IL-1β、IFN-γ对灌流大鼠卵巢中基质金属蛋白酶-2,-9mRNA基因表达的影响

目的 探讨IL-1β、IFN-γ对基质金属蛋白酶-2,-9（MMP-2,-9）mRNA基因表达的影响。方法 采用体外灌流卵巢系统、原位杂交（in situ hybridiaztion）等方法检测IL-1β、IFN-γ对大鼠卵泡发育过程中MMP-2,-9mRNA基因表达变化,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 IL-1β对MMP-2mRNA的表达无明显的刺激或抑制作用,但可显著增加卵泡膜细胞的MMP-9mRNA的表达;IFN-γ可显著降低MMP-2,-9mRNA的表达。结论 IL-1β、IFN-γ可通过调节卵泡发育过程中MMP-2,-9mRNA基因表达来调控卵泡发育过程。     

基质金属蛋白酶-2、-9在大鼠卵巢黄体中的作用

目的探讨基质金属蛋白酶-2、-9（MMP-2、-9）在大鼠卵巢黄体发育、维持和退化的组织重建中的作用。 方法采用原位杂交（insituhybridization）方法检测假孕大鼠卵巢黄体中MMP-2、-9mRNAs的基因表达变化，并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果MMP-2、-9mRNAs主要在假孕第1天黄体中表达，以后逐渐降低，到假孕第14天其mRNAs表达降低到最低程度。结论MMP-2、-9主要参与黄体的发育过程，而不参与黄体的退化过程。     

基质金属蛋白酶—2、—在大鼠卵巢黄体中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶－２、９（ＭＭＰ－２、－９）在大鼠卵巢黄体发育、维持和退化的组织重建中的作用。方法 采用原位杂交（ｉｎ ｓｉｔｕ ｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ）方法检测假孕大鼠卵巢黄体中ＭＭＰ－２、－９ｍＲＮＡｓ的基因表达变化，并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 ＭＭＰ－２、－９ｍＲＮＡｓ主要在假孕第１天黄体中表达，以后逐渐降低，到假孕第１４天其ｍＲＮＡｓ表达降低到最低程度。结论 ＭＭＰ－２、９主要参与黄体的发育过程。而不参与黄体的退化过程。     

大鼠急性心肌梗死后心室重构进展中基质金属蛋白酶活性的变化

目的　探讨大鼠急性心肌梗死 (AMI)后心室重构进展中基质金属蛋白酶 (MMPs)活性的变化与心功能的关系。方法　雄性SD大鼠随机分为假手术组和手术组 (结扎大鼠冠状动脉前降支制作AMI模型 ) ,再进一步分为 1、7、14、2 8、4 2d亚组。应用心脏超声和血流动力学测定心功能和心室重构 ;采用明胶酶法测定左室心肌MMPs活性。结果　手术组大鼠术后 14d起左室舒张末期直径 (LVEDD)逐渐增加 ,左室射血分数(LVEF)及左室短轴缩短率 (FS)逐渐降低 ,至 4 2d最明显 ;术后 1d起左室舒张末压 (LVEDP)逐渐升高 ,左室压力上升最大速率 (dp/dtmax)及压力下降最大速率 (dp/dtmin)逐渐下降 ,以术后 4 2d最明显 ;术后 1dMMP2 和MMP9活性即升高 ,至 7d时活性最高 ,此后逐渐下降 ,与相应时段假手术组比较 ,差异均有显著性 (P值均 <0 .0 1)。MMP2 活性与LVEDD成正相关 (r =0 .92 ,P <0 .0 1) ;与FS、LVEF、dp/dtmax成负相关 (r =- 0 .91、- 0 .88、- 0 .87,P <0 .0 5～ 0 .0 1)。MMP9活性与LVEDD成正相关 (r =0 .92 ,P <0 .0 1) ;与FS、LVEF、dp/dtmax成负相关 (r =- 0 .95、- 0 .96、- 0 .94 ,P值均 <0 .0 1)。结论　大鼠AMI后MMP2 、MMP9活性增加呈动态变化 ,并与心功能、心室重构相关 ,提示它们在促进AMI后心室重构、心功能异常     

基质金属蛋白酶-9在胃癌中的表达

目的 探讨基质金属蛋白酶－9（MMP－9）在胃癌中表达的意义。方法 采用免疫组化S－P法对47例胃癌组织和10例正常胃组织进行MMP－9的检测。结果 10例正常胃组织只有一例MMP－9阳性表达，47例胃癌组织中MMP－9阳性表达率为91.5%（43／47），MMP－9的表达强度与胃癌患者淋巴结转移（P＜0.05）、浆膜浸润相关（P＜0.01）。结论 MMP－9要作为判断胃癌恶性生物学行为的标记物。     

