MK-801对转Aβ42基因果蝇阿尔茨海默病模型的神经保护作用

目的:探讨N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂MK-801拮抗阿尔茨海默病(AD)果蝇模型中Aβ42诱导的神经毒作用。方法:建立转Aβ42基因果蝇AD模型,用NMDA受体拮抗剂MK-801分别干预正常对照果蝇和转Aβ42基因AD模型果蝇,在整体动物水平上进行果蝇行为学检测,分别检测各组果蝇的嗅觉短期记忆能力、攀爬能力和平均寿命。结果:与Aβ42转基因组果蝇相比,Aβ42转基因果蝇喂食MK-801组的学习记忆能力、攀爬能力、平均寿命均有显著改善(P<0.05),正常对照组和正常对照 MK801组的行为学检测无统计学差异。结论:在转Aβ42基因AD果蝇模型中,NMDA受体拮抗剂MK-801的干预有明显的神经保护作用,能减轻Aβ42诱导的神经毒作用。     

GLP-1对AD转基因鼠氧化应激的保护作用

目的:胰高血糖素样肽1(GLP-1)对AD转基因鼠氧化应激的保护作用及其可能机制.方法:将C57BL分为假手术组、AD组、GLP-1干预组,假手术组为正常小鼠,其他两组为AD转基因小鼠,GLP-1干预组分别侧脑室注入不同浓度(5、10、20、50、100 nmol)的GLP-1,连续5d,假手术组注入同等剂量PBS.3组免疫组化检测小鼠海马Aβ蛋白表达;QDs-SA量子点检测脑组织GFAP蛋白;运用分光光度仪检测海马组织海马超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量.结果:与假手术组比较,AD模型组Aβ含量明显升高,海马GFAP阳性细胞明显深染,体积增大,数量增多,AD组SOD活性降低,MDA含量均明显高(P＜0.05);干预组不同浓度的GLP-1注入能减少Aβ含量,增高SOD活性,降低MDA含量.结论:AD转基因鼠模型中Aβ含量明显升高,产生氧化应激损伤,GLP-1能通过降低氧化应激损伤减少细胞内Aβ聚集.     

维生素B3对PINK1B9突变转基因果蝇模型的保护作用研究

目的 探讨维生素B3对PINK1 B9突变转基因果蝇的保护作用及其可能机制.方法 选用TH-Gal4/UAS系统的PD转基因果蝇模型,按处理方式分为正常对照组、PD转基因果蝇模型组、PD转基因果蝇模型+维生素B3干预组,PD转基因果蝇模型用GAPDH2 RNAi基因干预+维生素B3干预组,进行果蝇形态学、ATP水平、果蝇的mRNA水平和蛋白印记检测.结果 适当浓度的维生素B3能部分挽救PINK1B9果蝇的飞行能力和降低翅膀异常率.并且上调了GAPDH和NDUFS3蛋白的表达,增加ATP生成的相对水平.再用GAPDH2 RNAi干预PINK1B9转基因果蝇后GAPDH和NDUFS3蛋白表达相应下降.结论 维生素B3可能通过上调GAPDH和NDUFS3水平发挥调控糖酵解和氧化磷酸化起到保护作用.     

维生素K2对SCA3/MJD转基因果蝇的神经保护作用研究

目的：探讨维生素K2对SCA3/MJD的神经保护作用.方法：构建Gmr-GAL4/UAS系统和Nrv2-GAL4/UAS系统两种不同表达部位的SCA3/MJD转基因果蝇模型.并分别用1.00,0.10和0.01 mM的维生素K2干预.结果：0.10 mM的维生素K2明显抑制了SCA3/MJD转基因果蝇眼睛视网膜光感受神经元变性,降低果蝇翅膀异常率,改善果蝇运动能力,0.01 mM的维生素K2作用较0.10 mM的弱,1.00 mM的维生素K2反而加重SCA3/MJD转基因果蝇眼睛视网膜光感受神经元变性,增加果蝇翅膀异常率,降低果蝇运动能力.结论：维生素K2对SCA3/MJD转基因果蝇的神经保护作用与维生素K2剂量有关,过低作用弱,而过高损伤神经元.     

