重型乙型肝炎患者肝组织中人纤维介素基因的表达及意义

目的 研究人纤维介素基因(hfgl2凝血酶原酶／墟皿)在重型乙型肝炎患者肝组织内蛋白及mRNA水平的特异性表达,hfgl2表达的细胞类型及其与纤维蛋白沉积、微血栓及肝细胞坏死形成之间的关系。方法采用免疫组化法研究了23例重型乙型肝炎、13例慢性乙型肝炎、14例乙型肝炎肝硬化患者的肝组织及重型乙型肝炎患者的肝外组织中蚓2的表达,同时制备hfgl2cDNA探针并对上述组织进行原位杂交以了解其在mRNA水平的表达。对枯否氏细胞表面标志CD68、纤维蛋白进行了检测。进一步对在重型肝炎肝组织中hfgl2凝血酶原阳性标本进行了hfgl2凝血酶原酶和纤维蛋白双染色。结果21例重型乙型肝炎患者肝组织中可见hfgl2表达,而在慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化患者的肝组织、重型乙型肝炎肝炎的肝外组织均无hfgl2表达。重型乙型肝炎肝组织枯否氏细胞明显增生活化,主要分布于炎性坏死区,表达hfgl2之细胞主要为活化枯否氏细胞和血管内皮细胞,邻近组织发现有纤维蛋白的沉积和微血栓的形成。结论hfgl2在重型乙型肝炎肝组织活化枯否氏细胞中的异常表达,激活凝血酶原,启动局部的凝血过程,导致纤维蛋白的沉积、微血栓的形成、微循环障碍和局部炎性反应,并最终引发肝细胞大量坏死,提示hfgl2高表达是重型肝炎肝细胞坏死重要分子机制之一。     

人纤维介素在急性排斥反应时移植肾组织中的表达及意义

目的探讨急性排斥反应时移植肾组织中人纤维介素[human子fibrinogen-like protein2(hfgl2)／fibroleukin]的表达及其意义。方法应用免疫组化法检测31例急性排斥移植肾穿刺活检标本中hfgl2的表达情况,确定阳性表达细胞的细胞类型。做抗纤维蛋白染色、微血栓染色,观察急性排斥反应时纤维蛋白沉积及微血栓分布情况,同时做抗hfgl2和抗纤维蛋白双染色,观察hfgl2的局部促凝作用与纤维素沉积的关系。结果29例急性排斥标本中可见hfgl2表达,主要在肾小管上皮细胞、间质浸润细胞和部分黏附、浸润于血管内皮及肾小管上皮细胞间的炎性细胞。间质中部分hfgl2阳性表达细胞的临近区域及部分hfgl2阳性肾小管的管腔内可见纤维蛋白沉积。结论hfgl2在人同种肾移植急性排斥反应中异常表达,局部激活了血管内、外的凝血酶,导致纤维蛋白的沉积和微循环障碍,从而进一步加重了急性排斥反应时的组织病理损害。hfgl2有可能成为干预急性排斥反应进程的新靶点。     

人纤维介素基因真核表达载体的构建及表达

目的：构建人纤维介素（hfgl 2）基因的真核表达载体，并在中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中表达。方法：提取人外周血单个核细胞的总RNA，逆转录得到cDNA，以其为模板，PCR扩增hfgl 2 cDNA片段，将目的片段通过T载体过渡克隆至表达载体pcDNA3．1，将重组质粒转染CHO细胞并制作细胞爬片，对爬片进行免疫组化染色，显微镜下观察并摄片。结果：扩增出1．3kb的目的片段，并将其克隆至pcDNA3．1，经酶切鉴定和测序鉴定无误；重组质粒转染CHO细胞，细胞爬片免疫组化染色可见细胞质中存在明显的阳性棕染。结论：成功构建hfgl 2基因的真核表达载体，为进一步探讨其功能学和干预研究奠定了基础。     

纤维介素在硬皮病血管病变中的表达

目的 探讨纤维介素在硬皮病血管病变中的作用。方法 运用免疫组织化学方法检测20例硬皮病患者和10例正常人皮肤组织连续切片中的纤维介素和纤维蛋白。结果 病变血管的内皮细胞及血管周围巨噬细胞和淋巴细胞内可见多量纤维介素表达,呈胞膜型和浆膜型;在纤维介素阳性区域均发现有不同程度的纤维蛋白沉积,微血栓处出现多量纤维蛋白沉积。结论 在硬皮病血管病变机制中,可能存在纤维介素介导的免疫凝血途径的影响。     

