Fas、FasL在大鼠肝癌中的表达及意义

目的:研究Fas、FasL在大鼠肝癌中的表达及其与细胞调亡和肿瘤发生、发展的关系.方法:应用免疫组织化学方法,对41只大鼠肝组织中的Fas及其配体FasL表达进行检测比较,其中34只经过暴露黄曲霉毒素B1(AFB1),28只出现癌变,6只未出现癌变,7只未经处理.结果:出现癌变大鼠肝组织和未出现癌变大鼠肝组织中的Fas表达率分别为25.0%、69.2%(P＜0.05).而FasL表达率分别为32.1%、53.8%(P＞0.05).结论:大鼠肝癌组织中Fas表达率要比未出现癌变的大鼠肝组织的表达率降低,Fas的低表达在大鼠肝癌的形成中可能起着重要的作用.     

原发性肝癌血清可溶性Fas与可溶性FasL的表达

目的：进行原发性肝癌血清可溶性ＦａｓＬ（ｓＦａｓＬ）与可溶性Ｆａｓ（ｓＦａｓ）的检测,以探讨其在肝癌发病机制中的作用。方法：采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法检测１８例原发性肝癌血清ｓＦａｓ与ｓＦａｓＬ水平。结果：肝癌组ｓＦａｓ与ｓＦａｓＬ均高于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论：可溶性Ｆａｓ与膜Ｆａｓ竞争性地与ＦａｓＬ结合,抑制肿瘤细胞凋亡。可溶性ＦａｓＬ可能通过转式机制导致别的表达Ｆａｓ的免疫细胞发生凋亡。从而使肿瘤细胞躲避免疫攻击。     

细胞凋亡相关基因Fas和FasL在大鼠苯巴比妥促肝癌过程中的表达研究

肿瘤发生是机体自稳态破坏,细胞异常过度增生,逃避免疫监视的结果。通过Fas(Apo-1)受体和Fas配体(FasL)介导的细胞凋亡,被认为是机体保持自稳态的重要机制之一。近年来的研究发现,Fas/FasL系统与肝癌的发生、发展和预后有密切关系。本实验研究了Fas及FasL在实验性大鼠肝癌促癌过程中的表达及作用。     

肺纤维化大鼠肺组织细胞凋亡及Fas/FasL基因的表达

目的:检测大鼠肺纤维化时肺组织细胞凋亡及Fas/FasL 基因的表达,探讨细胞凋亡在肺纤维化过程中的作用.方法:通过博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,同时设立正常对照组,采用TUNEL法、RT-PCR 和Western Blot法检测肺组织细胞凋亡、Fas/FasL mRNA以及蛋白的表达.结果:肺纤维化模型复制成功;模型组肺组织细胞凋亡率、Fas/FasL mRNA和蛋白表达均显著高于对照组.结论:细胞凋亡及Fas/FasL基因表达的上调在博来霉素致大鼠肺纤维化发生、发展的过程中起了重要作用.     

凋亡相关基因bcl-2、bax、Fas及FasL在乙型肝炎病毒相关性肝癌组织中的表达

目的 探讨原发性肝癌中乙型肝炎病毒感染与凋亡基因bcl-2、bax、Fas及FasL表达的关系。方法 采用免疫组化技术分析40例原发肝细胞癌组织中乙肝病毒表面抗原(HBsAg) 阳性组和HBsAg阴性组bcl-2、bax、Fas及FasL的表达。结果 癌组织中HBsAg阳性率为30%(12/40),癌旁组织中HBsAg阳性率为62.5%(25/40)。12例HBsAg阳性的癌组织中bcl-2和bax的阳性率比值为1：1.5(2/12: 3/12),28例HBsAg阴性的癌组织中bcl-2和bax阳性率比值为1:1.25(4/28: 5/28);25例HBsAg阳性和15例HBsAg阴性的癌旁肝细胞中bcl-2和bax的阳性率比值分别为1:3.2 (5/25：16/25) 和1:3(3/15: 9/15)。12例HBsAg阳性和28例HBsAg阴性的肝癌中Fas 和FasL阳性例数分别为6、5和1、1;25例HBsAg阳性和15例HBsAg阴性的癌旁肝细胞Fas和FasL阳性例数分别为17、5和4、3。两组间比较均有明显差异(P<0.05)。结论 肝癌组织中HBV感染与bcl-2和bax阳性表达比率无明显关系,而与Fas和FasL的表达有关。     

绿茶抑制黄曲霉毒素B1致大鼠肝癌作用的剂量—效应关系研究

在1984年,我们首次发现绿茶对黄曲霉毒素B_1(AFB_1)致大鼠肝癌作用有显著的抑制效果。随后,对不同产地、不同品系绿茶,时间一效应关系,阻断AFB_1诱发肝癌的长期动物实验等进行一系列研究。实验结果表明,绿茶的防癌作用非常显著。但在这些研究中,绿茶用量均为5%。为了解     

