高效液相色谱法同时测定肉苁蓉饮片及管花肉苁蓉提取物中4种苯乙醇苷类成分含量

目的 建立同时测定肉苁蓉饮片及管花肉苁蓉提取物中4种苯乙醇苷类成分含量的高效液相色谱法.方法 色谱柱为Inertsil ODS-3柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1％甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为330 nm,柱温为30℃,进样量为10μL.结果 松果菊苷、管...     

RP－HPLC法测定不同寄主和不同产地肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷的含量

目的:测定不同寄主和不同产地肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷含量。方法:采用反相高效液相色谱法,SUPELCOSIL LC-18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)。测定松果菊苷用流动相A:乙腈-水-冰醋酸(13:86:1);测定麦角甾苷用流动相B:甲醇-水-冰醋酸(32:67:1)。流速:1.0 mL·min~(-1),检测波长分别为335 nm、334nm。柱温:40℃。结果:松果菊苷和麦角甾苷分别在0.04～0.28 μg(r=0.999 8)和0.04～0.40 μg(r=0.999 2)内呈良好线性关系,平均加样回收率分别为97.6％和99.1％,RSD均为1.2％。结论:方法准确可靠,重现性好,可用于肉苁蓉的质量评价。     

肉苁蓉与沙苁蓉中6种苯乙醇苷类成分的UPLC含量测定及化学计量学评价

目的:建立肉苁蓉、管花肉苁蓉及沙苁蓉中松果菊苷、管花苷A、毛蕊花糖苷、异毛蕊花糖苷、金石蚕苷和2'-乙酰金石蚕苷的UPLC含量测定方法,并比较其含量的异同.方法:采用Waters HSST3(100 mmx 2.1 mm,1.8 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1％甲酸水,梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,检测波...     

响应面法优化肉苁蓉苯乙醇苷回流提取工艺

目的利用响应面法对瓜州肉苁蓉苯乙醇苷的提取工艺进行优化。方法以肉苁蓉苯乙醇苷提取率为评价指标,探究乙醇体积分数、提取温度、提取时间、料液比和提取次数对肉苁蓉苯乙醇苷提取率的影响。结果肉苁蓉苯乙醇苷的实际最佳提取工艺条件为:乙醇体积分数60%、提取温度80℃、液料比12:1,提取时间2 h,提取2次,此条件下的提取率为76.5880 mg·g-1。结论本研究为瓜州肉苁蓉苯乙醇苷资源开发及工业化生产提供理论依据。     

大孔吸附树脂分离纯化肉苁蓉中苯乙醇苷工艺研究

目的筛选富集肉苁蓉中苯乙醇苷的最佳树脂和工艺条件,使分离纯化工艺达到最优化。方法选择7种大孔吸附树脂（AB-8、DM301、DM130、D1400、DA-201、HPD-100、D-101-I）,通过树脂对苯乙醇苷的静态吸附和解析能力,筛选出最佳树脂,再通过树脂的静态特性和动态特性的筛选优化工艺。结果 DA-201的吸附解析最佳条件为：上样流速为1.5 mL.min-1,洗脱剂为90%的乙醇。按最佳工艺苯乙醇苷的纯度由25.1%上升为51.2%。结论该法简便、可行,为肉苁蓉中苯乙醇苷的纯化提供了参考。     

浅析决明子降血脂的有效成分

目的 简要分析决明子降血脂的有效成分.方法 将决明子研成粗粉,按系统溶剂提取法制取决明子正丁醇提取物.将决明子的正丁醇提取物上AB-8大孔吸附树脂,依次通过水、20%乙醇、80%乙醇洗脱,得到80%乙醇洗脱物.然后将洗脱物分别经过硅胶柱和氯仿-甲醇梯度洗脱,分段收集.然后将分段收集液经过硅胶柱层析(石油醚一丙酮梯度洗脱)、Spehadex LH-20柱层析(甲醇一水梯度洗脱)、C18柱层析(甲醇一水梯度洗脱)得到六种化合物.最后通过运用低密度脂蛋白受体(LDLR)报告基因模型对六种化合物的有效成分进行分析.结果 化合物Ⅱ能明显增强荧光素酶的活性,说明其能明显增强低密度脂蛋白的基因表达,从而有效的降低血脂含量.结论 化合物Ⅱ(橙黄决明素)为决明子降血脂的有效成分.     

