结肠癌p16基因缺失与突变的研究

目的：探讨p16抑癌基因外显子2缺失，突变与结肠癌发生，发展的关系。方法：采用聚合酶链反应（PCR），聚合酶链反应一单链构象多态性（PCR－SSCP）分析方法检测结肠癌中p16基因外显子2的缺失，突变，结果：30例结肠癌样本中，高分化及低分化腺部各1例PCR扩增无扩增产物，可能为p16基因缺失，其余28例结肠癌，正常组织均有产物出现，SSCP分析，30例结肠癌中未见异常泳动带，无P16基因突变，结论：P16基因外显子2缺失可能很少参与结肠癌的发生发展。而P16基因突变可能与结肠癌发生无关。     

应用PCR-SSCP银染技术分析胃癌p53基因的点突变

目的 分析胃癌中p53基因第5－8外显子点突变的发生及其意义。方法 应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（PCR－SSCP）和银染技术，对40例胃良性疾病和30例胃癌标本中p53基因第5－8外显子的点突变情况进行检测。结果 40例胃良性疾病均无点突变发生，30例胃癌中有12例发生p53基因的点突变，突变率为40．00％（12／30）。结论 p53基因突变与胃癌的发生密切相关；PCR－SSCP银染技术不仅灵敏安全，而且简便、快速、重复性好，可用于临床的基因诊断。     

葡萄胎中CDKN2A基因纯合性缺失和突变的研究

目的：探讨细胞周期依赖性激酶抑制基因（CDKN2A基因，包括p16^INK4a和p14^ARF基因）外显子1、2的纯合性缺失和突变情况与葡萄胎发生的关系。方法：对38例葡萄胎和30例早孕绒毛的新鲜组织标本进行基因组DNA抽提、PCR扩增．而后应用变性高效液相色谱分析（DHPLC）的方法对扩增产物进行突变检测。结果：1）38例葡萄胎组织样本中．5例发生p16^INK4a基因外显子1的纯合性缺失．其纯合性缺失率为13．16％；而30例早孕绒毛组织标本中．未发现p16^INK4a基因外显子1的纯合性缺失。p16^INK4a外显子1的纯合性缺失率在早孕绒毛组织和葡萄胎组织中差异具有统计学意义（P=0．036）；2）38例葡萄胎组织样本和30例早孕绒毛组织样本中，无一例发生p14^ARF基因外显子1和p16^INK4a外显子2的纯合性缺失：3）经DHPLC检测，38例葡萄胎组织样本和30例早孕绒毛组织样本中，p16^INK4a基因外显子1、2和p14^ARF基因外显子1扩增产物的所有谱图均为单一峰型，未检测到任何位点的突变发生。结论：p16^INK4a基因外显子1的纯合性缺失与葡萄胎的发生具有一定的相关性；在葡萄胎中，CDKN2A基因的遗传变异主要是由于此基因的纯合性缺失造成的，突变可能不是此基因变异的主要形式。     

人肺癌组织中nm23-H_1基因突变研究

目的　探讨癌转移抑制基因nm2 3 H1 在人肺癌中的突变情况 ,及其与肺癌发生、发展及转移的关系。方法　采用聚合酶链反应—单链构象多态性技术 (PCR SSCP) ,对手术切除的 45例肺癌组织和 7例正常肺组织的nm2 3 H1 基因的 5个外显子进行突变分析。结果　在所检测的肺组织中 ,未发现nm2 3 H1 基因纯合缺失。SSCP分析发现一例肺癌组织nm2 3 H1 基因外显子 1单链DNA迁移率发生改变。此例患者为晚期肺鳞癌 ,伴有纵隔淋巴结转移和恶性胸水。结论　本实验所检测的nm2 3 H1 基因外显子部分的基因突变在肺癌中发生率低 ,nm2 3 H1 基因突变可能与肺癌进展及转移有关     

