环氧化酶-2抑制剂NS398对肾癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨环氧化酶-2（Cyclooxygenase-2,COX-2）抑制剂NS398对肾癌细胞786-O增殖和凋亡的影响。方法:不同浓度NS398作用体外培养的786-O细胞后,采用噻唑蓝（MTT）法检测24、48、72、96h后肾癌细胞786-O的增殖活性。终浓度为30、180μmol/L的NS398作用786-O细胞72h后,免疫细胞化学检测COX-2蛋白表达;RT-PCR法检测COX-2mRNA表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果:NS398可以抑制786-O细胞的增殖,呈时间和剂量依赖型。RT-PCR法检测显示NS398作用后能降低COX-2mRNA表达。免疫细胞化学结果显示NS398作用后能降低COX-2蛋白表达。流式细胞仪检测表明,30、180μmol/LNS398处理组凋亡率分别为14.3%±1.4%、31.5%±2.1%,与对照组凋亡率2.1%±0.4%比较,凋亡率显著上升（P<0.05）。结论:NS398可能通过降低COX-2表达,抑制肾癌细胞增殖和诱导其凋亡。     

COX-2抑制剂NS398通过抑制前列腺素E2诱导肾癌细胞的凋亡

目的:揭示环氧合酶2(COX-2)在肾癌细胞中的表达情况,通过COX-2抑制剂NS398作用肾癌细胞探讨非甾体抗炎药(NSAID)对肾癌细胞增殖作用的影响及其可能的作用机制。方法:采用标准的细胞培养方法对人肾癌786-0细胞进行培养,将NS398分别以25,50,100,150及200μmol/L的剂量加入细胞中作用24及48h后,MTT法检测NS398对肾癌细胞增殖的影响;作用24h后,流式细胞仪测定细胞凋亡的情况,EIA法测定细胞中前列腺素E(2PGE2)含量的变化,Western blotting测定COX-2蛋白表达的情况。结果:NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用,且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大,呈浓度依赖关系(P<0.05);NS398作用肾癌786-0细胞24h后,在细胞周期G0/G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰,随着浓度升高,凋亡峰亦越来越增高(P<0.05);NS398可抑制PGE2释放,并且这种抑制作用呈剂量效应,与对照组相比有统计学意义(P<0.05);不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中,COX-2的表达明显减弱,且呈剂量梯度下降。结论:NS398通过诱导凋亡来抑制肾癌786-0细胞的增殖;NS398诱导肾癌786-0细胞的凋亡作用机制可能是通过抑制COX-2的表达,降低肾癌786-0细胞PGE2的合成,减少前列腺素对肿瘤细胞增殖的刺激作用来抑制增殖和促进凋亡的。     

NS398通过环氧合酶-2非依赖途径诱导胰腺癌BxPC-3细胞凋亡

目的探讨选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响及其分子机制.方法采用四甲基偶氮唑蓝(MTY)比色法观察不同浓度的NS398对BxPC-3细胞增殖的影响;流式细胞术、悬浮细胞/贴壁细胞比值测定BxPC-3细胞凋亡的改变,并检测Caspase-3活化情况;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测不同浓度NS398作用下BxPC-3细胞COX-1、COX-2 mRNA水平的变化,Western blot法检测COX-1、COX-2及Caspase-3蛋白水平的改变.结果MTT及流式细胞术结果显示,NS398呈剂量依赖性地抑制BsPC-3细胞增殖,并可诱导其凋亡;随着NS398处理浓度的增加,悬浮细胞/贴壁细胞比值显著上升,Caspase-3活性上调,在高浓度时尤为明显.RT-PCR和Western blot结果显示,COX-1 mRNA及蛋白表达不受NS398药物作用影响,COX～2 mRNA及蛋白表达在各浓度组中亦无明显变化,Caspase-3蛋白水平在高药物浓度时表达上调.结论选择性COX-2抑制剂NS398对胰腺癌BxPC-3细胞有显著的增殖抑制和凋亡诱导作用,这种效应与COX-2表达无明显相关,而与Caspase-3的活化密切相关.     