IFN-γ,IL-2诱导人脐静脉内皮细胞及单核细胞hfgl2表达的研究

目的 探讨肿瘤微环境中的一些细胞因子（IFN-γ、IL-2等）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）和人单核细胞（THP-1）hfgl2表达的影响。方法 分别用免疫组化，RT-PCR方法检测HUVEC和THP-1在静息和细胞因子作用下人纤维介素（hfgl2）蛋白和mRNA水平的表达，并对细胞因子刺激前后细胞的促凝功能做了检测。结果 IFN-γ、IL-2均可明显增强hfgl2蛋白和mRNA的表达。并且刺激后的细胞出现明显升高的促凝活性（PCA），刺激后细胞的PCA产生于X因子的下游，与Ⅱ因子密切相关。结论 IFN-γ、IL-2增强hfgl2蛋白和mRNA的表达，hfgl2能直接催化凝血酶原转化为凝血酶，进而通过凝血酶的凝血依赖及非依赖途径促进肿瘤血管新生和转移。     

纤维结合蛋白胶的制备

纤维结合蛋白胶（ｆｉｂｒｉｎｇｌｕｅ）由于其优良的止血、封固及促进上皮细胞再生等性能正被人们日益广泛地应用于临床。由于纤维蛋白原（ｆｉｂｒｉｎｏｇｅｎ，Ｆｇ）是一种人血液中天然存在的生物活性物质，无毒副作用，因此，以其作为外科止血、封固、填充的生物制...     

纤维支气管镜灌注纤维蛋白原、凝血酶治疗大咯血

目的探讨经纤维支气管镜灌注纤维蛋白原、凝血酶治疗大咯血的临床价值。方法临床收治26例因大咯血而内科治疗无效的患者,经纤维支气管镜对准出血部位注入20g/L纤维蛋白原和凝血酶溶液,观察出血结果。结果 26例大咯血患者经上述治疗均立即止血,配合病因治疗并静脉应用止血药物观察均未再咯血,总有效率100%。结论经纤维支气管镜灌注纤维蛋白原、凝血酶治疗大咯血止血作用迅速,效果确切,副作用少,是治疗大咯血的有效方法。     

人白细胞介素10的克隆及分泌表达

目的：研究人白细胞介素10（hIL-10)的高效分泌表达。方法：根据Genbank报道的hIL-10基因序列，人工合成hIL-10基因，并将某些稀有密码子替换成E.Coli偏爱密码子，克隆至pUC18质粒中，测序结果与预期一致，将hIL-10基因克隆至PET22b，构建分泌表达克隆PET22b-hIL-10，经IPTG诱导在大肠杆菌BL21（DE3）中表达hIL-10天然蛋白。结果：SDS－PGAE电泳及凝胶密度扫描分析显示，重组蛋白分子量约为18KD和21KD(含信号肽），不同温度条件下重组蛋白的表达状态和表达量不同，结论：18摄氏度重组蛋白hIL-10的表达量为7．6％。     

可溶性Fas及白细胞介素-2受体在恶性肿瘤病人血清中的表达

①目的 探讨恶性肿瘤病人血清可溶性Fas（sFas）和可溶性白细胞介素-2受体（sIL-2R）的表达水平。②方法 应用ELISA法测定了52例恶性肿瘤病人和20例正常对照者血清中sFas和sIL-2R的表达水平。③结果 肿瘤病人血清可溶性Fas表达水平明显高于正常对照组且与肿瘤种类无关。肿瘤病人血清sIL-2R水平明显高于正常对照组，与其他恶性肿瘤相比，肝癌病人血清sIL-2R增高明显。肿瘤病人血清可溶性Fas和sIL-2R水平呈正相关。④结论 肿瘤病人血清可溶性Fas和sIL-2R表达水平明显升高，为揭示肿瘤发生、发展和逃避免疫监视提供了一个可能的机制。     

C-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义

为探讨Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白在乳腺癌中的表达及其临床意义,采用免疫组化ＬＳＡＢ法对１０６例乳腺癌标本进行了Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白检测。结果：Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达阳性率为６３．２１％（６７／１０６）;生存时间≤５年及＞１０年者,其Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白表达阳性率分别为８１．６３％和３４．２９％。由此提示：Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白过度表达与乳腺癌的临床分期晚、组织学分级高及腋窝淋巴结转移有关。Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白的过度表达是判断乳腺癌预后的一个重要因素,可将Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白检测作为乳腺癌的常规检测指标之一。     

