P53及Bcl-2蛋白在大肠腺瘤及腺癌中的表达

目的：检测大肠腺瘤及腺癌中Ｐ５３蛋白及Ｂｃｌ－２蛋白的表达，探讨ｐ５３基因、ｂｃｌ－２基因在大肠癌发生发展过程中的作用。方法：应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测１０例正常大肠粘膜、３０例大肠腺瘤、１００例大肠腺癌及癌旁粘膜中Ｐ５３蛋白及Ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果：大肠腺瘤Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白阳性率分别为２６．７％及７６．７％，大肠腺癌Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白阳性率分别为４３％及６７％，均显著高于正常粘膜与癌旁粘膜（Ｐ＜０．０１）；随着腺瘤不典型增生程度的加重，Ｐ５３蛋白阳性率显著增高（Ｐ＜０．０１），而Ｂｃｌ－２蛋白表达与腺瘤分级无关；大肠腺癌Ｐ５３蛋白阳性率显著高于腺瘤Ⅰ级不典型增生（Ｐ＜０．０１），与Ⅱ、Ⅲ级不典型增生间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），分化差的大肠腺癌Ｐ５３蛋白阳性率显著高于分化好的大肠腺癌（Ｐ＜０．０１），而分化差的大肠腺癌Ｂｃｌ－２蛋白阳性率显著低于分化好的大肠腺癌（Ｐ＜０．０５），大肠腺癌Ｐ５３、Ｂｃｌ－２蛋白表达呈负相关（Ｐ＜０．０５）；Ｐ５３蛋白表达患者复发率高、５年生存率低（Ｐ＜０．０５），Ｂｃｌ－２蛋白过度表达的大肠癌患者复发率低、５年生存率高（Ｐ＜０．０５）。结论：ｂｃｌ－２     

IP_6诱导肝癌细胞HepG2凋亡及其对Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的研究肌醇六磷酸（IP6）对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用及其对相关蛋白表达的影响。方法将不同浓度IP6作用于体外培养的HepG2细胞,应用Hoechst 33258染色在荧光显微镜下观察HepG2细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测IP6对HepG2细胞凋亡率的影响;免疫细胞化学法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化。结果荧光显微镜下可观察到细胞凋亡的形态学改变;IP6作用后的HepG2细胞凋亡率升高且与药物剂量呈依赖关系（F=342.15,q=2.98～28.53,P〈0.05）;与0 mmol/L IP6组相比,1.0、2.0、3.0 mmol/L IP6组均有效抑制Bcl-2的表达（F=110.21,q=5.88～16.92,P〈0.05）,上调Bax的表达（F=26.00,q=2.97～8.19,P〈0.05）。结论 IP6可能通过调控Bcl-2及Bax蛋白的表达而诱导HepG2细胞的凋亡。     

P53,Bcl-2与Bax蛋白在胃癌组织中的表达

①目的 探讨P53,Bcl-2与Bax蛋白在胃癌组织中的表达及意义。②方法 应用免疫组化技术，检验45例胃癌组织、21例胃溃疡组织中P53，Bcl-2,Bax蛋白的表达。③结果 胃癌组织中P53，Bcl－2，Bax蛋白的阳性表达率分别为42．2％，4．4％、93．3％，胃溃疡组织中的阳性率分别为0，0，52．4％，P53与Bax表达在胃癌及胃溃疡组织中的表达差异有显著性（uc＝4．48，6．35，P＜0．01），Bcl－2蛋白在胃癌及胃溃疡组织中的表达差异无显著意义（uc＝0．50，P＞0．1）。④结论 P53，Bax蛋白的表达与胃癌的发生可能有关。     

喉鳞癌组织中P53、Bcl-2和Bax蛋白的表达

目的:探讨喉癌癌变过程中P53、Bcl -2和Bax蛋白表达的临床意义。方法:用免疫组织化学方法,检测20例喉正常黏膜(LNM)、38例喉不典型增生(LAH)和 50例喉鳞癌(LSCC)组织中P53、Bcl- 2和Bax蛋白的表达。结果: LNM、LAH和LSCC组织中P53阳性表达率分别为 0 (0 /20)、52. 6% (20 /38)和 62. 0% (31 /50);Bcl- 2阳性表达率分别为 5. 0% ( 1 /20 )、76. 3% ( 29 /38 )和 50. 0% ( 25 /50 );Bax阳性表达率分别为 75. 0% ( 15 /20 )、50. 0%(19 /38)和 64. 0% (32 /50); 3种组织间P53及Bcl 2阳性表达率差异有统计学意义 (χ2 分别为 22. 722, 26. 698,P均<0. 01),但Bax的表达差异无统计学意义 (χ2 =3. 773,P=0. 152)。LSCC组织中Bcl 2阳性表达率与病理分级和淋巴结转移相关(P<0. 01),P53及Bax与各病理指标均无关 (P>0. 05)。在LSCC组织中,P53和Bcl- 2阳性表达率呈负相关 (rs= -9. 453,P<0. 01 ),而P53与Bax之间、Bcl 2和Bax之间无相关性 (rs分别为 0. 077,-0. 167,P均>0. 05)。结论: P53和Bcl 2异常表达是LSCC发生过程中的早期事件。bcl -2基因过表达与LSCC病理分级和淋巴结转移密切相关。联合检测P53和Bcl 2蛋白的表达状况将有助于LSCC的早期诊断和预后判断。     

