NapsinA、TTF-1、CK5/6、CK7、P63在非小细胞肺癌支气管镜活检标本中的表达及意义

目的 检测NapsinA、TTF-1、CK5/6、CK7及P63在非小细胞肺癌(NSCLC)支气管镜活检标本中的表达及意义.方法 采用免疫组织化学SP法检测47例NSCLC支气管镜活检标本中NapsinA、TTF-1、CK5/6、CK7及P63的表达,并结合NSCLC的临床特征病理进行分析.结果 NapsinA、TTF 1和CK7在27例肺腺癌中的阳性表达率分别为100％(27/27)、100％(27/27)和93％(25/27),表达水平明显高于CK5/6[19％(5/27)]和P63[0(0/27)](P＜0.05);而CK5/6和P63在18例肺鳞癌中的阳性率均为100％(18/18),表达水平明显高于NapsinA及TTF 1[0(0/18)、0(0/18)]和CK7[11％(2/18)](P＜0.05),两者差异均具有统计学意义.结论 NapsinA、TTF-1、CK7、CK5/6及P63在肺支气管镜活检标本腺癌和鳞癌鉴别诊断中具有重要意义.     

COX-2在非小细胞肺癌中的表达及其预后意义

目的　探讨非小细胞肺癌组织中COX 2的表达情况及其与患者临床病理生理特征和预后的关系。方法　应用免疫组织化学S P法检测 5 2例NSCLC组织中COX 2蛋白的表达情况。结果　 5 2例NSCLC组织中 2 5例 ( 4 8.1% )COX 2表达阳性。其中腺癌COX 2阳性表达率为 76.5 % ,明显高于鳞癌3 4.3 % (P <0 .0 1)。COX 2阳性表达率在T1+T2 期 ( 3 3 .3 % )显著低于T3 +T4期 ( 92 .3 % ) (P <0 .0 1) ,在临床Ⅰ +Ⅱ期 ( 2 8.1% )显著低于临床Ⅲ +Ⅳ期 ( 80 .0 % ) (P <0 .0 1)。有淋巴结转移者COX 2阳性表达率为83 .3 % ,而阴性者仅为 17.9% (P <0 .0 1)。另外 ,在生存期≤ 2年、>2但 <5年和≥ 5年三组之间COX 2阳性表达率亦有显著性差异 (P <0 .0 1)。结论　COX 2在NSCLC尤其是腺癌中呈过度表达 ,与NSCLC的侵袭性、淋巴结转移、临床分期和肺癌进展等生物学行为有密切关系。检测NSCLC组织中COX 2表达有助于预测患者预后。     

非小细胞肺癌新辅助化疗后的临床病理学研究

目的　研究非小细胞肺癌 (NSCLC)新辅助化疗的临床病理学改变及其与临床疗效评价的一致性 ,探讨NSCLC新辅助化疗的临床应用价值。方法　 84例Ⅰ～Ⅲ期NSCLC患者随机分为综合治疗组和单纯手术组各 42例。综合治疗组术前行MVP方案化疗 2周期 ,分别进行临床评价和病理学评价 ,术后继续化疗 2～ 4周期 ;单纯手术组仅行手术治疗。结果　综合治疗组原发灶的肿瘤细胞在镜下显示不同程度的变性和坏死 ,单纯手术组则无此改变。术前新辅助化疗临床评价和病理学评价有效率均为 5 9.5 % (2 5 /4 2 )。两种评价的一致率为 71.4% (30 /4 2 ,Kappa值 =0 .40 7,P <0 .0 1)。综合治疗组与单纯手术组比较 ,总生存率差异有显著性 (P =0 .0 47) ,经分层分析 ,两组Ⅰ～Ⅱ期患者生存率差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ,但Ⅲ期患者生存率差异有显著性 (P =0 .0 37)。结论　伴有纤维化的变性和坏死是原发灶化疗后的主要病理学改变形式。化疗疗效的临床评价能够反映病理学变化。对Ⅲ期NSCLC患者行术前和术后辅助化疗与单纯手术相比有更好的治疗效果     

