骨髓间充质干细胞移植治疗急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠*☆

背景：国内多采用药物治疗和高压氧治疗一氧化碳中毒迟发性脑病,但存在疗程长,见效慢,花费高等问题。 目的：观察骨髓间充质干细胞移植治疗一氧化碳中毒迟发性脑病前后神经元及细胞凋亡的变化。 方法：将SD大鼠抽签随机分为假手术组、对照组与干细胞移植组。制作一氧化碳中毒迟发性脑病模型后,干细胞移植组在造模后第0,3,6,12,24,72小时及1周时脑内注射同种异体骨髓间充质干细胞,对照组不进行细胞移植;假手术组扎闭颈外动脉,用PBS代替细胞悬液。 结果与结论：造模后3,6,12,24 h干细胞移植组脑内神经元核心抗原表达明显高于对照组与假手术组(P < 0.01),干细胞移植各组脑内神经元核心抗原表达无明显差异(P > 0.05)。造模后0,3,6 h干细胞移植组脑内细胞凋亡平均吸光度值明显低于对照组与假手术组及其他干细胞移植组(P < 0.05),且移植后第1周明显低于第2,3,4周(P < 0.05)。提示在一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠体内移植间充质干细胞可以增加成熟神经元数量,其机制与减少细胞凋亡有关;移植的最佳时机为发病后0~24 h之间,细胞移植后的积极作用在第1周最明显。关键词：一氧化碳中毒迟发性脑病;骨髓间充质干细胞;神经元;凋亡;干细胞移植 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.19.025     

骨髓间充质干细胞移植急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠星形胶质细胞及髓鞘的变化

背景：国内有关一氧化碳中毒迟发性脑病治疗的报道,多采用药物治疗和高压氧治疗,但存在治疗疗程长,见效慢,花费较高等问题。 目的：首次观察骨髓间充质干细胞移植治疗一氧化碳中毒迟发性脑病前后星形胶质细胞及神经髓鞘的变化。 方法：以随机抽签方法将SD大鼠分为3组：对照组、假手术组及干细胞移植组。采用腹腔注入一氧化碳方法制作一氧化碳中毒迟发性脑病模型,干细胞移植组在注射后第0,3,6,12,24,72小时及1周时将同种异体骨髓间充质干细胞经左侧颈动脉植入到大鼠脑内;假手术组扎闭颈外动脉,用PBS代替细胞悬液;对照组不进行细胞移植。移植后1,2,3,4周采用免疫组织化学的方法检测胶质纤维酸性蛋白和固绿-FCF染色法观察髓鞘着色情况。 结果与结论：造模后6,12,24 h干细胞移植组大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达明显高于对照组及假手术组(P < 0.05),干细胞移植组移植后1~4周大鼠脑内胶质纤维酸性蛋白表达差异无显著性意义(P > 0.05)。造模后6,12,24 h干细胞移植组大鼠脑内髓鞘平均吸光度明显高于对照组及假手术组(P< 0.05),且细胞移植后第2周明显高于第1,3,4周(P < 0.05)。 提示经左侧颈动脉在一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠体内移植骨髓间充质干细胞可以增加星形胶质细胞反应性,促进髓鞘再生,移植的最佳时机为发病后6~24 h,细胞移植后的积极作用在一两周最明显。     