小细胞肺癌组织中突变型P53与Bcl-2蛋白的表达与生存期的关系

目的:探讨小细胞肺癌组织中突变型P53与Bcl-2的表达对生存期的影响.方法:用SP免疫组化法检测40例小细胞肺癌组织中突变型P53与Bcl-2蛋白的表达情况,并将生存期进行相关分析.结果:小细胞肺癌组织中突变型P53与Bcl-2蛋白的阳性表达率明显高于正常肺组织(P＜0.05).突变型P53或Bcl-2蛋白阳性表达组生存期明显低于阴性表达组(P＜0.05).结论:突变型P53与Bcl-2蛋白阳性表达均与小细胞肺癌的预后有关.     

低剂量电离辐射对小鼠睾丸生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响

目的：研究低剂量X射线对小鼠睾丸生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响。方法：采用免疫组织化学方法（SABC法）观察不同低剂量X射线照射后各类生精细胞P53和Bcl-2蛋白表达的剂量及时程效应关系。 结果：低剂量照射后各类生精细胞不同程度表达P53和Bcl-2。P53蛋白表达主要见于精原细胞和精母细胞,前者阳性率高于后者,并且随照射剂量增加而逐渐升高,而精子细胞和精子阳性率较低;Bcl-2蛋白主要表达于精子细胞和精子,并且随照射剂量增加而逐渐降低,而精原细胞和精母细胞Bcl-2蛋白表达阳性率较低。 结论：低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸各类生精细胞p53和Bcl-2蛋白表达具有一定规律性,两者在生精细胞表达的结果相反。     

Bcl-2过度表达对全脑缺血再灌注后大鼠海马回P53蛋白表达的影响

目的：研究过度表达Bcl-2的大鼠全脑缺血再灌注后P53在海马回的表达,探讨Bcl-2的抗凋亡作用及机制。方法：雄性健康SD大鼠随机分为3组（n=30）。缺血再灌注组（IR组）,采用4-血管法建立全脑缺血再灌注模型,6 min缺血后给予再灌注;假手术组（SO组）,只暴露血管而不夹闭;Bcl-2过度表达组（Bcl-2组）,Bcl-2过度表达大鼠模型造模成功后处理同IR组。所有动物于6、12、24、48、72及96 h行4%多聚甲醛灌注处理,将脑组织切片行免疫组化染色、原位末端标记法和HE染色,光镜下观察P53在海马回CA1和CA3区的表达、神经元形态及结构的变化以及凋亡神经细胞数,结果行统计学分析。结果：① 全脑缺血再灌注后24 h,IR组CA1区P53蛋白开始表达,程度较弱,随后逐渐增加,于72 h达高峰后下降,主要位于胞核;CA3区于再灌注后48 h才出现P53蛋白的表达,72 h达高峰,但表达强度较CA1区弱（P<0.05）。Bcl-2组CA1和CA3区P53蛋白表达强度均弱于IR组（P<0.05）,主要位于胞浆。② HE染色：全脑缺血再灌注后72 h,IR组CA1区有明显组织水肿,神经元数目降低,排列紊乱,核膜不清晰,未见核仁;CA3区神经元损伤程度较CA1区轻（P<0.05）;Bcl-2组神经元损伤较IR组轻（P<0.05）。③原位末端标记法染色：与SO组比较,IR组海马CA1区全脑缺血再灌注后24～48 h凋亡细胞数最多（P<0.01）,再灌注后72 h海马CA1区凋亡细胞数开始减少;与IR组比较,Bcl-2组凋亡细胞均较少（P< 0.05）。结论：Bcl-2过度表达可抑制大鼠全脑缺血再灌注后P53在海马回的表达。     

