DIDS对Bcl-2/Bax在staurosporine诱导心肌细胞凋亡中表达的影响

目的探讨氯离子通道阻断剂DIDS(4,4′-diisothiocy-ano-2,2′-stilbene-disulfonic acid)对staurosporine(STS)诱导心肌细胞凋亡的调节蛋白Bcl-2/Bax表达的影响。方法在STS诱导心肌细胞凋亡模型上,观察DIDS对心肌细胞存活率、caspase-3活性、Bcl-2/Bax蛋白表达水平及Bax细胞内分布的影响。实验分组:对照组、STS组、DIDS组。结果与STS组比较,DIDS能够明显抑制STS诱导的心肌细胞凋亡发生,心肌细胞存活率增加,caspase-3活性水平降低(P<0.01)。对照组、STS组和DIDS组在全细胞水平上Bcl-2、Bax表达差异无显著性(P>0.01),在亚细胞水平上发现STS组有明显的Bax蛋白从胞质向线粒体转位,DIDS可以抑制STS诱导的Bax线粒体转位。结论DIDS抑制心肌细胞凋亡可能与抑制促凋亡分子Bax由胞质向线粒体转位有关。     

坤泰胶囊对卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的：观察坤泰胶囊对卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax的影响。方法：建立卵巢早衰小鼠模型,造模成功后随机分为正常组、模型组、戊酸雌二醇片组、坤泰胶囊组。正常组、模型组给予生理盐水,戊酸雌二醇片组和坤泰胶囊组均以0.2 mL/10 g的体积灌胃给予相应药物。实验末,取卵巢、子宫称重,计算脏器指数,并以放免法和免疫组化法分别检测小鼠血清E₂、FSH的水平和卵巢组织Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果：坤泰胶囊组小鼠卵巢质量比模型组明显增加,卵巢指数与模型组相比差异具有显著性（P<0.05）;坤泰胶囊组小鼠血清中E₂水平比模型组小鼠明显升高、FSH水平明显降低,相对模型组差异具有显著性（P<0.05）;坤泰胶囊组小鼠卵巢组织Bax蛋白表达比模型组明显降低,Bcl-2蛋白表达比模型组小鼠明显升高,与模型组比较差异均具有显著性（P<0.05）。结论：坤泰胶囊可以促进卵巢的生长,并通过调节卵泡凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达来抑制卵巢功能早衰。     

益脑胶囊对血管性痴呆大鼠皮层Bcl-2/Bax蛋白表达的影响

目的探讨中成药制剂益脑胶囊对血管性痴呆大鼠皮层Bcl-2/Bax蛋白表达的影响。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备前脑缺血致血管性痴呆模型,以Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力;以免疫组化检测大鼠皮层Bcl-2、Bax蛋白表达。结果 VD模型组与假手术组相比,认知能力明显下降(P<0.05),Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P<0.05);治疗组与模型组相比,认知能力明显改善(P<0.05),Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.05),Bax蛋白表达明显减少(P<0.05)。结论血管性痴呆大鼠给予益脑胶囊后,可以通过调节脑组织Bcl-2及Bax蛋白表达,抑制神经细胞凋亡,保护神经细胞,促进脑功能的恢复,从而改善大鼠学习记忆能力。     

依那普利干预对缺血-再灌注大鼠模型心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响

目的探讨依那普利干预对缺血再灌注大鼠模型心肌细胞凋亡Bcl-2和Bax基因蛋白表达的影响。方法雄性Wistar大鼠45只,随机分成3组:①缺血-再灌注(I/R)组15只,结扎左冠状动脉45min,松解4h,结扎前15min以及再灌注1h分别静脉注射生理盐水2ml/kg。②依那普利组(L)组15只:结扎左冠状45min,松解4h,结扎前15min以及再灌注1h分别静脉注射依那普利10mg/kg(依那普利以5mg/kg溶于生理盐水)。③假手术(C)组15只,冠状动脉下穿线不结扎,持续4.75h股静脉注射生理盐水2ml/kg。于实验结束时,取出心脏于4%多聚甲醛固定、石蜡包埋切片,按TUNEL法检测凋亡细胞,以S-P免疫组化法检测Bcl-2和Bax基因蛋白表达。结果①I/R组和L组标本中分别有13例和11例心肌细胞发生凋亡,L组凋亡细胞百分数较I/R组明显减少,差异具有高度显著性(P<0.05)。C组15例样本中12例均未检测到TUNEL阳性细胞。②L组Bcl-2表达较I/R组和C组均增强,L组Bax阳性心肌细胞较I/R组明显减少(P<0.05)。结论缺血-再灌注心肌细胞存在明显的凋亡现象,且受Bax蛋白与Bcl-2基因蛋白下调影响,Bax蛋白与Bcl-2蛋白共同调节心肌细胞凋亡,依那普利干预可诱导心肌细胞表达Bcl-2,减少心肌细胞凋亡。     

