牡荆素调控PI3K/Akt通路对脑外伤大鼠的神经保护作用研究

目的 通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路探讨牡荆素对脑外伤大鼠的神经保护作用。方法 选用SD大鼠90只,随机分成假手术组,模型组,牡荆素假手术组（12 mg/kg牡荆素）,牡荆素低（3 mg/kg牡荆素）、高剂量组（12 mg/kg牡荆素）和吡拉西坦组（20 mg/kg吡拉西坦）,每组18只。采用自由落体致伤法建立脑外伤大鼠模型;采用神经功能评分法评价神经功能缺损程度;测定脑组织的含水量;苏木素伊红（HE）染色检测脑组织病理变化;TUNEL法检测脑组织神经细胞的凋亡情况;ELISA法检测脑组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平;Western blotting法检测脑组织中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果 与假手术组相比,模型组大鼠神经元变性坏死,毛细血管破裂,可见大量出血、炎性细胞浸润,神经功能受损评分、细胞凋亡指数、脑组织含水量及MDA含量显著升高（P<0.05）,SOD、GSH-Px含量及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白水平显著降低（P<0.05）。与模型组相比,牡荆素低、高剂量组和吡拉西坦组大鼠病理变化均有一定程度减轻,神经功能受损评分、细胞凋亡指数、脑组织含水量及MDA含量显著降低（P<0.05）,SOD、GSH-Px含量及p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白水平均显著升高（P<0.05）。假手术组和牡荆素假手术组各项指标差异无统计学意义。牡荆素高剂量组和吡拉西坦组各项指标差异无统计学意义。结论 牡荆素可能通过激活PI3K/Akt信号通路,发挥脑外伤大鼠的神经保护作用。     

液相色谱-串联质谱法测定全脑缺血损伤模型大鼠体内拉莫三嗪血药浓度及药动学研究

目的 建立液相色谱-串联质谱法（LC-MS/MS）测定大鼠血浆样品中拉莫三嗪浓度的方法,并进行药动学研究。方法 取12只SD大鼠,假手术组、脑缺血损伤模型组各6只,拉莫三嗪10 mg/kg灌胃,分别于5 min,0.25、0.5、1、2、4、6、8、12、24、36 h眼眶隐静脉丛取血,采用LC-MS/MS法测定其血药浓度,并用DAS软件计算药动学参数。结果 拉莫三嗪的药动学参数属于一级动力学两房室模型,拉莫三嗪在假手术大鼠体内的药动学参数c_max（1382.87±61.17）μg/L,t_1/2（40.43±6.77）h,AUC_0-∞（123.45±70.70）mg·h/L。全脑缺血损伤模型大鼠中药动学参数c_max（1 713.50±65.11）μg/L,t_1/2（73.72±17.46）h,AUC_0-∞（188.15±76.37）mg·h/L。结论 本方法适用于大鼠血浆中拉莫三嗪浓度的测定。假手术组和模型组大鼠拉莫三嗪灌胃后均于2 h达到峰值,但模型组拉莫三嗪的t_1/2较长,血药浓度较高,可为后期药效学研究提供依据。     

淫羊藿苷介导PI3K/Akt信号通路干预大鼠早期激素性股骨头坏死的研究

目的 探讨淫羊藿苷调控磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路干预大鼠早期激素性股骨头坏死的作用机制。方法 50只SD大鼠随机分为对照组、模型组和淫羊藿苷10、20、40mg/kg组,每组10只。除对照组外,其余各组ip脂多糖和im甲泼尼龙制备激素性股骨头坏死大鼠模型。淫羊藿苷组大鼠分别ig10、20、40mg/kg的淫羊藿苷,对照组、模型组均ig等量生理盐水,每天1次,连续6周。采用Micro-CT评估造模是否成功并分析骨密度（BMD）、骨体积密度（BV/TV）、骨表面积密度（BS/TV）、骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁分离度（Tb.Sp）;ELISA法检测血清中血管内皮生长因子（VEGF）、一氧化氮（NO）水平;Western blotting法检测股骨头PI3K、Akt、磷酸化Akt（p-Akt）蛋白的表达。结果 与对照组比较,模型组BMD、Tb.Th、BV/TV、Tb.N、BS/TV、VEGF和NO水平明显降低,Tb.Sp明显增高（P＜0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷组的BMD、Tb.N、BV/TV、Tb.Th、BS/TV、VEGF和NO水平明显增高,Tb.Sp明显降低（P＜0.05）。与对照组比较,模型组PI3K和p-Akt蛋白表达均减少（P＜0.05）;与模型组比较,淫羊藿苷组PI3K和p-Akt蛋白表达均增加（P＜0.05）。结论 淫羊藿苷能够有效缓解激素性股骨头坏死的进展,其机制可能与调节血清中VEGF、NO水平和增加骨组织中PI3K、Akt、p-Akt蛋白的表达有关,从而诱导血管修复与新生,促进骨形成和愈合。     