构建果蝇疾病模型研究胶质细胞对神经退化的作用机制

【立论依据】 神经退行性疾病(neurodegenerative diseases)等病变源于中枢神经系统(CNS,包括脑和脊髓)的神经元丧失以及功能退化,严重危害人类健康,对家庭和社会造成沉重负担。近期研究表明胶质细胞多方参与病变过程,包括神经元的损伤修复,以及自身细胞形态和基因表达上的改变。然而,对于胶质细胞如何参与退行性病变的具体环节所知仍然有限,因此迫切需要建立动物模型,深入阐明其病理机制,提供由胶质细胞角度出发的崭新临床治疗想法与思路。 【设计思路】 由于神经退行性疾病的共同特点为行动迟缓,我们选择果蝇爬行模式作为类似的行为指标,同时利用其强大的遗传表达系统,在胶质细胞中抑制不同基因的表达,从而寻找参与的目标基因,明确其在胶质细胞中对神经退化的机制作用。 【实验内容】 采用100余种不同品系的果蝇进行实验,通过与对照组相比,对果蝇幼虫爬行特点进行观察和统计学分析,筛选出3个目标基因:Neuroglian (Nrg), Sytaxin1A (Syx 1A), Damaged DNA binding protein 1 (DDB1)。下一步我们采用免疫组化方法对这些基因的织定位进行分析,明确其在神经元或胶质细胞的位置关系。 【材料】 黑腹果蝇、免疫组化1抗:anti-HRP-FITC、BP104(Nrg)、Syx1A;2抗:Cy5(mouse) 【可行性】 黑腹果蝇具有与人类相似的基因序列与神经结构,容易进行杂交与系统性的研究,其爬行更被广泛应用为前瞻性的行动指标,为从胶质细胞的角度研究神经退行性病变的机理提供了绝佳的在体环境。而其简易的测量行为模式可为神经退行性病变的症状提供基础式的分析,从中获取理论上的依据。因此,分析果蝇行为模式从而探讨胶质细胞在神经退化中的作用存在一定可行性。 【创新性】 胶质细胞调节神经退行性病变的病理机制成为研究热点,结合果蝇模式生物的遗传工具与行为模式分析,我们的项目连接两者领域的专长特点,为临床治疗与预防提供了创新的思路与策略。     

Hsp22保护SCA3/MJD转基因果蝇神经的机制

目的:探索Hsp22保护SCA3/MJD转基因果蝇神经的机制.方法:利用GAL4-UAS系统,使Hsp22在SCA3/MJD转基因果蝇模型的神经系统中表达.观察果蝇的羽化率,Western blot检查线粒体复合物Ⅰ亚基NDUFS3的蛋白水平.结果:Hsp22诱导不能羽化的elav-GAL4/UAS系统启动的SCA3/MJD转基因果蝇部分羽化,线粒体复合物Ⅰ亚基NDUFS3蛋白表达升高.结论:Hsp22可能通过改善线粒体功能对SCA3/MJD转基因果蝇神经起保护作用.     

远志的神经保护作用及其机制的研究进展

远志是传统中医用于治疗阿尔茨海默病(AD)的重要中药,具有安神益智等功效。近十几年来中药受重视程度增加,使远志研究逐渐增加并取得明显进步。远志之所以在治疗AD中发挥重要的神经保护作用,除了抗炎、抗氧化、抑制细胞凋亡以及促进神经元增殖或再生等作用外,还具有调控异常Tau蛋白与胆碱能系统的作用,更重要是可降低β淀粉样蛋白和谷氨酸的神经毒性。     

癸酸三酰甘油对β淀粉样蛋白42转基因果蝇的影响

目的：观察癸酸三酰甘油（Tri）对 Aβ42果蝇爬行力、脑组织超氧化物歧化酶（SOD）和 ATP 含量及脑组织病理的影响。方法杂交获得实验果蝇后分为5组,分别为 we 组（正常对照野生果蝇,予1‰ DMSO 食物）、ae 组（Aβ42果蝇,予1‰ DMSO 食物）、Tri 低剂量组（Aβ42果蝇,予0.03μmol/ L 及1‰ DMSO 食物）、Tri 中剂量组（Aβ42果蝇,予0.3μmol/ L 及1‰ DMSO 食物）、Tri 高剂量组（Aβ42果蝇,予3μmol/ L 及1‰ DMSO 食物）。记录果蝇爬行力,测试脑组织 SOD、ATP 含量,观察脑组织病理 HE 切片。结果同时间点,Tri 各剂量组爬行力比 ae 组好转,差异有统计学意义（P ＜0.05）,随药物浓度增加爬行力有增加趋势。Tri 高剂量组 SOD、ATP 量较 ae 组明显增加（P ＜0.05）。Tri 高剂量组与 we 组脑组织病理切片相似,与 ae 组比较明显好转。结论 Tri 能改善 Aβ42果蝇的爬行力,增加 Aβ42果蝇 SOD 及 ATP 的含量,减少 Aβ42果蝇脑组织中空泡的数量。     

