穗花牡荆的药理活性与临床应用

穗花牡荆果实提取物1992年已被德国联邦卫生局E委员会批准用于治疗月经不调，经前期综合征和乳腺痛。综述了近几年对穗花牡荆临床研究和药理活性的研究进展。     

欧洲药典(第5版增补本5.4):穗花牡荆果实(Agnus castus fruit)

本品为马鞭草科植物穗花牡荆Vitex agnus-castus L.成熟、干燥的全果。紫花牡荆素(分子式C19H18O8;分子量374.3)至少0.08%。其肉眼和显微镜下特征见鉴别试验A和B。鉴别A:穗花牡荆果实呈卵状,近球形,直径可达5mm。花萼灰绿色,上被细小软毛,4～5裂,花萼不落,包被果实表面的2/3至3     

穗花牡荆成熟果实提取物对人正常及肿瘤细胞的细胞毒活性和诱导细胞凋亡的作用

作者研究了穗花牡荆Vitex agnus-castus果实乙醇提取物对2种人非肿瘤细胞株(子宫颈成纤维细胞HCF和人胎儿成纤维细胞HE-21)及6种人癌细胞株(MCF-7、SKG-3a、SKOV-3、KATO-Ⅲ、COLO 201和Lu-134-A-H)的细胞毒活性。以XTT染料还原试验研究提取物对对数生长期及停滞期细胞的毒性;用琼脂糖凝胶电泳法分析DNA断裂;用蛋白质印迹法     

山楂叶及其提取物中2″-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量测定

目的建立对山楂叶及其提取物中有效成分2″-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量同时进行测定的方法。方法应用反相高效液相色谱法同时测定山楂叶及其提取物中2″-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量。以C18柱作为色谱柱,四氢呋喃-乙腈-水-磷酸(30∶5∶125∶0·1)为流动相,检测波长为270nm,按外标法定量。结果线性范围分别为0.1064μg~2.1280μg(相关系数r=0.9991)和0.1392~2.7840μg(r=0.9993)。在山楂叶药材中,2″-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的平均加样回收率为99.21%(RSD=2.80%,n=6)和100.56%(RSD=2.84%,n=6);重复性试验的RSD分别为2.74%(n=6)和1.99%(n=6)。结论本方法简便,分离重现性好,灵敏度高,为山楂叶及其提取物中2″-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量同时测定提供了可行的含量测定方法,为山楂叶的质量标准提供了测定依据。     

胡芦巴树脂提取物中总黄酮和牡荆素的测定

目的 测定胡芦巴树脂提取物中总黄酮和牡荆素的含量.方法 以牡荆素为对照品,采用UV法于340 nm处测定总黄酮;采用HPLC法测定牡荆素,C18色谱柱(150mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(16:84),检测波长340 nm.结果 总黄酮3.18～19.08μg·mL-1(r=0.9998)、牡荆素0.015～0.241μg(r=0.9998)线性关系良好;总黄酮和牡荆素的平均回收率分别为99.3%、100.47%;3批样品中总黄酮含量为16.24%、16.90%、15.95%,牡荆素含量为2.27%、2.42%、2.26%.结论 所建方法简便、快速、准确,适用于胡芦巴树脂提取物中总黄酮和牡荆素的测定.     

基于活性成分和α-葡萄糖苷酶抑制作用的组织培养牡荆遗传稳定性评价

目的 评价组织培养牡荆的遗传稳定性。方法 考察4种溶剂对牡荆叶总黄酮的提取效果；采用高效液相色谱(HPLC)法测定牡荆素含量，并测试牡荆叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制作用及动力学曲线。结果 不同溶剂对牡荆叶活性成分提取得率从高到低依次为酸性乙醇(pH 1.33)、70%乙醇溶液、丙酮、乙酸乙酯。以酸性乙醇(pH 1.33)为溶剂的组织培养和野生牡荆叶中总黄酮含量以鲜重计分别为62.79 mg/g和60.35 mg/g，牡荆素含量以鲜重计分别为132.20μg/g和126.12μg/g，提取物对α-葡萄糖苷酶的半抑制浓度(IC₅₀)分别为1.41 mg/mL和1.37 mg/mL。动力学曲线分析表明，组织培养和野生牡荆叶提取物对α-葡萄糖苷酶的抑制类型均为可逆性抑制。结论 牡荆叶提取物对α-葡萄糖苷酶有较强抑制作用，且组织培养和野生牡荆叶活性成分相当，组织培养牡荆遗传稳定性较好。     