高压氧改善一氧化碳中毒后迟发性脑病大鼠学习记忆能力及可能机制

目的探究高压氧改善一氧化碳中毒后迟发性脑病大鼠学习记忆能力可能的机制。方法选择雄性SD(Sprague Dawley)大鼠32只,鼠龄3个月,体质量(220±10)g。随机数字法分为对照组(NC组)、一氧化碳中毒组(COP组)、一氧化碳中毒后迟发性脑病组(DNS组)、高压氧治疗组(HBO组),每组8只。利用腹腔注射空气建立NC组模型;利用腹腔注射CO气体、Morris水迷宫、动物高压氧舱建立大鼠COP组、DNS组及HBO组模型。通过Morris水迷宫采集各组大鼠平均逃逸潜伏期、平台穿越次数、平台象限游泳距离等参数评估其学习记忆能力,通过流式细胞仪检测海马神经细胞凋亡程度;通过免疫组织化学染色法及蛋白免疫印迹法检测各组大鼠海马组织c-Jun蛋白表达情况,并将c-Jun蛋白表达情况与各参数进行双变量相关分析。结果与NC组相比,COP组、DNS组、HBO组学习记忆能力下降;HBO组学习记忆能力较DNS组提高(P0.05),与NC组相比,COP组、DNS组、HBO组海马神经细胞凋亡程度上升;HBO组海马神经细胞凋亡程度较DNS组下降。与NC组相比,COP组、DNS组、HBO组大鼠海马组织中c-Jun蛋白表达升高(P0.05);HBO组大鼠海马组织中c-Jun蛋白表达较DNS组下降(P0.05)。双变量相关分析结果显示,COP组、DNS组、HBO组中c-Jun蛋白表达与平均逃逸潜伏期呈正相关,与平台穿越次数、平台象限游泳距离呈负相关。结论一氧化碳暴露,尤其是一氧化碳中毒后迟发性脑病的发生可以引起c-Jun蛋白过度表达,导致学习记忆能力下降。高压氧治疗能够改善一氧化碳中毒后迟发性脑病大鼠学习记忆能力,其机制可能与调控海马组织c-Jun蛋白表达相关。     

一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠模型复制方法

目的：复制一氧化碳（CO）中毒迟发性脑病大鼠模型。方法：50只Wistar大鼠随机分为1000 ppm组、1500 ppm组、1650 ppm组、1800 ppm组和对照组共5组，每组10只。每组中毒箱分别通入浓度为1000 ppm、1500 ppm、1650 ppm、1800 ppm的CO混合气体，对照组通入空气。连续通气12h。利用迷宫试验评估动物的智力状态。迟发性脑病大鼠诊断标准为中毒3d后、28d内出现昏迷或迷宫实验正确入臂次数少于3次者。采用TUNEL法和透射电镜等双重方法检测大脑皮质、海马区细胞凋亡情况。结果：1500 ppm组、1650 ppm组均有4只大鼠出现迟发性脑病表现，1000 ppm组和对照组大鼠未出现迟发性脑病表现，1800 ppm组通气5 h有3只大鼠死亡。两种方法检测凋亡细胞数，1000 ppm组均少于5.00%，对照组均少于1.60%，1500 ppm组均多于5%-65%，1650 ppm组均多于10%-80%。结论：建立大鼠CO中毒迟发性脑病模型以CO浓度1500-1650 ppm、吸入时间12 h比较适宜。     

活化蛋白-1 在急性一氧化碳中毒迟发性脑病大鼠海马的表达变化

目的:观察急性一氧化碳中毒后不同时间点大鼠海马AP-1 的表达变化。方法:腹腔注射一氧化碳的方法制备一氧化碳中毒迟发性脑病模型,HE 染色观察大鼠海马区病理变化,免疫组化及Western blot 法检测AP-1 的表达水平,TUNEL 染色计数海马CA1 区凋亡神经元。结果:HE 染色,空气组(AC 组)、空白组(BC 组)各时间点海马区细胞形态正常;一氧化碳组(CO 组)海马区细胞肿胀、细胞数目减少,排列紊乱,细胞间隙扩大,细胞核碎裂、深染、固缩。免疫组化:CO 组各时间点AP-1 表达量均高于AC 组及BC 组,3 d 达峰值,组内第3 天与其余各时间点比较差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot:AP-1 表达在时间分布趋势上与免疫组化结果一致。TUNEL 染色:CO 组各时间点凋亡指数均较AC 组、BC 组多,于毒染后7 d 达高峰差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大鼠海马区AP-1 表达增高,可能进一步导致细胞凋亡和炎症免疫反应,成为DEACMP 发病的重要机制之一。     

36例急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的P300电位分析

目的　了解急性一氧化碳中毒后迟发性脑病与 P30 0电位之间的联系 ,为诊疗本病提供更多的依据。方法　对 36例急性一氧化碳中毒后迟发性脑病患者与 4 0例健康者分别进行了 P30 0测定和智商测定 ,并将两组结果进行了比较。结果　患病组与对照组比较 ,P30 0电位成份中 N2、P3潜伏期延长 ,P3波幅降低与对照组存在显著性差异 ( P<0 .0 1 )。智商测定中 1 1分量表得分低于对照组 ,存在显著性差异 ( P<0 .0 1或 P<0 .0 5 )。结论　P30 0电位对急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的认知功能及疗效判定有一定的价值。     

