胞排列整体密集,形状规则;衰老组大鼠海马锥体细胞排列较稀疏;应激组海马锥体细胞排列稀疏,形态不规则;埋线组大鼠海马锥体细胞排列较密集。衰老组、应激组大鼠海马锥体细胞数量明显少于空白组(P0.05,P0.01),应激组与衰老组相比,其海马锥体细胞数量减少更为显著(P0.01),而埋线组海马锥体细胞数量明显升高(与应激组比较P0.01)。电镜下观察,空白组神经元形态正常,衰老组神经元体积明显缩小,应激组神经元呈现极度不规则形态,埋线组的神经元异常形态得到明显改善。结论:衰老模型大鼠的海马神经元数量和结构呈现增龄性老化现象,慢性应激可加重对海马神经元的损害,加速脑衰老;穴位埋线可拮抗应激性衰老机体海马神经元的进一步损害,从而延缓脑衰老。     

加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA_1区神经营养因子-3表达的影响

目的探讨加味金匮肾气丸对糖尿病大鼠脑海马CA1区神经营养因子3（NT-3）表达的影响。方法腹腔内注射链脲佐菌素（STZ）制作糖尿病大鼠模型,造模后以免疫组化法观察加味金匮肾气丸对大鼠脑海马CA1区NT-3表达的影响。结果加味金匮肾气丸治疗组比糖尿病组大鼠脑海马CA1区NT-3表达增加。结论加味金匮肾气丸可以有效防治糖尿病大鼠脑海马CA1区神经元退行性变化。     

消郁安神胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的影响

目的 观察消郁安神胶囊对慢性应激抑郁模型大鼠海马神经元形态的影响.方法 对抑郁模型大鼠灌胃消郁安神胶囊,然后观察大鼠的空间学习记忆行为和海马神经元形态.结果 慢性应激抑郁模型大鼠空间学习记忆能力明显下降,还能使海马CA1区和CA3区锥体细胞层变薄,细胞排列紊乱、疏松,胞浆尼氏体减少,并且出现大量神经元缺失,药物组动物改善明显.结论 消郁安神胶囊能抵抗抑郁模型大鼠海马神经元的形态改变.     

电针对阿尔茨海默病模型大鼠海马形态学的影响

目的探讨阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马形态学的变化以及电针对其的影响。方法将40只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组。采用双侧海马一次性注射聚集态Aβ25-35制备AD大鼠模型,电针组选取双侧"肾俞"穴、双侧"内关"穴和"大椎"穴,选用2 Hz连续波,强度为1 mA,通电20 min,每日1次,每周6次,共治疗2周。治疗结束后,光镜下观察各组大鼠海马形态学的变化。结果模型组大鼠海马CA1区、CA3区锥体细胞数量较假手术组明显减少,残留的神经元排列松散不规则,多数细胞胞核固缩,核仁欠清晰,整个细胞深染,部分呈现出多齿形、月牙型等形态。电针组海马神经元损伤明显改善。结论电针对AD大鼠海马神经元有一定的保护作用。     

还脑益聪方提取物对不同月龄APP转基因小鼠行为学及其海马区线粒体超微结构的影响

目的:研究还脑益聪方提取物对不同月龄APP转基因小鼠行为学及其海马CA1区线粒体超微结构的影响,从能量代谢的角度探讨中药提取物治疗AD的部分作用机制。方法:选用3月龄APP695V717I转基因小鼠120只为痴呆模型,随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组、还脑益聪方提取物高剂量组、低剂量组,每组30只,并设正常对照组。采用Morris水迷宫及跳台实验观察试验动物的行为学;应用透射电镜观察模型脑海马区线粒体超微结构。结果:7,9月龄APP转基因模型小鼠Morris水迷宫试验中穿越原平台位置次数、游泳时间和路程均较转基因模型组显著增多(P<0.05,P<0.01)、跳台实验中的潜伏期均明显缩短(P<0.01),且随着病程的进展而有加重之势。还脑益聪方提取物能明显提高不同月龄转基因小鼠穿越原平台位置次数、游泳时间和路程(P<0.05,P<0.01),且明显延长跳台实验中的潜伏期(P<0.05,P<0.01)。7,9月龄APP转基因小鼠海马CA1区神经元线粒体均表现出线粒体膜破坏、溶解,内嵴大部分排列轻度紊乱,有的嵴内腔扩张,基质疏松,线粒体肿胀,且随病程进展而损坏加重;还脑益聪方提取物能改善不同月龄APP转基因小鼠海马CA1区线粒体超微结构与数量。结论:APP转基因小鼠AD模型学习记忆能力显著下降,且该模型海马CA1区神经元线粒体数量减少、结构损伤,且随病程进展而均显加剧;还脑益聪方提取物能够改善不同病程APP转基因小鼠的学习记忆能力,其可能与改善海马区神经元线粒体结构、增加线粒体数量而保护脑功能有关。     

耳针改善血管性痴呆大鼠记忆与nNOS表达的关系

目的 探讨耳针对血管性痴呆大鼠（VD）学习记忆的改善及与nNOS蛋白表达的关系。方法采用4－血管阻断的方法,建立大鼠VD模型,然后进行耳穴肾, 脑针刺治疗,用免疫组化法检测海马nNOS蛋白的变化,并用Nissl染色方法,结合图象分析统计海马神经元丢失比率;同时采用Y型迷宫,进行行为学检测,定量测定其学习记忆成绩,结果 耳针治疗后VD大鼠海马CA1区nNOS蛋白表达减少,海马CA1区神经元技失比率较VD模型组减少,与学习记忆成绩呈负相关。结论 耳针改善了VD大鼠学习记忆,这可能是针刺抑制脑缺血后nNOS的过量增加,达到对VD大鼠海马神经元的保护作用。