肢体缺血再灌注大鼠血浆肾上腺髓质素变化的实验研究

①目的探讨肾上腺髓质素（ADM）在大鼠肢体缺血再灌注后心肌损伤中的变化及其意义。②方法采用大鼠肢体缺血再灌注模型,将Wistar大鼠随机分为对照组、肢体缺血再灌注组（IR组）与CGRP8-37（ADM受体阻断剂）＋IR组,每组10只。分别测定各组动物血浆ADM、肌酸激酶-MB同工酶（CK—MB）、活性氧（ROS）及心肌组织中丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XOD）、超氧化物歧化酶（SOD）活性。③结果IR组与对照组比较,血浆ADM、CK—MB、ROS含量和心肌组织MDA、XOD含量升高,SOD含量降低（P〈0．05）,组织损伤加重;CGRP8-37＋IR组与IR组比较,各生化指标进一步加重（P〈0．05）。④结论大鼠LIR后心肌损伤可能与微循环障碍有关,ADM可能参与了损伤过程。     

肾上腺髓质素对肢体缺血再灌注大鼠心肌损伤的影响

目的:探讨外源性肾上腺髓质素( ADM)对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后心肌损伤的防治作用及其机制.方法:30只Wistar大鼠随机分为对照组(Control组)、肢体缺血再灌注组(LIR组)和ADM+ LIR组(ADM组),每组10只.采用放射免疫方法测定大鼠血浆和心肌组织中内皮素-1(ET-1)含量的变化;比色法测...     

肾上腺髓质素、内皮素-1对大鼠肢体缺血再灌注致心肌损伤的影响

目的 观察大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肾上腺髓质素(ADM)与内皮素-1(ET-1)的变化,探讨ADM/ET-1的平衡在LIR致心肌损伤中的作用.方法 在大鼠LIR损伤模型上,应用受体阻断剂进行干预,将Wistar大鼠随机分成对照组(Control组)、肢体缺血再灌注组(LIR组)、CGRP8-37+LIR组(CGRP8-37组)和BQ123+LIR组(BQ123组).采用放射免疫方法测定血浆和心肌组织ADM、ET-1含量的变化;比色法测定血浆活性氧(ROS),心肌组织丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量的变化;心肌酶学检测.结果 大鼠LIR后,血浆和心肌组织ADM、ET-1含量较对照组均明显升高,ADM/ET-1降低(P＜0.05),血浆ROS、心肌组织MDA、XOD含量明显升高,SOD、GSH-PX含量降低(P＜0.05);心肌酶升高.CGRP8-37组,血浆和心肌组织ADM/ET-1较LIR组进一步降低,心肌损伤加重.BQ123组,血浆和心肌组织ADM/ET-1较LIR组升高,心肌损伤减轻.结论 ADM、ET-1增高可能是大鼠LIR后代偿性自身保护机制之一,ADM/ET-1的失衡参与了LIR后心肌损伤的病理生理过程.     

肾上腺髓质素在大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用研究

目的：探讨肾上腺髓质素（ADM）对大鼠肾缺血再灌注（IR）损伤的作用，并对其可能的机制进行初步研究。方法：采用右肾切除。左肾肾动脉夹闭50min/再灌注24h的动物模型，将40只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组（n=8)，肾IR组（n=8)，ADM预防组（n=24，组内又按给药剂量不同分为0．05nmol/kg ADM组，0．1nmol/kg ADM组和1．0nmol/kg ADM组，每组n=8)，观察肾组织中丙二醛（MDA）含量，总抗氧化能力（TAOC）和总超氧化物歧化酶（T－SOD），Mn-SOD,Cu-Zn-SOD活力和血肌酐（Cr)，尿素氮（BUN）含量以及组织形态学改变。结果：与假手术组相比，肾IR组MDA，Cr和BUN升高，组织学损伤较重，TAOC，T－SOD，Mn-SOD和Cu-Zn-SOD活力下降（P＜0．01），肾IR前给予ADM则量依赖性逆转了上述病理改变（P＜0．05），结论：ADM可能经提高内源性抗氧化能力，尤其是SODI知力减轻肾IR。     