PDTC 对急性CO 中毒迟发性脑病大鼠海马区NF-κB 和C-myc 表达的影响

目的:探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对急性CO中毒迟发性脑病(DEACMP)大鼠海马区NF-κB和C-myc表达水平的调控及对神经细胞凋亡的影响。方法:按照随机数字表法将经水迷宫实验筛选后的150只成年健康SD雄性大鼠分为空气对照组(NC组),CO中毒组(CO组),CO中毒+PDTC组(PCO组),每组50只。采用分次腹腔注射纯品CO气体法制备DEACMP大鼠模型,PCO组于首次注射CO气体后0.5 h腹腔注射PDTC稀释液,1次/d,直到处死。于染毒后1 d、3 d、7 d、14 d、21 d,从三组中分别选取10只大鼠,采用Morris水迷宫实验验证大鼠学习记忆能力,免疫荧光法检测海马CA1区NF-κB和C-myc蛋白的动态表达情况,苏木精-伊红染色及TUNEL荧光染色检测海马CA1区的细胞凋亡情况。结果:与NC组对比,染毒后14～21 d CO组逃避潜伏期明显延长(P0.01),穿越平台次数显著减少(P0.01);CO组海马CA1区NF-κB和C-myc蛋白表达增多(P0.05),在染毒后1 d即明显升高,于染毒后3～7 d达峰值(P0.05);CO组海马CA1区神经细胞凋亡明显(P0.05),在染毒后7 d达高峰(P0.05)。PCO组大鼠行为学改变介于NC组和CO组之间,海马CA1区NF-κB、 C-myc蛋白表达和细胞凋亡在染毒3 d以后较CO组明显减少(P0.05),但仍高于NC组(P0.05)。结论:NF-κB、C-myc持续过量表达可加剧急性CO中毒所致的神经细胞凋亡,PDTC通过阻断NF-κB信号通路,减少凋亡因子C-myc的表达,减轻海马CA1区神经元损伤,从而达到改善DEACMP大鼠认知功能障碍的作用。     

人脐血单个核细胞移植治疗急性一氧化碳中毒后迟发脑病1年随访

背景：研究报道在特定的体内外环境下,脐血间充质干细胞能够诱导分化成为包括神经干细胞在内的多种组织细胞。 目的：评价人脐血单个核细胞经腰穿途径移植后治疗急性一氧化碳中毒后迟发性脑病的疗效及安全性。 方法：一氧化碳中毒后迟发性脑病患者60例随机分为2组。对照组给予高压氧及药物治疗;治疗组采用鞘内注射法将经密度梯度离心法分离出的人脐血单个核细胞移植到一氧化碳中毒性脑病患者的蛛网膜下腔,余治疗方法同对照组。分别于人脐血单个核细胞移植前、移植后3,9,12个月对患者进行简易精神状态检查法、改良Asworth肌肉痉挛程度分级及日常生活量表评分检查;比较两组患者MRI变化;同时对随诊患者行胸片、心电图及血生化检查,客观评价人脐血单个核细胞移植的安全性。 结果与结论：人脐血单个核细胞移植3,9,12个月,治疗组Asworth肌肉痉挛程度分级评分均显著低于对照组(P=0.032);移植后9,12个月简易智力状况检查法及日常生活量表评分均显著高于对照组(P < 0.05);两组患者神经功能在各时间点的变化趋势相似。人脐血单个核细胞移植后12个月MRI检查结果显示,治疗组患者MRI改善程度较对照组明显。提示鞘内注射移植人脐血单个核细胞治疗一氧化碳中毒后迟发脑病疗效优于高压氧治疗。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病模型大鼠海马IL-1α表达的影响

