解脲支原体MB抗原的研究进展

解脲支原体与多种疾病有关,但引起疾病的确切机制尚不清楚。MB抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外膜抗原,具有种特异性,包含血清型特异的和交叉反应的抗原决定簇。编码MB抗原的基因长1200多个碱基,N端1/3为保守区,包含群特异的抗原决定簇;C端2/3是由重复序列组成的可变区,包含型特异的抗原决定簇,对该抗原的研究及对于研究疾病的发病机制和免疫机制起重要作用。     

解脲支原体MB抗原的研究进展

解脲支原体与多种疾病有关,但引起疾病的确切机制尚不清楚。ＭＢ抗原是解脲支原体感染时被识别的主要外膜抗原,具有特种异性,包含血清型特异的和交叉反应的抗原决定簇。编码ＭＢ抗原的基因长１２００多个碱基,Ｎ端１／３为保守区,包含群特异的抗原决定簇;Ｃ端２／３是由重复充列组成的可变区,包含型特异的抗决定簇,对该抗原的研究及对于研究疾病的发病和免疫机制起重要作用。     

解脲支原体第一群的分型研究

目的 利用分子生物学方法对解脲支原体第一群进行分型,建立简便,可靠的分型方法。方法 设计分型引物,用ＣＲ和限制性内切酶消化的方法进行分型。结果 设计了解脲支原体的分型引物ＵＭＳ５１１ＵＭＡＵ１和ＵＭＳ５１１ＵＭＡＵ３,前者扩增出Ｕｕｌ型和Ｕｕ６型,后者扩增出Ｕｕ３型和Ｕｕ１４型。     

解脲支原体血清3型MB抗原N端的表达纯化及免疫学检测

目的 对解脲支原体（UU）血清3型MB抗原N端作蛋白的表达、纯化。方法 采用pGEX2T载体构建的重组质粒,用化学诱导剂IPTG诱导表达,应用Western斑点印迹法检测纯化融合蛋白的免疫学活性。结果 得到的UU3型MB抗原基因5′端重组克隆菌株,成功地诱导表达并纯化了N端43KD的融合蛋白,通过斑点印迹法证实该蛋白具有很好的免疫活性。结论 本实验成功地对解脲支原体血清3型MB抗原N端作了蛋白的表达与纯化,并证明具有很好的免疫活性。     

Ro52抗原119-264位氨基酸片段克隆及其抗原性研究

目的 研究Ro52抗原的第119至第264位氨基酸片段(含亮氨酸拉链基序)在抗原表位构成中的作用。方法 用PCR法从人类心脏cDNA第一链中扩增编码第119至第264位氨基酸的基因片段,定向插入表达质粒pMTY4,转导入宿主菌pop2136诱导表达融合蛋白,重组融合Ro52抗原片段纯化后用免疫印迹法进行抗原性检测。结果 重组Ro52抗原的第119至第264位氨基酸片段的融合蛋白相对分子质量为28000,该融合蛋白在宿主菌中高水平表达,形成包涵体。在42份抗Ro52抗体阳性血清中,26份(61.90%)可与重组融合蛋白反应。结论 所克隆的含亮氨酸拉链基序的第119至第264位氨基酸片段是Ro52抗原的重要抗原表位区段。     

解脲支原体基因群与非淋菌性尿道(宫颈)炎相关性研究

目的:探讨解脲支原体(Uu)基因群与非淋菌性尿道(宫颈)炎[NGU(MPC)]的相关性。方法:采用病例对照研究,收集单纯Uu阳性的性病门诊NGU(MPC)患者和非NGU(MPC)就诊者尿道拭子/宫颈拭子标本,通过培养法和PCR法检测Uu及基因分群。结果:共收集标本137例。男性组Uu基因群1占24.3%(18/74),基因群2占59.5%(44/74),基因群1,2同时阳性6.8%(5/74);女性组Uu基因群1占38.1%(24/63),基因群2占54%(34/63),基因群1,2同时阳性7.9%(5/63)。男女性别中Uu分布均以基因群2为主,Uu基因群1,2在男性NGU组与非NGU组间、女性MPC组与非MPC组间的分布没有统计学差异(P均>0.05)。结论:不同基因群Uu在尿道(宫颈)炎患者与非尿道(宫颈)炎就诊者之间的分布无差异,提示与非淋菌性尿道(宫颈)炎无相关性。     

