魁蒿内酯与1，25-二羟基维生素D3或全反式维甲酸协同诱导HL-60细胞分化的作用

薰衣草Lavandula angustifolia干花与沸蒸馏水混合,搅拌15 min后过滤,滤液冷冻干燥得活性物质。向原代培养的SD幼鼠小脑颗粒细胞培养液中分别加入盐水或薰衣草提取物10、102、103和104μg/mL,30 min后加入10-7mol/L的谷氨酸培养16 h,另设薰衣草提取物104μg/mL组(培养16 h)和谷氨酸对照组。各培养液用台盼蓝染色,通过     

1,25-二羟基维生素 D_3

近十几年来,已有将近二十种维生素D代谢物和合成的类似物应用于临床,收到了较理想的治疗效果。本文介绍一种临床应用价值较大的维生素D 代谢物——1,25-二羟基维生素D_3(1,25-(OH)_2D_3).     

小剂量二烯丙基二硫联合全反式维甲酸对HL-60细胞的生长抑制和诱导分化作用研究

二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)具有抑制肿瘤细胞增殖,调控细胞周期依赖素激酶、信号转导,诱导肿瘤细胞分化、凋亡及影响癌基因与抑癌基因表达的作用。小剂量DADS(1·25mg·L-1)可以抑制JAK1/STAT3信号通路,将HL-60细胞阻滞在G0/G1期,诱导HL-60细胞向粒系分化,其作用与全反式维甲酸(ATRA)相当[1~3]。本实验将探讨小剂量DADS与ATRA联合应用对HL-60细胞的生长抑制及诱导分化效应。1材料和方法参见文献2。2结果2.1DADS与ATRA单独或联合用药对HL-60细胞生长的影响1·25mg·L-1DADS或ATRA对体外培养的HL-60细胞均…     

全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞分化的机制

目的研究全反式维甲酸诱导人急性早幼粒白血病HL-60细胞分化机制。方法用流式细胞仪分析维甲酸对HL-60细胞周期变化的影响，用自制的含9 984个已知基因和EST的高密度基因芯片检测HL-60细胞在维甲酸诱导作用下不同时期的基因表达变化。结果HL-60细胞在1 μmol·L^-1维甲酸持续作用2,4和6 d时,流式细胞仪结果显示48%～73%细胞阻断在G0/G1期;基因表达谱分析发现,黏附分子、组织重建蛋白、转运蛋白、核蛋白体蛋白和涉及氧化酶激活途径的基因表达明显升高。结论基因表达谱的研究结果表明,维甲酸作用HL-60细胞与氧化酶激活途径及组织重建蛋白的表达相关联,并揭示了一些已知和未知功能的基因在HL-60细胞分化与细胞凋亡过程中的作用。     

聚肌巯胞与维甲酸协同诱导HL-60细胞的分化

聚肌巯胞以剂量依赖性明显抑制HL-60细胞生长,轻度促进氯化硝基四唑氮蓝(NBT)还原,对化学发光能力和细胞形态无影响.当其与维甲酸合用时,对HL-60细胞的生长抑制无相互影响,但却能协同诱导HL-60细胞的NBT还原能力和化学发光能力,在形态试验中均明显大于维甲酸单用时的效应。     

1,25-二羟维生素D_3对人胃腺癌细胞诱导分化的实验研究

目的观察1,25-二羟维生素D3对胃腺癌MGC-803细胞的诱导分化作用。方法1,25-二羟维生素D3(10-6、10-5、10-4mmol.L-1)作用于MGC-803细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖能力、平板克隆试验测定细胞集落形成率、流式细胞仪测定细胞周期、TRAP-银染法测定端粒酶活性。结果1,25-二羟维生素D3作用24、48、72和96h后胃腺癌细胞生长均明显受抑制,48h后细胞周期出现向G0/G1期移行的特征性动力学改变,端粒酶活性明显受到抑制。细胞集落形成率明显下降(P<0.05)。结论1,25-二羟维生素D3对人胃腺癌细胞有诱导分化作用。     