动脉粥样硬化斑块中平滑肌细胞凋亡及p53、bcl-2、c-myc基因的表达

目的　探讨动脉血管平滑肌细胞凋亡在动脉粥样硬化发生、发展中的作用及细胞凋亡与 p5 3、bcl- 2、c- m yc表达的内在联系 ,为动脉粥样硬化的防治提供新的思路。　方法　(1)选择因动脉粥样硬化住院手术患者 2 0例为观察组 ,因意外伤害手术患者的正常动脉 10例为对照组。两组标本均经病理切片证实。 (2 )采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的d UTP缺口末端标记 (TU NEL)技术比较两组动脉平滑肌细胞凋亡的差异。 (3)应用免疫组织化学方法检测动脉平滑肌细胞 c- myc、bcl- 2和 p5 3等凋亡相关基因表达的差异。 (4 )应用透射电镜观察动脉粥样硬化及对照组动脉平滑肌细胞形态学差异。　结果　动脉粥样硬化组动脉平滑肌细胞凋亡率明显增加 ,C- m yc蛋白、P5 3蛋白表达明显升高 ,Bcl- 2蛋白表达明显降低 (P<0 .0 0 1)。　结论　动脉平滑肌细胞凋亡与增生共同参与动脉粥样硬化的发生、发展。c- myc基因和 p5 3基因促进细胞凋亡 ,而 bcl- 2基因抑制细胞凋亡     

IP6诱导肝癌细胞HepG2凋亡及其对Bcl-2和Bax蛋白表达影响

目的研究肌醇六磷酸(IP6)对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用及其对相关蛋白表达的影响。方法将不同浓度IP6作用于体外培养的HepG2细胞,应用Hoechst 33258染色在荧光显微镜下观察HepG2细胞凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测IP6对HepG2细胞凋亡率的影响;免疫细胞化学法检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2及Bax表达的变化。结果荧光显微镜下可观察到细胞凋亡的形态学改变;IP6作用后的HepG2细胞凋亡率升高且与药物剂量呈依赖关系(F=342.15,q=2.98～28.53,P<0.05);与0 mmol/L IP6组相比,1.0、2.0、3.0 mmol/L IP6组均有效抑制Bcl-2的表达(F=110.21,q=5.88～16.92,P<0.05),上调Bax的表达(F=26.00,q=2.97～8.19,P<0.05)。结论 IP6可能通过调控Bcl-2及Bax蛋白的表达而诱导HepG2细胞的凋亡。     

同步热放化疗对宫颈癌组织Bax、Bcl-2、P53蛋白表达的影响

目的研究同步热放化疗治疗宫颈癌的疗效,分析治疗前和治疗中对宫颈癌组织Bax、Bcl-2、P53蛋白表达的影响。方法将40例宫颈癌Ⅲb期分为同步热放化疗组（H＋CRT组）和同步放化疗组（CRT组）,观察比较局部肿瘤消退情况和1、2、3年累积生存率;采用免疫组化法检测两组治疗前、中宫颈肿瘤组织中Bax、Bcl-2、P53蛋白表达。结果在完成体外照射27Gy时H＋CRT组局部肿瘤完全消退率高于CRT组（P〈0.05）,但两组患者1、2、3年累积生存率比较差异无显著性（P〉0.05）;治疗中H-CRT组Bax蛋白表达率较治疗前明显增高（P〈0.05）,且较治疗中CRT组高（P〈0.05）。H-CRT组Bcl-2/Bax比值治疗中较治疗前下降（P〈0.05）;CRT组P53蛋白在治疗中阳性表达率较治疗前增高,且较H-CRT组高（P〈0.05）。结论同步热放化疗治疗宫颈癌可以提高局部肿瘤的消退率,机制可能为上调Bax表达,使Bcl-2/Bax比值下降,促进细胞凋亡;也可能抑制P53基因突变,增强肿瘤细胞对放化疗的敏感性。     

海龙蛋白质提取物诱导宫颈癌Hela细胞凋亡的机制

目的 研究海龙蛋白质提取物对宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的诱导作用.方法 采用MTT法检测蛋白质提取物对细胞生长的抑制情况,采用Annexin WPI流式细胞分析法检测细胞凋亡,Western blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2、P53的表达.结果 不同浓度海龙蛋白质提取物对Hela细胞的增殖有抑制作用,具有时间和浓度依赖性.Annexin V/PI流式细胞分析显示,加药组早期凋亡率分别为29.18±0.65、39.32±0.78、51.21±1.13、61.56±1.09,与对照组（9.82±0.18）差异有统计学意义（P＜0.05）;晚期凋亡率加药组分别为3.20±0.03、7.48±0.06、11.11±0.07、14.60±0.03,与对照组（1.12±0.09）差异有统计学意义（P＜0.05）.Western blot检测发现随着蛋白质提取物浓度的升高,Bax、P53蛋白的表达逐渐升高,Bcl-2蛋白的表达逐渐降低.结论 海龙蛋白质提取物在一定浓度范围内可在体外抑制Hela细胞增殖并诱导其凋亡,且随蛋白质提取液浓度的升高,凋亡率显著增加,可能的机制是增强促凋亡蛋白Bax、P53的表达,降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达.     