NS398对宫颈癌Hela细胞bcl-2表达的影响

目的 探讨NS398对宫颈癌Hela细胞生长及bcl-2基因和蛋白表达的影响.方法 用不同浓度的NS398(0、25、50、75和100μmol/L)处理宫颈癌Hela细胞不同时间,采用MTT比色法分析细胞生长抑制卒.用不同浓度NS398处理Hela细胞24h,RT-PCR检测COX-2和bcl-2 mRNA表达的变化,Western blot检测COX-2和bcl-2蛋白表达的变化.结果 随着NS398浓度及处理时间的增加.宫颈癌Hela细胞生长抑制率升高;随着NS398剂量的增加,COX-2和bcl-2 mRNA及蛋白的表达水平逐渐减少.结论 NS398可呈剂量和时间依赖性抑制Hela细胞的生长,呈浓度依赖性减少COX-2和bcl-2 mRNA及蛋白的表达.NS398可能通过抑制COX-2和bcl-2的表达,抑制宫颈癌Hela细胞的生长.     

NS398对白血病细胞K562凋亡的时间和剂量效应机制

目的 探讨非甾体药物选择性环氧合酶-2(COX-2)抑制剂NS398对白血病细胞株K562细胞增殖及凋亡的效应关系和机制.方法 采用噻唑蓝还原法(MTT法)检测NS398对K562细胞增殖抑制作用,流式细胞仪(FCM)和单细胞凝胶电泳技术(comet assay)测定K562细胞的凋亡,免疫印迹实验检测相关蛋白的表达.结果 NS398抑制K562细胞增殖存在时间和剂量效应关系,各浓度间差异有显著性(P<0.05).NS398激活caspase-3和caspase-9,促进P53蛋白的积聚、Bax蛋白表达的上调和Bcl-xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使K562细胞凋亡.结论 NS398可抑制K562细胞增殖,其诱导细胞凋亡的途径可能经过P53介导Bax的Caspase-3、Caspase-9的激活,揭示COX-2抑制剂可能存在着一个影响细胞翻译的新机制.     

环氧化酶-2在肿瘤发生发展中的研究

环氧化酶(eyclooxygenase，COX)是催化花生四烯酸转化为前列腺素的关键酶，其相关基因COX-2不仅与炎症反应有关，而且可通过促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，促进肿瘤血管形成等机制促进肿瘤的发生和发展。COX-2在消化、呼吸、泌尿、生殖等系统组织发生的恶性肿瘤中表达均明显增高，且多与肿瘤的发生和侵袭转移有关，故可作为临床肿瘤基因治疗的可选靶位。     

环氧化酶-2在人肾透明细胞癌中的表达及意义

目的探讨环氧化酶-2（COX-2）在人透明细胞癌组织中的表达及其临床意义。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测62例人透明细胞癌患者的癌组织及23例患者距离肿瘤组织3cm以外的正常肾脏组织中COX-2 mRNA的表达。结果COX-2 mRNA在77.4%（48/62）的癌组织中表达,仅在17.4%（4/23）的正常肾脏组织中表达（P〈0.01）。结论COX-2在人透明细胞癌组织中高表达,可能在肿瘤的发生发展中起一定的作用,可能成为肾癌化学预防的一个靶点。     

NS-398诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制

目的 探讨NS-398诱导肝癌细胞HepG2凋亡的分子机制.方法 采用MTT法测定COX-2选择性抑制剂NS-398对HepG2细胞的增殖抑制率;流式细胞仪检测凋亡;原位细胞凋亡检测法观察细胞凋亡形态学变化;免疫细胞化学分析COX-2、cIAP-1、XIAP、Survivin蛋白变化.结果 NS-398对HepG2细胞株有增殖抑制作用,流式细胞仪检测用药组凋亡率明显高于对照组.TUNEL染色可见典型的凋亡形态学特征.免疫细胞化学分析表明使用NS-398后,COX-2、cIAP-1、XIAP、Survivin蛋白表达降低.结论 COX-2选择性抑制剂NS-398对人肝癌细胞株HepG2有诱导凋亡作用,其机制可能通过抑制COX-2,下调cIAP-1、 XIAP、 Survivin的表达而诱导凋亡.     