新生大鼠缺氧缺血再灌注脑损伤肾上腺髓质素表达的研究

目的:探讨新生大鼠缺氧缺血再灌注脑损伤(hy-poxic-ischemic reperfusion brain damage,HIRBD)后不同时间脑组织肾上腺髓质素(Adrenomedullin,AM)mRNA、AM及外周血血浆AM水平变化规律。方法:将42只健康7 d龄SD实验大鼠随机分为正常对照组、假手术组、HIRBD后0 h、6h、12 h、24 h、48 h组,每组6只,按时剖杀各组实验大鼠,断头取血及双侧脑组织,采用半定量RT-PCR法测定脑组织AM mRNA,酶联免疫吸附法测定脑组织和血浆AM水平。结果:①HIRBD各组脑组织AM mRNA、AM和血浆AM水平显著性增高,与对照组比较有统计学意义(P均<0.05),高峰在6~24 h,24 h后开始下降。②脑组织AM mRNA水平和脑组织AM水平呈正相关(r=0.75,P<0.05)。③外周血血浆AM水平和脑组织AM水平呈正相关(r=0.78,P<0.05)。结论:缺氧缺血再灌注可诱导新生大鼠脑组织AM基因表达和转录水平的增高,并具有一定的时间依赖性;新生大鼠HIRBD时脑组织AM基因表达和转录水平的增高可能是外周血血浆AM增高的主要原因。     

肾上腺髓质素对离体灌流大鼠心脏缺血—再灌注损伤的保护作用

肾上腺髓质素（ＡｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎＡＭ）是从人肾上腺嗜铬细胞中分离的一种降压多肽。本工作利用离体灌流的大鼠心脏模型，观察了ＡＭ的心脏保护效应。再灌注时应用ＡＭ（１０￣（－７）ｍｏｌ／Ｌ）治疗明显提高心肌对缺氧的耐受性，减轻再灌注损伤。冠脉流量恢复到正常水平，而心肌蛋白、ＬＤＨ漏出，心肌脂质过氧化形成和心肌钙含量的升高分别被抑制。结果表明，ＡＭ作为内源性抗损伤物质可以有效地防治心肌缺血──再灌注损伤。     

牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注后肺损伤的影响

（1）目的 观察牛磺酸对肢体缺血再灌注（IR）后肺损伤的影响。（2）方法 实验采用大鼠肢体缺血再灌注损伤模型，将Wistar大鼠随机分3组，即：对照组(control，单纯缺血再灌组（IR），牛磺酸＋缺血再灌组（Tau IR)，分别测定血浆及肺组织中与自由基有关物质的含量。（3）结果 口服牛磺酸可有效地减少胞浆酶的漏出，增加自由基清除酶的活性，抑制组织脂质过氧化的发生，减轻组织水肿及中性粒细胞的聚集。（4）结论 牛磺酸对大鼠肢体缺血再灌注后继发的肺损伤具有保护作用，其机制之一与其抗氧化自由基和细胞保护作用有关。     

降钙素基因相关肽受体对大鼠肺缺血再灌注损伤中核因子-κb表达的影响

目的使用降钙素基因相关肽(CGRP)和CGRP受体拮抗剂CGRP8-37研究CGRP受体对大鼠肺缺血再灌注后肺核因子-κb(NF-κb)表达的影响。方法将32只成年健康大鼠随机分为4组:假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)、CGRP8-37预处理的缺血再灌注组(CGRP8-37组)、CGRP预处理的缺血再灌注组(CGRP组)。再灌注末抽取动脉血进行血气分析,观察动脉血氧分压(PaO2)及肺泡动脉氧分压差(A-aDO2)的变化,同时取肺组织以RT-PCR法检测NF-κb mRNA的表达,并用光学显微镜观察再灌注后肺组织病理学变化。结果与假手术组比,缺血再灌注降低PaO2,增加A-aDO2,上调NF-κb mRNA的表达(P<0.05),加重肺的组织病理损伤;与IR组比较,CGRP预处理可改善肺的气体交换功能,降低NF-κb mRNA的表达(P<0.05),同时减轻缺血再灌注引起的病理学损伤;CGRP8-37预处理的作用则相反。结论 CGRP受体在肺缺血再灌注损伤中可能通过下调NF-κb而发挥保护作用。     

