当归的形态变化特征与物质积累进程

目的 通过研究当归成药期的形态变化特征及物质积累进程,为当归的规范化种植提供参考。方法 以当归为材料进行田间试验,定期取样并测定茎叶性状,根部性状,根部浸出物、挥发油、有机酸、多糖、阿魏酸和Z-藁本内酯质量分数等。结果 株高、叶数和叶鲜/干质量在成药期呈先升高后降低的趋势,根长、根粗和根鲜/干质量在成药期呈升高的趋势,浸出物、挥发油、有机酸、多糖、阿魏酸和Z-藁本内酯的质量分数和总量在成药期均呈升高的趋势。结论 茎叶生物量的积累进程快于根部生物量,且浸出物、挥发油、有机酸、多糖、阿魏酸和Z-藁本内酯的积累进程从属于根部生物量。     

当归种苗等级与植株生物量积累及药材质量的关系

目的:研究当归种苗等级与植株生物量积累、药材产量和质量的关系,为制定种苗标准提供依据.方法:广泛收集产自甘肃当归主产区岷县、漳县、宕昌、渭源的当归种苗30份,以单根重为指标对所有样品进行测定,并对测定结果进行聚类分析,依据聚类中心值将种苗划分为3个级别,以级别为处理进行田间试验,实验室检测药材质量.结果:二级种苗(单根重0.74～1.38g)成药期植株的根干重、地上部干重、全株干重等生长指标均超过其他处理及对照;田间抽薹率低,药材单根重大,产量位居第一;所成药材的外部性状优,阿魏酸含量高于药典(2010年版一部)标准.结论:二级种苗的植株生长量大、产量高、质量优,可作为生产用种苗的首选.     

秦巴山区5种花挥发性物质抗氧化和抗菌活性研究

目的:提取含笑花、紫玉兰花、栀子花、藿香花以及蔷薇花中的挥发性物质,探讨这5种花挥发性物质的抗氧化活性和抗菌活性为其开发利用可提供科学依据。方法:用水蒸气蒸馏法从含笑花、紫玉兰花、栀子花、藿香花以及蔷薇花中分别提取挥发性物质,测定其对羟基自由基的清除作用来确定抗氧化活性效果,测定最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)来确定这5种花挥发性物质的抗菌活性。结果:5种花的挥发性物质均有明显的抗氧化活性,这5种花的挥发性物质均具有显著地抗菌活性。结论:这5种花的挥发性物质抗氧化活性大小依次为含笑花﹥藿香花﹥紫玉兰花﹥栀子花﹥蔷薇花;抗菌活性大小依次为藿香花﹥紫玉兰花﹥蔷薇花﹥栀子花﹥含笑花。     

当归补血汤及当归、黄芪抗氧化和抑制自由基产生的研究进展

当归为临床常用的养血活血药、黄芪为临床常用的补气药。二者既可独立成方使用；又可以当归配伍黄芪为当归补血汤使用。不但临床应用十分广泛．而且近来对当归补血汤的药理研究亦十分活跃。本文从临床和实验研究、体内实验和体外实验对当归、黄芪、当归补血汤及其有效组份抗氧化和抑制自由基产生的作用进行了较全面的综述。     

西藏当归同岷县当归挥发油、总黄酮含量及抗氧化活性对比研究

目的：考察西藏昌都、那曲当归根与道地药材岷县当归根挥发油、总黄酮含量和体外抗氧化活性,为当归资源的开发利用提供药源和理论依据。方法：以《中华人民共和国药典》2015版中挥发油测定法通则2204乙法为依据,提取各地产当归根中的挥发油并进行含量对比;采用乙醇浸提,结合加热回流提取各地当归根中的总黄酮;采用NaNO₂-AlCl₃比色法,以芦丁为对照品,对当归中总黄酮进行含量测定。采取浸泡、超声、过滤、烘干、溶解、浓缩得乙醇提取物,以总抗氧化能力及对DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力综合评价各地产当归的体外抗氧化活性。结果：与道地药材岷县当归根比较,西藏昌都、那曲当归根挥发油含量均较低(***P<0.001),且未达到“药典”标准要求;然而,西藏昌都、那曲当归根总黄酮含量分别为3.076 mg·g^-1、2.681 mg·g^-1,与岷县当归根中总黄酮含量1.715 mg·g^-1比较,含量显著高且差异具有统计学意义(***P<0.001)。与岷县当归根比,西藏昌都...     

