贯叶金丝桃中的金丝桃素和贯叶金丝桃素对P-糖蛋白的抑制作用

P-糖蛋白(P-gp)对许多药物(包括化疗药物、天然产物、毒物和肽类)的生物利用度、分布和功效有明显的影响。作者研究了贯叶金丝桃中的成分金丝桃素和贯叶金丝桃素与P-gp的相互作用及其对荧光标记的柔红霉素(DNR)、丹若明(Rho)等转运的影响。通过它们在细胞保留的荧光强度测定转运效果,     

肠壁CYP3A和P-糖蛋白与口服药物生物利用度

口服给药时 ,药物在到达腔静脉之前必先沿着胃肠道向下移动并通过肠壁和肝脏 ,加上大多数药物以原形发挥的药理活性 ,因此 ,口服生物利用度 (F)通常由药物吸收分数 (Fa)、吸收的药物不经代谢进入肝门脉血流的分数 (Fg)、肝首过利用度(进入肝脏的药物逃过首过消除的分数 ,Fh)三者所产生 ,即F=Fa×Fg×Fh。随着药物剂型的不断改进以及共用药物影响因素的尽量避免 ,近来认为药物在肠道的代谢以及被吸收药物在肠道的主动外排成了口服药物生物利用度的主要决定因素[1]。1细胞色素P450(CYP)3A位于许多组织滑面内质网上的CYPs是一组含亚铁血…     

贯叶金丝桃中的金丝桃素和贯叶金丝桃素对P-糖蛋白的抑制作用[英3／Wang E J…∥J Pharm Pharmacol．

P一糖蛋白(P—gP)对许多药物(包括化疗药物、天然产物、毒物和肽类)的生物利用度、分布和功效有明显的影响。作者研究了贯叶金丝桃中的成分金丝桃素和贯叶金丝桃素与P—gP的相互作用及其对荧光标记的柔红霉素(DNR)、丹若明(Rho)等转运的影响。通过它们在细胞保留的荧光强度测定转运效果，并通过流式细胞仪计算它们的IC50；以ATP水解速率表示P—gP的转运速率。结果表明，     

CYP3A和P-糖蛋白对布格呋喃在大鼠小肠吸收的影响

本研究采用大鼠小肠在体单向 (single-pass) 灌流模型, 收集灌流后不同时间点灌流液和肠系膜静脉血, 应用GC-MS联用法测定灌注液和血浆中的布格呋喃含量, 并计算布格呋喃渗透系数［P_lumen = −(Q/2πrl) Ln(C_out/C_in) 和P_blood = (ΔM_B/Δt)/(2πrl)］, 从而反映布格呋喃的代谢变化。同时, 观察CYP3A选择性抑制剂醋竹桃霉素 (TAO)、CYP3A和P-糖蛋白 (P-gp) 共同抑制剂环孢素A (CsA) 和P-gp选择性抑制剂LSN335984对布格呋喃自大鼠肠道吸收的影响。结果表明, 在大鼠小肠在体单向灌流模型中加入LSN335984、TAO和CsA后, 大鼠肠系膜静脉血中布格呋喃的累积量分别为73.4、82.9和98.3 pmol·cm⁻², 与对照组比较分别增加3.9倍、4.6倍和5.6倍, 代谢分别减少12%、11%和21%。提示CYP3A和P-gp选择性抑制剂可明显减少布格呋喃在大鼠肠道的首过效应, 促进布格呋喃的肠道吸收。由此可见, P-gp与CYP3A两者联合作用是引起布格呋喃口服生物利用度低的重要因素, 两者对布格呋喃小肠吸收均具有重要影响。     

栽培密度对贯叶金丝桃生长和活性成分含量的影响

贯叶金丝桃Hypericum perforatum L．地上部分含有黄酮、鞣质和挥发油等物质,其含量与许多因素有关,其中包括栽培条件。作者研究了栽培密度对该植物生长发育和其地上部分有效成分含量的影响。     

注射用丹参总酚酸(冻干)对人CYP450酶和P-糖蛋白体外抑制作用及对大鼠CYP1A2和CYP3A体内诱导作用(英文)