莫西沙星在肺炎大鼠与正常大鼠的血浆及肺组织中药动学比较

目的 莫西沙星（MXF）口服给药在被肺炎链球菌（S.p）感染肺炎大鼠与正常大鼠的血浆及肺组织中药动学比较研究。方法 建立肺炎链球菌肺炎大鼠和正常大鼠模型,莫西沙星42 mg/kg灌胃给药,采用微透析技术对肺炎大鼠及正常大鼠的血液及肺组织取样,用高效液相色谱法测定莫西沙星在各样本中的游离药物浓度,计算药动学参数,进行肺炎大鼠和正常大鼠口服莫西沙星的药动学比较。结果 莫西沙星在正常大鼠及肺炎大鼠血液中的t_1/2分别为（5.27±4.38）h、（2.15±0.07）h（P>0.05）,C_max分别为（4.94±0.98）μg/ml、（4.83±0.05）μg/ml（P>0.05）,C_{last_obs}/C_max分别为0.02±0.03、0.27±0.04（P<0.05）,AUC_0-t分别为（22.33±2.02）μg/ml·h、（12.88±1.19）μg /ml·h（P<0.05）,CL/F 分别为（1.79±0.11）(mg/kg)/(μg/ml)·h、（2.49±0.26）(mg/kg)/(μg/ml)·h（P<0.05）;在正常大鼠及肺炎大鼠肺组织中的C_max分别为（1.42±0.05）μg/ml、（4.84±0.02）μg /ml（P<0.05）,t_1/2分别为（1.9±0.63）h、（3.39±0.79）h（P>0.05）,AUMC分别为（11.93±5.14）μg/ml·h²、（107.01±25.39）μg/ml·h²（P<0.05）,AUC_0-t分别为（3.06±1.0）7μg/ml·h、（13.16±0.53）μg /ml·h（P<0.01）。结论 ①在400mg/d剂量条件下,莫西沙星灌胃给药后,血液及肺组织内的游离药物浓度较高,远超过最低抑菌浓度（MIC）和防耐药突变浓度（MPC）,可以有效清除肺炎链球菌。②肺炎链球菌感染大鼠肺组织中莫西沙星游离浓度始终高于正常大鼠,C_max约为正常大鼠的3.4倍,莫西沙星在肺炎大鼠的肺组织穿透率显著高于正常大鼠。     

高盐饮食对盐敏感性高血压大鼠肾脏损伤的影响

目的 研究高盐饮食对盐敏感性高血压大鼠肾脏组织损伤的影响。方法 将20只实验大鼠按照大鼠品系分为对照组（SS-13^BN大鼠,n=10）与盐敏感性高血压大鼠模型组（Dahl/SS大鼠,n=10）,通过喂食盐含量为8%的高盐饲料构建盐敏感性高血压大鼠模型,分析两组大鼠肾脏组织损伤程度及肾脏组织中白介素-6（IL-6）、白介素-1β（IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达情况。结果 模型组大鼠的收缩压为（183.82±3.87）mmHg,对照组为（129.03±3.94）mmHg,差异有统计学意义（P<0.05）。模型组大鼠肾脏组织中Nephrinuria含量为（12.12±0.92）mg/d、肾损伤程度评分为（1.93±0.52）分、TNF-α含量为（623.14±43.12）pg/mg,均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。模型组大鼠肾脏组织中IL-6 mRNA的相对表达量为（2.25±0.81）、IL-1β mRNA为（2.89±0.86）,均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。模型组大鼠肾脏组织中IL-6蛋白相对表达量为（1.71±0.08）、IL-1β为（2.23±0.13）,均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 高盐摄取会对盐敏感大鼠的肾脏造成严重的损伤,引起炎症反应,从而影响肾小球等肾脏器官的正常功能。     