肾上腺髓质素对大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织的保护作用

目的探讨肾上腺髓质素与脑缺血再灌注损伤的关系。方法采用栓线法制成大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型，阻断血流2h后进行再灌注。应用免痘组织化学染色法拴测不同时间段大鼠局灶性脑缺血再灌注后肾上腺髓质素的表达情况，并进行动态观察。结果正常大鼠脑内即有肾上腺髓质表达，假手术后肾上腺髓质素表达略有增加，但与正常对照组相比无明显差异，P〉0．05；大鼠脑缺血再灌注后肾上腺髓质素免疫阳性细胞增多，与正常对照组及假手术组相比差异显著，均P＜0．05；大鼠脑缺血再灌注后缺血侧既缺血对侧肾上腺髓质素免疫阳性知胞均增多，但以缺血侧区域增多最为明显，P〈0．05。动态观察发现，脑缺血再灌注2h后，肾上腺髓质素免痘阳性细胞即增多，缺血再灌注6h迭高峰，至1周左右仍明显增多。结论脑缺血再灌注后肾上腺髓质表达增强。     

降钙素基因相关肽在哮喘中的作用

目的 利用大鼠哮喘模型揭示降钙素基因相关肽（CGRP）及其受体拮抗剂CGRP（8-37）在哮喘发病机制中的作用。方法 雄性SD大鼠随机分为哮喘组、干预组和对照组,每组8只,给予腹腔注射致敏原后连续激发7天致哮喘发作,其中干预组于激发前30min腹腔注射CGRP（8-37）,观察大鼠肺部组织学变化,免疫组化SABC法观察其CGRP水平变化。结果 干预组和对照组大鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数明显低于哮喘组（P〈0．01）;免疫组化显示,哮喘组CGRP阳性细胞占气道上皮细胞的百分比显著高于干预组和对照组（P〈0．01）;哮喘组大鼠肺组织内CGRP染色灰度明显高于干预组和对照组。结论 CGRP在哮喘的发病过程中起重要作用,CGRP（8-37）可减轻哮喘大鼠气道炎症及高反应性。     

缺血预适血减轻大鼠后肢缺血再灌注后肺损伤的实验研究

目的 探讨缺血预适应（IPC）对大鼠双侧后肢缺血再灌注（I／R）后肺损伤的影响及意义。方法 通过阻断肾下腹主动脉的方法建立双侧后肢I／R损伤模型。60只大鼠随机分为4组：假手术组（Ⅰ组，11：6）、缺血组（Ⅱ组，11=6）、I／R组（m组，n=24）、IPC＋I／R组（Ⅳ组，Ⅱ=24）。Ⅱ组在缺血4h末，Ⅲ组、Ⅳ组缺血4h并分别于再灌注后4、12、24和48h留取标本。观察肺组织形态学、湿／干重比、丙二醛（MDA）及髓过氧化物酶（MPO）的变化。原位杂交和逆转录多聚酶链反应（RT～PCR）方法检测肺组织中胞同粘附分子（I-CAM）-1的mRNA表达，Western蛋白印迹检测ICAIM-1。结果 Ⅲ组中，PMN计数、肺组织的湿／干重比、MDA、MPO显著增加（P〈0．01）、ICAM-1 mRNA反蛋白产物表达明显增强，与Ⅰ组或Ⅱ组比较差异显著（P〈0.01）。经IPC处理的Ⅳ组中上述各项指标明显减少，与Ⅲ组比较差异显著（P〈0．01）。结论 IPC减轻大鼠双侧后肢缺血再灌注后肺损伤，其作用机制可能是通过抑制ICAM-1介导的中性粒细胞在肺组织内的粘附、浸润而实现的。     