胃癌中 p16基因表达、缺失及突变的检测

目的研究p16基因表达与胃癌发生发展、侵袭、转移的关系及p16基因外显子2缺失、突变在胃癌发生中的地位。方法运用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶(S-P)免疫组织化学方法检测胃癌及癌前病变组织中p16蛋白的表达;采用聚合酶链反应(PCR)、聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析方法检测胃癌中p16基因外显子2的缺失、突变。结果(1)p16蛋白表达阳性率①正常胃粘膜96.25％(77／80),不典型增生92.00％(45／50),胃癌47.54％(58／122),胃癌组中p16蛋白表达低于正常胃粘膜及不典型增生（P<0.05）;②粘液腺癌(10.00％,1／10)低于低分化腺癌(51.22％,21／41)、未分化癌(57.69％,15／26)和印戒细胞癌(62.50％,10／16)（P<0.05）;③30例原发癌和淋巴结转移癌配对标本中p16蛋白表达阳性率原发癌46.67％（14/30）,淋巴结转移癌16.67％(5／30),淋巴结转移癌低于原发癌(P<0.05);(2)p16基因缺失与突变分析25例胃癌中检测出缺失5例,但未发现突变。结论①p16蛋白表达缺失与胃癌的发生、组织学类型及淋巴结转移有关。②p16基因外显子2缺失可能与胃癌发生有关;而p16基因突变可能与胃癌发生无关。     

p53基因在甲状腺癌中的突变研究

目的:为探讨p53基因突变与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系.方法:应用PCR单链构象多态性(SSCP)分析技术,对p53基因第7,8外显子突变进行了检测和分析.结果:在37例甲状腺癌中有11例在第7.8外显子发生突变,突变率为29.9%.p53基因突变在复发的患者中显著高于未复发的患者;p53基因突变与转移、组织学类型和分化状况无显著差异.结论:p53基因的突变可能与甲状腺癌患者预后有关.     

PCR-SSCP技术检测原发性胃腺癌石蜡标本p53第七外显子基因突变的初步研究

目的 :研究PCR SSCP技术检测原发性胃腺癌石蜡标本中p53第 7外显子基因突变 ,探讨其与肿瘤发展的关系。方法 :应用PCR SSCP(聚合酶链反应 单链构象多态性 )技术检测 37例原发性胃腺癌标本中p53第 7外显子的基因突变 ,同时应用免疫组织化学技术检测p53蛋白的表达。探讨其与肿瘤发展的关系。结果 :37例原发性胃腺癌标本中 ,p53第 7外显子基因突变率为 19% (7/ 37) ,7例发生突变的标本 ,其p53蛋白表达亦呈阳性 ,低分化腺癌突变率高于高、中分化腺癌 (P =0 0 0 0 6 ) ,发生淋巴结转移组突变率高于未发生淋巴结转移组 (P =0 0 0 0 3)。结论 :临床检测胃腺癌原发灶中是否存在p53第 7外显子基因突变 ,有助于识别高度恶性的胃腺癌。     

p53基因在甲状腺癌中的突变研究

目的：为探讨p53基因突变与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系。方法：应用PCR单链构象多态性（SSCP）分析技术,对p53基因第7,8外显子突变进行了检测和分析。结果：在37例甲状腺癌中有11例在第7.8外显子发生突变,突变率为29.9％。p53基因突变在复发的患者中显著高于未复发的患者;p53基因突变与转移、组织学类型和分化状况无显著差异。结论：p53基因的突变可能与甲状腺癌患者预后有关。     