五味子乙素联合泼尼松调节PI3K/Akt信号通路改善大鼠膜性肾病研究

目的 研究五味子乙素联合泼尼松对膜性肾病大鼠的作用及对其对PI3K/Akt信号通路的影响。方法 取15只SD大鼠作为对照组,60只大鼠采用阳离子化牛血清白蛋白（C-BSA）建立膜性肾病模型,造模完成后的大鼠随机分为模型组、泼尼松（2 mg/kg）组、五味子乙素（30 mg/kg）组、五味子乙素（30 mg/kg） ＋泼尼松（2 mg/kg）组。连续给药28 d后,分别测定各组大鼠24 h尿蛋白量、血清总胆固醇（TC）、三酰甘油（TG）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、尿素氮（BUN）及肌酐（Scr）水平,苏木精-伊红染色法进行组织病理学检查,Western blotting法检测大鼠肾脏p-Akt、Akt、PI3K-P85、PI3K-P110蛋白表达水平。结果 与模型组比较,泼尼松组、五味子乙素组、五味子乙素＋泼尼松组大鼠24 h尿蛋白量和血清TC、TG、MDA、BUN及Scr水平均显著降低（P<0.05）,SOD水平显著升高（P<0.05）,组织病理学明显改善,肾脏p-Akt、Akt、PI3K-P85、PI3K-P110蛋白表达水平均显著降低（P<0.05）,且五味子乙素＋泼尼松组各项指标均优于单给药组。结论 五味子乙素联合泼尼松对大鼠膜性肾病发挥显著改善作用,作用优于单给药,其机制可能与调节PI3K/Akt信号通路有关。     

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3在病毒性心肌炎中的作用研究

目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3（NLRP3）在柯萨奇B组3型病毒（CVB3）诱导的病毒性心肌炎中的作用。方法 40只6～8周龄BALB/c雄性小鼠使用随机数字表法随机分为对照组和病毒性心肌炎模型组,每组20只。对照组ip 0.1 mL生理盐水,模型组ip 0.1 mL含有CVB3病毒（1×10⁶ PFU/mL）的病毒液进行造模。造模第7天,处死所有小鼠。酶联免疫吸附法（Elisa）检测血清NLRP3、白介素（IL）-1β和IL-18炎症因子。结果 模型组NLRP3、IL-1β和IL-18表达水平分别为（26.43±4.14）、（31.25±5.63）、（38.57±6.45） μg/L,显著高于对照组的（4.53±1.06）、（6.35±1.24）、（7.83±1.36） μg/L（P<0.01）。模型组心肌炎评分为（2.36±0.27）分,显著高于对照组的（0.18±0.04）分（P<0.01）。模型组心肌细胞NLRP3表达评分为（1.82±0.24）分,显著高于对照组的（0.16±0.03）分（P<0.01）。相关性分析显示模型鼠NLRP3与体质量呈显著负相关（r=-0.517,P<0.05）,和心肌炎评分呈显著正相关（r=0.624,P<0.05）。结论 NLRP3炎症小体可能参与了柯萨奇B组3型病毒致小鼠病毒性心肌炎的的发生过程。     

糖复康宁提取物对2型糖尿病大鼠的降糖作用研究

目的 研究中药复方糖复康宁提取物2糖尿病模型大鼠的降血糖作用。方法 分别以遗传性ZDF模型大鼠和链脲佐菌素（STZ）联合高糖高脂饲料诱导的SD大鼠为此次研究的2型糖尿病模型动物,ig给予低、高剂量（5.0、10.0 g生药/kg）的糖复康宁提取物,金芪降糖片（455 mg/kg）作为阳性药,连续给药42 d,每周测定空腹血糖、给药第38天测定葡萄糖耐量。结果 ZDF模型结果显示,模型组大鼠血糖值波动幅度保持在10%以内,显著高于对照组（P<0.01）;给药42 d后,与模型组比较,各给药组血糖均显著下降（P<0.01）,金芪降糖片及糖复康宁提取物低、高剂量组血糖下降率分别为（35.9±8.4）%、（22.1±11.1）%、（50.0±9.1）%;STZ模型结果显示,模型组大鼠血糖一直维持在较高水平（21.1~21.6 mmol/L）,变化幅度相对稳定,显著高于对照组（P<0.01）;给药42 d后,与模型组比较,各给药组血糖均下降,其中糖复康宁提取物低、高剂量组差异显著（P<0.01）;金芪降糖片及糖复康宁提取物低、高剂量组血糖下降率分别为（18.6±5.7）%、（21.6±7.2）%、（51.7±20.2）%。糖复康宁提取物低、高2个剂量组血糖曲线下面积（AUC）与模型组比较均显著下降（P<0.05、0.01）。结论 中药复方糖复康宁对2种2型糖尿病模型均发挥显著降糖效果。     