基质金属蛋白酶-2及其抑制因子-2在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及其抑制因子-2（TIME-2）在甲状腺癌中的表达及其与甲状腺癌生物学行为的关系。方法采用免疫组织化学S-P法对55例甲状腺癌组织，20例甲状腺瘤组织，5例癌旁正常甲状腺组织MMP-2、TIMP-2进行检测，并进行r检验及等级相关分析。结果免疫组化结果显示MMP-2、TIMP-2蛋白在甲状腺癌中表达极显著高于癌旁正常甲状腺组织和甲状腺瘤组织（P〈0．01）。MMP-2蛋白表达率随甲状腺癌临床分期递增，肿瘤浸润程度的升高，淋巴结转移发生而上调。TIMP-2蛋白表达率随甲状腺癌临床分期递增，肿瘤浸润程度的升高，淋巴结转移发生而下调。结论MMP-2和TIMP-2蛋白的表达与甲状腺癌临床分期、淋巴结转移情况，肿瘤浸润程度有密切关系。检测甲状腺癌组织中MMP-2和TIMP-2蛋白的表达，尤其是测定MMP-2、TIMP-2比率，对判断甲状腺癌侵袭与转移，估计其预后有一定意义。     

MUC4和ErbB2在胰腺癌中的表达及临床意义

目的 探讨MUC4和ErhB2在胰腺癌中的表达及临床意义。方法 免疫组化SP法检测60例胰腺癌．12例慢性胰腺炎及8例正常胰腺组织标本中MUC4和ErbB2蛋白的表达。结果 MUC4和ErbB2在胰腺癌中的表达率较慢性胰腺炎及正常胰腺组织均明显升高（P＜0．01）；ErbB2随胰腺癌病理分化程度的降低．阳性表达率逐渐增高（P〈0．05）；MUC4和ErbB2在临床Ⅲ～Ⅳ期胰腺癌中的表达率均明显高于Ⅰ～Ⅱ期（P〈0．05），在伴淋巴结转移的39例胰腺癌患者中的表达率亦较无淋巴结转移者明显升高（P＜0.05或P＜0.01）。结论 MUC4可能是一个特异的胰腺癌肿瘤相关标志物．与ErbB2共同在胰腺癌的发生、发展中发挥重要作用。     

PTEN蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义

目的研究PTEN蛋白在前列腺癌组织中的表达及其临床意义。方法免疫组化S-P法测定29例前列腺癌(Pca)与20例前列腺增生(BPH)组织切片中PTEN蛋白的表达。结果 20例BPH中18 例(90．0％)、29例Pca中12例(41．4％)PTEN有不同程度表达,差异有显著性(P<0．05)。Pca中Gleason评分2～4分与5～7分两组间表达无差异(P>0．05),但此两组与8～10分组比较均有显著性差异(P<0．01);高分化与低分化组间表达有显著差异(P<0．01);临床A、B期与C、D期表达差异性显著(P<0．01)。Spearman等级相关分析PTEN蛋白在前列腺癌中的表达随肿瘤进展而降低。结论将PTEN作为诊断并预测Pca进展的肿瘤标记物有一定的临床意义。     

AKT2和FN蛋白在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的 探讨上皮性卵巢癌中蛋白激酶B2(AKT2)及纤维连接蛋白(FN)的表达及其临床意义.方法 采用免疫组织化学SP法及半定量分析方法,检测上皮性卵巢癌(n=50),卵巢良性上皮性肿瘤(n=19)及正常卵巢组织(n=13)中AKT2及FN的表达,并分析AKT2和FN与上皮性卵巢癌病理学分级、临床分期的相关性.结果 AKT2主要表达在细胞质,上皮性卵巢癌中AKT2表达显著高于卵巢良性肿瘤及正常卵巢组织(均P＜0.01);FN主要分布于间质,与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤比较,上皮性卵巢癌组织FN表达明显降低(均P＜0.01);且AKT2、FN表达强度与卵巢癌病理分级及临床分期密切相关(P＜0.01).两者在肿瘤中的表达呈相反的趋势.结论 AKT2表达越高,间质FN表达越低,上皮性卵巢癌浸润程度越高,越容易复发、转移.AKT2、FN的表达可作为临床判断上皮性卵巢癌恶性程度及评估预后有价值的指标.     