解脲支原体第一群各型在不同人群泌尿生殖道中的检测

解脲支原体 (Uu)为性传播疾病 (STD)中非淋菌性尿道炎 (NGU)的重要病原体之一,分为 2个生物群和 14个血清型。第 1群包括 1、 3、 6、 14四个血清型,第 2群包括其余 10个血清型 [1]。在人类泌尿生殖道定殖或引起感染的 Uu绝大部分为第 1群 [2]。本研究首先用 Uu分群引物对 321份泌尿生殖道标本进行 PCR扩增分群,在此基础上,对 Uu阳性标本进一步用分型引物结合酶切的方法进行分型研究。最后再根据型的酶切位点,用特异的限制性内切酶对分型结果进一步验证,初步探讨 Uu分群分型在不同人群泌尿生殖道定殖与感染的关系。 一、材料与…     

解脲支原体药敏与tetM基因检测及生物群的研究

目的：了解泌尿生殖道支原体的耐药性机理,指导临床治疗。方法：采用微量肉汤稀释法测定281株UU对5种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,用PCR法扩增tetM基因并酶切,用UU MB抗原基因引物对 tetM基因阳性UU株进行生物群的研究。结果：281UU 82株对四环素MIC为16－256ug/ml,39株为8ug/ml,7株为4ug/ml,153株MIC＜4ug/ml;121株MIC大于等于8ug/ml及2株MIC＝4ug/ml者均出现377bp tetM基因阳性带;阳性检测率为43．77％。158株UU MIC小于等于4ug/ml未见类似扩增带,扩增产物用Hpa II酶切和电泳分析,均产生279bp和98bp两个特异性片段。281株UU用群特异性PCR分析,生物群1有166株,生物群2有115株,123株tetM阳性UU株,属生物群1,2者分别有54株和69株,分别占32．53％（54／166）和60．0％（69／115）（X2＝7．94,P＜0．05）,结论：（1）PCR技术检测泌尿生殖道感染患者UU耐药性tetM基因具有特异,敏感,快速等优点;（2）载有tetM基因的UU株可能成为四环素耐药株,应进行监测及随访;（3）我国衡阳地区UU四环素耐药株以生物群2占优势。     

烟曲霉组氨酸激酶基因片段的克隆及表达分析

目的分离克隆烟曲霉组氨酸激酶基因,进一步探讨其在侵袭性感染中的作用。方法基于组氨酸激酶保守区设计简并引物,通过逆转录－聚合酶链反应获得特异性扩增产物,对目的产物克隆、测序。通过Blast分析进行相似性比较。以获得的目的基因片段作为探针,通过Northern杂交比较该基因在体外与体内感染时表达的差异。结果逆转录－聚合酶链反应获得2个片段,长度分别为171bp、305bp,其中305bp片段与构巢曲霉tesA基因的同源性>80％。该基因在小鼠侵袭性肺曲霉病中表达水平明显增加。结论烟曲霉组氨酸激酶基因的表达可能有助于其在体内存活,该基因可能是烟曲霉潜在的毒力基因。     

解脲支原体培养基的改良研究

解脲支原体(ＵＵ)能引起男女生殖道感染,是导致男性不育和女性不孕的重要原因之一,因而受到生殖医学家的重视。目前国内外多采用传统的解脲支原体培养基予以培养检查。由于传统培养基中抑制杂菌生长的药物———青霉素不稳定,在低浓度的水溶液中,尤易分解丧失其活性;同时,我们在检查中发现,非淋菌性尿道炎患者,凝固酶阴性葡萄球菌如表皮、溶血、人葡萄球菌感染率很高,对青霉素耐药率达88.48%;酵母样真菌感染也很普遍,还有一定数量的非发酵菌等。上述这些细菌当不能被培养基中的抑菌剂抑制时,会导致培养基长菌混浊,从而影响ＵＵ阳性检出率。…     

解脲支原体中tetM基因的检测及临床应用评价

近年来对解脲支原体(Ｕｕ)的耐药性研究表明,ｔｅｔＭ基因是介导Ｕｕ对四环素耐药的唯一基因[1]。能否用检测ｔｅｔＭ基因来反映Ｕｕ对四环素或四环素类其它抗生素的耐药性尚不清楚。本研究应用聚合酶链反应(ＰＣＲ)方法检测ｔｅｔＭ基因,并将其结果与微量肉汤稀释法检测药物敏感性及临床疗效进行综合分析,以图明确ｔｅｔＭ基因在Ｕｕ耐药性中的作用。一、材料与方法(一)材料:1.实验菌株:2株Ｕｕ标准菌株(血清型8ＴｃＳ和血清型9ＴｃＲ,由加拿大Ａｌｂａｔａ大学Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ教授赠送),1株金黄色葡萄球菌标准菌株(由中山医科大学微生…     