咳特灵中牡荆苷、异牡荆苷二者之和的含量不同对止咳疗效的观察

目的探讨咳特灵中牡荆苷、异牡荆苷二者之和的含量不同对止咳疗效的影响。方法选择2015年1月至2016年11月本院收治的80例以咳、痰、喘症状为主的呼吸道疾病患者,随机分为对照组和观察组,各40例。观察组采用牡荆苷+异牡荆苷含量为0.95毫克/粒的咳特灵胶囊治疗,对照组增加常规符合国家最新版药典标准咳特灵胶囊(牡荆苷+异牡荆苷含量约为0.28毫克/粒)治疗,观察两组临床疗效、不良反应情况。结果观察组总有效率(97.50%)显著高于对照组(82.50%),组间差异(P<0.05)。观察组不良反应发生率(17.50%)略低于对照组(22.50%),但无显著组间差异(P>0.05)。结论咳特灵中牡荆苷、异牡荆苷二者之和含量不同对止咳疗效影响较大,高含量有助于提高临床疗效,临床应用安全可靠。     

RP-HPLC法测定牡荆片中牡荆素的含量

牡荆片是由牡荆子制成的制剂,具有平喘,镇咳,祛痰的功能。主要用于慢性气管炎,支气管哮喘。本方源自《中华人民共和国药品标准.中药成方标准》第10册[1],原标准项下无含量测定的方法,为有效控制其质量,笔者用RP-HPLC法对其中的牡荆素的含量进行了测定，经方法学考察认为本法简便，准确，可用于该制剂的质量标准。     

HPLC法同时测定山楂叶提取物中的7种主要成分

目的同时测定山楂叶提取物中牡荆素葡萄糖苷(Ⅰ)、牡荆素鼠李糖苷(Ⅱ)、芦丁(Ⅲ)、牡荆素(Ⅳ)、金丝桃苷(Ⅴ)、熊果酸(Ⅵ)和槲皮素(Ⅶ)的含量。方法采用HPLC法,色谱柱为Agilent ZORBAX SB-C18柱(5μm,4.6×250mm,柱号:880975-902)流动相A为1%冰醋酸水溶液,B为乙腈。梯度洗脱。0~5min,流动相A由95%~90%,B由5%~10%;5~15min,A由90%~80%,B由10%~20%;15~35min,A由80%~0%,B由20%~100%;35~45min,A 0%,B 100%,流速1.0 mL.min-1;检测波长0~20min,检测波长为360nm;20~30min,检测波长为220nm;30~45min,检测波长为360nm,参比波长均为385nm,柱温40℃。结果Ⅰ~Ⅶ的平均加样回收率分别为99.87%、99.86%、101.23%、100.65%、101.58%、101.45%和98.37%,其RSD分别为1.26%、1.28%、1.35%、1.49%、1.32%、1.51%和1.44%(n=6)。结论该方法简便、快速、准确、可靠,可用于山楂叶提取物的质量控制。     

高效液相色谱法同时测定护肝片中牡荆苷和异牡荆苷的含量

目的建立同时测定护肝片中牡荆苷和异牡荆苷含量的方法,并比较不同厂家护肝片中这两种成分含量的差异。方法以牡荆素和异牡荆素为指标,采用Prevail C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱,乙腈-水(20∶80)为流动相,柱温30℃,检测波长337 nm,流速1 mL·min~(-1),进样量15μL。结果牡荆苷和异牡荆苷分别在1.55～99.2μg·m L~(-1)和1.73～110.4μg·mL~(-1)内与峰面积线性关系良好,回归方程分别为Y=44.980X-26.175(r=0.9995)和Y=54.267X-48.826(r=0.9994),方法平均回收率分别为98.5%(RSD=0.93%)和99.0%(RSD=1.8%);所收集的30批来自16个不同厂家的护肝片每片牡荆苷和异牡荆苷的含量分别为0.011～0.222 mg和0.014～0.185 mg。结论该方法简便可行,准确可靠,重复性较好,可用于护肝片中牡荆苷及异牡荆苷的含量测定,为护肝片质量标准的完善提供参考。结果显示,不同厂家护肝片中牡荆苷和异牡荆苷含量差异较大。     