1,25-二羟基维生素D_3抑制K562细胞增殖及其机制

目的观察1,25二-羟基维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对白血病细胞株K562增殖的影响并初步探讨其作用机制。方法间接免疫荧光法鉴定维生素D受体(VDR)在K562细胞的表达;四噻唑蓝法(MTT)、AO/EB、流式细胞PI单染分析细胞生长抑制率、细胞凋亡率及细胞周期;比色法检测凋亡信号蛋白———天冬酰胺特异酶切的半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性。结果①K562细胞核阳性表达VDR;②10-8mol.L-11,25(OH)2D3可明显抑制K562细胞增殖,促进凋亡,凋亡率从4.1%(对照组)增至26.5%,P<0.01;③1,25(OH)2D3作用后K562细胞的Caspase-3活性增加,P<0.05,提示细胞凋亡伴随着Caspaes-3活性升高。结论1,25(OH)2D3可明显抑制K562细胞增殖,促进细胞凋亡,其作用机制与Caspase-3活性增加相关。     

全反式维甲酸对小细胞肺癌细胞的分化诱导作用研究

目的探讨全反式维甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)对小细胞肺癌细胞的分化诱导作用。方法选择NCI-H446细胞株MTT法检测细胞体外增殖能力,电镜下观察形态,流式细胞仪进行细胞周期分析。RT-PCR法分析维甲酸受体亚型基因。结果全反式维甲酸诱导小细胞肺癌NCI-H446细胞株,细胞增殖能力下降,凋亡增加,更多的细胞被阻止于G1/G0期。结论全反式维甲酸诱导分化能有效抑制小细胞肺癌NCI-H446细胞株的增殖,促进凋亡。     

全反式维甲酸和阿糖胞苷对HL-60细胞端粒酶活性的影响

目的 探讨全反式维甲酸（all trans-retinoic acid,ATRA)和阿糖胞苷（Ara-c)诱导人早幼粒细胞白血病细胞凋亡和分化的机制。方法 采用PCR－ELISA方法观察ATRA和Ara-c对HL－60细胞端粒酶活性的影响。结果 ATRA和Ara-c在诱导HL－60细胞凋亡和分化过程中均可使端粒酶 活性减低。结论 ATRA和Ara-c抑制HK－60细胞端粒酶的活性,可能是其诱导白血病细胞凋亡和分化的重要机制之一。     

1,25-二羟维生素D_3对IgA肾病大鼠调节性T细胞作用研究

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对Ig A肾病大鼠调节性T细胞的作用。方法 26只Wistar大鼠分为正常对照组、Ig A肾病组、1,25(OH)2D3治疗组。检测大鼠尿蛋白定量(24 h)的变化,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测人叉头框蛋白P3(Foxp3)m RNA的表达水平。结果 1Ig A肾病组与正常对照组相比,尿蛋白定量(24 h)水平显著升高,Foxp3 m RNA的水平显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。2治疗组与Ig A肾病组相比,尿蛋白定量(24 h)水平显著降低,Foxp3 m RNA的水平显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论11,25(OH)2D3可能降低或缓解Ig A肾病尿蛋白的水平。21,25(OH)2D3可能通过调节调节性T细胞分化发挥免疫作用。     

1,25-二羟基维生素D_3对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用及机制

目的探讨1,25-二羟基维生素D3〔1,25(OH)2D3〕对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用及可能的机制。方法将雄性Wistar大鼠采用(自由摄取)胆碱缺乏氨基酸(CDAA)饮食诱导建立NASH模型的同时,每周2次(周二和周六)ip给予1,25(OH)2D31,5和10μg·kg-1。第12周末,测量大鼠体质量、肝质量,计算肝指数;检测血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(CHO)和肝组织TG水平;苏木素和伊红染色、天狼星红染色观察肝组织形态学变化;免疫组织化学法检测CD68、转化生长因子β1(TGF-β1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达。结果与正常组相比,模型组大鼠肝指数明显增加(P<0.01);血清GPT和GOT和肝组织TG水平明显升高(P<0.01),血清CHO水平升高(P<0.05),肝组织NAS积分和CD68,TGF-β1和α-SMA的表达明显升高(P<0.01)。与模型组相比,给予1,25(OH)2D3治疗后,5μg·kg-1剂量组肝指数下降(P<0.05);血清GPT和GOT活性均明显下降(P<0.05);5μg·kg-1剂量组血清TG水平显著升高(P<0.01);5μg·kg-1剂量组肝组织TG水平、NAS积分和CD68,TGF-β1,α-SMA表达明显降低(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可通过抑制肝组织的CD68、TGF-β1和α-SMA蛋白表达改善NASH大鼠炎症。     