榄香烯对人宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应

目的研究中药榄香烯对人宫颈癌细胞Hela的体外抑瘤效应及其作用机制.方法应用MTT比色法观察榄香烯对细胞的生长抑制作用;DNA凝胶电泳和流式细胞术等分析细胞凋亡、周期变化及Bcl-2蛋白表达情况.结果榄香烯对Hela细胞有较强的体外增殖抑制作用.榄香烯能诱导Hela细胞凋亡,同时伴随有Bcl-2蛋白表达下调.结论榄香烯对Hela细胞有较强的抗瘤效应,可能与Bcl-2蛋白下调引起的细胞凋亡有关.     

Bcl-2和P53蛋白在前列腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨P53和bc l-2蛋白在前列腺癌的表达水平及其与前列腺癌发生发展的关系.方法采用免疫组化方法检测32例前列腺癌患者bc l-2及P53蛋白的表达水平.结果bc l-2及P53蛋白在前列腺癌的阳性率分别为43.8%及28.1%,均高于良性前列腺增生的阳性率,但无统计学差异(P>0.05).在前列腺癌中,低分化组bc l-2的表达水平明显高于高及中分化组(P<0.05).P53的表达水平在上述各组之间均无统计学差异(P>0.05).结论前列腺癌bc l-2蛋白的表达异常增高,可能与前列腺癌的发生发展有关,检测bc l-2蛋白的表达水平可以作为前列腺癌诊断及预后判断的一项参考指标.     

低强度电磁场对大鼠生精细胞P53及Bcl-2表达的影响

目的探讨低强度电磁场对大鼠生精细胞P53和Bcl-2表达的影响。方法选择Wistar大鼠60只,随机分为于0．1mT,12．8mT电磁场暴中露2周和12周组及对照组,每组10只。持续2周和12周,摘眼球取血,测血清卵泡雌激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）含量,麻醉大鼠后摘取睾丸,应用免疫组织化学的方法检测睾丸P53和Bcl-2的表达,并应用图像分析系统进行测定。结果与正常对照组相比较,于0．1mT、12．8mT电磁场中暴露2周和12周,P53灰度值升高,Bcl-2灰度值下降,两者均有统计学意义。结论随着电磁场强度的升高和在磁场中暴露时间的延长,大鼠生精细胞P53的表达明显上调,Bcl-2的表达逐渐下降。     

小儿急性白血病骨髓细胞Bcl-2和P~(53)蛋白的表达

目的　探讨小儿急性白血病骨髓细胞Bcl- 2、P53 蛋白的表达状态。方法　以SP免疫组化法对 41例患者及 11例对照骨髓细胞Bcl- 2、P53 蛋白进行检测 ,高倍镜下计数 5 0 0个细胞 ,P53 阳性细胞≥5 %为阳性病例 ,Bcl- 2≥ 10 %为阳性病例。结果　Bcl- 2蛋白表达率在小儿ALL、ANLL及ALL高危型中均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 0 1,P <0 .0 1) ,ALL标危型与对照组相比无差异 (P >0 .0 5 ) ,但ALL高危型高于标危型 ,ANLL高于ALL(P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 )。P53 蛋白表达率在ALL、ANLL、ALL高危型及标危型均显著高于对照组 (P <0 .0 5 ,P <0 .0 1,P <0 .0 5 ,P <0 .0 5 ) ,ALL高危型与标危型及ALL与ANLL之间无差异 (P >0 .0 5 )。结论　P53 突变及Bcl- 2表达增强参与了小儿急性白血病骨髓细胞的恶性转化 ,但其作用机制可能是相互独立的。     