心脑宁片对大鼠脑缺血模型凋亡基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的研究心脑宁片对大鼠脑缺血模型脑组织匀浆中凋亡基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法取体重180~200 g雄性Wistar大鼠36只,随机分为3组:第一组为假手术组,其余2组造脑缺血模型。模型Ⅰ、Ⅱ组分别灌服0.5%羧甲基纤维素钠(CMC)和同体积的0.75 g/kg含量的心脑宁片混悬液,采取酶联免疫技术测定匀浆中Bcl-2及Bax的含量。结果与假手术组比较,模型Ⅰ组大鼠脑组织匀浆中Bcl-2含量显著增加(P<0.05),而Bax含量非常显著增加(P<0.01);与模型Ⅰ组比较,模型Ⅱ组有显著高的Bcl-2含量(P<0.05)和显著低的Bax含量(P<0.05),且Bcl-2/Bax显著升高(P<0.05)。结论心脑宁片可以提高抑凋亡基因含量,降低促凋亡基因含量,明显增加抑凋亡基因与促凋亡基因的浓度比率,表明其对脑组织有着明显的保护作用。     

阿胶对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及Bcl-2和Bax表达的影响

目的：探讨阿胶对围绝经期大鼠卵巢颗粒细胞凋亡及其相关基因Bcl-2和Bax表达的影响。方法：选用4月龄雌性大鼠为正常对照组,14月龄阴道细胞学表现为动情期延长的雌性大鼠为衰老大鼠模型。模型动物随机分别给阿胶或戊酸雌二醇片治疗。采用原位末端核苷酸标记法（TUNEL）检测卵巢细胞凋亡,免疫组化法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2,Bax。结果：阿胶高、中、低剂量组卵巢细胞凋亡阳性表达与模型组比较有显著性差异,同时可使卵巢凋亡基因Blc-2表达增强,促凋亡基因Bax表达减弱,Bcl-2/Bax比例增加。结论：阿胶通过抑制Bax蛋白的表达,上调Bcl-2蛋白表达,抑制卵巢颗粒细胞凋亡,进而改善卵巢功能。     

银杏达莫对大鼠局灶性脑缺血神经细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的观察银杏达莫对局灶性脑缺血大鼠大脑缺血坏死区周边抑凋亡基因蛋白Bcl-2和促凋亡基因蛋白Bax表达的影响。方法①选用健康成年Wistar大鼠20只。体质量270～300g。②按随机抽签法将大鼠分为2组：缺血对照组、银杏达莫治疗组,每组10只。③术后6h用免疫组化染色统计Bcl-2和Bax表达阳性细胞数。结果银杏达莫治疗组较缺血对照组缺血坏死区周边脑组织Bcl-2的含量有明显增加,而Bax的含量则明显减少。结论银杏达莫可对局灶缺血性脑损伤起到预防性保护作用,其保护作用发生可能与提高Bcl-2表达、抑制Bax表达有关。     