预适应对大鼠肢体缺血再灌注后骨骼肌损伤的影响

①目的观察大鼠肢体缺血再灌注（LIR）后骨骼肌损伤及缺血预适应（IPC）保护作用,并探讨IPC的可能保护机制。②方法实验用雄性Wistar大鼠24只,随机分为对照（Control）组、缺血再灌注（IR）纽和缺血预适应（IPC＋IR）组,每组8只。分别测定血浆乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、血栓素B2（TXB2）、6-酮-前列腺素（6-Keto—PGF1α）的含量及TXB2／6-Keto—PGF1α比值的变化;测定骨骼肌组织中ROS、MDA、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、还原型谷胱甘肽（GSH）、Ca^2＋、Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-M^2＋-ATP酶的变化及DNA双链百分率（Rat io of DNA Chain）的变化。③结果IPC＋IR组血浆LDH、CK、TXB2／6-Keto—PGF1α比值及骨骼肌组织中ROS、MDA、Ca^2＋明显低于IR组,而骨骼肌组织中GSH—PX、GSH、Na^＋-K^＋-ATP酶、Ca^2＋-Mg^2＋-ATP酶及DNA双链百分率明显高于IR组。④结论IPC减轻了LIR后骨骼肌的损伤。抑制自由基生成和提高自由基清除酶的活性,降低钙超载及改善TXA2／PGl2的平衡关系可能是IPC抗损伤的机制。     

缺血预处理对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨缺血预处理 (IP)对兔肺缺血 /再灌注 (I/ R)损伤的保护作用。 方法 :将 30只新西兰白兔随机分为对照组 (C组 )、缺血 /再灌注组 (I/ R组 )和缺血预处理组 (IP组 ) ,每组 10只。对比观察各组同侧肺静脉血氧分压 (Pa O2 )、肺湿 /干重比、血清及肺组织超氧化物歧化酶 (SOD)活性、丙二醛 (MDA)、髓过氧化物酶 (MPO)含量和肺组织形态学变化。结果:再灌注后 I/ R组 Pa O2 呈进行性下降 ,尤以再灌注 30 min内明显 ;IP组 Pa O2 、SOD活性和 MPO含量均优于 I/ R组 (P <0 .0 5 ) ,肺湿 /干重比和 MDA含量均低于 I/ R组 (P <0 .0 1) 。结论 :肺的缺血预处理可通过减轻肺毛细血管的通透性 ,提高机体抗氧化自由基的能力 ,减轻 I/ R损伤 ,起到保护肺脏的作用。     

大鼠创伤性脑损伤后降钙素基因相关肽对骨折愈合的影响

目的通过侧方液压脑损伤骨折模型研究脑损伤后大鼠血清中降钙素基因相关肽（calcitoningene—related peptide,CGRP）的变化及对骨折愈合的影响。方法SD大鼠随机分成三组,空白对照组10只（A组,n=10）,单纯骨折组48只（B组,n=48）,脑损伤骨折组48只（C组,n=48）,通过侧方液压脑损伤及开放骨折建立模型,损伤后适时取SD大鼠血清及骨折标本,通过放射免疫荧光、免疫组化、X片、骨折直径及生物特性测量骨痂直径、骨痂中阳性细胞的数量表达及抗应力的大小等,了解血清中CGRP的含量、骨折愈合情况。结果伤后各组血清中CGRP的含量：从伤后CGRP水平的变化看,脑损伤骨折组CGRP含量明显升高,第7天达高峰（196．73±54．98）pg／ml,随后逐渐下降,单纯骨折组CGRP含量也升高,第5天达高峰（74．70±20．76）pg／ml,随后下降;脑损伤骨折组中CGRP含量明显高于单纯骨折组,且高峰时间长,差异有统计学意义（P〈0．05）;脑损伤骨折组骨痂无论在影像学、直径大小及骨痂抗应力均大于单纯骨折组,免疫组化发现脑损伤骨折组骨痂中阳性细胞明显增多,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论脑损伤骨折大鼠骨折愈合快于单纯骨折,推测脑损伤血清中CGRP可促进骨折愈合。     