早期肠内营养联合肠外营养对食管癌患者术后营养状况及生活质量的影响

目的 探讨早期肠内营养联合肠外营养对食管癌患者术后营养状况及生活质量的影响。方法 选取太和县人民医院2015年2月至2017年2月收治的40例食管癌手术患者为研究对象,按照随机数字表法分为观察组20例和对照组20例,对照组患者仅实施肠外营养干预,观察组患者在对照组的基础上同时实施肠内营养进行干预。分别对两组患者手术前后营养状况主观评价（SAG）得分和客观营养状况指标（包括总白蛋白、清蛋白、转铁蛋白、前清蛋白）、肝肾功能以及生活质量进行比较。结果 观察组患者术后总白蛋白、清蛋白、转铁蛋白、前清蛋白分别为（59.8±5.1） g/L、（32.4±4.2） g/L、（1.98±0.40） g/L、（117.2±20） mg/L,术前为（54.1±4.3） g/L、（28.8±4.1） g/L、（1.59±0.41） g/L、（103.8±21.3） mg/L,对照组分别为（55.2±6.2） g/L、（29.5±4.2） g/L、（1.56±0.41） g/L、（101.4±27） mg/L,观察组术后的营养情况优于对照组和术前,差异有统计学意义（P<0.05）;术前观察组和对照组患者的SAG评价结果差异无统计学意义（P>0.05）,术后,观察组患者SAG评价结果优于对照组（P<0.05）;手术前后观察组和对照组患者肝肾功能指标差异均无统计学意义（P>0.05）;随访1年,观察组患者生活质量评分优于对照组患者（P<0.05）。结论 早期肠内营养联合肠外营养在不影响食管癌患者肝肾功能的情况下,可有效改善患者的营养状况、增强免疫功能、提高生活质量。     

氢溴酸樟柳碱注射液大鼠组织分布和Beagle犬药动学研究

目的 研究氢溴酸樟柳碱注射液在大鼠体内的组织分布情况和Beagle犬体内的药动学特征。方法 SD大鼠单次iv氢溴酸樟柳碱注射液5 mg/kg,于给药后5、30、60、90、180 min处死大鼠,取血浆、心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、小肠、骨骼肌、脂肪、卵巢、子宫、睾丸。Beagle犬单次iv氢溴酸樟柳碱注射液0.1、0.3、0.9 mg/kg,给药后5、10、20、30、45 min和1.0、1.5、3.0、5.0、7.0、10.0 h静脉采血。采用高效液相色谱-质谱联用法（LC-MS）测定各时间点血浆及各组织中氢溴酸樟柳碱的浓度,统计矩法计算氢溴酸樟柳碱在犬体内的药动学参数。结果 大鼠肾、胃氢溴酸樟柳碱峰浓度最高,分别为（1 967.6±569.4）（2 316.9±952.6） ng/mL,其次为血浆、小肠、肺、肝、脾、卵巢、心、子宫、骨骼肌,而脂肪、睾丸和脑峰浓度最低,低于200 ng/mL。除胃在30 min达峰外,其余组织均在5 min达峰,之后快速下降。Beagle犬iv氢溴酸樟柳碱注射液后,0.1、0.3、0.9 mg/kg组达峰浓度（C_max）分别为（43.3±8.6）、（117.9±40.2）、（348.6±40.0） ng/mL,药时曲线下面积（AUC_0~t）分别为（35.9±6.6）、（159.6±56.6）、（443.3±50.3） ng·h/mL,半衰期（t_1/2z）分别为（0.9±0.3）、（1.5±0.9）、（1.1±0.2）h,清除率（Cl_z）分别为（20.9±5.3）、（17.9±7.6）、（19.4±2.2）×10⁵ L/（h·kg）,表观分布容积（V_z）分别为（24.6±7.0）、（37.0±18.5）、（31.3±4.3）×10⁵ L/kg。结论 氢溴酸樟柳碱在大鼠体内的分布与器官血流量、药物水溶性、生理屏障等因素具有明显相关性;在犬体内血浆清除率和组织分布程度均较高,血浆消除较快,无蓄积性。     

细胞凋亡过程中核糖体蛋白质S3a水平变化的研究(一)——应用GST基因融合蛋白系统制备核糖体蛋白质S3a(RPS3a)