MTS_1/p16和MTS_2/p15基因共丢失与原发性非小细胞肺癌预后的研究

目的 探讨p15/p16基因纯合性共丢失与原发性非小细胞癌(NSCLC)患者预后的相关性。方法 采用聚合酶链式反应(PCR)技术,先后检测140例NSCLC手术标本中p15/pl6双基因的共丢失。结果 肺腺癌组织中p15/pl6基因共丢失率明显高于肺鳞癌(P＜0.05),而双丢失组的患者生存率与患者的性别、年龄及TNM分期等因素无关(P＞0.05)。p15/pl6基因共丢失组的患者生存率明显低于未丢失组,两组之间呈著性差异(P＜0.01)。经统计学处理提示TNM分期对患者累计生存率的影响也具有明显差异(P＜0.05)。结论 据于p15/pl6基因共丢失率与肺癌患者生存期密切相关,因此检测pl5/pl6基因共丢失可作为NSCLC患者预后判断的指标。     

非小细胞肺癌组织中FHIT、P53和P16蛋白的异常表达及其与临床病理的关系

目的 :研究非小细胞肺癌组织 (NSCLC)中脆性组氨酸三联体 (FHIT)蛋白 (Fhit)、P5 3蛋白 (P5 3)和P16蛋白 (P16 )异常表达及其与临床病理的关系。方法 :应用免疫组织化学方法检测NSCLC组织中Fhit、P5 3及P16的表达 ,用 χ2 检验分析其异常表达与临床病理参数之间的相关性。结果 :NSCLC组织中Fhit、P5 3及P16的异常表达率分别为 6 2 .2 % (5 6 / 90 )、4 8.9% (4 4 / 90 )和 4 6 .7% (4 2 / 90 ) ;除了Fhit异常表达显著多见于鳞癌 (SqCC ,P <0 .0 0 1)和吸烟者 (P =0 .0 32 )、P16多见于非鳞癌 (non SqCC)以及P5 3异常多见于N2淋巴结转移 (P =0 .0 39)外 ,三者的异常表达与其他临床病理参数 (包括年龄、性别、肿瘤大小和分期等 )均无相关性。结论 :Fhit的表达缺失 ,与P5 3、P16异常表达一样 ,是非小细胞肺癌中常见事件。     

Ⅲa期非小细胞肺癌术后放疗加化疗的疗效分析

目的 :探讨Ⅲa期非小细胞肺癌 (NSCLC)患者术后放疗加化疗的临床意义。方法 :回顾性分析 10 2例Ⅲa期NSCLC患者术后放疗与单纯手术治疗的生存率及复发情况。其中术后放疗加化疗 76例 ,单纯手术 2 6例。结果 :术后放化疗组和单纯手术组 5年的生存率分别为 32 . 2 %和 9 1% ,两组比较有显著性差异 (P <0 . 0 5 )。术后放化疗组的 5年局控率为 73 .7% (5 6 / 76 ) ,明显高于单纯手术组的 5 3 .8% (14 / 2 6 ) ,P <0 . 0 5。术后 5年远处转移率放化疗组为 5 0 .0 % (38/ 76 ) ,单纯手术组为 6 1 5 % (16 / 2 6 ) ,两组比较无显著性差异 (P >0 . 0 5 )。结论 :本组资料提示 ,对Ⅲa期非小细胞肺癌术后患者行放疗加化疗 ,可以提高生存率 ,且治疗方式、N分期、血红蛋白为生存率的独立预后因素。     

Caspase活化的细胞凋亡在老年非小细胞肺癌组织中的表达

目的 :研究老年非小细胞肺癌 (NSCLC)组织中Caspase活化的癌细胞凋亡与临床病理特征的关系。方法 :对手术切除的老年NSCLC组织标本 5 0例 (鳞癌 2 4例 ,腺癌 2 6例 ) ,采用Caspase特异的单克隆抗体—M30CytoDEATH免疫组化染色方法显示凋亡细胞 ,计算凋亡指数 (AI)。结果 :2 8 0 % (14 /5 0 )的肺癌组织标本中可见不同程度的M 30表达。其中肺鳞癌组织的M30阳性表达率 (4 1 7% )明显高于肺腺癌 (15 3% ) ,差异有显著意义 ,P <0 0 5 ;肺鳞癌组织的AI亦高于腺癌 ,差异有显著意义 ,P <0 0 5。低分化NSCLC组织的AI高于中、高分化的NSCLC组织 ,差异有显著意义 ,P <0 0 5 ;低分化鳞癌组织的AI明显高于中、高分化的鳞癌 ,差异有显著意义 ,P <0 0 5。M30的表达与其他临床病理学特征无相关性。结论 :非小细胞肺癌组织中存在Caspase活化的自发性癌细胞凋亡机制 ,且Caspase的表达与组织类型及组织分化程度有关。     