HPLC法测定益心酮片中五种成分的含量

目的:建立HPLC同时测定益心酮片中牡荆素-4″-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量。方法:采用HPLC法,色谱柱为Sepax HP C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:A为乙腈-四氢呋喃(20∶1),B为0.5%甲酸溶液,采用梯度洗脱;0~10 min,A为14%~17%,B为86%~83%;10~26 min,A为17%~18%,B为83%~82%;26~28 min,A为18%~14%,B为82%~86%;检测波长360 nm,流速1.0 mL.min-1;柱温32℃。结果:该方法加样回收率牡荆素-4″-O-葡萄糖苷为99.61%(RSD=0.64%),牡荆素鼠李糖苷为99.30%(RSD=0.49%),牡荆素为98.97%(RSD=1.03%),芦丁为99.45%(RSD=0.85%),金丝桃苷为99.27%(RSD=0.96%)。结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于益心酮片的质量控制。     

高效液相色谱梯度洗脱法同时测定调气丸中6个主要成分含量

目的 建立调气丸中和厚朴酚、厚朴酚、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素和金丝桃苷含量的测定方法。 方法采用Venusil MP C₁₈色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:乙腈—1.0%冰醋酸溶液,梯度洗脱,流速:0.9 mL/min,柱温30 ℃。结果 和厚朴酚、厚朴酚、牡荆素葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素和金丝桃苷分别在2.97~59.40、4.26~85.20、3.59~71.80、20.68~413.60、2.66~53.20、1.84~36.80 mg/L范围内线性关系良好;平均回收率分别为97.95%(RSD=0.98%)、98.27%(RSD=1.26%)、 98.19%(RSD=1.15%)、99.96%(RSD=0.68%)、 97.88%(RSD=1.68%)、96.93%(RSD=1.24%);精密度和重复性良好;供试品溶液在室温条件下12 h内稳定。结论 该方法操作简便,精密度、稳定性、重复性好,可同时用于调气丸中6种主要成分的含量测定。     

高效液相色谱法测定小儿清火宝颗粒中牡荆苷的含量!

目的:建立测定小儿清火宝颗粒中牡荆苷含量的高效液相色谱方法。方法:采用Dionex-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.2%冰醋酸水溶液(19∶81)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长331 nm。结果:牡荆苷在0.017～0.340 mg/mL浓度范围内与峰面积有良好线性关系(r=0.9999),平均加样回收率为98.0%,RSD小于2.0%。结论:本方法简便、快速、准确、重复性好,可用于小儿清火宝颗粒中牡荆苷的含量测定以及该制剂的质量控制。     

山楂叶及其提取物中2＂-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量测定

目的 建立对山楂叶及其提取物中有效成分2＂-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量同时进行测定的方法。方法应用反相高效液相色谱法同时测定山楂叶及其提取物中2＂-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量。以C18柱作为色谱柱，四氢呋喃-乙腈-水-磷酸（30：5：125：0．1）为流动相，检测波长为270nm，按外标法定量。结果 线性范围分别为0．1064μg-2．1280μg（相关系数r=0．9991）和0．1392～2．7840μg（r=0．9993）。在山楂叶药材中，2＂-O-鼠李糖牡荆素和牡荆素的平均加样回收率为99．21％（RSD=2．80％，n=6）和100．56％（RSD=2．84％，n=6）；重复性试验的RSD分别为2．74％（n=6）和1．99％（n=6）。结论 本方法简便，分离重现性好，灵敏度高，为山楂叶及其提取物中2＂-0-鼠李糖牡荆素和牡荆素的含量同时测定提供了可行的含量测定方法，为山楂叶的质量标准提供了测定依据。     

HPLC法同时测定淡竹叶中绿原酸和牡荆素的含量

目的:建立同时测定淡竹叶中绿原酸和牡荆素含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Waters Atlantis C18,流动相为乙腈-水(梯度洗脱),流速为1.0 ml/min,检测波长为280 nm,柱温为35℃,进样量为10μl。结果:绿原酸和牡荆素检测进样量线性范围分别为0.041 0~1.228 8(r=0.999 8)、0.264 0~7.920 0μg(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;加样回收率分别为97.6%~102.3%(RSD=1.85%,n=9)、97.6%~101.3%(RSD=1.19%,n=9)。结论:该方法操作简便、稳定、重复性好,可用于淡竹叶中绿原酸和牡荆素含量的同时测定。     