3,4-二甲氧基-5-羟基茋对HL-60细胞凋亡的诱导作用

3,4-二甲氧基-5-羟基茋(DMHS)是虎杖Polygonum cuspidatum 中的云杉新苷(白藜芦醇-3-O-葡糖苷)经甲基化和酸解形成的羟基芪类化合物,具有与白藜芦醇相似的结构。作者研究了 DMHS 对 HL-60细胞凋亡的诱导作用。实验所用的其他羟基芪类化合物还有丹     

1,25-二羟基维生素D_3对环磷酰胺处理的NOD小鼠糖尿病的影响

目的　探讨 1,2 5 -二羟基维生素 D3 对环磷酰胺促发的 NOD鼠 1型糖尿病的预防作用。方法　N OD鼠从离乳后隔日接受 1,2 5 -二羟基维生素 D3 治疗 ,第 10周龄给予环磷酰胺 30 0 m g/ kg,观察 1,2 5 -二羟基维生素 D3 对环磷酰胺处理的 NOD鼠糖尿病发病率和胰岛炎的影响 ,及对 Th1、Th2细胞因子 m RNA表达的影响。结果　 1,2 5 -二羟基维生素 D3 处理组糖尿病发病率为 17% ,明显低于对照组 6 7% (P<0 .0 5 ) ,且胰岛炎严重程度也明显减轻。处理组胰腺 TNT- α、IFN- γ m RNA的表达较对照组明显降低 ,而 IL- 10 m RNA的表达无明显改变。结论　 1,2 5 -二羟基维生素 D3 可以预防 NOD鼠环磷酰胺诱发的糖尿病的发生 ,其机制可能与纠正 Th1型细胞因子与 Th2型细胞因子比例失衡有关     

1,25-二羟基维生素D3抑制脂肪细胞分化作用的研究

【摘要】目的研究1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)₂D₃]对脂肪细胞分化的影响及其机制。方法以间充质干细胞系C3H10T1/2为研究对象,将其分为6组,分别为对照组、诱导分化组和4个不同剂量的1,25(OH)₂D₃处理组。其中对照组加入溶媒,诱导分化组加入脂肪细胞诱导分化试剂,1,25(OH)₂D₃处理组除了加入脂肪细胞诱导分化试剂外,予以10^-9、10^-8、10^-7、10^-6mol/L 1,25(OH)₂D₃处理。处理后5d进行油红O染色,RT-PCR检测脂肪细胞特异性转录因子和Wnt/β-catenin信号通路相关因子表达水平,Western blot检测β-catenin蛋白水平。结果1,25(OH)₂D₃能够强烈抑制脂肪细胞生成,阻断脂肪细胞特异性转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体（PPAR）γ、CCAAT增强子结合蛋白（C/EBP）α及脂肪细胞表征因子aP2mRNA表达,下调Wnt/β-catenin信号通路抑制因子分泌性卷曲相关蛋白1（sFRP1）mRNA,上调β连环素（β-catenin）蛋白水平。结论1,25(OH)₂D₃强烈抑制脂肪细胞分化,该作用可能与其激活Wnt/β-catenin信号通路有关。     