目的:探讨雷公藤内酯醇对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠海马白细胞介素-1α(IL-1α)表达的影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组及用药组,模型组及用药组大鼠双侧海马各一次注射Aβ1-40,对照组大鼠双侧海马注射等量生理盐水,模型制作成功后,用药组大鼠每日腹腔注射雷公藤内酯醇0.4mg/kg,共15d。采用免疫组织化学和RT-PCR方法检测IL-1α蛋白和mRNA在大鼠海马的表达。结果:免疫组织化学染色显示,模型组大鼠海马IL-1α阳性细胞数和平均光密度明显高于对照组(P0.01),用药组大鼠海马IL-1α阳性细胞数和平均光密度较模型组明显减少(P0.05或0.01)。RT-PCR结果显示,模型组大鼠海马IL-1αmRNA水平明显高于对照组(P0.01),用药组大鼠海马IL-1αmRNA水平较模型组明显下降(P0.01)。结论:雷公藤内酯醇可抑制AD模型大鼠海马IL-1α的表达。     

神经节苷脂对体外培养一氧化碳损伤少突胶质细胞Nogo-A的影响

背景：Nogo-A蛋白是表达于少突胶质细胞的神经元轴突生长抑制因子,推测其可能与一氧化碳中毒后迟发性脑病关系密切。单唾液酸四己糖神经节苷脂可改善一氧化碳中毒所致的神经系统损害,其作用是否与少突胶质细胞上Nogo-A蛋白有关目前尚无报道。 目的：从少突胶质细胞Nogo-A的角度探讨神经节苷脂对神经细胞一氧化碳损伤后保护的机制。 方法：体外培养大鼠视神经少突胶质细胞。实验分为3组：对照组、一氧化碳组、单唾液酸四己糖神经节苷脂组。后两组在含有体积分数1%一氧化碳的密室中培养,单唾液酸四己糖神经节苷脂组预先在培养液中加入5 mg/L单唾液酸四己糖神经节苷脂。采用RT-PCR及细胞免疫组织化学观察6,24,48 h少突胶质细胞Nogo-A mRNA及其蛋白质的表达。 结果与结论：一氧化碳组6,24及48 h各间点Nogo-A mRNA积分吸光度比值、Nogo-A蛋白质表达的累计吸光度值均显著高于对照组(P < 0.05);一氧化碳处理后24 h,单唾液酸四己糖神经节苷脂组Nogo-A mRNA积分吸光度比值、蛋白质表达的累计吸光度值均显著高于对照组(P < 0.05),但低于一氧化碳组(P < 0.05);Nogo-A mRNA水平与蛋白质表达具有线性相关性(r = 0.95)。提示一氧化碳本身可使少突胶质细胞进入活跃的功能状态,提高Nogo-A的转录和翻译水平;Nogo-A蛋白质表达的增加为其mRNA水平水平提高所致;单唾液酸四己糖神经节苷脂对神经细胞急性一氧化碳损伤的保护作用与抑制少突胶质细胞Nogo-A表达有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

血红素氧合酶系统对一氧化碳中毒后体外培养少突胶质细胞Nogo-A的影响

BACKGROUND: Cerebral white matter demyelination is outstanding in the images of delayed encephalopathy after acute carbon monoxide (CO) poisoning. Since Nogo-A and Nogo-receptor are expressed in onoligodendrocytes and neurons respectively, we infer that Nogo-A system is involved in brain injury after acute CO poisoning and related to delayed encephalopathy after acute CO poisoning. Endogenous CO is a gaseous messenger, which is the metabolic product of hemeoxygenase. There is no report about the CO effect on Nogo-A system till now.OBIECTIVE:To in vitro culture oligodendrocytes using endogenous CO, inhibit the activity of hemeoxygenase system using zinc protoporphyrin-IX (ZnPPIX) and observe the variation of Nogo-A in oligodendrocytes at mRNA and protein levels.METHODS:Rat oligodendrocytes cultured in vitro were divided into control, CO, ZnPPIX groups. Cells in the CO and ZnPPIX groups were treated with 1% CO directly, In the ZnPPIX group, 10 μmol/L ZnPPIX was added into the culture medium before CO treatment. The expressions of Nogo-A mRNA and protein at 6, 24, 48 hours after culture were compared. Differences in the peak levels of Nogo-A mRNA and protein between CO and ZnPPIX groups were detected using RT-PCR and immunohistochemistry respectively.RESULTS:The expression levels of Nogo-A mRNA and protein were significantly higher in the CO group than the control group and reached the peak at 24 hours of culture. Compared with the CO group, oligodendrocytes cultured with ZnPPIX showed higher expressions of Nogo-A mRNA and protein at 24 hours of culture. These findings suggest that except the influence of hypoxia occurring in CO poisoning, exogenous CO increases the expression of Nogo-A in cultured oligodendrocytes in vitro, and the heme oxygenase system can inhibit the expression of Nogo-A mRNA and protein.     