芹菜素对大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响

目的探讨黄酮类化合物芹菜素对大鼠实验性心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)时心肌细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白表达的影响,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法采用结扎左冠状动脉前降支,心肌缺血45 min,再灌注2 h制作缺血/再灌注模型。将大鼠随机分为8组,即正常组(normal group,Normal)、假手术组(sham oper-ation group,Sham)、生理盐水缺血/再灌注组(saline ischemi-a-reperfusion group,NS)、溶剂对照组(solvent control group,Sol)、美托洛尔对照组(metoprolol control group,Meto)、芹菜素低、中、高剂量(1、2、4 mg.kg-1)用药组(apigenin low,medium and high dose treatment group,Api1,Api2,Api4)。再灌注2 h后迅速取出心脏,TUNEL法原位标记凋亡的心肌细胞;免疫组化法测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达;做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果芹菜素各剂量组心肌细胞凋亡率明显低于NS组(P<0.05),Api1,Api2,Api4能剂量依赖性地降低大鼠缺血/再灌注心肌细胞凋亡率;芹菜素各剂量组剂量依赖性地提高大鼠心肌缺血/再灌注的Bcl-2蛋白表达量(P<0.05)、降低大鼠心肌缺血/再灌注的Bax、Caspase-3蛋白表达量(P<0.05);芹菜素各剂量组与NS组比较,心肌组织损伤的病理学变化明显减轻(P<0.05)。结论芹菜素对缺血/再灌注心肌的保护效应可能与其抑制缺血/再灌注心肌细胞凋亡有关;芹菜素抗心肌凋亡作用的机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax、Caspase-3蛋白表达有关;芹菜素能明显减轻心肌组织损伤。     

阻断JAK/STAT通道对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax表达的影响

<正>缺血再灌注损伤是心脏外科手术体外循环中一个常见的病理生理过程,在这个过程中常伴有心肌细胞的死亡。它包括心肌细胞的坏死和心肌细胞的凋亡,其中心肌细胞的凋亡占主要的地位,文献[1]报道缺血再灌注过程中可发生细胞凋亡,细胞凋亡加重再灌注损伤。大量研究表明[2,3],细胞凋亡     

丹参对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡及基因蛋白表达的影响

目的探讨丹参对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡及基因蛋白表达的影响。方法18只引种繁殖的雄性SHR随机分为3组,每组6只:⑴基础组:育至第8周处死;⑵丹参组:从第8周给药,丹参粉针剂1g/kg.d,腹腔注射,第18周处死;⑶对照组:用相同容量蒸馏水腹腔注射,余同丹参组。心肌细胞凋亡的检测采用TdT介导的原位末端缺口标记法(TUNEL),Bcl-2基因的蛋白表达检测采用S-P免疫组化法。比较3组间心肌细胞凋亡指数、Bcl-2蛋白阳性表达指数的差异,分析两指标间的相关性。结果与基础组比较,对照组心肌凋亡细胞明显增多(P<0.05),而Bcl-2蛋白阳性表达指数显著降低(P<0.05);丹参组较对照组心肌凋亡细胞明显减少(P<0.05),Bcl-2蛋白阳性表达指数显著升高(P<0.05),与基础组无差异。心肌细胞凋亡指数与Bcl-2蛋白阳性表达指数呈明显的负相关性(P<0.01)。结论SHR心肌细胞凋亡具有周龄的依赖性,中药丹参能显著减少SHR心肌细胞凋亡,具有明显上调Bcl-2基因蛋白表达的作用。     

卡维地洛、缬沙坦及其合用对自发性高血压大鼠心肌细胞凋亡、P53及Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨卡维地洛(Carvedilol,Car)、缬沙坦(Valsartan,Val)及其合用对自发性高血压大鼠(SHR)心肌细胞凋亡、心肌Bcl-2、P53蛋白表达的影响。方法6周龄雄性SHR24只,随机分为4组(n=6):一组为对照组,其他3组为干预组,分别予NS5ml、Cal(20mg·kg-1·d-1)、Val(40mg·kg-1·d-1)和Car+Val合用(剂量同上)干预8周后,予2%戊巴比妥钠40mg/kgIP麻醉、开胸取心脏,取左心室游离壁心肌于10%中性福尔马林中固定24小时,继之脱水,石蜡包埋及切片,采用TUNEL法、免疫组化法分别检测心肌细胞凋亡率(cardiacmyocyteapoptosisrate,CMAR),Bcl-2及P53蛋白表达率。结果与对照组比较,各干预组CMAR及P53蛋白表达率均明显降低,而Bcl-2蛋白表达率却明显增高,尤以合用组更明显(P<0.01)。与Car组、Val组比较,合用组CMAR及P53蛋白表达率均降低,而Bcl-2蛋白表达率均增高(P<0.01)。与Car组比较,Val组CMAR、Bcl-2及P53蛋白表达率,差异无显著性意义(P>0.05)。各组中P53蛋白表达率与CMAR呈正相关;而Bcl-2与CMAR呈负相关((P<0.05)。结论CarVal均可抑制SHR心肌细胞凋亡,二者合用效应更明显,可能与两药均能上调BCL-2蛋白表达和下调P53蛋白表达有关。     

