B细胞活化因子/增殖诱导配体系统在IgA肾病研究进展

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是常见的肾小球疾病,其发病机制较为复杂,目前,学者们逐渐达成共识:黏膜免疫引起IgA1异常糖基化,导致半乳糖缺乏的IgA1(galactose-deficient IgA1,Gd-IgA1)大量产生,致使机体产生针对Gd-IgA1的特异性抗体,当自身抗体与Gd-IgA1结合会产生免疫复合物,并循环至肾脏,沉积于系膜区,引起炎症细胞浸润、补体活化和增殖反应,进而持续引起肾脏损害[1]。B细胞活化因子(B cell activating factor the TNF family,BAFF)和增殖诱导配体(a proliferation inducing ligand,APRIL)是肿瘤坏死因子超家族中的成员,均可由树突状细胞、单核细胞等免疫细胞分泌。     

系统性红斑狼疮患者增殖诱导配体水平变化及意义

增殖诱导配体（APRIL）与B淋巴细胞刺激因子（BAFF）同属肿瘤坏死因子超家族，共享两个受体。BAFF能促进B细胞分化、增殖和未成熟淋巴细胞的生存，诱导或加重系统性红斑狼疮（SLE）病情。APRIL在SLE中作用却不清楚，研究结果甚至互相矛盾。本研究通过检测SLE患者血清APRIL水平，并同时检测与疾病活动有关的自身抗体如抗dsDNA抗体、抗核小体抗体（AnuA）和抗C1q抗体，探讨其在SLE疾病活动和系统损害中的作用和意义。     

BAFF在自身免疫性疾病方面的研究进展

自身免疫性疾病的特征是B细胞耐受丧失,B细胞激活因子(B cell activating factor belonging to the TNF family,BAFF)通过与受体结合,对B细胞的增殖、存活起重要作用.BAFF转基因小鼠易出现自身免疫性疾病.因此,拮抗或抑制BAFF的表达可能是治疗自身免疫性疾病的靶点.本文主要对BAFF在自身免疫性疾病方面的研究进展进行综述.     

B细胞激活因子在慢性炎症性疾病中研究进展

B细胞激活因子(B cell activating factor,BAFF)是一种由285个氨基酸组成的Ⅱ型膜结合蛋白,通过与3种主要受体结合,主要调控B细胞的生存和分化,在天然免疫和适应性免疫中发挥调控作用。目前研究发现,BAFF表达于免疫细胞如B细胞、T细胞、单核-吞噬细胞及非免疫细胞如黏膜上皮细胞(肠道、呼吸道和肾脏)、脂肪细胞等,参与系统性红斑狼疮、动脉粥样硬化、自身免疫性肝炎、炎症性肠病、慢性阻塞性肺疾病等慢性炎症性疾病的发生、发展。本文就BAFF及其受体的表达、生理学功能、免疫调控进行探讨,以进一步了解BAFF在慢性炎症性疾病中的功能。     

B细胞激活因子在风湿性疾病中的研究进展

B细胞激活因子(B-cell activating factor , BAFF) ,又名 B 淋巴细胞刺激因子(B lymphocyte stimulator ,BLyS) ,是一种含有 285 个氨基酸的 Ⅱ型跨膜蛋白 ,属于肿瘤坏死因子(TNF)超家族的第13 位成员 .它来源于单核细胞 、巨噬细胞 、树突状细胞(DC) 、中性粒细胞 、恶性 B 细胞 、活化的 T 细胞等多种细胞 ,并以膜结合型和分泌型两种形式存在 . BAFF 表面被弗林蛋白酶溶解后可释放一种生物活性高的可溶性 17-kDa 分子 ,它可以与 B 细胞表面的 B 细胞活化因子受体(BAFF-R) 、B 细胞成熟抗原(BCMA)和跨膜蛋白活化因子钙离子信号调节亲环素配体(TACI)结合 ,促进幼稚 B 细胞的分化和成熟及抗体的产生和类型转换[1] . 研究证实异常表达的 BAFF 可参与多种风湿性疾病的发生 ,这为疾病提供新的治疗靶点 ,现将此方面的研究进展综述如下 .     