目的探讨注射用丹参总酚酸(冻干)(SLI)对人CYP450酶和P-糖蛋白体外抑制作用以及对大鼠CYP1A2和CYP3A体内诱导作用。方法①应用P450-GloTMCYP450检测试剂盒,通过化学发光法测定SLI和经典抑制剂对细胞色素P4501A2(CYP1A2),CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9的IC50值,通过比较SLI和经典抑制剂对相应细胞色素P450亚型的IC50值来判断SLI对人CYP450酶的体外抑制作用。②Wistar大鼠分别iv给予SLI 3,10和30 mg·kg-1和诱导剂苯巴比妥钠20 mg·kg-1,采用探针底物法,通过比较代谢产物的生成速率来评价SLI对大鼠CYP1A2和CYP3A的诱导作用。③应用ATP酶检测试剂盒,通过化学发光法测定ATP酶活性来评价SLI是否为P-gp的底物或抑制剂。结果①CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6和CYP3A4抑制剂的IC50与SLI对其的IC50进行比较(CYP1A2:0.12μmol·L-1vs 840μmol·L-1;CYP2C9:3.362μmol·L-1vs 704μmol·L-1;CYP2C19:3.236μmol·L-1vs 306μmol·L-1;CYP2D6:0.117μmol·L-1vs 2660μmol·L-1;CYP3A4:0.078μmol·L-1vs 1780μmol·L-1)。②与空白对照组(86.4±6.3)nmol·g-1.min-1相比,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP1A2活性分别为83.4±6.6,82.5±4.0和(83.4±6.6)nmol·g-1.min-1。与空白对照组(16.1±0.9)nmol·g-1.min-1比较,SLI 3,10和30 mg·kg-1组CYP3A活性分别为15.7±0.6,15.9±0.7和(15.9±1.0)nmol·g-1.min-1,无显著性差异。③以临床血药浓度为依据设计的一系列浓度的SLI 0.0002,0.0006,0.002,0.006,0.017,0.052,0.156和0.468 g.L-1的ATP酶活性分别与空白对照组进行比较(5.8,5.3,5.8,5.5,5.8,5.2,,5.8,5.3,vs 5.75μmol·g-1.min-1),无显著性差异。结论SLI临床给药剂量既不能体外抑制人CYP1A2,CYP2D6,CYP3A4,CYP2C19和CYP2C9酶活性,也不能诱导大鼠CYP1A2和CYP3A,同时也不是P-gp的体外抑制剂或底物。     

丹参注射液对家兔体内CYP1A2、CYP2D6和CYP3A4活性的影响

目的：用Cocktail探针药物法研究丹参注射液对家兔细胞色素P450亚型酶活性的影响。方法：将家兔随机分成四组,耳缘静脉注射给予丹参注射液,分低、中、高剂量三个实验组,空白对照组给予生理盐水。用HPLC法测定各组Cock-tail探针药物（咖啡因、美托洛尔和氨苯砜）的血药浓度,比较药时曲线及药代动力学参数的变化,评价各组细胞色素P450亚型酶的活性。结果：丹参注射液低、中、高剂量组CYP2D6的活性与对照组相比降低,具有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）;CYP1A2和CYP3A4的活性与对照组相比差异均无统计学意义。结论：丹参注射液对家兔CYP2D6有抑制作用,对CYP1A2和CYP3A4的影响不显著。提示临床应用丹参注射液时,应关注其对CYP2D6的抑制作用,避免联合用药引发CYP2D6介导的药物相互作用,促进临床安全合理用药。     

健康男性志愿者单次量或多次口服含贯叶金丝桃提取物的片剂后主要活性成分药动学观察

金丝桃素、伪金丝桃素、贯叶金丝桃素和一些黄酮类化合物被认为是贯叶金丝桃抗抑郁的主要活性成分。作者进行了2项开放的期临床试验,以获取这些化合物的药动学数据。每项试验各选取18名男性健康志愿者。所有受试者在试验前1个月内不得吸烟,对贯叶金丝桃高度敏感者以及严重和急性疾病者、慢性乙醇和药物滥用、HIV或肝炎病毒感染、胃肠道手术、试验前4周内进行慢性治疗或10日内进行其他治疗者除外。在第1项试验中,受试者于实验前48h内未服任何药物,在试验第1天上午7点单次量口服含900mg贯叶金丝桃提取物片剂,于服药后48h内22个时间点采血测…     