胰腺癌组织中基质金属蛋白酶MMP9的表达及其临床意义

目的 探讨基质金属蛋白酶MMP9在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学技术检测MMP9在11例正常胰腺组织和88例胰腺癌组织中的表达.结果 免疫组织化学结果显示胰腺癌组织中MMP9的表达显著高于正常组织(P＜0.01).MMP9的表达和胰腺癌的临床TNM分期、淋巴结转移均成正相关(均P＜0.01),与生存时间成负相关(P＜0.01),而与肿瘤部位和病理分级均无关(均P＞0.05).经COX回归分析显示MMP9表达与胰腺癌预后成负相关(P＜0.01).结论 MMP9在胰腺癌的发生、发展和转移中扮演着重要角色,在治疗过程中对其进行检测有助于对胰腺癌患者的预后进行评估.     

阿霉素肾病大鼠肾小球中基质金属蛋白酶-2和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)在阿霉素肾病大鼠中的表达和意义。方法 25只Sprague-Dawlay(SD)雄性大鼠,随机分为对照组10只和观察组15只,观察组尾静脉内一次性注射阿霉素7.5 mg.kg-1(以生理盐水稀释至3 mL),对照组尾静脉内一次性注射等量生理盐水,对照组和观察组每日1次按10 mL.kg-1给予生理盐水灌胃,灌胃共8周。采用反转录聚合酶链式反应法检测肾组织MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达。结果实验8周时与对照组比较,观察组的24 h尿蛋白定量、肌酐和尿素氮水平均显著上升(P<0.01),血白蛋白显著降低(P<0.01)。对照组大鼠肾皮质区肾小球毛细血管襻开放较好,无细胞外基质(ECM)聚集;观察组大鼠肾组织可见部分毛细血管腔变窄甚至完全闭塞,肾小囊扩张,囊壁增厚,球囊粘连。观察组MMP-2和TIMP-2 mRNA的表达较对照组明显下降(P<0.01),观察组中MMP-2/TIMP-2 mRNA半定量比值较对照组明显降低(P<0.01)。结论 MMP-2和TIMP-2在阿霉素肾病大鼠肾小球硬化中起到重要的作用;MMP-2/TIMP-2的比值失调使肾小球ECM降解减少,导致ECM过度积聚,参与肾小球硬化的发生发展。     

MMP—2，MMP—9，TIMP—1和TIMP—2在肝癌中原位表达

OBJECTIVE: To explore the expression and clinical prognostic significance of matrix metalloproteinase-2 mRNA (MMP-2 mRNA), tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2 mRNA (TIMP-2 mRNA), matrix metalloproteinase-2 protein (MMP-2), matrix metalloproteinase-9 protein (MMP-9), tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-1 protein (TIMP-1), and tissue inhibitor of matrix metalloproteinase-2 protein (TIMP-2) in the hepatocellular carcinomas (HCCs). METHODS: Fifty-six specimens of HCCs from 56 patients, who were followed-up, were investigated by in situ hybridization with specific probes for MMP-2, TIMP-2, and by immunohistochemistry with anti-MMP-2, MMP-9 and anti-TIMP-1, TIMP-2 monoclonal antibody. We analyzed the data with chi-square test, spearmans correlation analysis, monovariate Kaplan-Meier plot and multivariate Cox regression analysis. RESULTS: 1. The positive expression of MMP-2mRNA, TIMP-2mRNA, MMP-2 protein, MMP-9 protein, TIMP-1 protein and TIMP-2 protein in the 56 HCCs cases were 48 (85.7%), 35 (62.5%), 44 (78.6%), 41 (73.2%), 30 (53.6%), and 38 (68%), respectively. 2. We found over-expression of MMP-2 mRNA, MMP-2 protein, and MMP-9 protein, but low expression of TIMP-1 protein in the 56 cases of HCCs (P < 0.01, P < 0.05). 3. There was a positive association between TIMP-2mRNA and TIMP-2 protein expression, and between MMP-2 mRNA and MMP-2 protein in HCCs, respectively (r = 0.316, P < 0.05; r = 0.356, P < 0.05). 4. Over-expression of MMP-2 mRNA was positively correlated to the tumor size and TNM classification (r = 0.441, P < 0.001; r = 0.340, P < 0.05), and MMP-9 protein was related to shortened survival (P < 0.05). 5. In both monovariate Kaplan-Meir plot and multivariate Cox regression analysis, the expression of MMP-2 protein and MMP-9 protein were linked to unfavorable prognosis. These results were further confirmed by multivariate analysis in which MMP-2 protein and MMP-9 protein emerged as independent prognostic factors for poor survival regardless of the age, tumor size, tumor grades, TNM classification and expression of MMP-2mRNA, TIMP-2mRNA, TIMP-1 protein and TIMP-2 protein. The hazard ratios of expression of MMP-2 protein and MMP-9 protein were 3.875 and 4.528, respectively. CONCLUSION: The over-expression of MMP-2mRNA, MMP-2 protein and MMP-9 protein and the imbalance between MMP-2 and TIMP-2 play pivotal roles in the degradation of excellular matrix of HCCs. MMP-2 and MMP-9 immunoreactive protein have been closely related to a shortened survival independent of major prognostic indicators in the primary HCC and increase the risk of the patients after the operation.     