解脲脲原体不同基因群与男性非淋菌性尿道炎相关性的研究

目的 探讨解脲脲原体（Uu）不同基因群与男性非淋菌性尿道炎（NGU）的相关性。方法 病例对照研究结合横断面研究收集402例标本，用3对PCR引物对标本进行基因分群。结果 3对引物将Uu 14个血清型明确分成两个基因群，细小脲原体（Urealpasma parvum，Up）和解脲脲原体（Urealpasma urealyticum，Uu’）。未做基因分群时，Uu阳性率在NGU组、非NGU就诊者组及健康体检组3组人群间无差异。分群后．Up在NGU组和健康体检组间、非NGU就诊组与健康体检组间的定植率差异有统计学意义．P均〈0．01，而在NGU组和非NGU就诊组间定植率差异无统计学意义，P=0．380。Uu’在NGU组和非NGU组间阳性率差异无统计学意义，P=0．704，但在NGU组和健康体检组、非NGU就诊者与健康体检组间的阳性率差异有统计学意义，P均〈0．01。排除沙眼衣原体感染后，3组人群Uu定植率差异仍无统计学意义，Up在NGU组和健康体检组间定植率的差异有统计学意义，P=0．04；在非NGU就诊者与健康体检组间定植率差异有统计学意义（P=0．005）。Uu’在非NGU就诊组和健康体检组间定植率差异有统计学意义，P=0．01。男男性接触者（MSM组）Up阳性率为3．63％、Uu’阳性率为14．54％，定植情况不同于异性性接触者。结论 提示Uu’的定植与高危性行为有关，但与尿道炎无相关性，Up可能是尿道正常定植的菌群。     

解脲脲原体及人型支原体的耐药性分析

为了解本地区解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)感染的耐药情况,我们检测了8种抗生素的耐药性,旨在为治疗支原体感染提供选择抗生素的依据。     

解脲支原体感染的血清学研究现状

解脲支原体是人类非淋菌性尿道炎的主要病原体之一。本文介绍了解脲支原体的血清学试验方法,血清学异质性,血清型和人类疾病的关系,解脲支原体的抗原特性以及解脲支原体感染的血清抗体检查及其临床意义。     

慢性前列腺炎患者解脲支原体及人型支原体感染的研究

对９０例性病门诊慢性前列腺炎患者前列腺液及３６例正常对照组的前列腺液进行解脲支原体（ＵＵ）及人型支原体（ＭＨ）培养。结果表明，慢性前列腺炎组ＵＵ阳性１８例（２０．００％），ＭＨ阳性４例（４．４４％）；对照组ＵＵ、ＭＨ均为阴性。两组ＵＵ阳性率，经统计学处理有显著性差异（Ｐ〈０．０１）。作者认为，ＵＵ是性病后慢性前列腺炎的主要病原体之一。     

解脲支原体感染的血清学研究现状

解脲支原体是人类非淋菌性尿道炎的主要病原体之。本文介绍了解脲支原体的血清学试验方法，血清学异质性，血清型和人类疾病的关系，解脲支原体的抗原特性以及解脲支原体感染的血清抗体检查及其临床意义。     

解脲支原体培养基改良的实验室研究

在传统的解脲支原体培养基中增加了血清含量，补充了抑制剂，改进了培养基。对１１０例性病门诊患者采用传统和改良的两种培养基同时检测，结果表明，改进后的培养基阳性者３８例（３４．５％），传统培养基阳性者１８例（１６％），两者之间有显著差异（χ＾２＝１８．６７８ｐ〈０．０１）。     

生殖支原体粘附蛋白基因片段重组后的表达

生殖支原体寄生于泌尿生殖道,可引起人类的非淋菌性尿道炎.目前研究表明生殖支原体细胞膜上的特异顶端结构可能是致病的主要原因^[1].具有粘附功能的相对分子质量为140000粘附蛋白即位于该结构中^[2].我们利用分子克隆技术得到了生殖支原体粘附蛋白一基因片段所编码的蛋白,获得了相对分子质量约为35000的融合蛋白.通过免疫印迹方法检测证实该基因产物具有免疫活性.