河豚毒素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的 研究河豚毒素（TTX）心脏停搏液对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。     

河豚毒素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的研究河豚毒素（TTX）心脏停搏液对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法取Wistar大鼠24只,建立Langendorff-Neely离体心脏灌注模型,随机分为3组（n=8）：基础组、STH-2组、TTX组。用TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数,免疫组化测定凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53的表达,Westernblot检测Bcl-2蛋白表达。结果STH-2组凋亡指数（AI）（11.20±0.79）%高于TTX组（6.92±1.10）%和基础组（1.34±0.23）%（P〈0.01）。TTX组Bcl-2的PEI为（22.63±1.10）%高于STH-2组（13.51±0.67）%和基础组（2.52±0.58）%（P〈0.01）;STH-2组Bax的PEI为（8.04±0.57）%高于TTX组（6.05±0.46）%和基础组（2.14±0.57）%（P〈0.01）。TTX组Bcl-2/Bax为3.78±0.41高于STH-2组1.75±0.15（P〈0.01）。TTX组Bcl-2的相对蛋白含量为（86.1±0.98）%高于STH-2组（53.2±1.76）%和基础组（23.7±2.61）%（P〈0.01）。p53蛋白在各组均未见明显阳性表达。结论与STH-2比较,TTX能减少缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡数,其抗凋亡的机制可能与上调Bcl-2表达,下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

氯氨酮对大鼠心肌缺血再灌注心肌细胞凋亡和Fas蛋白、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨氯胺酮作用下大鼠实验性心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡与Fas及Bcl-2蛋白表达的变化及与心肌组织损伤的关系,并分析心肌组织病理学损伤程度。方法:以穿线结扎或松扎左冠状动脉制备大鼠心肌缺血再灌注模型。32只大鼠随机分成假手术组(假手术4.5 h)、缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4 h)、低剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注4h)及高剂量氯胺酮+缺血再灌注组(缺血30min、再灌注个4 h)。以缺口末端标记法检测心肌细胞凋亡的变化,S-P免疫组化法分别检测Fas与Bcl-2蛋白水平变化,做病理组织切片检查心肌损伤情况。结果:心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡指数及Fas蛋白阳性染色指数与Bcl-2蛋白阳性染色指数均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少Fas和Bcl-2蛋白阳性细胞表达;心肌缺血再灌注后心肌组织呈大小不一的灶性坏死,坏死周围有炎性细胞浸润,氯胺酮作用后坏死减轻,低剂量氯胺酮作用更明显。结论:心肌缺血再灌注时心肌细胞凋亡、Fas基因的蛋白与Bcl-2蛋白表达量均增加,氯氨酮可减少心肌凋亡,减少细胞Fas和Bcl-2蛋白阳性表达,从而减轻心肌损伤,且低剂量氯氨酮作用更明显。     

灵芝孢子粉对糖尿病大鼠心肌细胞Bax、Bcl-2基因表达的影响

目的探讨灵芝孢子粉防治糖尿病心肌病变的分子作用机制。方法测定链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠心肌细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果Bax蛋白表达的OD值,模型组明显升高,与灵芝组及对照组比较差异有显著性(P<0.01);Bcl-2蛋白表达的OD值,模型组明显降低,与灵芝组及对照组比较差异有显著性(P<0.01)。结论灵芝孢子粉可以抑制糖尿病性心肌病时的心肌细胞凋亡,对心肌细胞具有保护作用。     

促红细胞生成素对大鼠急性心肌梗死心肌细胞Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨促红细胞生成素（EPO）对大鼠急性心肌梗死（AMI）的心肌细胞Bcl-2、Bax表达影响。方法将27只大鼠制作AMI模型后随机分为：治疗组16只和对照组11只。采用腹腔注射方法,治疗组给予EPO3000U／kg,共3d（术前1d手术、当天和术后1d）,对照组在相同的时间点给予等量的0．9％氯化钠注射液。6周后,采用导管法测定左室有创血流动力学指标;免疫组化法检测Bcl-2、Bax表达水平。结果治疗组的LVSP和＋dp／dtmax较对照组明显升高（P〈0．05）,LVEDP和-dp／dtmax较对照组明显降低（P〈0．05）;两组心率变化不大（P〉0．05）。治疗组的心肌细胞Bcl-2的表达明显高于对照组（P〈0．05）;心肌细胞Bax的表达及Bcl-2／Bax明显低于对照组（P〈0．05）。结论EPO对缺血和梗死心功能的保护作用可能与心肌细胞凋亡的减少有关。     