基质金属蛋白酶与脓毒症性急性肺损伤的研究进展

基质金属蛋白（matrix metalloproteinases,MMPs）家族是一族具有钙、锌依赖性的内源性蛋白水解酶,MMPs在急性肺损伤／急性呼吸窘迫综合征（ALI／ARDS）的发生和进展中起到重要作用。本文对MMP－9、MMP－2等金属基质蛋白家族成员与脓毒症性肺损伤的关系进行综述。     

NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B mRNA在成年大鼠海马的表达

目的 研究NMDA受体亚单位（NR1，NR2A和NR2B）mRNA在正常成年大鼠海马结构各区的表达及形态特点。方法 原位核酸分子杂交组织化学反应和图像处理与分析。结果 NR1，NR2A和NR2BmRNA在正常大鼠海马结构各区锥体细胞和颗粒细胞普遍表达，其中NR1mRNA的表达最强，NR2AmRNA的表达最弱，NR1mRNA在齿状回（DG）的表达水平明显强于CA1区和CA3区；NR2AmRNA在CA1区的表达水平则强于CA3区和DG；NR2BmRNA在海马各区的表达水平基本相同。结论 NR1，NR2A和NR2BmRNA在正常成年大鼠海马各区的表达模式不同，其中NR2AmRNA在海马CA1区以及NR1mRNA在DG高表达的分布特点可能与海马的学习，记忆等生理功能以及选择性易损现象有关。     

食管癌组织中基质金属蛋白酶-2,-9的定位表达

目的：探讨食管癌组织中基质金属蛋白酶-2,-9(MMP-2,-9)的蛋白和mRNA定位表达。方法：用免疫组化,原位杂交,RT-PCR法分别检测41例食管癌组织标本中MMP-2,-9的mRNA及蛋白定位表达。结果：用RT-PCR、原位杂交2种不同方法检测食管癌组织及癌细胞MMP-9mRNA的阳性表达率分别为80．49％和53．66％,MMP-2mR-NA的阳性表达率分别为58．54％和9．76％,食管癌细胞与组织成分中MMP-9阳性表达相-致,但MMP-2明显不符。结论：本研究结果提示MMP-9由食管癌组织中的肿瘤细胞分泌,而MMP-2则非肿瘤细胞所分泌。     

应激大鼠下丘脑血管紧张素原mRNA的表达

目的　观察应激时大鼠下丘脑血管紧张素原 m RNA表达及血管紧张素 含量的变化 .方法　雄性大鼠 48只随机分为 3组 ,游泳组予以 4℃～ 6℃冷水游泳刺激 ;电击组予以0 .5～ 2 Hz,6 0～ 10 0 V足底电刺激 ,每日 2次 ,每次 2 h,持续1wk;对照组不予任何刺激 .用原位杂交技术及放免分析法检测不同应激时大鼠下丘脑血管紧张素原 (Ang) m RNA的表达及血管紧张素 (Ang )含量的变化 .结果　应激大鼠下丘脑 Ang m RNA阳性表达面积百分比与积分吸光度均显著增高 .游泳组 (2 .48± 0 .40 ) %与 (0 .75± 0 .0 9) ,电击组 (2 .94± 0 .82 ) %与 (1.83± 0 .41) vs对照组 (0 .2 0± 0 .0 4) %与 (0 .2 4± 0 .12 ) ,P<0 .0 1;Ang 含量也显著增高 .游泳组 (141±6 7) ng· g- 1 ,电击组 (84± 2 5 ) ng· g- 1 vs对照组 (5 6± 16 ) ng· g- 1 ,P<0 .0 1,P<0 .0 5 ,且 Ang m RNA表达增高率 (12 16± 196 ) %和 (144 1± 40 2 ) % ,超过了 Ang 含量的增高率(2 95± 118) %和 (149± 44 ) % ,P<0 .0 1.结论　应激时下丘脑肾素 -血管紧张素系统 (RAS)被显著激活 ,进一步支持局部RAS参与了应激反应的观点 .     