肾癌环氧化酶-2的表达及内皮抑素基因治疗ACHN肾细胞癌

肾细胞癌是泌尿系常见恶性肿瘤之一,其发病率占全身恶性肿瘤的3％左右,其中肾透明细胞癌占80％左右。肾细胞癌的发病机制、发生、发展、转移等生物学行为复杂多变,其中肿瘤新生血管的形成占极为重要地位。环氧化酶-2（cyclooxgenase-2,COX-2）及内皮抑素基因（EndostatinGene）均与肿瘤新生血管有关,现综述如下。     

环氧化酶-2的表达与食管癌细胞增殖和凋亡的关系

目的:研究食管癌环氧化酶-2(COX-2)的表达与增殖细胞核抗原以及凋亡的关系.方法:采用免疫组化方法检测96例食管癌组织和20例对照组中的COX-2、bcl-2和PCNA,同时用末端脱氧核苷酸转移介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL法)进行原位凋亡检测,并计算增殖指数(proliferation index PI)和凋亡指数(apoptotic index AI).结果:96例食管癌组织中的COX-2和bcl-2表达升高,PI为72.20%,AI为8.67%,COX-2、PI和AI与肿瘤的淋巴结转移、血管的浸润以及临床分期密切相关.结论:COX-2通过上调bcl-2促进肿瘤细胞增殖和抑制细胞凋亡参与了食管癌的发生机理.     

肾癌细胞中环氧合酶-2的高表达及NS398对肾癌细胞生长抑制和凋亡作用机制的研究(英文)

目的揭示COX-2选择性抑制剂NS398对肾癌细胞的增殖和凋亡作用的影响，及其可能的作用机制。方法采用标准的细胞培养方法对人肾癌786—0细胞进行培养，将NS398分别以不同浓度剂量加入细胞中作用24及48h后，应用流式细胞仪检测凋亡，应用RT-PCK和Western blotting检测COX-2和Bcl-2表达的改变。结果NS398对肾癌786-0细胞具有较强的抑制作用，且这种抑制作用随浓度和时间的增加而增大，呈浓度依赖关系（P〈0．05）；RT—PCR和Western Blot结果表明，不同浓度NS398作用下的肾癌786-0细胞中，COX-2和Bcl-2的表达明显减弱，且呈剂量梯度下降。NS398作用于肾癌786-0细胞24h后。在细胞周期G0／G1期前出现明显的亚二倍体凋亡峰，随着浓度的升高，凋亡峰亦越来越高（P〈0．05）。结论肾癌786—0细胞中存在着COX-2的过表达；选择性COX-2抑制剂NS398通过诱导凋亡来抑制肾癌786—0细胞的增殖，其机制可能是通过抑制COX-2的表达及下调Bcl-2来完成的。     

选择性环氧化酶抑制剂对肾癌细胞BCL-2表达的影响

目的：探讨环氧化酶抑制剂NS398对肾癌786—0细胞生长及bcl-2基因和蛋白表达的影响。方法：用不同浓崩的NS398（0、50、100、150μmol／L）处理肾癌786—0细胞不同时间,采用MTr比色法分析细胞生长抑制率。用不同浓度NS398到理肾癌786—0细胞24h,RT—PCR检测bcl-2mRNA表达的变化,Westernblot检测bcl-2蛋白表达的变化。结果：随着NS398《浓度及处理时间的增加,肾癌786—0细胞生长抑制率升高;随着NS398剂量的增加,bcl-2 mRNA及蛋白的表达水平逐渐减少。结论：NS398可呈剂量和时间依赖性抑制肾癌786—0细胞的生长,呈浓度依赖性减少bcl-2 mRNA及蛋白的表达。NS398可崩通过抑制bcl-2的表达,抑制肾癌786—0细胞的生长。     