脑胶质瘤 p16基因的纯合性缺失、高甲基化、突变及表达

目的：研究p16基因在脑胶质瘤中的纯合性缺失、高甲基化和突变等结构变化及其与表达之间的关系。方法：应用聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR)和PCR甲基化银染分析技术（PCR-methylation assay with silver staining,PCR-MASS)对50例脑胶质瘤标本进行了p16基因纯合性缺失和甲基化检测；用PCR－SSCP和DNA测序技术进行了p16基因突变分析，用免疫组化检测了p16蛋白的表达。结果：50例脑胶质瘤中23例p16蛋白表达阳性，27例表达阴性，表达缺失率54％；9例（18％）纯合性缺失、7例（14％）高甲基化、2例（4％）突变。结论：p16基因在脑胶质瘤中有多种形式的结构异常，其结构的变化使p16蛋白表达障碍。p16基因纯合性缺失和高甲基化是基因失活的重要机制，在脑胶质瘤的发生、发展中起重要作用。     

p16基因突变与子宫内膜癌关系的研究

 目的　研究 p16基因的突变在子宫内膜癌发生、发展中的作用。 方法　应用PCR SSCP及DNA测序对 4 0例子宫内膜癌中 p16基因第二外显子缺失及序列改变进行研究。 结果　 4 0例子宫内膜癌中 12例存在 p16基因的第二外显子 5 2 2bp的纯合缺失 ,10例存在点突变 (突变位点相同 ) ,突变位点之一为第 12 6密码子硷基GTC→AAT(错义突变 ) ,另一突变位点为第 12 7密码子GCA→GCG(同义突变 ) ,缺失及突变共占 5 5 %。结论　p16基因的突变与子宫内膜癌的发生有明显的相关性。     

乳腺癌中P16基因缺失与突变的研究

背景与目的:了解乳腺癌与p16基因的关系.材料与方法:采用PCR和DNA测序方法,对33例乳腺癌患者肿瘤组织标本的p16基因进行检测,研究p16基因的缺失和突变情况.结果:所有标本均未检出纯合缺失,10例标本进行了外显子2的序列测定,也未发现点突变.结论:p166基因的纯合缺失和点突变可能与乳腺癌的发生无关.     

抑癌基因FHIT第8和第5外显子在原发性肝癌中纯合性缺失与点突变的研究

目的　对 2 0例原发性肝细胞肝癌 (HCC)的抑癌基因 FHIT外显子 5、外显子 8的纯合性缺失和点突变进行检测。方法　收集 HCC手术标本 ,提取癌细胞 DNA,采用 PCR方法研究 FHIT外显子 5、外显子 8的纯合性缺失 ;使用 PCR- SSCP方法研究 FHIT外显子 5和外显子 8的点突变。结果　发现在 2 0例 HCC中外显子 5的纯合性缺失率为 10 .0 (2 / 2 0 ) ,外显子 8的纯合性缺失率为 30 .0 % (6 / 2 0 ) ;有 1例外显子 5和外显子 8均缺失 ;FHIT的异常率为 35 .0 % (7/ 2 0 )。在被检的肿瘤组织细胞中 ,未发现 FHIT外显子 5和外显子 8存在点突变。在被检的正常细胞中未发现 FHIT缺失和点突变的情况。结论　 FHIT的缺失只发生在 HCC的肿瘤细胞中。在 HCC中 ,外显子 (尤其是外显子 8)的纯合性缺失是 FHIT基因失活的重要方式之一。点突变可能不是 HCC中 FHIT失活的主要方式     

小细胞肺癌组织中p53基因改变的研究

为探讨小细胞肺癌（ＳＣＬＣ）发生的分子机制，应用免疫组化和聚合酶链反应—单链构象多态性分析的方法，对１４例ＳＣＬＣ组织进行ｐ５３基因突变研究。结果显示，有９例出现ｐ５３蛋白阳性，阳性率为６４．３％（９／１４）。ｐ５３基因第５，６，７，８外显子突变率分别为２１．４％（３／１４），１４．３％（２／１４），１４．３％（２／１４），７．１％（１／１４），总突变率为５７．１％（８／１４）。结果表明，ＳＣＬＣ组织中存在较高的ｐ５３基因突变率，故ｐ５３基因可能是人类肺癌发生的关键基因。     

p16 mutations/deletions are not frequent events in prostate cancer.