MTS1／p16和MTS2／p15基因共丢失与原发性非小细胞肺癌预后的研究

目的：探讨p15/p16基因纯合性共丢失与原发性非小细胞癌（NSCLC）患者预后的相关性。方法：采用聚合酶链式反应（PCR）技术，先后检测140例NSCLC手术标本中p15/p16双基因的共丢失。结果：肺腺癌组织中p15/p16基因共丢失率明显高于肺鳞癌（P＜0．05），而双丢失组的患者生存率与患者的性别、年龄及TNM分期等因素无关（P＞0．05）。p15/p16基因共丢失组的患者生存率明显低于未丢失组，两组之间呈显著性差异（P＜0．01）。经统计学处理提示TNM分期对患者累计生存率的影响也具有明显差异（P＜0．05）。结论：据于p15/p16基因共丢失率与肺癌患者生存期密切相关，因此检测p15/p16基因共丢失可作为NSCLC患者预后判断的指标。     

非小细胞肺癌微血管计数与血管内皮生长因子表达

目的　探讨血管内皮生长因子 (VEGF)在非小细胞肺癌 (NSCLC)浸润和转移中的作用。方法　应用免疫组化法检测 6 5例癌组织中VEGF蛋白的表达及微血管计数 (MVC)。结果　NSCLC组织中VEGF阳性表达率为 83 .1%(5 4/ 6 5 ) ,有转移组癌组织中VEGF阳性表达比例 (10 0 %,44/ 44)以及MVC(5 8.90± 31.45 )均显著高于无转移组 (47.6 %,10 / 2 1;2 1.44± 12 .77) (P <0 .0 1) ;Ⅲ期肺癌VEGF表达阳性率 (10 0 %,2 9/ 2 9)以及MVC(6 0 .2 4± 2 8.2 9)亦显著高于Ⅰ和Ⅱ期肺癌 (6 9.4%,2 5 / 36 ;19.5 3± 16 .2 7) (P <0 .0 1)。VEGF表达强度与MVC间有密切关系。在不同组织学类型及肿瘤直径间VEGF阳性率和MVC均未见显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　VEGF可能在NSCLC浸润和转移过程中发挥重要作用 ,检测VEGF表达及MVC有助于判断NSCLC转移及预测患者预后。     

揭阳市食管癌p16基因表达与缺失的研究

 目的　了解食管癌高发区揭阳市食管癌患者 p16基因的表达与缺失情况。方法　采用免疫组化、PCR及原位杂交技术检测 6 0例食管癌标本中 p16蛋白表达、基因纯合性缺失及其mRNA信号表达情况。结果　 (1)有 2 6例 (43.3% ) p16蛋白表达阳性 ,且有淋巴结转移与无转移之间蛋白表达差别显著 (P =0 .0 4 3) ;(2 )PCR检测外显子 2缺失有 2 7例 (45 % ) ,外显子 1缺失有 15例 (2 5 % ) ;(3)原位杂交检测 10 / 13例与免疫组化结果一致。结论　p16基因表达缺失与该组食管癌的浸润、转移有相关 ;外显子 2的缺失可能是 p16基因产物丢失的主要机制。     

多种肿瘤抑制基因在视网膜母细胞瘤中存在状态的研究

目的 深入研究视网膜母细胞瘤（ＲＢ）内多种肿瘤抑制基因的存在状态。方法 综合利用ＳＳＣＰ分析、ＤＮＡ序列测定以及多重ＰＣＲ等技术,检测分析ＲＢ肿瘤内Ｒｂ、ｐ５３,ｐ１６,ｐ１５及ｐ１２等肿瘤抑制基因是存在缺失与点突变。结果 约７４％的ＲＢ肿瘤有Ｒｂ基因点突变,１６％显示,ｐ１６基因缺失,但ｐ５３及ｐ２１基因除多态性外未检测到真正的点突变。结论 ＲＢ的发病和病变的进展主要是由于以Ｒｂ基因为核心的代谢     