CYP3A4和P糖蛋白与药物的肠道处置

肠CYP3A4介导的生物转化和P糖蛋白介导的药物主动泵出肠细胞是决定口服药物生物利用度的主要因素。有证据显示CYP3A4和P糖蛋白在小肠不是共同调节的,但两者在药物肠道处置中的协同作用已得到体外试验和动物体内试验的证实。进一步了解两者的相互作用有助于改善CYP3A4/P糖蛋白底物的生物利用度。     

人细胞色素P450 3A4突变体CYP3A4.3,CYP3A4.4,CYP3A4.5和CYP3A4.18重组酶的异源表达与活性

目的重组表达人细胞色素P450(CYP)3A4突变体CYP3A4.3,CYP3A4.4,CYP3A4.5和CYP3A4.18蛋白,为CYP3A4代谢活性的体外研究提供单一酶源。方法应用杆状病毒表达系统构建含有上述各CYP3A4突变体基因序列的重组病毒,将其连同含人源还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸-P450氧化还原酶(POR)和细胞色素b5基因的重组病毒共同感染昆虫草地夜蛾细胞Sf9得到CYP3A4突变体与POR和细胞色素b5共表达的重组蛋白,分别以高效液相色谱法和荧光分析法测定各重组酶对睾酮和7-甲氧基-4-三氟甲基香豆素的代谢活性。结果在mRNA分子水平上验证了CYP3A4突变体CYP3A4*3,CYP3A4*4,CYP3A4*5和CYP3A4*18基因在Sf9细胞中的转录。感染了各重组病毒的Sf9细胞裂解液对睾酮和7-苄氧基-4-三氟甲基香豆素有明显代谢。结论应用杆状病毒-昆虫细胞表达系统在体外成功表达了具有催化活性的人CYP3A4突变体CYP3A4.3,CYP3A4.4,CYP3A4.5和CYP3A4.18蛋白,其中CYP3A4.5活性显著低于野生型蛋白,CYP3A4.18活性显著高于野生型蛋白,而CYP3A4.3和CYP3A4.4与野生型蛋白活性近似。     

服用卡马西平癫痫患者CYP3A4基因多态性的研究

目的:研究服用卡马西平癫痫患者细胞色素P4503A4(CYP3A4)的基因多态性,为临床制定卡马西平个体化给药方案提供依据。方法:收集临床服用卡马西平癫痫患者的血标本,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)法检测CYP3A4的突变。结果:141例患者中存在CYP3A4*4、CYP3A4*6的突变,个体突变率均为0.71%;未见CYP3A4*5的突变。结论:2例突变型标本与其他标本的血药浓度与临床疗效比较无显著性差异,不能说明CYP3A4*4、CYP3A4*6的突变对其表达的药物代谢酶的活性有影响。     

用核磁共振谱、多元数据分析和药理活性对贯叶金丝桃提取物进行分类和相关性研究

核磁共振谱法通过对所有含质子的化合物进行定量和对所有相关物质的结构进行鉴定,可分析植物提取物的复杂成分。由于得到的波谱太复杂,以至不能直观地分析,因此采用多元统计方法对波谱进行分类。作者将贯叶金丝桃4种栽培品用6种溶剂提取,并对提取物的波谱数据用化学计量法进行了评价和用偏最小二乘法（PLS-1和PLS-2）校正。     

银杏叶提取物及其不同成分对CYP3A4活性的影响

目的:研究银杏叶提取物及其中2种主要活性物质黄酮和内酯对人体内CYP3A4酶活性的影响。方法:构建了可用于体外高通量检测基于PXR诱导的CYP3A4系统,通过细胞培养实验,化学发光检测仪检测银杏叶不同组分对CYP3A4的激活水平。采用反相高效液相色谱法测定银杏叶不同组分对细胞内尼卡地平代谢的影响。结果:高通量检测系统检测表明,银杏叶提取物对体内的CYP3A4酶表达具有显著的激活作用。进一步研究证实银杏叶提取物的两类主要活性物质黄酮和内酯呈剂量的方式激活CYP3A4的表达。银杏叶内酯明显加速尼卡地平的代谢速率,而银杏叶黄酮则降低细胞内尼卡地平的降解速率。结论:银杏叶提取物及其主要活性成分黄酮和内酯能显著提高CYP3A4的活性,内酯能提高CYP3A4代谢尼卡地平的能力,而黄酮则可能由于药物相互作用的原因,抑制了CYP3A4酶活性,降低其代谢尼卡地平的能力。     