通痹灵对CIA大鼠软骨细胞凋亡及其调控基因p53、Bcl-2表达作用的比较研究

目的探讨中药通痹灵在类风湿关节炎(RA)发病中对软骨细胞凋亡及其基因p53、Bcl-2调控的作用机制.方法采用大鼠CIA模型,分别予通痹灵、甲氨蝶呤片(MTX)、雷公藤治疗36 d,关节软骨免疫组化染色,计算机图像分析系统对软骨p53、Bcl-2基因蛋白及细胞凋亡的表达进行分析,比较各组差异.结果 CIA大鼠软骨细胞中存在高度活跃的p53蛋白表达,通痹灵可以下调细胞中过度活跃的p53蛋白表达,MTX高剂量及雷公藤高剂量的作用不显著;大鼠软骨细胞Bcl-2蛋白表达呈抑制状态,通痹灵低剂量组明显上调Bcl-2蛋白的低表达水平,其次为雷公藤高剂量组;大鼠软骨细胞存在明显的凋亡亢进,通痹灵明显下调细胞凋亡水平.结论通痹灵能通过调整过度表达的p53蛋白与低表达的Bcl-2蛋白,抑制软骨细胞的过度凋亡;MTX与雷公藤对凋亡的作用与Bcl-2基因家族的调控密切相关,与p53相关基因的相关性不显著.     

胃癌组织P53、P63蛋白表达及细胞凋亡的研究

目的：探讨P53、P63蛋白表达及细胞凋亡在胃癌发生发展中的可能机制。方法：选择57例手术切除的胃癌及胃癌旁组织,用免疫组化方法检测组织中的P53、P63蛋白表达,同时用Tunel方法检测胃癌组织中的凋亡细胞。结果：胃癌组织P53、P63蛋白表达率显著高于胃癌旁组织（P〈0.05）;低、未分化型腺癌表达率显著高于高、中分化型腺癌（P〈0.05）;有淋巴转移显著高于无转移组（P〈0.05）;P53、P63高表达的癌组织,细胞凋亡指数减少,早期胃癌低于晚期胃癌（P〈0.05）。结论：胃癌组织P53、P63蛋白高表达,可能延缓细胞凋亡;细胞凋亡机制障碍可能是胃癌增生失控的基础。     

突变型PUMA(S10A)对Hela细胞的凋亡作用及其分子机制

目的 观察突变型PUMA和野生型PUMA对Hela细胞在促凋亡及抑制肿瘤细胞增殖方面的生物学功能差异,并探讨导致这些差异的分子机制.方法 实验随机分为:空载体质粒组、野生型PUMA组、突变型PUMA 3个实验组,应用脂质体转染方法分别将空载质粒、野生型PUMA质粒、突变型PUMA质粒转染Hela细胞中,转染24、48 h后用实时定量PCR和Western blot法检测各组PUMA表达情况;野生型实验组和突变型实验组分别加入蛋白质合成抑制剂放线菌酮后,Western blot法检测PUMA蛋白的表达;MTT及流式细胞术检测野生型PUMA与突变型PUMA对细胞增殖抑制和促凋亡作用.结果 在相同转染效率的情况下,通过Western blot法分析野生型PUMA组和突变型PUMA组的表达水平,结果表明突变型PUMA蛋白比野生型PUMA蛋白有一个更高的稳定状态.转染24 h后诱导表达野生型和突变型的PUMA细胞中均加入放线菌酮,结果表明,突变型PUMA蛋白降解延迟、半衰期延长;光密度值测定结果显示细胞转染两种质粒后,细胞存活率随着时间的延长逐渐下降,且转染突变型PUMA质粒在24、48 h的存活率均比野生型PUMA组低(P＜0.05,P＜0.01);流式细胞术结果显示,随着PUMA转染时间的增加,野生型和突变型两组肿瘤细胞的凋亡率均逐渐升高,并且突变型组细胞比野生型组细胞的凋亡率增加更加明显(P＜0.05,P＜0.01).结论 PUMA具有抑制Hela细胞增殖、促进其凋亡的作用,而其10号位的丝氨酸被丙氨酸取代后增加了突变型PUMA的稳定性、延长了其半衰期,导致突变型比野生型PUMA对Hela细胞的抑制作用及促凋亡功能得到加强.     

P53,Bcl—2癌基因蛋白表达与胃癌生物学行为的关系

目的 探讨Ｐ５３,ｂｃｌ－２表达与胃癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组织化学法,研究６０例胃癌中Ｐ５３,ｂｃｌ－２蛋白的表达。结果 ６０例胃癌中,Ｐ５３阳性率为５３．３％,ｂｃｌ－２阳性率为７０．０％。Ｐ５３和ｂｃｌ－２表达与胃癌分期有关（Ｐ〈０．０５）。Ｐ５３阳性率随着胃癌分期的增加而升高。相反,ｂｃｌ－２阳性率随着胃癌分期的增加而降低。Ｐ５３表达与胃癌分化程度有关（Ｐ〈０．０５）,但ｂｃｌ－