选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的作用及其作用机制

目的:研究选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的作用及其作用机制,探讨NS-398与卡铂在宫颈癌治疗中的协同作用.方法:用NS-398、卡铂及两者联合作用人宫颈癌Hela细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测NS-398、卡铂及两者联合对宫颈癌细胞增殖的影响,流式细胞仪PI染色法分析NS-398、卡铂处理后宫颈癌细胞凋亡率和细胞周期的改变.结果:NS-398、卡铂对人宫颈癌hela细胞的增殖具有抑制作用.卡铂联合NS-398对人宫颈癌hela细胞的增殖抑制作用显著增加,其联合抑制率近似于NS-398和卡铂单药抑制率之和,也近似于2倍卡铂剂量时的增殖抑制率.流式细胞仪检测发现,与对照组比较,NS-398处理组G1期细胞明显增加,而S期细胞明显减少,两组比较差异有统计学意义(P＜0.05);而卡铂处理组G1期细胞明显减少,S期细胞明显增加,两组比较有统计学意义(P＜0.05).NS-398(200 μmol/L)作用Hela细胞48 h后,流式细胞仪检测发现,NS-398处理组凋亡率为3.43%±0.02%,对照组凋亡率为1.48%±0.03%,两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).而卡铂(80 mg/L)处理组凋亡率为9.32%±0.02%,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论:选择性COX-2抑制剂NS-398对宫颈癌细胞的增殖具有抑制作用.NS-398对宫颈癌细胞的作用可能与凋亡无关.NS-398与卡铂在宫颈癌化疗中具有叠加作用.     

BTG1在肾透明细胞癌组织中的表达及对786-O细胞株增殖和凋亡的影响

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在肾透明细胞癌组织中的表达及对肾透明细胞癌细胞株786-O增殖和凋亡的影响.方法:采用免疫组化法检测20例肾透明细胞癌及其癌旁组织中BTG1蛋白的表达.构建BTG1表达质粒及合成BTG1的干扰RNA分别转染786-O细胞,通过MTT法实验观察BTG1对786-O细胞体外增殖的影响,...     

BTG1在HK-2和786-O细胞株中的表达及其对细胞周期和细胞凋亡的影响

目的：探讨B细胞易位基因1（ BTG1）在人肾小管上皮细胞株（ HK-2）和肾透明细胞腺癌细胞株（786-O）中的表达及BTG1基因对HK-2和786-O细胞周期、细胞凋亡的影响。方法：采用Western blotting方法检测BTG1蛋白在HK-2、786-O细胞株中的表达,构建BTG1表达质粒转染786-O细胞,合成BTG1干扰RNA转染HK-2细胞,通过流式细胞仪（ FACS）观察BTG1对HK-2、786-O细胞周期和细胞凋亡的影响。结果：Western blotting检测显示,BTG1蛋白在HK-2中的表达高于786-O。786-O中高表达BTG1蛋白能够促进其凋亡,增加其G0/G1期比率;HK-2中低表达BTG1蛋白能够抑制其凋亡,减少其G0/G1期比率。结论：BTG1可能通过对细胞凋亡及细胞周期的调控抑制肾细胞癌的生长。     

NS398诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡机制的研究

目的:研究NS398诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的机制。方法:通过实验细胞培养、MTT试验、细胞形态变化、A549细胞survivin的mRNA表达、A549细胞p-AKT与survivin的蛋白表达来对NS398诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的机制进行分析研究。结果:NS398对A549细胞增殖的影响受到浓度的影响,NS398浓度越大,A549细胞增殖抑制率越大;A549细胞在不同浓度的NS398试剂中表现出不同的细胞形态;survivin的mRNA表达随着NS398浓度的增加而减弱,A549细胞p-AKT与survivin的蛋白表达随着NS398浓度的增加而增强。结论:NS398对A549细胞的凋亡具有诱导作用,使肿瘤生长受到抑制,其抗肿瘤机制与AKT磷酸化的抑制、survivin蛋白表达的下调有关。     

选择性COX-2抑制剂NS398干预对HIBD新生鼠脑细胞凋亡的影响

目的研究新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)时应用选择性COX-2抑制剂NS398干预后不同时段脑原位细胞凋亡的变化。方法于制备新生大鼠左脑的HIBD模型前30min,腹腔注射NS39820mg/kg,同时设未注射组及假手术组对照,应用TUNEL染色方法及图像分析软件研究于HI后24h、7d脑皮层及海马TUNEL染色阳性细胞百分率变化。结果假手术组组脑组织中偶见TUNEL染色阳性细胞;未注射组缺氧缺血(HI)后24hTUNEL染色阳性细胞数较多,至HI后7d明显减少;NS398干预组染色阳性细胞数较未注射组明显减少。结论应用选择性COX-2抑制剂NS398于HIBD新生鼠,可以有效减少HI后凋亡细胞,提示NS398对发育期脑组织缺氧缺血损伤存在保护作用。