Bcl-2蛋白质在膀胱癌中的表达及其临床意义

目的探讨膀胱癌组织中Bcl-2蛋白质表达及其临床意义。方法用免疫组化法,检测石蜡包埋膀胱癌组织(78例)和癌旁组织(20例)中Bcl-2蛋白质的表达,分析其表达水平与膀胱癌临床分期、病理分级及转移的关系。结果(1)Bcl-2蛋白质在膀胱癌组织中表达的阳性率为46.1%(36/78例),癌旁组织5%(1/20),膀胱癌阳性表达率高于癌旁组织(P<0.01);(2)Bcl-2蛋白质的高表达与膀胱癌的临床分期、病理分级和转移相关(P<0.05)。结论检测Bcl-2蛋白质在膀胱癌中的高表达状况,可为膀胱癌的诊断及预后判断提供实验依据。     

CerbB-2蛋白在胃癌组织中的表达及临床意义

目的:研究胃癌中CerbB-2表达的临床意义,为胃癌靶向治疗奠定理论基础。方法:搜集118例手术后胃癌病理组织,通过免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)技术检测人类表皮生长因子受体2(CerbB-2基因)在胃癌(gastric carcinoma,GC)组织中的表达,分析CerbB-2表达与临床病理参数之间的相关性。结果:免疫组化结果显示118例胃癌细胞中CerbB-2阳性总表达率为24.6%。CerbB-2表达与病理类型、脉管侵犯和神经侵犯有关。肠型胃癌的表达率(38.3%)明显高于弥漫型胃癌(18.4%,P<0.05)。CerbB-2蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、肿瘤侵袭深度、TNM分期无关。结论:胃癌中CerbB-2蛋白的表达与胃癌的某些生物学行为有关,且肠型胃癌CerbB-2蛋白表达率高,故CerbB-2阳性胃癌患者可能为曲妥珠单抗靶向治疗的主要人群,有可能从靶向治疗中获益。     

人错配修复基因2、细胞增殖核抗原在宫颈癌组织中的表达及意义

目的 研究判定宫颈癌患者预后的分子生物学指标。方法 通过免疫组织化学方法 观察人错配修复基因2（hMSH2）、细胞增殖核抗原（Ki-67）在宫颈鳞癌、腺癌组织中的表达。结果 在宫颈癌组织中hMSHz、Ki-67阳性表达率高于正常宫颈组织（均P〈0．01）；hMSH2高表达与宫颈癌淋巴结转移、癌细胞分化程度密切相关（均P〈0．05）；hM-SH2表达阳性者Ki-67表达强度明显高于hMSH2表达阴性者（P〈0．05）。结论 hMSH2、Ki-67可能参与宫颈癌的发生、发展及转移过程，hMSH2在宫颈癌中的过表达与细胞增殖密切相关。     

前列腺癌E2F3蛋白的表达及临床意义

目的探讨前列腺癌组织中E2F3蛋白的表达及临床意义。方法应用免疫组化EliVisionTMplus二步法,检测49例前列腺癌(prostate cancer,PCa),20例良性前列腺增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)及10例肾移植正常前列腺组织(nor-mal prostate,NP)中E2F3蛋白的表达,分析其表达与肿瘤分级、分期及血清PSA和预后间的关系。结果前列腺癌中E2F3的水平明显高于BPH(P<0.05)及NP(P<0.05),且与PCa病理分级和临床分期与血清PSA及预后有密切的联系。结论 E2F3可作为PCa新的标志物,检测E2F3有助于判定PCa恶性程度及预后。     

朊蛋白在胃癌组织中的表达及其意义

目的　研究朊蛋白 (PrP)在胃癌组织中的表达 ,探讨其与胃癌发生及发展关系。方法　采用免疫组化的方法测定PrP在 36例胃癌组织和 30例胃良性病变组织中的表达。结果　PrP在胃癌组织和胃良性病变中均有表达 ,但在胃癌组织中的表达高于胃良性病变组织 (P <0 0 5 ) ,PrP在低、中分化性胃癌中的表达高于高分化型胃癌 (P <0 0 5 )。结论　PrP可能在胃癌的发生及发展的过程中发挥作用 ,并且与胃癌的分化程度有关系