缺血预处理对肢体缺血再灌注时炎性介质的影响

目的:观察缺血预处理对肢体缺血再灌注损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法:32例胫腓骨切开复位内固定患者被随机分为常规治疗组及缺血预处理组,每组16例。两组分别于再灌注前(手术结束)及再灌注后(手术结束后)30 min、2 h采集外周静脉血标本4 mL检测血小板计数及IL-8、NO、TXB2、6-Keto-PGFlα含量。结果:与再灌注前比较,两组在再灌注后2 h血小板计数及NO含量明显降低(P<0.05,P<0.01),血浆IL-8、TXB2和T/K明显升高(P<0.05,P<0.01);与常规治疗组比较,缺血预处理组相同时相点血小板计数及NO含量明显升高(P<0.05,P<0.01),血浆IL-8、TXB2和T/K明显降低(P<0.05)。结论:肢体缺血再灌注后出现的血小板活化和炎性介质浸润是再灌注损伤的重要机制,缺血预处理能减轻缺血再灌注损伤的程度。     

大鼠肢体缺血再灌注致肺损伤及高渗盐水的肺保护作用

目的:观察大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后肺损伤的发生以及静脉输注高渗盐水(HS)的肺保护作用。方法:将SD大鼠24只随机分为3组:正常对照组(C组)、模型对照组(M组)、模型+高渗盐水处理组(H组),分别行肺的病理形态学观察;批量检测肺组织湿重/干重比值(W/D)、肿瘤坏死因子-α(TNFα-)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性、丙二醛(MDA)含量。结果:M组出现肺间质水肿及炎细胞浸润等病理改变,W/D、TNF-α、MPO和MDA均明显高于其他两组(P<0.05),而H组与C组间比较无显著性差异(P>0.05)。结论:大鼠肢体缺血再灌注后发生了肺损伤,静脉输注高渗盐水有一定的肺保护作用。     

抑肽酶对犬肺移植中缺血/再灌注损伤的作用

目的: 研究抑肽酶(aprotinin)在犬肺移植手术中对肺组织缺血/再灌注损伤的作用.方法: 20只成年雄性犬随机分为两组,每组供体和受体各5只.建立肺移植动物模型.I组(抑肽酶组): 术中受体给予aprotinin静滴(25 u/kg),II组(对照组): 给予等容积50 g/L葡萄糖溶液.恢复血流灌注1 h后,取移植肺组织为标本,检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活力、一氧化氮(NO)含量、肺组织含水量并做HE染色光镜下观察病理变化.结果: aprotinin组的肺组织含水量(73.65±4.31)%较对照组(81.33±3.67)%显著降低(P＜0.05).aprotinin组肺组织中髓过氧化物酶活性(0.21±0.05 ΔOD/ min·g)显著(P＜0.05)低于对照组(0.37±0.10 ΔOD/min·g).抑肽酶组丙二醛每毫克蛋白含量(0.17±0.004)nmol显著低于对照组(0.29±0.01)nmol.aprotinin组一氧化氮每毫克蛋白含量(12.60±8.73) nmol显著(P＜0.05)低于对照组(35.10±13.73) nmol(P＜0.05).病理切片观察显示缺血/再灌注后的肺组织呈较为严重的白细胞浸润及肺水肿形成,而aprotinin组的病变程度较对照组轻微.结论: 在肺移植术中使用aprotinin对肺的缺血/再灌注损伤有保护作用.