黄曲霉毒素B_1诱发大鼠肝癌的癌前病变与肝癌的组织发生学

用大鼠31只,喂食纯品AFB_1诱发肝癌观察其癌前病变及肝癌的组织发生学。其癌前病变有肝细胞不典型增生(58.06％);嗜酸性细胞增生灶(51.61％),用IIP-AFP多呈阳性,嗜碱性细胞增生灶(29.03％),IIP-AFP呈阴性。诱发出肝癌11例(35.48％),多中心起源7例、单中心起源4例。Ⅰ级分化9例,Ⅱ级分化2例。大细胞性肝癌7例,作IIP-AFP3例,有2例阳性,小细胞性肝癌4例,2例作IIP-AFP,1例阳性。6例肝癌作电镜观察显示大细胞性肝癌分化较好、小细胞性肝癌分化较差的亚微结构。其核仁均质化较为特殊。作者提出了AFB_1诱发肝癌的组织发生的设想,并认为肝癌的多中心与单中心起源均可存在。     

Fas/FasL与氧自由基在肺纤维化大鼠细胞凋亡中的作用研究

目的 探讨肺纤维化大鼠肺组织中Fas/FasL介导的细胞凋亡与氧自由基的关系。方法 将32只大鼠分为3组：对照组（16只）、模型7d组（8只）及模型28d组（8只）,测定博莱霉素致肺间质纤维化大鼠肺组织的细胞凋亡率、Fas/FasL表达和丙二醛（MDA）的含量。结果 模型7d组肺组织细胞凋亡增加,Fas/FasL表达增高（P〈0.01）,28d组细胞凋亡、Fas/FasL表达升高更为明显;模型7d组肺组织中MDA含量明显增加（P〈0.01）,28d组MDA含量下降但仍高于对照组（P〈0.05）。结论 肺纤维化大鼠细胞凋亡和氧自由基增加;Fas/FasL系统与氧自由基在大鼠肺纤维化中起着重要作用。     

黄曲霉毒素B_1诱发大鼠肝癌的实验病理研究

本实验以黄曲霉毒素B_1(AFB_1)诱癌,苯巴比妥钠(PB)和四氯化碳(CCl_4)促癌,建立了一种新的诱发大鼠肝癌的实验模型,并用病理组织学、形态定量测算及电子显微镜等方法,研究了癌变过程中变异肝细胞灶/给节的发生和发展及其与肝癌的关系。结果表明,PB和CCl_4能使变异细胞灶的数目和体积增加,而且可促进肝癌的发生。作者还发现,嗜酸细胞结节与高分化型肝细胞癌密切相关。     

胃癌发生发展中可溶型Fas/FasL的表达及其意义

目的:探讨Fas/FasL基因蛋白在胃癌发生发展中的作用。方法:应用免疫组化、特定组织蛋白提取及Westem印迹杂交技术,对20例正常胃黏膜,22例癌前病变和35例胃癌组织中Fas/FasL的表达情况加以分析。结果:正常胃黏膜、癌前病变、胃癌组织的Fas阳性率分别为85%、45%、37%;FasL的阳性率分别为20%、27%、46%。Western印迹杂交显示:胃癌细胞产生的Fas蛋白以分子量30 kDa的可溶型Fas(sFas)为主,伴少量的43 kDa膜型Fas(mFas)。结论:Fas在正常胃黏膜和癌前病变、胃癌组织中的表达强度差异有显著性(P<0.05);FasL在胃癌组织和正常胃黏膜、癌前病变中的表达强度差异有显著性(P<0.05)。     

Fas／FasL在肺癌中的表达

目的 探讨Fas／FasL在肺癌中的表达及意义。方法 采用免疫组化方法检测60例肺癌组织、癌旁组织及20例正常肺组织的Fas／FasL的表达。结果 Fas／FasL在肺癌组织中阳性表达率显著低于Fas／FasL在癌旁组织及正常肺组织中Fas／FasL表达率。Fas／FasL在非小细胞肺癌组织中阳性表达率显著低于Fas／FasL在小细胞肺癌中阳性表达率。Fas的阳性表达率与PTNM及淋巴结转移无明显相关，FasL的阳性表达率与PTNM及淋巴结转移明显相关。结论 Fas／FasL在肺癌的发生和发展中起重要作用。     

