大鼠实验性急性氰化物中毒时脑组织的病理变化及其发生机制的研究

本文结合血液、脑组织CN~-浓度测定和脑组织细胞色素氧化酶活性定量分析,对大鼠急性NaCN中毒(4.5mg/kg i.p.)后21h内脑组织的病理变化进行了动态观察,结果表明:大鼠腹腔注射低于致死剂量的NaCN(80％LD)造成急性中毒后,脑组织可出现明显的病理变化,以细胞色素氧化酶低活性分布区为重。其基本病理变化为:(1)神经细胞、神经胶质细胞变性、坏死;(2)各种细胞突起成份变性、肿胀、溶解;(3)有髓神经纤维髓鞘破坏。这些病理变化的产生和发展。表现为一动态过程,大致可分为3个时期:(1)代谢紊乱期;(2)损伤反应期;(3)恢复期。本文认为,动物急性中毒反应的发生,是NaCN注射后脑组织细胞色素氧化酶活性受到强烈抑制的直接结果;随后出现的震颤、不稳、共济失调等则可能与继发的脑组织结构损伤有关。本文还对氰化物中毒后脑组织病理变化产生的机制进行了讨论。     

大鼠肝、肾细胞色素氧化酶亚单位的分离

细胞色素氧化酶是真核生物细胞呼吸链终末氧化酶,是生物体内能量生成的重要步骤。本文利用高分辨率的SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离了大鼠肝、肾细胞色素氧化酶的亚单位组分。     

肺细胞色素氧化酶体视学测量法与高压氧研究

采用超微结构细胞化学方法,用计算机图象分析仪测量计算了小鼠肺毛细血管和Ⅱ型肺泡线粒体、线粒体膜和嵴上细胞色素氧化酶活性变化的二维形态学、三维立体学定量参数.结果表明,毛细血管线粒体面积较Ⅱ型肺泡细胞小,但体密度大;毛细血管线粒体细胞色素氧化酶阳性反应面积比Ⅱ型肺泡细胞小,但酶反应体密度大.暴露于高压氧(0.5MPa)后小鼠Ⅱ型肺泡细胞线粒体细胞色素氧化酶活性降低.     

镉对大鼠肾脏损害的组织学及组织化学观察

用组织学及组织化学方法观察大鼠长期饮用含镉水（含镉３００ｍｇ／Ｌ，饮６个月）对肾脏的毒性作用。结果：与正常组大鼠比较，饮含镉水组大鼠肾近曲小管的琥珀酸脱氢酶、三磷酸腺苷酶的活性及糖原明显降低，乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶活性明显增强。提示长期饮用含镉水对肾小管的结构和功能有明显的损害。     

妊高征患者胎盘绒毛细胞色素C氧化酶活性的变化

为探讨线粒体能量代谢细胞色素C氧化酶活性在妊高征发病机制中的作用。应用紫外分光光度法测定了32例妊高征患者(妊高征组)和26例正常妊娠妇女(对照组)的胎盘绒毛细胞色素C氧化酶的活性。结果发现患者平均年龄在妊高征组[(27．23±3．78)岁]与对照组[(26．87±3．70)岁]间差异无显著性(P>0．05),孕周以妊高征组[(37．30±2．96)周]为低,与对照组[(38．91±1.70)周]间差异有显著性(P<0．05)。妊高征组细胞色素C氧化酶活性明显低于对照组[细胞色素C氧化速率常数分别为(0．30±0．39)／min和(0．73±0．54)／min,P<0．01]。妊高征组中IUGR的发生率显著高于对照组(P<0．05)。提示细胞色素C氧化酶活性降低可以影响电子传递链的功能,引起ATP生成减少,线粒体能量代谢障碍,从而可能导致妊高征发病及胎盘功能障碍。     