川楝子与小鼠肝脏CYP3A活性的相关性研究

目的：研究川楝子与肝脏CYP3A活性的相关性。方法：以聚乙二醇法提取肝脏微粒体,用红霉素-N-脱甲基酶活性的测定方法测定肝脏CYP3A活性。结果：川楝子大、小剂量组与正常对照组相比,肝脏CYP3A活性明显降低（P〈0.05）。结论：川楝子可能是CYP3A的抑制剂。     

谷丙转氨酶和总胆红素浓度预测CYP3A的活性

目的 探索肝功能指标是否可以预测不同肝功能患者的肝微粒体酶(CYP3A)的活性。方法 选择全身麻醉下手术患者45例,分成3组：正常肝功能组(正常组),肝功能中度损伤组(中度损伤组)和终末期肝病组(终末期组)。每位患者静脉注射5 mg咪唑安定,2 h后采集静脉血检测咪唑安定(MDZ)以及主要代谢产物1’-羟基-咪唑安定(1’-OH-MDZ)的血浆药物浓度,以1’-OH-MDZ与MDZ计算CYP3A的活性。将肝功能指标参数与CYP3A活性进行多项回归。结果 正常组和中度损伤组的CYP3A活性差异没有显著性(P=0.332),而终末期组的酶活性比正常组和中度损伤组低,差异具有统计学意义(P=0.000)。多项线性回归的结果显示CYP3A活性与血清谷丙转氨酶(ALT)浓度(R²=0.682,P=0.000)和总胆红素(TB)浓度(R²=0.519,P=0.002)具有线性关系。而其他因素如白蛋白(P=0.881)和碱性磷酸酶(P=0.497)与CYP3A活性没有线性关系。结论 终末期肝病患者CYP3A活性降低,血清ALT和TB浓度可以预测CYP3A的活性,因此肝功能检测ALT或者TB升高可以提示临床医生需要调整药物剂量。     

中国汉族人群中CYP3AP1基因型与CYP3A活性的相关性研究

目的:研究中国汉族人群中CYP3AP1基因型的分布特征及其与CYP3A活性的相关性.方法:以口服7.5mg咪哒唑仑后1小时血浆中1′-羟化咪哒唑仑与咪哒唑仑的比值作为CYP3A活性的衡量指标,测定191名中国汉族健康受试者的CYP3A活性,并利用多聚酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法对已知CYR3A活性受试者的DNA进行CYP3AP1基因分型.结果:CYP3AP1不同基因型个体的CYR3A活性存在显著差异(P<0.05).A_(-44)等位基因纯合子个体的CYP3A活性低于A_(-44)G杂合子,而G_(44)等位基因纯合子个体的CYP3A活性最高.结论:CYP3AP1基因型与体内CYP3A活性的增加存在相关性.     

Cocktail法研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响

目的：研究脉络宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性的影响。方法：14只大鼠随机均分成临床等效剂量组和高剂量组,连续2周静脉给予脉络宁注射液（临床等效剂量纽,2mL／kg;高剂量组,4mL／kg）前后,均同时灌胃给予3个探针底物（茶碱,30mg／kg;氯唑沙宗,50rag／kg;氨苯砜,20mg/kg）,进行采血试验。用HPLC法同时测定大鼠体内各探针的血药浓度,DAS1．0软件计算药动学参数,并以配对t检验对各组大鼠前后两轮主要药动学参数进行差异性比较。结果：在1个给药疗程（14d）内,临床等效剂量组大鼠用药前后,3个探针的药动学参数均无显著性变化（P〉0．05）;高剂量组大鼠用药后,与用药前相比,茶碱的药动学参数没有显著变化（P〉0．05）;氨苯砜和氯唑沙宗的AUC0-24h均有升高趋势（P〈0．05）,给药后分别是给药前的1．44倍和1．28倍,同时氯唑沙宗的CL显著降低（P〈0．05）。结论：临床等效剂量脉络宁对大鼠CYP1A2、CYP2E1和CYP3A4活性均无显著影响,而高剂量脉络宁对大鼠CYP2E1和CYP3A4均有弱抑制作用。