HPLC同时测定山楂叶提取物中的5种主要成分

目的 同时测定山楂叶提取物中2″-O-牡荆素葡萄糖苷(Glv)、2″-O-牡荆素鼠李糖苷(Rhv)、芦丁(Rut)、牡荆素(Vit)和金丝桃苷(Hps) 的含量.方法 采用HPLC法, 色谱柱为DiamonsilTM C18 柱(200 mm × 4.6 mm,5 μm),流动相A为甲醇,B为乙腈-四氢呋喃(1:19),C为0.5%冰醋酸,梯度洗脱.0～15 min,流动相A由1%～21%,B由19%～21%;15～17 min,A由21%～65%,B保持5%;17～20 min,A由 65%～1%,B由5%～19%;流速1.0 ml · min-1;检测波长360 nm;柱温30 ℃. 结果 Glv、Rhv、Rut、Vit、Hps的平均加样回收率分别为99.72%、100.27%、99.48%、99.31%和100.83%,其RSD 分别为1.26%、1.69%、1.61%、1.70%和1.31%(n=6).结论 所建方法简便、快速、准确、可靠,可用于山楂叶提取物的质量控制.     

HPLC法测定绿豆中牡荆素的含量

目的建立HPLC法测定绿豆中牡荆素的含量。方法采用Symmetry~? C_(18)色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-0.3%磷酸水(35∶65)为流动相等度洗脱,流速:1 ml/min,检测波长:260 nm,柱温:25℃。结果牡荆素进样量在0.04～0.44μg(r=0.999 9)范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为99.34%,RSD为1.37%(n=6),不同产地绿豆中牡荆素含量范围为1.04～1.71 mg/g。结论该方法准确、可靠、重复性好,可用于绿豆的质量控制。     

布渣叶总黄酮中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷在家兔体内的药动学

目的：建立了家兔灌胃布渣叶总黄酮提取物后血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的HPLC/MS方法,并研究其药动学。方法：家兔灌胃给于布渣叶总黄酮提取物后于不同时间点取血,采用HPLC/MS测定兔血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,并计算药动学参数。色谱柱：Hypersil Gold C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相为乙腈-1%乙酸水溶液（V/V）,梯度洗脱,柱温20℃,质谱检测采用ESI离子源,同时测定血浆样品中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的浓度,采用非房室模型估算药动学参数。结果：牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷均在0.2~20 mg·L^-1内线性关系良好（r>0.999）,提取回收率、精密度和稳定性均良好。家兔口服布渣叶总黄酮提取物后牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的主要药动学参数如下：AUC_0-t分别是10.13,8.92,15.12 mg·L^-1·h,C_max分别是3.04,2.62,3.51 mg·L^-1,t_max分别是0.75,0.75,1.00 h,t_1/2分别是2.96,3.20,3.93 h,MRT_0-∞分别是5.01,5.58,6.33 h。结论：该方法可特异、准确、灵敏地同时测定家兔血浆中牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷的血药浓度,家兔口服布渣叶总黄酮提取物后牡荆苷、异牡荆苷、水仙苷可迅速吸收入体内,其药时曲线存在双峰现象。     

提高男性性功能的植物药强壮剂

本剂由燕麦、番红花、无花果和芦苇根的醇提取物组成。最好由燕麦的谷粒、红花的干燥柱头和无花果果实组成,也可以包含田刺芹Eryngium campestre根、肉豆蔻和胡椒果实、或小豆蔻Elettaria cardomom果实、穗花牡荆Vitex agnuccastus果实的乙醇提取物和维生素E的醋酸酯等。也可以加些D-生物素、菸酰胺、叶酸、维生素B_6,泛酸钙、核黄素和或维生素B_1。该强壮剂能激活雄性激素和性腺功能,提高精子数、减少不合格精子数的比率。例:47.5mg燕麦,47.5mg番红花,95.0mg粉碎的无花果和150mg芦苇根粉末浸泡在100ml 38％的威士忌中,共11天。3名成人男性受试者每天接受剂量为3×20     

RP-HPLC法同时测定布渣叶中牡荆苷和异牡荆苷的含量

目的:建立同时测定布渣叶中牡荆苷和异牡荆苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为SHISEIDO Capcell pak MG C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%甲酸溶液(30:70,V/V),流速为1.0ml/min,检测波长为339nm,柱温为30℃。结果:牡荆苷和异牡荆苷的进样量分别在53.40～1334.00、73.90～1847.00ng范围内与各自峰面积积分值呈良好线性关系(r均为0.9999);平均加样回收率分别为99.00%和99.37%,RSD分别为1.87%和1.77%(n均为9)。结论:本方法重复性好、操作简便、结果准确可靠,可为布渣叶的质量评价和资源利用提供试验依据。