肉苁蓉的HPLC指纹图谱研究

目的:建立肉苁蓉的色谱指纹图谱检测方法。方法:以麦角甾苷为参照物,用HPLC方法建立肉苁蓉甲醇提取物的指纹图谱。色谱柱:Shim-packVP-ODS柱(4.6×150mm,5μm),流动相:甲醇-乙腈-0.05molCL醋酸钠缓冲液(冰醋酸调pH4.0)(12:11:77),流速:1.0mLCmin,检测波长:334nm。结果:标示出肉苁蓉12个共有峰。结论:该方法简便、准确、重现性好,可以作为肉苁蓉质量评价和品种鉴别的重要依据之一。     

HPLC法测定管花肉苁蓉中松果菊苷和麦角甾苷的含量

目的：建立同时测定管花肉苁蓉药材及提取物中松果菊苷和麦角甾苷含量的HPLC法。方法：采用Hypersil ODS C18（200mm×4．6mm,5μm）色谱柱,甲醇-乙腈-1％醋酸溶液（15：10：75）为流动相,流速为0．8ml·min^-1,检测波长为334nm,柱温为30℃。结果：松果菊苷和麦角甾苷线性范围分别在3．65—234．00μg·ml^-1（r=0．9999）和2．74～175．20μg·ml^-1（r=0．9999）浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率分别为95．7％,95．8％,RSD分别为1．8％,2．7％（n=9）。结论：方法简便,精密度、重复性良好,结果准确可靠,可用于工业生产肉苁蓉药材、饮片及其制剂的含量测定。     

HPLC法测定益坤宁酊中梓醇、麦角甾苷、马替诺皂苷、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮

目的建立HPLC波长切换法测定益坤宁酊中梓醇、麦角甾苷、马替诺皂苷、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮的方法。方法采用Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相A:乙腈–甲醇(1∶3),流动相B:0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长210 nm(梓醇)、330 nm(麦角甾苷、马替诺皂苷)和230 nm(氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、α-香附酮);体积流量0.8 m L/min;柱温25℃;进样量10μL。结果梓醇、麦角甾苷、马替诺皂苷、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷和α-香附酮在2.66~66.50、1.59~39.75、0.76~19.00、1.38~34.50、7.02~175.50、9.91~247.75、1.19~29.75μg/m L线性关系良好。平均加样回收率分别为97.97%、98.31%、96.99%、97.78%、99.28%、100.03%、97.43%,RSD值分别为1.42%、0.92%、1.30%、1.13%、1.08%、0.65%、1.27%。结论本法操作便捷、数据准确、灵敏度高,重复性好,可为益坤宁酊的质量控制提供参考。     

新疆假龙胆的保肝活性部位环烯醚萜苷提取纯化工艺研究

目的利用响应面法优化新疆假龙胆中保肝活性部位环烯醚萜苷的提取工艺,并优选大孔吸附树脂分离纯化新疆假龙胆中环烯醚萜苷的工艺条件。方法以新疆假龙胆中主要的3种环烯醚萜苷的提取率为考察指标,采用单因素实验结合Box-Behnken中心组合设计方法优化提取工艺,再通过考察静态和动态吸附、洗脱效果,筛选大孔吸附树脂分离纯化环烯醚萜苷的最佳工艺条件。结果新疆假龙胆环烯醚萜苷提取的最优条件为:乙醇体积分数为55%,提取时间为3.0 h,提取温度为50℃,料液比为1∶30,所得提取物环烯醚萜苷含量为52.67%(其中獐牙菜苦苷、龙胆苦苷和獐牙菜苷的含量分别为32.47%,17.41%和2.79%)。选用NKA-9型大孔吸附树脂,树脂柱径高比为1∶5进行洗脱,上样液pH值为2,质量浓度为0.5 g·mL~(-1),上样量为10 mL,吸附2 h后的树脂柱先用5 BV蒸馏水洗脱,再分别用10 BV体积分数为10%和30%的乙醇以5 BV·h~(-1)的流速洗脱。结论该方法具有较好的分离纯化效果,环烯醚萜苷类成分含量可达到59.9%。该优选工艺操作简单、稳定可行,可显著提高新疆假龙胆中环烯醚萜苷的提取率。     

肉苁蓉中异麦角甾苷标准品的制备及含量测定

目的研究肉苁蓉中异麦角甾苷标准品的制备及含量测定方法。方法运用半制备高效液相色谱法分离纯化异麦角甾苷,采用薄层色谱法和高效液相色谱面积归一化法检测纯度,波谱法鉴定其结构,反相高效液相色谱法测定肉苁蓉药材中异麦角甾苷的含量。结果制备的化合物鉴定为异麦角甾苷,纯度为98.8%;其质量在0.22～1.31μg范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0.999 5,平均回收率为101.51%,RSD=1.79%(n=9)。结论该制备方法效率高,所得化合物纯度高,可用于大量制备;含量测定方法准确、简便、可靠,重复性好。     