参乌冠心颗粒剂对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Fas、Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨中药复方参乌冠心颗粒剂防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法采用异丙肾上腺素连续多点皮下注射,复制大鼠心肌缺血动物模型。运用DNA末端标记(TUNEL)法,观察复方参乌冠心颗粒剂对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Fas、Bcl-2蛋白表达的影响。结果①参乌冠心颗粒剂有明显的抗心肌缺血作用。②参乌冠心颗粒剂可显著下调Fas基因的蛋白表达,上调Bcl-2基因的蛋白表达,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。③参乌冠心颗粒剂可能通过抑制和阻断心肌细胞过度凋亡的发生而起到保护心肌的作用。结论通过调节缺血心肌Fas、Bcl-2基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生,说明中药复方参乌冠心颗粒剂具有防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制。     

茅莓总皂苷对大鼠局灶性脑缺血/再灌注后神经细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2、Bax表达的影响

目的探讨茅莓总皂苷对缺血性脑损伤的神经保护机制。方法采用大鼠大脑中动脉阻塞造成局灶性脑缺血2h,再灌注24 h模型,以HE染色,TUNEL标记和免疫组化的方法观察茅莓总皂苷5、10、20 mg.kg-1对凋亡细胞数目及相关蛋白Bc l-2,Bax表达的变化。结果3个剂量的茅莓总皂苷治疗组显示神经元形态病理改变明显减轻,降低残存细胞中TUNEL阳性细胞的百分率。增加Bc l-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,Bc l-2/Bax的表达比例增加。结论茅莓总皂苷有明显的抗凋亡作用,其机制可能与增加Bc l-2阳性细胞的表达,降低Bax阳性细胞的表达,提高Bc l-2/Bax有关。     

肝纤维化形成过程中大鼠肝组织Bcl-2、Bax表达的动态研究

目的研究CCl4肝纤维化模型形成过程中Bcl-2、Bax蛋白在大鼠肝组织中的动态表达。方法雄性wistar大鼠制备CCl4肝纤维化动物模型,设正常对照组、4周模型组、8周模型组。实验结束后用v-G法染色观察肝纤维化程度并分级,同时用免疫组织化学法(SABC法)检测各组大鼠肝组织Bcl-2、Bax的表达情况。结果模型组大鼠肝纤维化程度均达肝纤维化的Ⅲ-V期以上。BcI-2在正常组、4周及8周模型组表达量分别为(3.19±0.79)％、(12.36±4.71)％及(17.39±5.98)％(P<0.01或P<0.05)。Bax在正常组、4周及8周模型组表达量分别为(2.04±0.58)％、(18.05±5.64)％及(13.56±4.77)％(P<0.01或P<0.05)。凋亡指数、Bax/Bcl-2比值在CCl4肝纤维化模型组中明显增加,尤以4周模型组增加最明显,且凋亡指数与Bax/Bcl-2比值呈正相关(r=0.347,P<0.05)。 结论肝纤维化时Bcl-2、Bax的表达加强,且在肝纤维化发生过程中存在动态变化。     

柴胡对肝损伤模型小鼠肝细胞Bax、Bcl-2表达的影响研究

目的:探讨柴胡对肝损伤模型小鼠肝细胞凋亡的影响及其机制。方法:将24只小鼠随机分为空白对照组、模型对照组、柴胡低剂量干预组和柴胡高剂量干预组,给予相应药物后处死,采用免疫组织化学法检测小鼠肝组织中Bax、Bcl-2表达情况。结果:柴胡干预组Bax蛋白表达强于模型对照组(P<0·05),Bcl-2蛋白表达弱于模型对照组(P<0·05)。结论:柴胡可能通过上调Bax、下调Bcl-2表达来诱导肝细胞凋亡。