人脑胶质瘤组织中MT1-MMP、MMP-2 mRNA的表达

目的 :分析MT1 MMP、MMP 2mRNA的表达与脑胶质瘤恶性程度和侵袭性之间的关系及其意义。方法 :采用原位杂交方法检测 4 2例人脑胶质瘤和 8例正常脑组织中MT1 MMP、MMP 2mRNA的表达。结果 :MT1 MMP、MMP 2mRNA的表达水平与肿瘤的级别呈正相关 (r=0 .875、0 .86 5 ,P <0 .0 1 ) ;Ⅲ～Ⅳ级脑胶质瘤组织与正常脑组织、Ⅰ～Ⅱ级脑胶质瘤组织之间标记指数差异有统计学意义 (P <0 .0 1 ) ;且MT1 MMPmRNA表达与MMP 2mRNA表达呈正相关 (r=0 .882 ,P <0 .0 1 )。结论 :MT1 MMP表达与脑胶质瘤的恶性程度和侵袭性有明显的关系 ;MT1 MMP与MMP 2在脑胶质瘤的侵袭过程中密切相关     

大鼠胰腺促性腺激素释放激素受体mRNA的原位杂交

目的 研究大鼠胰腺促性腺激素释放激素（GnRH)受体mRNA的存在及细胞定位。方法 采用原位杂交组织化学法。结果 胰脏的外分泌部腺上皮细胞、胰导管上皮细胞及内分泌部胰岛细胞内可检测到较强的GnRH受体mRNA杂交信号,杂交阳性信号物质均分布在胞质内,胞核呈阴性。结论 大鼠胰脏内、外分泌部均能合成GnRH受体。GnRH也是一种消化激素,它由胰脏自身合成,又作用于胰脏,可能参与胰脏内、外分泌功能的调节。     

Whole rat embryo in situ hybridization:gene expression in three dimension

Ｗｈｏｌｅｒａｔｅｍｂｒｙｏｉｎｓｉｔｕｈｙｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎ：ｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｔｈｒｅｅｄｉｍｅｎｓｉｏｎＨｅＷｅｉｇｏｎｇ，ＬｕＳｈｕａｎｇ，ＷａｎｇＸｕｅｇｏｎｇ，ＨｕａｎｇＢｉｎｇｙｕ，ＬｉＳｈｏｕｒｏｕ（Ｄｅｐａｒｔｍｅ...     

胃蛋白酶C基因在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞内的表达

目的：研究胃蛋白酶原基因C在大鼠胃底腺发育过程中上皮细胞的表达。方法：采用地高辛标记的RNA探针，用原位杂交的方法研究了大鼠胃底腺中胃蛋白酶C产生细胞的个体发育。结果：大鼠胃腺在胚胎18．5天开始出现，但没有形态分化，胃蛋白酶的mRNA在出生后3．5天首次被原位杂交法检出，其蛋白酶产生细胞在出生后8周发育成熟．胃蛋白酶的mRNA表达在主细胞和颈黏液细胞内，其发育可分为4个阶段：①胚胎18．5天至出生后0．5天；②出生后3．5天至2周；③生后3周至4周；④出生后8周。在胃底腺发育过程中，胃蛋白酶mRNA的表达至局限于某种特定的细胞，这些细胞的分布具有明确的阶段特异性。结论：认为在发育生物学的研究中，胃蛋白酶C可作为胃上皮细胞分化的分子标志。     

N-甲基-D-门冬氨酸2B受体mRNA在纹状体边缘区的表达

目的 通过研究N-甲基-D-门冬氨酸（N-methyl-D-asparate, NMDA）2B受体是否在纹状体边缘区表达,从而在基因分子方面确定边缘区在学习记忆过程中的作用。方法 用地高辛标记多相探针方法,原位检测大鼠纹状体边缘区内NMDA 2B受体表达。结果 原位杂交结果发现NMDA 2B受体mRNA阳性信号在纹状体内分布不均匀,主要见于尾壳核,在尾壳核和苍白球间的边缘区部位可见中等大小梭形神经元,呈密集的带状分布,而苍白球只有少量的阳性胞体。结论 大鼠纹状体边缘区可以合成NMDA 2B受体,推测边缘区的学习记忆功能与NMDA受体有关。