B淋巴细胞刺激因子家族相关分子在系统性红斑狼疮治疗中的应用

B淋巴细胞刺激因子家族(B-lymphocyte activating factor family, BAFF)在B细胞生长、发育和分化中发挥重要的免疫调节作用,其过度表达与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)等自身免疫性疾病的发病密切相关.针对BAFF及其受体研制相应的阻断剂,通过封闭BAFF分子的特异性免疫调控信号,拮抗其诱导的B淋巴细胞高度活化和病理性自身抗体的产生,有望为SLE治疗提供新的理论和实验依据.     

BAFF通过非经典NF-κB途径对Raji细胞增殖调节作用的研究

目的研究BAFF对Raji细胞促增殖作用的机制,分析其对非经典NF-κBB信号途径的调节作用,并初步探讨RIPK2与BAFF/BAFF-R介导的信号通路的相关性。方法以不同浓度重组人BAFF刺激Raji细胞,MTT法分析BAFF对Raji细胞的促增殖作用,应用实时荧光定量PCR(real time q-PCR)与蛋白质印迹实验(Western blotting)检测Raji细胞中BAFF、BAFF-R、NIK、p52、Bcl-XL及RIPK2的表达。结果 BAFF能促进Raji细胞的增殖,且具有明显的剂量效应与时间效应依赖关系;BAFF、BAFF-R、NIK、p52、Bcl-XL及RIPK2在mRNA及蛋白水平的表达均随重组人BAFF浓度的增加而升高(P<0.05)。结论重组人BAFF刺激Raji细胞后能激活非经典NF-κB信号途径,并引起下游靶蛋白Bcl-XL等抗凋亡因子的过表达,促进肿瘤细胞的存活和增殖。BAFF可以上调RIPK2的表达,提示RIPK2与非经典NF-κB信号途径之间可能存在功能联系。     

IgA肾病治疗进展

IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)是全球范围内最常见的一种原发性肾小球肾炎.糖皮质激素(Glucocorticoid,GC)被广泛用于治疗IgAN,糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)是人体内广泛存在的细胞内受体,是GC在体内发挥作用的靶点.GC通过与GR结合发挥抑制炎症反应、免疫反应、直接保护足细胞的作用.改善全球肾脏病预后组织指南中也指出GC治疗IgAN的必要性及如何、何时使用.IgAN推荐使用具有肾脏保护作用和减少蛋白尿作用的血管紧张素转换酶抑制剂(angiotensin-converting enzyme inhibitors,ACEI)和/或血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂(angiotensin receptor blockers,ARB)阻断肾素血管紧张素-醛固酮系统,近年来一些新型的制剂如阿利吉仑、过氧化物酶体增殖活化受体γ等已被使用.多靶点治疗也越来越被重视,本文对目前IgAN治疗进展进行综述.     

IgA肾病肾组织中NF-κB表达与病理损伤的相关性

目的探讨IgA肾病(IgAN)肾穿刺组织中核转录因子-κB(NF-κB)的表达及其与免疫活动性的关系。方法整理60例原发性IgAN患者的临床及病理资料,依据IgA肾病Lee分级方法,计算组织学活动指数(AI);免疫组化法检测肾组织中NF-κB、疾病活动指标增殖细胞核抗原(PCNA)的表达水平,并进行半定量评分,观察肾组织NF-κB表达与PCNA表达的相关关系。结果 NF-κB表达与PCNA表达与IgA肾病患者尿蛋白定量、尿红细胞数呈正相关(P<0.05)。结论 NF-κB在IgAN患者肾组织中的表达与IgAN肾病的免疫活动相关。     