亚硒酸钠抗氧化作用与抑瘤效应的实验观察

人ｐ１６基因是最近发现的一种肿瘤抑制基因。ｐ１６蛋白作为一种细胞增殖的负调控因子，在恶性肿瘤发生发展中起重要作用。为了进一步探讨ｐ１６基因的抗肿瘤特性，我们通过运用分子克隆技术构建重组人ｐ１６基因表达载体（ｐｃＤＮＡ３－ｐ１６），并通过电穿孔方法将ｐ１６基因导入到人肺腺癌ＮＣＩ－Ｈ４６０细胞中，经Ｃ４１８筛选获得可稳定表达ｐ１６的人肺腺癌细胞，观察ｐ１６基因对人肺腺癌细胞周期的影响和细胞增殖的作用     

探讨HBV X、TGF-alpha,c-myc及beta-catenin基因与高发区肝癌的相关性

目的　研究HBVX基因、TGF alhpa、c myc、beta catenin等癌变相关基因及 2 49密码子突变的p5 3蛋白在高发区肝细胞癌癌变发生及其恶性表型维持所发挥的作用。方法　以肝癌高发区启东的肝癌细胞株 770 1和 770 3标本作为研究对象 ,以PCR及DNA测序分析方法确定HBVX基因在细胞DNA水平的整合。以RT PCR及Western blot检测HBVX基因的转录与表达。用PCR RFLP方法确定 p5 3基因 2 49密码子的错义突变。应用免疫组织化学法分析TGF alhpa ,c myc ,beta catenin的表达。结果　 2株细胞在DNA水平都存在HBVX基因片断的整合 ,但未见完整的转录和蛋白水平表达。序列分析显示 2株细胞的HBVX基因的序列各有特异性 ,并存在 13 0、13 1密码子的热点突变。PCR RFLP分析说明 2个细胞株中p5 3基因 2 49密码子均属野生型。免疫组化显示 2株细胞中TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白均有显著的积累。 结论　本实验的结果显示HBVX基因对这 2株细胞恶性表型的维持并不存在必然的关联 ,而是 1种HBV感染的遗传标志。未见HBVX基因蛋白表达 ,可能由于X基因 3′端缺失变异所致。免疫组化的结果显示TGF alpha ,c myc和beta catenin蛋白的显著积累 ,说明多种癌基因的相互协同 ,可能与肝癌的发生、发展及恶性表型的维持相关联     

Mechanisms by which eucaryotic genes evolve

Summary This paper reviews our current efforts to understand the evolutionary origin of the ovomucoid gene. Sequence analyses have suggested that introns were present in the primordial ovomucoid gene before birds and mammals diverged, about three hundred million years ago. Our work suggests that the present ovomucoid gene has evolved from a primordial ovomucoid gene by two separate intragenic duplications followed by the addition of a final segment which codes for a secretory signal sequence. The three domains of the secreted peptide and also the signal sequence, are constructed by an apparent assembly of exons which code for individual peptide segments. The exact position of introns within the ovomucoid gene has been defined and the results support the theory that introns separate gene segments that code for functional domains of proteins and provide insight into the manner by which eucaryotic genes were constructed during the process of evolution.     