大白鼠脑内单胺氧化酶内源性抑制剂的研究

本文研完了大白鼠脑内单胺氧化酶内源性抑制剂(MAOI),并确定它存在于大白鼠脑105000g离心的上清液中。大白鼠被注射甲状腺素后MAOI含量明显增加。结果表明,MAOI分子量为28700,等电点为5.9,由68个氨基酸组成,其中含谷氨酸、天冬氨酸较多。     

亚硒酸钠诱导NB4细胞中细胞色素c氧化酶亚基IV的下调机制

目的 探讨亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡的过程中,细胞色素c氧化酶亚基IV(COX IV)表达的变化情况及其机制和意义.方法 用20μmol/L亚硒酸钠作用NB4细胞不同时间,Western blot和RT-PCR分别检测COX IV蛋白和mRNA表达的变化.活性氧清除剂预处理细胞后Western blot检测COX IV蛋白表达的变化以及caspase-3的激活.caspase-3抑制剂预处理细胞后Western blot检测COX IV蛋白表达的变化.瞬时转染干扰NB4细胞中COX IV表达后,流式细胞术检测细胞凋亡.结果 亚硒酸钠诱导NB4细胞COX IV蛋白表达显著下调,但mRNA表达水平无变化.活性氧清除剂能完全逆转亚硒酸钠引起的COX IV表达下调与caspase-3激活.caspase-3抑制剂能部分逆转亚硒酸钠引起的COX IV表达下调.干扰COX IV表达后,亚硒酸钠诱导的细胞凋亡显著增加.结论 在亚硒酸钠诱导NB4细胞凋亡过程中,COX IV在蛋白水平显著下调.活性氧介导COX IV下调与caspase-3激活,caspase-3在一定程度上参与COX IV表达下调,抑制COX IV能显著提高NB4细胞对亚硒酸钠诱导凋亡的敏感性.     

高压氧中毒对肺毛细血管细胞色素氧化酶的影响

采用超微结构细胞化学和计算机图像定量分析方法,测量计算了高压下氧中毒小鼠肺毛细血管线粒体、线粒体细胞色素氧化酶二维形态学和三维立体学参数.结果表明,小鼠暴露于0.5MPa高压氧后,肺毛细血管线粒体二维形态学和三维立体学参数的值没有发生变化,但线粒体细胞色素氧化酶的活性明显降低.     

用原位杂交法显示大脑皮质内的生长抑素mRNA

用原位杂交组织化学法对大脑皮质内生长抑素ｍＲＮＡ（ＳＯＭｍＲＮＡ）的分布进行了研究。发现ＳＯＭｍＲＮＡ广泛分布于大脑皮质各层中的神经元胞体及近端树突内，尤以Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ层为主，ＳＯＭｍＲＮＡ阳性神经元可分为浓染及淡染两种类型。结果表明ＳＯＭｍＲＮＡ阳性神经元在大胞皮质的广泛分布可能在其复杂的功能活动中起神经调制物的作用。     

肝硬化大鼠胃窦平滑肌细胞色素氧化酶Ⅱ基因及线粒体膜电位的变化

目的研究肝硬化大鼠胃窦平滑肌细胞色素氧化酶Ⅱ基因（COⅡ gene）及线粒体膜电位的变化，探讨肝硬化胃动力障碍机制。方法20只Wister大鼠随机分为肝硬化组和对照组，采用葡聚糖蓝-2000为胃肠内标记物观察胃动力的变化，RT-PCR法检测胃窦平滑肌COⅡ mRNA的变化，激光共聚焦显微镜检测线粒体膜电位的改变。结果与对照组比较，肝硬化组胃动力明显减弱（P〈0．01），胃窦平滑肌COⅡ mRNA的表达及线粒体膜电位均显著低于对照组（P〈0．01）。结论肝硬化大鼠胃运动功能减退与胃窦平滑肌COⅡ mRNA的表达下降及线粒体膜电位的降低有关。     