正交试验优化管花肉苁蓉水提取工艺

目的:优选管花肉苁蓉水提取最佳工艺。方法:以管花肉苁蓉中的苯乙醇苷提取量为检测指标,以料液比、提取时间、提取次数为考察因素,采用正交试验法进行优选。结果:管花肉苁蓉的最佳水提工艺为料液比1∶15,回流提取3次,每次1h。结论:本工艺成本低廉、安全性高、生产周期短、提取率高,对管花肉苁蓉制剂的大生产具有指导意义。     

白首乌C_(21)甾苷提取及大孔树脂纯化工艺

目的:筛选优化白首乌中C21甾体酯苷类成分的提取工艺及大孔树脂纯化工艺。方法:采用正交试验设计,以C21甾苷得率为指标,优化乙醇回流提取工艺;比较AB-8及HP-20型大孔树脂的吸附效果,并以纯化后C21甾苷收率及浸膏中甾苷的质量分数为指标,优选纯化工艺。结果:C21甾苷的最佳提取工艺为:6倍量90%乙醇提取3次,每次1h。AB-8型大孔树脂对C21甾苷有较好的吸附分离性能,优选的纯化工艺为:上样液质量浓度1g.mL-1,以6倍量80%乙醇洗脱,纯化后总甾苷含量可达46.91%。结论:优选工艺简单稳定,对C21甾苷提取精制效果好,可为其工业制备提供参考依据。     

玄参中哈巴苷的制备方法研究

目的 优选玄参中哈巴苷的制备工艺。方法 运用正交试验法,以哈巴苷提取量为指标,优化玄参中哈巴苷的提取方法;采用大孔吸附树脂法,以哈巴苷吸附-解吸率为指标,确定最佳树脂型号,优化其富集工艺;采用柱色谱法,通过对固定相、洗脱剂、上样量、色谱柱径高比、洗脱体积的考察,优化哈巴苷的纯化工艺。结果 提取工艺为玄参药材加10倍量水提取3次,每次1.5 h;富集工艺为采用SP825大孔吸附树脂柱色谱,上样液浓度为生药0.07 g·mL^-1,树脂柱径高比为1：6,吸附流速为1.0 mL·min^-1,最大比吸附量为0.40 g·mL^-1;纯化工艺为采用硅胶柱色谱法,上样量为样品：硅胶（1：70）,径高比为1：15,洗脱剂为氯仿-甲醇（4：1,2：1）,洗脱体积为氯仿-甲醇（4：1）洗脱2个柱体积、氯仿-甲醇（2：1）洗脱1个柱体积,再用C₁₈色谱柱（径高比1：9）纯化。结论 所建立的工艺制备效果良好,操作简单,重复性好,制备得到的哈巴苷纯度>98%,且得率较高,可用于批量生产,为玄参的进一步应用与产品开发提供参考。     

藏药短管兔耳草中松果菊苷和麦角甾苷的含量测定

目的:建立RP-HPLC法同时测定松果菊苷和麦角甾苷的含量。方法:采用ZORXDB C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1%醋酸水溶液(3∶7),流速1.0 mL.min-1,检测波长330 nm,柱温25℃,进样量20μL。结果:本方法可在25 min内完成松果菊苷和麦角甾苷2个成分的色谱分析,且两成分色谱峰之间具有良好的分离度,线性范围分别为25～400μg.mL-1(r=0.9996)和19.4～310μg.mL-1(r=0.9985),平均加样回收率(n=9)分别为99.8%和97.8%。结论:以松果菊苷和麦角甾苷为目标成分时,青海省海北州热水地区为短管兔耳草的最佳采收地。该方法灵敏度高、准确、简便、快速,可用于短管兔耳草的质量控制。     

管花肉苁蓉苯乙醇苷提取物对血管内皮细胞EA.hy926增殖的抑制和凋亡的诱导作用

目的 研究管花肉苁蓉苯乙醇苷提取物对血管内皮细胞EA.hy926增殖的抑制和凋亡的诱导作用.方法 采用CCK-8法测定细胞增殖的抑制率,用Hoechst33342染色法观察细胞的凋亡形态,采用Annexin V-FITC/PI双染法结合流式细胞仪测定细胞的凋亡率,用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达情况.结果 与对照组相比,管花肉苁蓉苯乙醇苷提取物能够抑制血管内皮细胞的增殖且呈剂量依赖性,其作用24h时的IC50 =30.61 μg·mL-1;能够增加血管内皮细胞凋亡率,药物组的细胞呈现核浓染和固缩现象,能够降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达、增加促凋亡蛋白Bax的表达、Bcl-2/Bax值显著降低.结论 肉苁蓉苯乙醇苷提取物能够通过诱导血管内皮细胞的凋亡来抑制其增殖,其机制与调控凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达有关.     