含小鼠糖皮质激素受体第二外显子基因片段的克隆和结构分析

克隆适于构建可调控基因打靶载体的小鼠糖皮质激素受体（ＧＲ）基因片段,为建立糖皮质激素受体基因缺陷型小鼠模型奠定基础。和ＰＣＲ扩增小鼠ＧＲ基因第二外显子上５６２ｂｐ的核酸片段作为探针,筛选小鼠基因组文库,共获得６个阳性克隆。对Ｃ１０克隆进行详细的测序和酶切图谱和Ｓｏｕｔｈｅｍ杂交分析事一６．５ｋｂ的基因片段。该片段含完整的ＧＲ基因第二外显子,基或分别有３．９ｋｂ和１．４ｋｂ的ＤＮＡ片段可作为下一步构     

MTX耐药基因在骨髓干细胞中的高效表达

以脂质体为载体，把突变的抗ＭＴＸ的耐药基因转染到小鼠的造血干细胞中，用不同浓度的ＭＴＸ对细胞进行筛选。结果发现同一浓度下已转染基因组的细胞接种率大于未转染基因组的细胞接种率，未转染组对ＭＴＸ耐受性差，克隆形成率低。行卡方检验，同一浓度下的组间差异显著（Ｐ〈０．００１）。ＰＣＲ分析证实抗ＭＴＸ的耐药基因在造血干细胞中有效表达，该实验为进一步研究ＭＴＸ治疗的肿瘤患者减少骨髓毒性，提供了有参考价值的资料     

bcl-2、bax和mdrl基因表达与急性白血病的治疗及预后

目的 :研究探讨 bcl- 2基因、bax基因和 m drl基因表达与急性白血病的治疗及预后的关系。方法 :用链亲和素—胶体金原位杂交检测了 5 6例 AL 患者的 bcl- 2、bax和 mdrl基因表达。结果 :bcl- 2和 mdrl基因低表达及 bax基因高表达患者的完全缓解率 (CR)高 ,bcl- 2 /bax比值 <0 .6患者的 CR率更明显高于 >1.2者 (P<0 .0 0 1)。结论 :bcl- 2、m dr1及 bax基因表达是 AL 相对预后不良因素 ,bcl/bax比值更是决定 AL 预后好坏的关键指标。     

RFP标记的 YCD 基因在 HeLa 细胞中的表达及其介导的细胞毒性

背景与目的 :探讨红色荧光蛋白标记的酿酒酵母菌胞嘧啶脱氨酶(YCD)基因在人宫颈癌细胞(HeLa细胞)中的表达及其功能。材料与方法 :采用基因重组技术构建含有CMV启动子和RFP、YCD基因开放阅读框(ORF)的真核表达载体pIRES_YCD ,脂质体法转染HeLa细胞。荧光显微镜下观察转染细胞中红色荧光蛋白的表达 ,流式细胞术分析转染效率及荧光强度并筛选荧光阳性细胞 ,命名为HeLa_Y。以不同浓度的前药5_FC处理HeLa_Y细胞 ,MTT法检测细胞存活率。 结果 :荧光显微镜下可见红色荧光蛋白在HeLa_Y细胞中表达 ,流式细胞术成功筛选出HeLa_Y细胞。前药5_FC能明显杀伤HeLa_Y细胞 ,5_FC浓度与HeLa_Y之间存在对数曲线关系。结论 :RFP可作为报告基因快速筛选YCD表达载体转染的细胞 ,YCD/5_FC自杀基因系统可以进一步用于肿瘤的基因治疗研究     

肿瘤基因治疗阳离子载体应用中的问题与策略

采用阳离子载体将肿瘤治疗基因送入靶细胞中表达 ,须经历体内传递、穿过细胞膜、细胞内传递、细胞内表达等多个步骤。当前研究表明 ,阳离子载体在此过程中面临一系列独特的问题 ,对这些问题的研究与解决大大推动了对阳离子载体的认识与应用。     

Stathmin 基因在非小细胞肺癌中的表达

目的：检测 Stathmin 基因在非小细胞肺癌组织中的表达,探讨其与临床病理因素的关系。方法：用免疫组织化学 SP 法检测135例非小细胞肺癌及20例癌旁肺组织中 Stathmin 蛋白的表达,分析其与患者年龄、性别、肿瘤分化程度等临床病理特征之间的相关性。结果：小细胞肺癌组织中 Stathmin 基因蛋白的表达水平明显高于癌旁肺组织（P ＜0．05）,Stathmin 的表达与淋巴结转移有关（P ＜0．05）。结论：Stathmin 基因在非小细胞肺癌组织中的表达显著上调;Stathmin 基因的表达与淋巴结转移有关,而与年龄、性别、肿瘤大小、TNM分期、组织类型无关。