B细胞活化因子的双向性:促进调节性T细胞分泌白细胞介素-35

目的研究B细胞活化因子(B cell activation factor of the tumor necrosis factor family,BAFF)对调节性T细胞(Tregs)分泌抑制性细胞因子白细胞介素-35(interleukin-35,IL-35)的影响,验证系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中BAFF对免疫反应的双向调节机制。方法磁珠分选狼疮模型鼠Tregs,经BAFF刺激后采用qRT-PCR及流式细胞术检测其分泌IL-35浓度。比较正常对照鼠、狼疮模型鼠及经尾静脉注射抗BAFF蛋白后狼疮模型鼠脾脏Tregs频率及分泌IL-35情况。结果BAFF能够有效促进Tregs分泌IL-35。相对于正常对照鼠,狼疮模型鼠(血清中BAFF升高)脾脏Tregs分泌较高浓度的IL-35,而中和其循环中BAFF后,Tregs分泌IL-35减少。结论在SLE发病机制中,BAFF不仅是重要的致病因素,还能够通过促进Tregs细胞分泌IL-35发挥负向免疫调节效应。     

胃癌组织中增殖诱导配体及其受体蛋白的表达

目的:观察人胃癌组织中增殖诱导配体(APRIL)及其受体B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)蛋白的表达,探讨其临床意义.方法:采用H-E染色及间接免疫荧光法检测30例人胃癌组织及相应10例癌旁正常组织APRIL及其受体蛋白的表达,分析不同临床病理特征下相关蛋白的表达水平.结果:胃癌组织中APRIL阳性率为86.7%,癌旁正常组织未见表达(P<0.05);而其受体BCMA和TACI蛋白表达水平在两者间无统计学差异.胃癌组织不同临床病理指标下(肿瘤大小、分化程度、浸润深度、有无淋巴结转移和TNM临床分期),APRIL及其受体蛋白表达无统计学差异.结论:胃癌组织中APRIL蛋白高表达,检测其表达水平可能有助于胃癌的早期诊断.     

滋肾化瘀泻浊方对实验性IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞的影响

探讨滋肾化瘀泻浊方对IgA肾病 (IgAN)肾小球系膜细胞 (MC)增殖的影响。方法　以牛血清白蛋白 (BSA)的葡萄球菌肠毒素B (SEB)诱导制作大白鼠IgAN模型 ,采用血清药理学方法 ,提取各组大鼠的血清作用于体外培养的MC体系 ,观察其对MC增殖情况的水平。结果　滋肾化瘀泻浊方具有抑制MC增殖的作用 ,与正常组和模型组比较有显著性差异 (P <0 0 1 )。结论　滋肾化瘀泻浊方对MC增殖有明显抑制作用 ,这可能是该方防止IgAN的机制之一。     

人可溶性增殖诱导配体促HeLa细胞增殖作用的研究

目的 观察人可溶性增殖诱导配体(soluble a proliferation-induced ligand, sAPRIL)是否具有促进宫颈癌细胞株HeLa增殖的作用及其机制.方法 用Brdu法检测sAPRIL蛋白对人宫颈癌HeLa细胞增殖的作用,进而用RT-PCR法检测HeLa细胞APRIL受体的表达情况.结果 原核表达的sAPRIL蛋白能促进HeLa细胞增殖.HeLa细胞表达APRIL的受体HSPG1、HSPG2,而不表达BCMA 、TACI及HSPG4.结论 sAPRIL有明确的促HeLa细胞增殖作用.由于HeLa细胞有APRIL受体HSPG1、HSPG2的表达,我们初步推测该作用可能是通过HSPG1及HSPG2起作用的.     

IgG4相关性眼病泪腺病变的病理特点及BAFF和APRIL的表达

目的 观察IgG4相关性眼病（IgG4-ROD）泪腺病变的病理特点，探讨B细胞活化因子（BAFF）和增殖诱导配体（APRIL）在IgG4-ROD泪腺病变中的作用。方法 收集13例IgG4-ROD泪腺病变患者（15眼）的泪腺肿物为实验组，8例因其他疾病行眶内容物摘除患者（8眼）的正常泪腺组织为对照组。采用HE染色法观察泪腺的病理形态变化，免疫组织化学染色法检测泪腺中BAFF和APRIL的表达情况，并对二者表达水平进行相关性分析。结果 实验组泪腺出现弥漫性淋巴细胞和浆细胞浸润，广泛淋巴滤泡形成，纤维组织增生的病理改变。实验组泪腺中BAFF和APRIL的表达水平均明显高于对照组（均P <0.05），且二者的表达呈正相关（P <0.05）。结论 IgG4-ROD泪腺病变表现出淋巴细胞和浆细胞弥漫浸润、纤维组织增生的病理特点，这可能与BAFF和APRIL表达上调导致的免疫调节失衡有关。     