大黄酸对过氧化氢致心肌细胞线粒体损伤的保护作用机制

目的 探讨大黄酸是否通过调节线粒体功能保护过氧化氢(H₂O₂)诱导的心肌细胞损伤。方法 应用H₂O₂建立心肌细胞损伤模型,实验分为3组：对照组(不用H₂O₂处理)、H₂O₂组(以H₂O₂诱导心肌细胞H9c2损伤)、大黄酸组(H₂O₂刺激心肌细胞H9c2造模,1μg/mL大黄酸干预)。采用噻唑蓝法检测细胞活力,电镜检测线粒体超微结构,JC-1检测线粒体膜电位,Western blot检测蛋白p-Drp1、Drp1、OPA1、Bax、Bcl-2及Caspase 3表达水平。结果 与对照组相比,H₂O₂组能明显抑制细胞活力(P<0.05),大黄酸组中3个浓度均能显著增加细胞活力,大黄酸浓度为1μg/mL细胞活力最显著(P<0.01)。对照组线粒体轮廓完整,棱嵴清晰;H_...     

脑胰岛素信号在阿尔兹海默症模型小鼠渐进过程中的改变

目的：探讨阿尔兹海默症（Alzheimer’s disease,AD）形成过程中脑胰岛素信号及葡萄糖转运体（glucose transporters,GLUTs）表达的改变,为AD早期诊断提供依据。方法：借助APP/PS1转基因AD模型小鼠,运用Western blot检测该模型鼠皮层和海马区域胰岛素信号通路相关蛋白的表达。结果：与对照组相比,AD模型鼠在3月龄时,表现为脑胰岛素信号应激性激活,下游AKT/GSK3β等胰岛素信号分子磷酸化水平升高,而GLUTs此时表达变化不明显;5月龄时,该模型表现为脑胰岛素信号磷酸化水平显著下降,其下游AKT/GSK3β等信号分子磷酸化水平表达下调,同时观察到海马中GLUT3、GLUT4表达下调,AD病理性蛋白（APP）、Tau蛋白磷酸化水平显著增加。结论：胰岛素信号紊乱和葡萄糖转运体在AD形成过程中发生紊乱,且随年龄增长,具有紊乱加剧的趋势。     

脑源性神经营养因子靶向药物的制备及其对阿耳茨海默转基因鼠的治疗作用

目的：检测脑源性神经营养因子（BDNF）靶向药物对阿耳茨海默病（AD）转基因鼠的治疗作用。方法：将BDNF与抗胰岛素受体单克隆抗体（2984）相结合，制备嵌舍肽BDNF-PEG-2984／SA。药物静脉注入AD转基因鼠tg2576体内。应用ELISA方法检测AD转基因鼠脑内BDNF的粥样蛋白（At3）的含量。结果：AD鼠脑内的BDNF浓度较高和平稳。可以有效降低AD转基因鼠脑内AB含量。结论：BDNF-PEG-2984／SA可以通过主动转运进入血脑屏障，对AD转基因鼠有治疗作用。     

Curcumin improves learning and memory ability and its neuroprotective mechanism in mice

Background Increasing evidence suggests that many neurons may die through apoptosis in Alzheimer＇s disease （AD）. Mitochonddal dysfunction has been implicated in this process of neuronal cell death. One promising approach for preventing AD is based upon anti-apoptosis to decrease death of nerve cells. In this study, we observed the memory improving properties of curcumin in mice and investigated the neuroprotective effect of curcumin in vitro and in vivo. Methods The mice were given AlCl3 orally and injections of D-galactose intraperitoneally for 90 days to establish the AD animal model. From day 45, the curcumin group was treated with curcumin for 45 days. Subsequently, the step-through test, neuropathological changes in the hippocampus and the expression of Bax and Bcl-2 were carried out to evaluate the effect of curcumin on the AD model mice. In cultured PC12 cells, AlCl3 exposure induced apoptosis. The MTT assay was used to measure cell viabilities; flow cytometric analysis to survey the rate of cell apoptosis; DNA-binding fluorochrome Hoechst 33258 to observe nuclei changes in apoptotic cells and Western blot analysis of Bax, Bcl-2 to investigate the mechanisms by which curcumin protects cells from toxicity. Results Curcumin significantly improved the memory ability of AD mice in the step-through test, as indicated by the reduced number of step-through errors （P 〈0.05） and prolonged step-through latency （P 〈0.05）. Curcumin also attenuated the neuropathological changes in the hippocampus and inhibited apoptosis accompanied by an increase in Bcl-2 level （P 〈0.05）, but the activity of Bax did not change （P 〉0.05）. AICI3 significantly reduced the viability of PC12 cells （P 〈0.01）. Curcumin increased cell viability in the presence of AICI3 （P 〈0.01）. The rate of apoptosis decreased significantly in the curcumin group （P 〈0.05） when measured by flow cytometric analysis. Curcumin protected cells by increasing Bcl-2 level （P 〈0.05）, but the level of Bax did not ch     