不同季节采收的肉苁蓉中4种苯乙醇苷的含量比较研究北大核心CSCD

目的:建立RP-HPLC同时测定肉苁蓉中松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷和2’-乙酰基毛蕊花糖苷含量的方法,并比较不同季节采收的肉苁蓉中4种成分的含量差异。方法:采用Agilent XDB-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,柱温30℃,流动相为甲醇(A)-0.1%甲酸(B),梯度洗脱(0 min,30%A;30 min,40%A;35 min,30%A;40 min,30%A),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长330 nm。结果:在上述色谱条件下,松果菊苷、肉苁蓉苷A、毛蕊花糖苷和2’-乙酰基毛蕊花糖苷获得良好分离;进样浓度分别在20.4~816μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、4.60~184μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、26.0~1 040μg·mL^(-1)(r=0.999 9)、10.4~416μg·mL^(-1)(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系;平均加样回收率(n=6)分别为98.8%、97.4%、101.2%和99.0%;精密度试验的RSD(n=6)不大于0.24%;重复性试验的RSD(n=6)不大于2.27%。秋季采收的肉苁蓉中松果菊苷和肉苁蓉苷A含量较高,分别为1.036%~4.400%和0.213%~0.834%,12批样品中4个指标成分总含量为1.259%~5.65%。春季采收的肉苁蓉中4个指标成分中2’-乙酰基毛蕊花糖苷和松果菊苷含量较高,分别为0.512%~2.384%、0.11%~0.804%,12批样品中4个指标成分总含量为0.551%~3.121%。结论:该方法简便、准确,重复性好,不同季节采收的肉苁蓉中4种成分含量差异明显,可为肉苁蓉的质量控制提供实验依据。     

高效液相色谱法测定赤芍中赤芍总苷的含量

目的研究用高效液相色谱法测定赤芍总苷(TPG)含量的可行性.方法赤芍经70%乙醇提取后大孔吸附树脂分离以制备TPG;采用高效液相色谱法(HPLC)测定赤芍总苷中芍药苷含量,色谱条件:S-Gel C18,5 μm色谱柱,流动相:甲醇-水(50∶ 50),柱温40℃,流速0.8 ml·min-1,检测波长230 nm.结果大孔吸附树脂分离赤芍总苷(TPG)的制备工艺质量稳定;HPLC法准确、可靠、重现性好,平均回收率为100.1%,RSD为1.96%.结论建立的方法可用以控制赤芍总苷质量.     

上海医药工业研究院从西藏胡黄连中提取得到一种新苷类成分并进行了结构确定

由上海医药工业研究院谢智勇、孔德云和杨培明同志从西藏胡黄连中提取得到一种新的苷类成分 ,操作如下 :将西藏胡黄连 ( Picrorhiza scrophu-lariiflora Pennell)的药材粗粉用水提取 ,其水提取物上大孔吸附树脂 ,以不同浓度的醇进行梯度洗脱。取其中 45 %乙醇的洗脱部分 ,回收乙醇后剩余物依次用石油醚 ( 60～ 90℃ )、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取 ,取用乙酸乙酯萃取后得到的萃取物 ,反复经硅胶柱色谱纯化后得到一个化合物。通过对其各种波谱数据 ( 1HNMR、13 CNMR、 DEPT、HMBC及 ESI-MS)的解析及水解后与已知化合物进行对照 ,确…     

人工栽培盐生肉苁蓉的苯乙醇苷类化学成分

目的研究人工栽培盐生肉苁蓉(寄主为囊果碱蓬)中的苯乙醇苷类化学成分。方法采用色谱技术分离纯化,根据理化性质和谱学数据鉴定其结构。结果从盐生肉苁蓉栽培品中分离得到7个苯乙醇苷类化合物,分别鉴定为松果菊苷(echinacoside,1)、肉苁蓉苷A(cistanosideA,2)、毛蕊花苷(acteoside,3)、异毛蕊花苷(isoacteoside,4)、2′乙酰基毛蕊花苷(2′acetylacteoside,5)、管花苷B(tubulosideB,6)、1O[2(4羟基苯基)乙基]6O(E)香豆酰基βD吡喃葡萄糖苷(EutigosideA,7)。结论首次对人工栽培盐生肉苁蓉的化学成分进行了研究,分离得到7个化合物,其中化合物7为首次从列当科植物中分得,化合物1-6为在该种植物栽培品中首次报道。