IgA肾病及过敏性紫癜性肾炎患儿血清半乳糖缺乏IgA1测定的临床意义

目的分析IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)及过敏性紫癜性肾炎(Henoch-Schnlein purpura nephri-tis,HSPN)患儿中IgA1(Gd-IgA1)水平的临床意义。方法 45例研究对象被分为IgAN组、HSPN组、对照组,每组15例。磁珠分选外周血初始B细胞(CD27-IgD+),加滤泡辅助性T细胞(T follicular helper,Tfh)相关因子共培养,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞培养上清液IgA分泌,散大蜗牛凝集素(helix asper-sa,HHA)ELISA测定半乳糖缺乏的IgA1(Gd-IgA1)水平,同时测定血清中的IgA、Gd-IgA1水平。结果 IgAN、HSPN及对照组细胞培养上清液IgA水平分别为(65.4±11.3)ng/ml、(63.6±9.4)ng/ml、(60.7±12.8)ng/ml;Gd-IgA1水平分别为(91.5±11.5)U/ml、(88.0±10.5)U/ml、(75.7±12.8)U/ml。IgAN、HSPN及对照组血清IgA水平分别为(537.0±100.0)μg/ml、(508.0±95.2)μg/ml、(498.0±85.4)μg/ml;Gd-IgA1水平分别为(2495.0±278.5)U/ml、(2580.0±254.0)U/ml、(1897.0±210.9)U/ml。与对照组相比,IgAN组和HSPN组细胞培养上清液及血清IgA水平无统计学差异(P>0.05);细胞培养上清液及血清Gd-IgA1水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。IgAN组及HSPN组细胞培养上清液IgA、Gd-IgA1及血清IgA、Gd-IgA1水平均无统计学差异(P>0.05)。结论Tfh细胞介导Gd-IgA1的生成增加,在IgAN和HSPN发病起作用;血清Gd-IgA1可能是间接反映IgAN和HSPN的无创性指标之一。     

白细胞介素17在IgA肾病中引起IgA1糖基化异常的作用研究

目的 对Th17细胞的主要细胞因子白细胞介素17(IL-17)参与介导IgA肾癌(IgAN)中B淋巴细胞增殖及IgA—1异常糖基化的过程进行初步研究.方法 以体外培养的DAKIKI细胞为研究对象,在剂量效应分析中,以5～320 ng/mL的IL-17作用48 h,在时间效应分析中以160 ng/mL ID-17刺激24、48、72 h,细胞计数法和CCK-8法检测细胞增殖状况,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测DAKIKI细胞培养上清液中IgA1的水平,HAA凝集素检测IgA1糖基化异常程度.结果 CCK-8和细胞计数法显示,5～320 ng/mL浓度范围的IL-17均可明显刺激B淋巴细胞增殖(P＜0.05);ELISA及HAA检测结果显示,与对照组相比,IL-17可引起DAKIKI细胞培养上清液中IgA1水平及异常糖基化的明显增加(P＜0.05).结论 IL-17呈时间和剂量依赖性地刺激B淋巴细胞的增殖和B淋巴细胞分泌IgA1,并且IL-17刺激B淋巴细胞增生的同时,诱导IgA1的低糖基化异常.     

人TACI-linker-BR3双受体融合基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达

目的:构建人双受体融合基因真核表达载体--pcDNA3.1( )-TACI-linker-BR3-IgGFc,观察其在COS-7细胞中的表达.方法:应用基因工程技术构建重组载体,脂质体转染COS-7细胞,通过Western印迹、ELISA以及免疫组化方法,检测目的蛋白的表达及其与BAFF、APRIL蛋白相互作用情况.结果:融合基因在瞬时转染的真核细胞中获得表达,并分泌至上清,转染效率能达到48%,融合蛋白能与BAFF、APRIL蛋白有效结合而且融合蛋白中分子标签IgGFc未影响双受体融合蛋白的结构及其生物学活性.结论:人TACI-linker-BR3双受体基因与IgGFc融合基因载体构建成功,表达的融合蛋白具有生物学活性,为进一步探讨SLE等自身免疫疾病的发病机制和生物学治疗方法奠定了基础.     