北疆地区刺山柑多酚类物质消长规律及其抗氧化活性的研究

目的研究北疆地区刺山柑中多酚类物质消长规律并对其抗氧化活性进行比较。方法采用Folin-Ciocalteu法,测定北疆地区刺山柑多酚类物质含量,用DPPH法对其抗氧化活性进行比较。结果北疆地区刺山柑多酚类物质含量6月花蕾中达到25.72 mg/g,自由基清除率最高。结论刺山柑不同部位不同时期多酚含量存在显著性差异,抗氧化活性也存在不同,石河子地区刺山柑6月份花中多酚类物质含量最高,抗氧化活性最强。     

薰衣草活性成分的提取和抗氧化能力的测定

目的比较不同溶剂对提取熏衣草花穗活性成分抗氧化能力的影响,找到较好提取溶剂;比较不同蒸馏法对提取熏衣草花穗挥发油抗氧化能力的影响。方法采用石油醚、醋酸乙酯、丙酮、正己烷、无水乙醇等有机溶剂提取新疆伊犁的熏衣草花穗活性成分,并通过分光光度法测定其抗氧化能力;水中蒸馏法提取熏衣草花穗挥发油,测定其挥发油的抗氧化能力,并与水上蒸馏法得到的挥发油进行比较。结果熏衣草花穗中抗氧化能力强的活性成分在无水乙醇中含量较多;水中蒸馏法提取熏衣草花穗挥发油的抗氧化能力大于水上蒸馏法。结论极性强的无水乙醇提取熏衣草花穗的活性成分效果较好;水中蒸馏法较水上蒸馏法,其原料与沸水接触更加充分,并可能促使熏衣草花穗中酯类成分发生水解。     

阿魏酸薄荷酯的合成与体外总抗氧化能力

目的:研究阿魏酸薄荷酯的合成方法及其体外总抗氧化能力.方法:以香兰素为原料,通过与中间体丙二酸单薄荷酯发生缩合反应合成阿魏酸薄荷酯,并通过法和铁离子还原(FRAP)法对其总抗氧化能力进行了测定.结果:经过三步反应合成得到了阿魏酸薄荷酯,化合物未见报道,结构经1H-NMR和MS得到确证,在试验浓度范围内具有一定的抗氧化能力,但比阿魏酸弱.结论:阿魏酸薄荷酯具有抗氧化活性,其合成方法适用于其他阿魏酸酯或阿魏酸酰胺衍生物的合成.     

栽培方式对当归干物质积累和生长动态影响的研究

目的研究栽培方式对当归地上部分和根的生长动态以及当归麻口病、早薹率、产量的影响。方法以垄作、沟植、覆白色地膜、覆黑色地膜4种不同的栽培方式与平作比较,分析栽培方式对当归干物质积累和生长动态的影响。结果黑色地膜覆盖对当归株高、地上部分和根部干物质积累量的影响最大,其次为白色地膜覆盖。垄作对麻口病的抑制作用最明显,黑色地膜覆盖有提高早薹率的现象。覆黑色地膜的处理产量最高,较对照平作增加4650kg/hm2,增产率达33.4%;覆白色地膜的处理产量次之,较对照增加3372.2kg/hm2,增产率达24.3%,沟植和垄作的增产作用不显著。结论在当归栽培中应大力推广黑色地膜覆盖栽培技术。     

植物源烟水对白花丹参生物量和有效物质积累的影响

该文采用1：500,1：1000,1：2000浓度的烟水处理白花丹参,研究其对白花丹参生物量和有效物质积累的影响,测量指标包括地下部分鲜重、地下部分干重、分根数、最大根粗、平均根粗、平均根长、脂溶性成分（二氢丹参酮、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅱ_A）和水溶性成分（迷迭香酸、丹酚酸B）含量。结果显示,1：500和1：1000浓度的烟水处理显著提高白花丹参地下部分鲜重和干重,分别达到98.01%,44.32%和85.71%,28.57%。1：500浓度的烟水处理显著提高白花丹参最大根粗（58.44%）和地下部分干重（85.71%）。烟水处理后白花丹参中丹参酮I和丹参酮Ⅱ_A含量显著提高,二氢丹参酮、隐丹参酮以及水溶性成分的积累未表现出显著性差异。研究表明烟水处理能有效提高白花丹参生物量和有效物质的积累,为白花丹参绿色生态种植提供新的思路。     

海拔对当归中阿魏酸量的影响及关键因子分析

目的 在不同海拔进行当归Angelica sinensis生态适应性实验,探索影响当归阿魏酸积累的关键因子.方法 通过田间实验测定当归阿魏酸量的变化和生理生化指标、光合参数、生态因子.结果 当归根中阿魏酸量随海拔升高而增加,且海拔2780m处理比海拔2360m处理高14.5％,差异显著(P＜0.05).分析影响当归阿魏酸积累的关键因子表明,降雨量(r=0.8988)和温度(r=-0.7991)是关键生态因子,可溶性糖(r=-0.9749)和超氧化物歧化酶(SOD)(r=-0.8408)是关键生理生化因子,湿度(r=0.9699)和光合活性辐射(r=0.9467)是关键光合参数因子.结论 适当升高种植海拔,增加降雨量和湿度,降低温度和可溶性糖量均有利于当归中阿魏酸的转化积累.     