1α,25二羟基维生素D_3对人早幼粒白血病细胞(HL—60)的诱导分化作用

1α,25二羟基维生素D_3在体外可诱导HL-60细胞向单核/巨噬样细胞发展。在形态上,核/质比例减少,核仁减少,细胞变得不规则并伸出伪足;在细胞化学方面,细胞对NBT还原能力增强,α萘酚醋酸酯酶和酸性磷酸酶阳性率明显增加,细胞周期的变化是:二倍体细胞明显增多,G_0+G_1期增加和S期减少。表明在1α,25(OH)_2D_3作用下,HL-60细胞向成熟分化,细胞DNA合成受抑制。     

三羟基苯甲酸二聚体诱导HL-60细胞凋亡的作用

三羟基苯甲酸二聚体是从菱角中分离出的抗肿瘤单体化合物。本研究主要探讨三羟基苯甲酸二聚体对人早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60细胞的抑制作用及诱导其凋亡的分子机制。通过MTT法检测三羟基苯甲酸二聚体对HL-60细胞的增殖抑制作用; 流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞内活性氧及线粒体膜电位的变化; 蛋白印迹 技术 ( Western blotting ) 检测胞浆和线粒体细胞色素c水平, 分光光度法测定Caspase-9、Caspase-3蛋白活性。结果发现, 三羟基苯甲酸二聚体显著抑制HL-60细胞的增殖, 其作用呈时间和剂量依赖性。与对照组比较, 三羟基苯甲酸二聚体可增加HL-60细胞内活性氧水平, 降低HL-60细胞线粒体膜电位, 促进线粒体中细胞色素c释放入胞浆, 激活Caspase-9、Caspase-3蛋白。因此三羟基苯甲酸二聚体可能通过线粒体信号传导途径诱导HL-60细胞凋亡。     

1,25-二羟基维生素D3与系统性红斑狼疮的关系研究

维生素D由皮肤中的胆固醇合成,然后代谢为肝、肾及外周免疫炎症细胞中的活性维生素D.有关研究表明,维生素D与多种自身免疫性疾病的发展呈负相关(如甲状腺毒症、虹膜睫状体炎、克罗恩病、溃疡性结肠炎、寻常型牛皮癣、风湿性多肌痛等),因此,该文就维生素D在系统性红斑狼疮的发病机制中的作用及治疗性补充剂的有效性相关研究进展进行了综...     

1,25-二羟基维生素D_3通过抑制尿激酶型纤溶酶原激活剂受体表达降低足细胞活动力

目的观察1,25-二羟基维生素D_3[1,25(OH)_2D_3]对脂多糖诱导的足细胞活动力和尿激酶型纤溶酶原激活剂受体(uPAR)表达的影响。方法小鼠足细胞分化成熟后分为3组:正常对照组、脂多糖组(50 mg·L~(-1)脂多糖孵育足细胞24 h)、脂多糖+1,25(OH)2D3组[50 mg·L~(-1)脂多糖+1 nmol·L~(-1)的1,25(OH)_2D_3]共同孵育足细胞24 h。采用免疫荧光激光共聚焦、流式细胞术、实时荧光定量PCR、转板迁移测定法等技术,检测足细胞活动力改变以及足细胞uPAR蛋白和uPAR mRNA(Plaur mRNA)的表达。结果转板迁移测定法中每个视野细胞在正常对照组、脂多糖组、脂多糖+1,25(OH)2D3组分别为(8.4±3.8)、(31.3±7.9)、(19.2±6.8)个,脂多糖组膜下层迁移足细胞多于其他2组,脂多糖+1,25(OH)_2D_3组多于正常对照组(P<0.01)。脂多糖组uPAR蛋白荧光信号强于正常对照组,脂多糖+1,25(OH)_2D_3组弱于脂多糖组。脂多糖+1,25(OH)2D3组uPAR蛋白表达率和Plaur mRNA为(31.12±4.46)%和1.97±0.46,均低于脂多糖组[(54.66±8.69)%和3.06±0.93,P<0.05],高于正常对照组[(9.80±3.1 1)%和1.00±0.00,P<0.05]。结论 1,25(OH)_2D_3可能通过抑制uPAR的表达,降低足细胞活动力,起到保护足细胞的作用。