腭扁桃体及外周血中记忆B细胞在IgA肾病临床进展中的异常表达

目的：观察IgA肾病（IgA nephropathy,IgAN）患者腭扁桃体、外周血中记忆B细胞表达及腭扁桃体切除后外周血记忆B细胞表达的变化,了解腭扁桃体在IgAN发病机制中的作用,为IgAN的治疗提供理论依据。方法：选取28例经临床和肾脏病理检查确诊为IgAN的患者腭扁桃体及外周血作为观察组,将27例慢性扁桃体炎患者腭扁桃体及10例正常健康者外周血作为对照组。采用流式细胞术检测记忆B细胞在腭扁桃体及外周血B细胞的表达,并分析IgAN患者腭扁桃体切除前、后外周血记忆B细胞的变化。结果：记忆B细胞在IgAN患者腭扁桃体及外周血高表达,分别为5.72%±5.26%和4.92%±5.10%;腭扁桃体切除前、后外周血中记忆B细胞表达百分率分别为4.92%±5.10%和1.10%±0.65%,差异有统计学意义,且腭扁桃体切除后外周血记忆B细胞表达基本恢复到正常水平。结论：记忆B细胞表达的高低为IgAN的临床进展研究提供了依据。     

增殖诱导配体及其受体mRNA水平的定量测定在儿童淋巴瘤诊断中的价值

目的 探讨增殖诱导配体(APRIL)及其受体mRNA水平的定量测定在儿童淋巴瘤早期诊断中的价值.方法 采用实时荧光定量聚合酶链反应技术定量测定87例儿童外周血APRIL及其受体的表达,其中霍奇金病10例、非霍奇金淋巴瘤37例、健康对照40例.并分析APRIL及其受体mRNA表达水平与恶性淋巴瘤不同分期的相关性,以靶基因mRNA和p2微球蛋白(p2M)mRNA含量的比值作为评价APRIL及其受体表达水平的指标.结果 47例儿童淋巴瘤样本APRIL(1.13±0.09)及其受体[B细胞成熟抗原(BCMA):1.22±0.11、跨膜激活物和CAML结合物(TACI):0.89±0.12]mRNA的水平均显著高于健康儿童(0.41±0.09、0.43±0.10、0.35±0.08,均P＜0.05);APRIL及其受体mRNA的水平在霍奇金病组和非霍奇金淋巴瘤组间差异均无统计学意义(均P＞0.05);APRIL在非霍奇金淋巴瘤Ⅰ期(0.88±0.06)和Ⅱ期(0.90±0.08)中表达水平显著低于Ⅲ期(1.21±0.09)和Ⅳ期(1.23±0.09,P＜0.05),而其受体在各分期之间表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 APRIL表达水平与恶性淋巴瘤的病理分期有相关性,并在恶性淋巴瘤病变演进过程中呈现累积和渐进趋势,外周血APRIL及其受体测定有可能成为恶性淋巴瘤早期重要的预后因素.     

特发性血小板减少性紫癜患者BAFF和APRIL表达及意义

目的研究B细胞激活因子（BAFF）和增生诱导配体（APRIL）在特发性血小板减少性紫癜（ITP）的表达情况及其临床意义。方法应用双抗夹心ELISA方法检测27例ITP患者的血清BAFF和APRIL水平,并进行相关分析。结果①ITP组的血清BAFF和APRIL分别为3．92&#177;1．88μg／ml和（34．12&#177;30．52）μg／ml,均明显高于对照组的2．90&#177;0．52μg／ml和17．97&#177;4．96μg／ml（分别为P〈0．05和P〈0．01）;②ITP组血清BAFF和APRIL水平相关分析为r=0．5019,t=2．9028,P〈0．01;而对照组r=-0．2170,P〉0．05。结论ITP患者的BAFF和APRIL均高表达,可能是ITP发生机制的重要原因之一。