Cyclin-dependent kinase-4 inhibitor gene (p16INK4) has recently been mapped to chromosome 9p21. Homozygous deletions of this gene have been found at high frequency in cell lines derived from different types of tumours. These findings suggested therefore, that p16INK4 is a tumour-suppressor gene involved in a wide variety of human cancers. To investigate the frequency of p16INK mutations/deletions in prostate cancer, we screened 20 primary prostate tumours and four established cell lines by polymerase chain reaction (PCR) and single-strand conformation polymorphism (SSCP) analysis for exon 1 and exon 2. In contrast to most previous reports, no homozygous deletions were found in prostate cancer cell lines, but one cell line (DU145) has revealed to a mutation at codon 76. Only two SSCP shifts were detected in primary tumours: one of them corresponds to a mutation at codon 55 and the other one probably corresponds to a polymorphism. These data suggest that mutation of the p16INK4 gene is not a frequent genetic alteration implicated in prostate cancer development.     

胃癌中p16基因缺失与突变的研究

目的：探讨p16基因外显子2的缺失和突变与胃癌发生发展的关系.方法：应用新鲜组织标本基因组DNA抽提、PCR-SSCP分析的方法,对30例胃癌及癌旁组织中p16基因外显子2的缺失和突变进行检测.结果：胃癌组织样本中p16基因外显子2的缺失率为10.00%,突变率为10.00%,两者之和为20.00%,癌旁组织样本中未发现缺失和突变,统计学分析有显著性差异（P〈0.01）.结论：p16基因外显子2的缺失和突变与胃癌的发生具有一定的相关性.     

原发性胃癌p16INK4a基因缺失和突变的研究

目的探讨p16INK4a基因缺失和突变在胃癌发病机制中所起的作用。方法采用多重PCR、PCR-SSCP和DNA测序对62例胃癌、癌旁组织及10例正常胃黏膜标本中p16INK4a基因纯合性缺失和突变进行检测。结果62例胃癌中发现p16INK4a基因第一外显子和第三外显子各有2例纯合性缺失,缺失率6.5%(4/62),PCR-SS-CP和DNA测序发现1例p16INK4a基因第一内含子区碱基插入,突变率1.6%(1/62),癌旁和正常胃黏膜均未发现缺失和突变。结论在原发性胃癌中,p16INK4a基因纯合性缺失率很低、突变罕见。     

散发性乳腺癌患者BRCA1基因突变分析

目的 :探讨BRCA1基因突变在散发性乳腺癌发生和发展中的作用及在乳腺癌临床诊断和治疗中的应用前景。方法 :应用PCR SSCP和直接测序法检测 3 0例散发性乳腺癌和 15例正常乳腺组织中BR CA1基因外显子 2、11和 2 0的突变情况。结果 :15例正常乳腺组织在 3个外显子上都未显示电泳异常 ,3 0例乳腺癌中有 6例在外显子 2上显示电泳条带异常 ,其中 4例经测序证实有突变 ,1例在外显子 2上 ,3例在内含子拼接区。BRCA1基因突变率在初诊年龄、临床分期和肿瘤体积上差异无统计学意义 ,但与肿瘤转移密切相关。结论 :BRCA1基因突变与散发性乳腺癌的发生和发展密切相关 ,该基因突变筛查可作为一种预后指标。     

大肠癌MTS基因突变和p16蛋白表达

[目的]分析大肠癌MTS基因突变与p16蛋白表达的关系。[方法]应用PCR-SSCP技术及LSAB免疫组织化学法同时检测 135例大肠癌MTS基因的突变和其基因产物(p16蛋白)的表达情 况。[结果]135例大肠癌MTS基因的突变率为4.44％,与正常粘 膜组织相比差异并无显著性,p16蛋白阳性率为59.25％,与 正常粘膜组织相比有显著性差异(P<0.05)。[结论]大肠癌极少 发生MTS基因突变,但有较高的p16蛋白表达下调。MTS基因表 达障碍可能有另外原因。