目的应用GST基因融合蛋白系统制备核糖体蛋白质S3a(RPS3a)。方法将S3acDNA序列插入到pGEX-4T-2质粒中,制备GST/S3a融合蛋白及其抗体。结果S3acDNA序列在XhoI位点上插入到pGEX-4T-2质粒中,形成重组的pGEX-4T-2/S3a质粒。结论pGEX-4T-2质粒编码GST蛋白基因,在IPTG的诱导下可以表达GST/S3a融合蛋白。为下一步实验奠定了基础。     

细胞凋亡过程中核糖体蛋白质S3a水平变化的研究（二）——制备和纯化抗GST／S3a多克隆抗体

目的：制备和纯化抗GST／S3a多克隆抗体。方法：盐析法粗提抗体,用蛋白A－琼脂糖柱纯化IgG,ELISA法检测多克隆抗体水平。结果：ELISA法测定制备和纯化抗GST／S3a多克隆抗体的活性正常,产生了抗原－抗体反应复合物。结论：制备和纯化的抗体血清可以与GST／S3a融合蛋白相结合,产生抗原－抗体反应复合物,说明具有抗GST／S3a融合蛋白的性,为下一步实验奠定基础。     

eIF3a的生物学功能研究进展

eIF3a是真核翻译起始因子eUF3中最大的亚单位。许多研究表明，在酵母细胞和哺乳动物细胞中，eIF3a都参与了mRNA翻译的起始过程，并在蛋白质翻译起始过程中起重要调控作用。同时，eIF3a参与了细胞周期的调控，它与细胞的生长和分化存在着重要联系。最近的研究发现，eIF3a与肿瘤的发生、发展、预后和化疗疗效密切相关，且eIF3a基因多态性与恶性肿瘤的易感性也有一定相关性。本文对近年来eIF3a的生物学功能研究进展进行综述。     

The role of the complement anaphylatoxins in the recruitment of eosinophils

Eosinophils are blood and tissue immune cells that participate in a diverse range of activities normally beneficial for the host defense, but in circumstances of untoward inflammatory conditions these cells can be responsible for pathological responses. Accordingly the transit of eosinophils from the blood to tissues is a subject of considerable importance in immunology. In this article we review how the complement anaphylatoxins, C3a and C5a bring about eosinophil extravasation. These mediators do not merely provide a chemotactic or haptotactic gradient but are responsible for orchestrating innumerable responses by other cells types, including of endothelial cells, mast cells, and basophils in order to create an environment that is conducive for eosinophil infiltration. C5a has the capacity to prime the endothelium directly to present P-selectin, and C5a stimulated generation of eosinophil hydrogen peroxide and other oxidants can cause additional upregulation of endothelial P-selectin and ICAM-1. Moreover, the anaphylatoxins have the ability to recruit mast cells and basophils and can stimulate these cells to release IL-4 and IL-13, which by augmenting endothelial VCAM-1, convey some selectivity for eosinophils. The anaphylatoxins also have the capability to evoke the release and activation of eosinophil MMP-9, which is employed by this cell type to digest its way past the subendothelial matrix. Finally, because C3a and C5a can stimulate the generation of nitric oxide along with the secretion of histamine and LTC4 from several cell types, the anaphylatoxins can bring about an increase in vascular permeability that facilitates eosinophil accumulation at sites of allergic inflammation.     

antagomiR-27a对胶质瘤细胞增殖的抑制作用

目的 研究miRNA-27a抑制剂antagomiRNA-27a对胶质瘤细胞的影响.方法 通过生物信息数据库筛选miRNA-27a预测靶点FOXO3a,并通过基因报告验证预测靶点基因;应用qRT-PCR法检测转染后细胞,MTT法检测antagomiRNA-27a对胶质瘤细胞增殖的影响.结果 转染antagomiRNA-27a组细胞增殖受到明显抑制(P＜0.05);通过Western blot和报告基因证实FOXO3a是miNAR-27a新的靶基因.结论 miRNA-27a抑制剂对胶质瘤细胞增殖具有抑制作用.     