姜黄素对阿尔茨海默病模型小鼠胰岛素受体底物-1的影响

目的 观察姜黄素对阿尔茨海默病模型APP/PS1双转基因小鼠胰岛素受体底物-1(IRS-1)和磷酸化胰岛素受体底物-1(p-IRS-1)表达的影响,探讨姜黄素神经保护作用机制.方法 将3月龄的APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、罗格列酮组、姜黄素高(400 mg/kg)、中(200 mg/kg)、低(100 mg/kg)剂量组,并以同窝阴性小鼠作为正常对照组.连续灌胃6个月后,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR法进行检测.结果 免疫组化染色,模型组小鼠大脑海马CA1区IRS-1阳性细胞较正常组明显增加(P＜0.01),与模型组相比,各干预组IRS-1阳性细胞数减少(P＜0.05或P＜0.01),p-IRS-1结果与IRS-1结果相反.Western blot检测海马IRS-1和p-IRS-1的蛋白表达结果与免疫组化检测结果一致.RT-PCR检测IRS-1 mRNA表达结果与免疫组化和Westernblot结果一致.结论 姜黄素可以使APP/PS1双转基因小鼠海马增加的IRS-1和减少的p-IRS-1得以恢复,并调节IRS-1 mRNA表达,改善APP/PS1双转基因小鼠胰岛素信号转导,提示姜黄素可能通过调节胰岛素信号转导机制发挥抗阿尔茨海默病作用.     

染料木素的神经保护作用及其机制的研究进展

染料木素广泛存在于豆科植物中,其作为植物雌激素应用于制药、营养保健品等领域.研究表明,染料木素可以通过抗氧化、抗AB毒性、调节神经营养因子的表达、调节细胞内Ca2+浓度、减轻谷氨酸的神经毒性、抑制神经细胞的凋亡、调节信号转导通路以及增加海马神经肽Y的表达等作用机制,从而发挥神经保护作用.本文综述染料木素的神经保护作用及...     

Ndfip1对铁离子诱导的神经细胞凋亡的抑制作用及其神经保护作用机制

目的:观察铁超载条件下跨膜蛋白Nedd4家族反应蛋白1(Ndfip1)过表达对神经细胞凋亡的抑制作用,探讨Ndfip1对神经细胞的保护作用机制.方法:分别以Ndfip1质粒和空质粒转染的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞分为实验组和对照组.在铁离子超载条件下,采用MTT比色法测定2组细胞生存率,采用活性氧(ROS)和丙二...     

初步探讨鸟嘌呤核苷、姜黄素对AD双转基因小鼠学习记忆的影响

目的 采用Morris水迷宫测试小鼠定位航行及空间搜索等学习记忆和记忆保持能力,评价鸟嘌呤核苷、姜黄素对4月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠认知功能的影响。方法 将3月龄APPswe/PS1dE9双转基因小鼠随机分为模型组、盐酸多奈哌齐组(0.92 mg?kg-1?d-1)、鸟嘌呤核苷组(20mg?kg-1?d-1)、姜黄素组(200mg?kg-1?d-1)、姜黄素(200mg?kg-1?d-1)和鸟嘌呤核苷组(20mg?kg-1?d-1),每组12只;并以同月龄野生型C57/BL6J小鼠作对照。每天给药1次,连续给药1个月。应用Morris水迷宫进行行为学检测。结果 鸟嘌呤核苷、姜黄素对APPswe/PS1dE9双转基因小鼠空间学习记忆能力障碍有改善作用,尤其以姜黄素组明显。结论 鸟嘌呤核苷、姜黄素能改善APPswe/PS1dE9双转基因小鼠的早期出现的认知障碍。     

老年性痴呆动物模型研究进展及其评价

老年性痴呆(Alzheimer's disease,AD)是一种与年龄相关的中枢神经系统退行性病变。由于至今其病因不明、发病机制复杂,制约了该病动物模型的制作研究工作。本文对各类AD动物模型的研究进展及其优劣进行了评价,认为Tg2576转基因小鼠已成为较合适的防治AD新药研究的动物模型。     

胶质细胞源性神经营养因子在大鼠神经病理性疼痛模型中的作用及机制研究

目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)通过PINK1/Parkin信号通路对大鼠神经病理性疼痛的作用及其机制.方法 将大鼠按随机数字表法分为Sham组、NP组和GDNF组.对大鼠的一般情况和行为学进行观察和测定;透射电镜观察大鼠脊髓;Western blotting法观察大鼠脊髓组织中PINK1和Parkin蛋...