激光照射脑组织损伤区细胞色素氧化酶的改变

本实验选用３５只家兔经ＣＯ２激光照射后，利用酶组织化学方法－锇黑法直接，动态，定量地观察脑组织损伤区水肿外带中线粒体的细胞色素氧化酶的变化。随激光照射时间延长，线粒体内细胞色素氧化酶逐渐脱失，超微结构逐渐破坏。在相同条件下，激光照射２秒，４秒后，在地塞米松组和激光照射组之间线粒体内细胞色素氧化酶脱失有极显著差异，而激光照射６秒之后，两组虽有差异但不甚显著，说明ＤＸＭ对激光照射后的脑组织损伤区具有保     

大鼠肺内NOS之分布及缺氧对其活性的影响

本文以组织化学方法对大鼠肺内一氧化氮合成酶（ＮＯＳ）进行定位研究，并观察了不同时间（８小时～２８天）缺氧时肺内ＮＯＳ活性的变化。结果显示：①正常大鼠各级支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞呈ＮＯＳ强阳性反应；肺血管内膜呈ＮＯＳ阳性反应。②缺氧８小时，肺血管内膜ＮＯＳ阳性反应开始降低，且缺氧时间越长，ＮＯＳ阳性反应越低。③缺氧１４天时，肺泡间质和肺血管周围炎性细胞呈ＮＯＳ阳性反应；缺氧２８天时，炎性细胞ＮＯＳ阳性反应增强。④缺氧对支气管、肺泡管和肺泡囊上皮细胞ＮＯＳ的活性无明显影响。从而提示一氧化氮不仅对肺具有一定的生理学作用，而且可能参与缺氧时肺的某些病理学过程。     

人眼正常前房角小梁网凝集素亲和组化研究

使用七种对N－乙酰氨基葡萄糖或半乳糖有特异亲和性的凝集素，对9只人眼正常小梁网进行亲和组化研究。结果证实人眼正常小梁网细胞外基质和内皮细胞胞浆中，分布有N－乙酰氨基葡萄糖和N－乙酰氨基半乳糖：ConA对N－乙酰氨基葡萄糖的亲和力较强，DBA和PNA对N－乙酰氨基半乳糖的亲和力较强，提示小梁网内皮细胞具有合成氨基己糖多糖的功能，具有同一单糖特异亲和性的凝集素，对小梁网的亲和力有差异。     

Mitochondrial tRNA ~(leu(UUR)) Gene Mutation and the Decreased Activity of Cytochrome c Oxidase in Preeclampsia

Ａｌｔｈｏｕｇｈｔｈｅｅｔｉｏｌｏｇｙｏｆｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｒｅｍａｉｎｓｕｎｋｎｏｗｎ,ｇｅｎｅｔｉｃｐｒｅｄｉｓｐｏｓｉｔｉｏｎａｒｅｔｈｏｕｇｈｔｔｏｃｏｎｔｒｉｂｕｔｅｔｏｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐ－ｍｅｎｔｏｆｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａ．Ｒｅｃｅｎｔｌｙ,ｒｅ－ｓｅａｒｃｈｅｒｓｈａｖｅｔｒｉｅｄｔｏｆｉｎｄｔｈｅｒｏｌｅｏｆｉｎ－ｈｅｒｉｔｅｄｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｉｎｔｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｅｓｉｓｏｆｐｒｅｅｃｌａｍｐｓｉａｕｓｉｎｇｍｏｌｅｃｕｌａｒｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｔｅｃｈｎｏｌ…     

调心方对AD模型鼠脑组织呼吸链氧化酶活性和氨基酸递质含量的影响

为研究调心方(主药：党参、桂枝、茯苓、蕾蒲、远志)治疗阿尔茨海默病(AD)的机理．将SD雄性大鼠脑窒内注射DHF-FeCl3-ADP,造成氯化损伤型类AD模型(造模前1周起以调心方灌胃．每日1次．连续4周);采用Clark氯电极法观察鼠脑线粒体呼吸链氯化酶活性：HPLC-荧光法观察鼠脑氨基酸递质含量;RT-PCR法观察大脑皮质NMDAR(NR1a和NR2a)mRNA表达．以及调心方对AD大鼠上述指标变化的影响．并与Donspezil治疗组比较。结果：模型大鼠脑组织氨基酸递质含鼠和NMDAR(NR1a和NR2a）mRNA表达高于正常对照组。而线粒体呼吸链细胞色素氯化酶活性则显着下降;调心方对上述各项指标有不同程度的纠正作用。提示调心方可以通过纠正AD模型鼠脑组织呼吸链氯化酶活性和氨基酸递质的异常变化．这可能是该方防治AD的机理之一。     

胚脑神经肽Y的免疫组织化学研究

通过免疫组织化学方法观察胚胎大鼠脑组织神经肽Ｙ的分布与含量变化。结果：大脑皮质在胚胎第２０天出现神经肽Ｙ，丘脑和下丘脑在胚胎第１４天开始出现神经肽Ｙ，并随着胎龄增加而显著增加，脑干从胚胎第１４天开始出现神经肽Ｙ，并在胚胎第１８天达到最高峰，胚胎小脑未见神经肽Ｙ阳性反应。本文对神经肽Ｙ与筛选中枢神经移植供体最佳胎龄的关系做了探讨     

癫痫持续状态大鼠的蓝斑组织化学与图像分析研究

作者用马桑内酯致大鼠癫痫持续状态,取蓝斑用荧光组织化学方法显示去甲肾上腺素(NA),并用显微摄影自动曝光时间和图像分析两种方法测定荧光强度。结果:均显示大脑皮质包埋马桑内酯微粒的大鼠癫痫持续发作6小时后,蓝斑中NA荧光增强。用单胺氧化酶组化和图像分析法观察到该处酶活性增强。观察到在癫痫持续状态时NA起了一定的调控作用。     

正常大鼠和人肺组织一氧化氮合成酶组织化学定位研究

以还原型辅酶Ⅱ-黄递酶组织化学法对大鼠和人肺组织内一氧化氮合成酶(NOS)进行定位研究.结果显示:NOS广泛分布于各级支气管、肺泡管和部分肺泡囊上皮细胞及肺血管内皮细胞内.但肺泡及血管中、外膜NOS呈阴性反应,且NOS在大鼠和人肺组织内分布无明显区别.从而提示一氧化氮在肺组织的生理和病理学功能上可能发挥着重要作用.     

中枢胰岛素的存在、分布及与饮食的关系

用免疫组织化学法，在大鼠下丘脑、丘脑、大脑皮层、海马、第三脑室室管膜及脉络膜等脑组织细胞内发现有胰岛素存在，一些细胞的核内也似有胰岛素存在。免疫电镜结果再次证实了上述观察。用放射免疫法发现大鼠各脑区提取液中胰岛素含量高低不等。摄食活动可引起脑内胰岛素含量增加，尤以下丘脑为最，中枢胰岛素的作用之一即可能为参与机体能量平衡的调控。同时测定血浆、脑脊液及脑组织的胰岛素含量，结果表明脑内胰岛素不可能由血浆经脑脊液而进入，尚有其它来源。     

肝硬化大鼠肠神经丛一氧化氮合酶的分布

以组织化学方法对正常大鼠及肝硬化大鼠结肠及回肠壁内一氧化氮合酶(NOS)进行了定位研究,并用图像测量方法对两组大鼠肠壁内NOS进行了定量分析。结果表明:肝硬化大鼠结肠及回肠壁内NOS阳性纤维及胞体比正常组明显增多,染色增强;其面积参数、光密度参数值显著高于正常组,灰度参数值显著低于正常组(P<0.01)。从而提示一氧化氮在肝硬化门脉高压性肠道功能异常中具有重要作用。