细胞凋亡过程中核糖体蛋白质S3a水平变化的研究（三）：——检测细胞凋亡过程中RPS3a水平的变化

目的：检测细胞凋亡过程中RPS3a水平的变化，探讨RPS3a在细胞凋亡中的作用。方法：用放射菌素D（Act D）诱导HL－60细胞发生凋亡。应用WesternBlot法检测细胞凋亡过程中RPS3a水平的变化，结果：HL－60细胞在诱发凋亡1小时后，RPS3a的水平与对照组比较显著升高，之后迅速降低，在诱导2h时其水平已低于正常对照组的水平，并随时间推移逐渐降低，在细胞凋亡的晚期，即诱导6h时，RPS3a已降至不可检测的水平，结论：RPRS3a水平出现的一过性增高随后迅速降低，这可能是发挥其核糖体外的功能，作为信号诱导细胞凋亡；在细胞凋亡的早期RPRS3a的不可逆性降致使核糖体的完整性丧失，从而抑制蛋白质的合成，最终导致细胞凋亡。     

Novel Quinoline-Based P2–P4 Macrocyclic Derivatives As Pan-Genotypic HCV NS3/4a Protease Inhibitors

相似文献   

人的核糖体蛋白S3a基因克隆、表达、纯化与亚细胞定位

目的克隆人核糖体蛋白S3a（Ribosomal protein S3a,RPS3a）基因,并表达、纯化其蛋白,分析RPS3a蛋白的细胞定位,为其功能研究奠定基础。方法应用RT-PCR从人胚肾HEK293细胞的总RNA中反转录并扩增出RPS3a基因,克隆到原核表达载体PET-21a中,转化大肠杆菌（Escherichia coli）BL21（DE3）进行蛋白表达。在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导下,PET21a-RPS3a融合表达载体在大肠杆菌菌株BL21（DE3）中以可溶性蛋白的形式高效表达RPS3a蛋白,超声破碎细胞,通过Ni~（2＋）-NTA亲和层析柱初步纯化,再应用50kD超滤膜进一步纯化。用Western Blot印迹实验检测纯化后的蛋白。构建绿色荧光蛋白（Enhanced Green Fluorescent Protein,EGFP）的pEGFP-N1-RPS3a表达载体,转染HEK293细胞,通过荧光显微镜观察RPS3a重组荧光蛋白在细胞内的分布。结果获得了较高纯度的RPS3a蛋白,亚细胞定位分析表明RPS3a蛋白主要分布于细胞质。结论成功克隆了RPS3a基因并表达纯化了其蛋白,确定其亚细胞分布,为进一步研究RPS3a蛋白的性质和功能奠定了基础     

Characterization of the microsomal cytochrome p-450 species induced in rat liver by trans-stilbene oxide

trans-Stilbene oxide differs from the classical inducers of drug-metabolizing enzymes, pheno-barbital and 3-methylcholanthrene, in that it induces the so-called phase II activities, epoxide hydrolase and glutathione S-transferase, to a much larger extent than it induces cytochrome P-450. Nonetheless, the level of cytochrome P-450 in liver microsomes from rats treated with trans-stilbene oxide is increased significantly to twice the control value.The existence of a number of different isozymes of cytochrome P-450 has now been clearly demonstrated and in the present study we have posed the question: What form(s) of cytochrome P-450 is induced by trans-stilbene oxide? A number of criteria including substrate specificity, pattern of benzo(a)pyrene metabolism, sensitivity to inhibitors, substrate binding spectra, ethylisocyanide binding spectra, sodium dodecyi sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis, and crossed immunoelectrophoresis were used to answer this question. It seems clear that trans-stilbene oxide induces the same form(s) of cytochrome P-450 as phenobarbital.     

Relative roles of CYP2C19 and CYP3A4/5 in midazolam 1′-hydroxylation

1. During the characterization of recombinant CYP2C19, it was observed that this enzyme metabolized midazolam, which is generally regarded as CYP3A4/5 substrate, and we therefore decided to pursue this observation further.

2. CYP2C19 showed a Michaelis-Menten pattern for midazolam 1′-hydroxylation and was inhibited by (+)-N-3-benzylnirvanol and S-mephenytoin, which are a standard potent inhibitor and a substrate of CYP2C19, respectively.

3. The inhibitory potency by CYP3A4/5 inhibitor on the midazolam 1′-hydroxylation in human liver microsomes (HLM) was correlated with the CYP3A4/5 specific catalytic activity, but such correlation was not observed in CYP2C19 enzyme. The in vitro intrinsic clearance value for midazolam 1′-hydroxylation was not changed by the addition of (+)-N-3-benzylnirvanol in four individual HLM preparations.

4. These results indicated that although CYP2C19 is capable of catalyzing midazolam 1′-hydroxylation, CYP3A4/5 play a more important role.