Fas/FasL在复发性自然流产患者中的表达

[目的]探讨复发性自然流产( RSA)患者绒毛滋养细胞 FasL的表达以及淋巴细胞 Fas表达与正常者有无差异.[方法]应用免疫组化检测 RSA患者和正常早孕妇女的绒毛滋养细胞 FasL表达,应用流式细胞仪检测其外周血淋巴细胞 Fas表达,并进行比较.[结果]免疫组化结果显示,绒毛合体滋养细胞和细胞滋养细胞的胞浆和胞膜上均有 FasL表达, FasL在两组的定位无差异,但正常组滋养细胞 FasL表达( PU=18.03± 4.69)强于 RSA组( PU=13.59± 3.73), P< 0.05.流式细胞仪检测结果表明, CD4 T淋巴细胞的 Fas表达两组比较无统计学差异. RSA组 CD8 T淋巴细胞的 Fas表达为 12.32% ± 2.78%,较正常组( 7.78%± 2.17%)高,( P< 0.01). RSA组 NK细胞 Fas表达为 14.23%± 3.67%,较正常组( 8.87%± 2.95%)高,( P< 0.01).[结论]不明原因 RSA患者的绒毛滋养细胞 FasL表达弱于正常者,并且其表达 Fas的 CD8 T淋巴细胞和 NK细胞均较正常妇女增多,表明 RSA患者存在 CD8 T淋巴细胞和 NK细胞的异常激活. Fas/FasL在 RSA发病中可能起重要作用.     

Fas/FasL、Bcl-2基因在急性阻塞性黄疸肝细胞中的表达及意义

目的研究Fas/FasL、Bcl-2基因在急性阻塞性黄疸肝细胞凋亡中的表达情况. 方法 SD大鼠30只,随机分为3组.A组为假手术组,B、C组为实验组,结扎胆总管,B组饲养7 d,C组饲养14 d.每组动物处置后观察肝细胞凋亡现象,检测肝细胞凋亡率和Fas、FasL、Bcl-2基因的表达情况.结果 (1)电镜观察到B、C组肝细胞有典型的凋亡现象.(2)各组间的肝细胞凋亡率比较有统计学意义(P<0.05).(3)各组大鼠肝细胞中Fas均有阳性表达,阳性率比较无显著差异(P＞0.05);各组FasL、Bcl-2阳性率有显著差异(P<0.05),C组高于B组.结论 (1)肝细胞凋亡率的升高是导致阻塞性黄疸肝损伤的一个重要机制.(2)Fas/FasL系统是阻塞性黄疸肝细胞凋亡的一个重要途径.(3)Bcl-2基因的表达是肝细胞抵制凋亡的一个重要表现.     

Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜患者T细胞亚群表达的研究

目的探讨Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜（rrP）患者T细胞亚群及血小板中的表达状况及其在ITP发病机制中的作用。方法收集ITP患者及健康人群外周抗凝静脉血,分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的anti-CRTH2mAb和cy5标记的anti-CD4、CD8mAb及FTTC标记的anti-Fas、FasL mAb做三色流式细胞术,分析ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化;以FITC标记的anti-Fas、FasL mAb作单色流式细胞术,分析ITP患者血小板Fas、FasL表达的变化。结果与健康人群相比,ITP患者外周血Th、Th1、Th2细胞百分率均明显下降（P〈0．05）,Tc、Tc1、Tc2细胞百分率均无明显变化（P〉0．05）;Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均明显升高（P〈0．05）;同时,111P患者血小板Fas的表达明显升高（P〈0．05）,而FasL的表达无明显变化（P〉0．05）。结论ITP患者存在免疫功能失调,T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP患者免疫病理机制有关。     

细胞凋亡和Fas/FasL系统在兔肺缺血再灌注损伤中的作用

目的:探讨细胞凋亡在兔肺缺血再灌注损伤中的作用及其基因调控机制.方法:健康日本大耳白兔48只,随机分为对照组与肺缺血再灌注损伤1 h、3 h和5 h组.复制肺缺血再灌注损伤模型.采用TUNEL法观测肺组织细胞凋亡指数,以免疫组化及原位杂交技术检测肺组织细胞Fas/FasL系统蛋白和基因表达的变化.结果:兔肺缺血再灌注损伤后,肺组织细胞凋亡明显高于对照组(P均＜0.01),尤其是肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞;Fas及FasL在肺缺血再灌注损伤后表达明显上调(P均＜0.01).肺组织细胞凋亡指数分别与Fas、FasL蛋白和Fas及FasL mRNA之间均呈显著正相关(r分别为0.659,0.747,0.731,0.759;p均＜0.01).结论:肺组织细胞凋亡和Fas/FasL系统活化可能参与了肺缺血再灌注损伤的发生.     