基于ITS2序列鉴别道地药材岷县当归及其混伪品

目的利用核糖体r RNA基因内转录间隔区(ITS2)序列,对甘肃道地药材岷县当归(岷归)及其混伪品和近缘属药材进行鉴定分析。方法对供试材料ITS2序列进行PCR并双向测序,所得序列经Codon Code Aligner校对拼接后,利用MEGA 6.0对序列进行分析比对,计算种内、种间遗传距离,利用邻接法(NJ)构建系统聚类树,并应用ITS2数据库网站预测其ITS2二级结构。结果经PCR扩增测序,15份甘肃栽培当归与标准样品岷归1号序列比对无差异,序列长度230 bp,GC含量为55.46%,37份当归混伪品与近缘属药材ITS2序列长度为228～233 bp,GC含量为51.53%～65.65%。岷归与混伪品、近缘属药材共53条序列中共检测到变异位点220个,保守位点10个,信息位点213个。根据K2P遗传距离计算,岷县当归种内遗传距离明显小于种间遗传距离,基于ITS2序列构建的NJ树和网站预测的ITS2二级结构,均能将岷归与其混伪品和近缘属药材区分。结论 ITS2序列可作为当归鉴定的DNA条形码,为当归市场的健康可持续发展提供有效的技术手段。     

野生与栽培当归遗传多样性比较

目的比较野生当归Angelica sinensis与栽培当归的遗传多样性。方法应用ISSR分子标记对48个栽培当归居群和7个野生当归居群1 038个样本进行扩增,利用Popgen 1.32软件对其Shannon’s多样性信息指数(I)等遗传信息参数进行分析,并利用SPSS 19.0中的独立样本t检验进行差异显著性检验;运用Gen Al Ex 6.5软件对野生和栽培当归2个组群遗传变异进行AMOVA分析;应用NTSYS软件构建当归野生和栽培各居群的Nei’s遗传距离UPGMA聚类树状图,并使用Gen Al Ex6.5软件中的Mental test分析遗传距离与地理距离的相关性。结果野生当归居群和栽培当归居群的多态位点百分率(PPB)为83.77%和96.10%,I平均值为0.221 7和0.282 8,Nei’s基因多样性指数(H)平均值为0.344 4和0.434 3,且存在极显著差异(P0.001);野生和栽培当归居群的种群间遗传分化指数(Gst)、基因流(Nm)值分别为0.299 1、1.171 8和0.733 4、0.181 7,组间变异百分比为15.85%,居群间变异百分比为54.3%,居群内变异百分比为29.85%;遗传距离变化范围0.014 4~0.730 7。结论当归野生居群的遗传多样性低于栽培居群,野生居群间的遗传分化程度明显低于栽培居群,当归总的遗传变异来自于居群间,野生居群与栽培居群亲缘关系较远,且遗传距离与地理距离存在相关性。     

当归肌动蛋白基因片段的克隆及序列分析

目的 对当归肌动蛋白(Actin)基因进行克隆及序列分析.方法 根据已经克隆的植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以当归根部总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增Actin基因片段并连接到pMD19-T载体上,阳性克隆经PCR检测后进行测序.结果 得到一段598 bp的序列,序列分析表明,该片段编码198个氨基酸,与高等植物Actin基因核苷酸序列同源性在83％以上,与其他肌动蛋白氨基酸序列同源性达94％以上.结论 首次从当归中克隆出了Actin基因,为有效利用该基因奠定了基础.     

甘肃产当归生态适宜性研究

目的研究甘肃省当归Angelica sinensis的生态适宜性,指导甘肃产当归的合理栽培。方法通过走访和实地调查,从甘肃当归栽培县区采集不同分布地点的样品共计1 545份,使用GPS获取每个采样点的经度、纬度、海拔等相关地理信息,结合全国生态环境因子数据,利用Maxent模型和ArcGIS软件的空间分析功能进行分析。结果当归分布适宜度较高的区域在甘肃省东南部。影响当归适宜性分布的主要生态因子为海拔高度、3月份降雨量、5月份降雨量、最湿月降雨量、12月份降雨量、土壤酸碱度。结论研究结果与当归多生长于海拔2 000～3 000 m的高寒山区及高原平坦牧场地带,喜气候凉爽,土壤水分适中,微酸性至中性肥沃疏松棕褐沙壤土基本一致,可为甘肃省当归栽培区域的合理分布提供科学依据。     

当归根部中主要有效成分的动态积累和转化研究

目的 分析当归Angelica sinensis中阿魏酸和藁本内酯等主要有效成分在其根部的积累规律和转化机制。方法 采用HPLC法测定不同生长期当归根部中阿魏酸、阿魏酸松柏酯和藁本内酯等8种苯酞类挥发油成分的含量,结合体外转化研究成果进行分析。结果 阿魏酸和阿魏酸松柏酯含量从苗期到根膨大期沿着相同的方向不断增加,而从根膨大期到收获期分别逐渐降低和升高,朝2个相反的方向变化,提示在当归体内可能存在阿魏酸和松柏醇转化为阿魏酸松柏酯的过程。藁本内酯和5种转化产物含量总体随生长期呈现上升趋势,尤其从根膨大期到成药期增长速度极快,符合成药期特性;藁本内酯含量远远大于其他6种苯酞类转化产物洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、阿魏酸松柏酯、洋川芎内酯A、正丁基苯酞、欧当归内酯的含量,提示在当归活体内藁本内酯的转化程度不高,具体转化机制有待进一步研究。结论 阿魏酸和藁本内酯在不同生长期具有不同的积累和转化规律,可为当归药材生产、炮制和质量评价提供理论支持。     

近红外光谱法快速测定当归中7种成分的含量

目的应用近红外光谱(NIRS)技术结合偏最小二乘法(PLS)建立当归中多指标成分的快速无损检测方法,以更好地控制当归药材和饮片的质量。方法采集购买不同产地的当归样品共108批。建立同时测定当归中7种成分含量的超高效液相色谱(UPLC)方法,并以其测定值为参比;以积分球漫反射模式采集当归样品的NIRS图;采用PLS等化学计量学手段建立各指标性成分的参比值与NIRS图的定量校正模型。分别对建模过程的各个阶段进行优化,包括样本集的选择、不同预处理方法和不同光谱区段的选择。结果所建立的绿原酸、阿魏酸、异绿原酸A、藁本内酯、丁烯基苯肽、洋川芎内酯I和欧当归内酯A的模型校正集相关系数分别为0.937 6、0.970 2、0.963 4、0.991 1、0.962 4、0.966 6和0.947 6;预测均方差分别为0.072 1、0.038 9、0.011 3、0.483 0、0.017 5、0.178 0和0.097 0。NIRS模型预测值与UPLC测定值具有良好的线性相关关系,模型预测效果良好。结论采用NIRS技术结合PLS可以快速对当归中绿原酸、阿魏酸、异绿原酸A、藁本内酯、丁烯基苯肽、洋川芎内酯I和欧当归内酯A 7种成分的含量进行检测,方法操作简便、结果可靠。     

当归实时荧光定量PCR内参基因筛选

目的 通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)筛选当归Angelica sinensis不同材料中稳定表达的内参基因。方法 以不同生长期、春化温度、组织部位以及抽薹/未抽薹植株为材料,对转录组数据库获得的13个候选内参基因和1个已报道的肌动蛋白基因的表达水平进行qRT-PCR检测,利用ge Norm、NormFinder、BestKeeper、?Ct和RefFinder等软件分析表达水平的稳定性。结果 不同材料中14个候选内参基因的稳定性存在显著差异,ACT7、UBC32、UBC26和UBC7分别为不同发育阶段、春化温度、组织部位和抽薹/未抽薹植株中最稳定的内参基因;EEF1G为所有样品中最稳定的内参基因,其次为RPL3和UBC26。结论 为进一步检测当归产量和品质形成过程中的基因表达提供重要参考。     

当归中1个新香豆素类化合物及其细胞毒活性

目的研究当归Angelica sinensis干燥根的化学成分。方法运用硅胶、凝胶、MCI-Gel树脂及RP-HPLC等多种色谱技术分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果从当归干燥根95%乙醇提取物中分离得到了1个新香豆素类化合物,鉴定为6-羟基-3-(4-羟基苯)-7-甲基-香豆素(1);化合物1对A549和MCF-7细胞株IC50值分别为3.2和2.8μmol/L。结论化合物1为1个新的香豆素类化合物,命名为云归香豆素A;其对A549和MCF-7细胞株表现了明显的体外细胞毒活性。