左归丸对免疫性卵巢早衰小鼠卵巢Fas、Fas—L表达的影响

目的：探讨免疫性卵巢早衰小鼠（POF）卵巢Fas、Fas-L蛋白的表达及补肾复方左归丸的影响。方法：以小鼠透明带3为抗原，皮下多点注射免疫BALB／C雌性小鼠建立免疫性卵巢早衰模型。设左归丸低、中、高不同剂量进行治疗，以泼尼松、己烯雌酚为阳性对照，免疫组化法检测卵巢卵泡、间质Fas、FasL蛋白的表达。结果：POF小鼠大、小卵泡Fas蛋白表达均明显减少，小卵泡、间质FasL表达均明显增强。左归丸各剂量组大、小卵泡Fas表达明显增强；左归丸低剂量组间质Fas表达也增强，小卵泡FasL表达减弱；左归丸高剂量组问质Fas表达也均增强，与模型组相比差异显著。结论：POF小鼠Fas／FasL系统平衡失调，B细胞凋亡减弱，抗体聚集，抑制免疫应答的效应减低，导致对卵巢的免疫性损伤，卵巢功能的破坏、衰竭。补肾中药复方左归丸可通过调节Fas／FasL系统平衡，调节免疫反应及细胞毒性淋巴细胞功能，促进B细胞凋亡，抑制抗体聚集，减轻卵巢免疫炎性反应，改善卵巢功能。     

Fas/FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯睾丸毒性机制中的作用

目的 探讨细胞凋亡Fas／FasL系统在邻苯二甲酸二丁酯（DBP）的雄性生殖毒性机制中的作用。方法 在大鼠多代繁殖实验的基础上,运用免疫组织化学染色的方法,通过对睾丸组织损伤的观察和细胞凋亡相关蛋白（Fas／FasL）的检测和分析,探讨不同剂量DBP对成年F;代大鼠（PND70天）睾丸损害的情况及可能的作用机制。结果 与对照组相比较,随着DBP染毒剂量的增高,PND70天F1代雄性大鼠睾丸曲细精管生精上皮退化变性,生精细胞脱落至曲细精管管腔面,甚至有部分曲细精管内的生精细胞耗竭;免疫组织化学染色结果表明,与对照组相比,中、高剂量组（每天250和500mg／kg）大鼠睾丸组织Fas／FasL染色范围扩大,着色细胞数量增多,且存在剂量-反应关系。结论 DBP对大鼠睾丸生精细胞损伤可能是由于DBP启动了睾丸支持细胞Fas／FasL系统,阻抑生精过程造成的,Fas／FasL系统在DBP的雄性生殖毒性中起一定作用。     

问号钩端螺旋体诱导J774A.1细胞FasL/Fas表达上调及FasL/Fas相关细胞凋亡的研究

目的：了解FasL／Fas途径参与问号钩端螺旋体（简称钩体）诱导细胞凋亡及其FasL／Fas表达水平变化。方法：建立问号钩体黄疸出血群赖型56601株感染小鼠单核一巨噬细胞J774A．1模型。采用DAPI染色法观察问号钩体56601株感染细胞凋亡的形态学特征，流式细胞术定量检测感染细胞的凋亡率及FasL中和抗体对细胞凋亡的阻断作用。PE标记抗小鼠FasL或Fas单克隆抗体染色法，观察问号钩体56601株感染细胞FasL／Fas表达情况。采用流式细胞术定量检测感染细胞的FasL／Fas表达水平。结果：问号钩体56601株感染J774A．1细胞4h时，部分细胞出现染色质浓缩及边缘化现象；感染24h时上述病变现象更加明显且有部分细胞核裂解。问号钩体56601株感染J774A．1细胞4h和24h的凋亡率分别为53．6％和64．31％。FasL中和抗体预处理细胞后，问号钩体56601株感染细胞4h或24h的凋亡率分别为10．27％和15．90％。J774A．1细胞被问号钩体56601株感染后4和24h，FasL表达率分别从感染前的4．19％上升至21．69％和65．70％，Fas表达率分别从感染前的12．88％上升至91．96％和88．01％。结论：诱导细胞凋亡是问号钩体56601株损伤J774A．1细胞的重要机制。问号钩体可上调靶细胞FasI。／Fas表达水平；并通过FasL／Fas途径诱导J774A．1细胞凋亡。     

Fas/FasL系统与肿瘤

Fas(CD95)属于肿瘤坏死因子(TNF)和神经生长因子(NGF)受体超家族成员,它在多种细胞表面均有表达。Fas与其天然配体结合可引起表达Fas的细胞凋亡。在多种肿瘤细胞出现Fas表达下调和Fas配体(FasL)表达上调的现象,这与清除肿瘤浸润性淋巴细胞和抑制抗肿瘤免疫反应有关,参与了肿瘤的免疫逃逸。而且,特殊的肿瘤微环境也参与了肿瘤的进展和转移。通过各种药物或基因转染的方法可恢复Fas-FasL介导的肿瘤细胞凋亡,为肿瘤治疗开辟了广阔的前景。