Curcumin 对注射脂多糖大鼠肺脏血红素氧合酶-1表达的影响

目的：探讨活化蛋白-1（AP-1）阻断剂curcumin对注射脂多糖大鼠肺组织血红素氧合酶（HO-1）表达的转录调节机制。 方法： 18只大鼠随机分为3组：对照组（经舌静脉注入等量生理盐水）、脂多糖（LPS）组（经舌静脉注入LPS 5 mg·0.5 mL-1·kg-1）和LPS+curcumin组（经腹腔注入AP-1阻断剂curcumin 20 mg·0.5mL-1·kg-1，20 min后再注入LPS 5 mg·0.5 mL-1·kg-1）。给药7 h后杀死动物留取肺组织，应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Westren 印迹法分别检测HO-1 mRNA和蛋白的表达，生化方法检测肺组织匀浆碳氧血红蛋白（HbCO）含量，间接代表肺组织中一氧化碳（CO）含量。 结果： LPS组大鼠肺组织HO-1 mRNA和蛋白的表达水平及肺组织CO含量高于对照组（均P<0.01），而LPS+curcumin组肺组织HO-1 mRNA、蛋白表达及CO含量明显低于LPS组（均P<0.01）。 结论： LPS攻击的大鼠肺组织中HO-1基因转录可能是通过激活AP-1进行调控的。     

大鼠急性一氧化碳中毒迟发性脑病模型中干预剂叔丁基对苯二酚对Nrf2 及HO-1 表达的影响

目的:初步探讨大鼠急性一氧化碳中毒迟发性脑病(DEACMP)模型中干预剂叔丁基对苯二酚(tBHQ)前后脑组织海马区核因子E2 相关因子2(Nrf2)及其下游靶基因血红素加氧酶1(HO-1)的变化,从而进一步研究DEACMP 的发病机制,同时为其靶向治疗的研究提供一定的实验基础。方法:将240 只大鼠按随机数字表法分为一氧化碳中毒组(CO 组)、空气对照组(AC 组)、一氧化碳+3%乙醇组(EC 组)、一氧化碳+tBHQ 组(TC 组),再将各组大鼠按染毒后1、3、7、14、21、28 d 随机分为6 个亚组,随后用Morris 水迷宫试验观察大鼠行为学表现,免疫组织化学及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠干预剂tBHQ 前后Nrf2 及HO-1 的表达变化,TUNEL 染色检测细胞凋亡情况。结果:CO 组、EC 组、TC 组大鼠海马区Nrf2 及HO-1表达均表现为染毒后第1 天升高,3 d 达高峰,随后逐渐下降的趋势,各时间点与AC 组比较差异均有统计学意义,TC 组与CO组比较Nrf2 及HO-1 表达增高,各亚组比较差异均有统计学意义。CO 组、EC 组、TC 组大鼠与AC 组比较凋亡细胞随时间明显增多,且均表现为增高-高峰(7 ~14 d)-降低的趋势,TC 组与CO 组比较凋亡细胞(7 ~ 14 d)减少,差异有统计学意义。结论:DEACMP 的发生发展中Nrf2/ ARE/ HO-1 通路起着重要作用,tBHQ 特异性激活Nrf2 通路达到早期保护作用,有望减少或减轻DEACMP。     

血红素氧化酶1可提高脐血间充质干细胞移植梗死心肌细胞的存活率*☆

背景：血红素氧化酶1具有较强的内源性抗氧化作用,可减轻炎症反应,发挥细胞保护作用。 目的：观察血红素氧化酶1对犬脐血间充质干细胞梗死心肌移植后细胞存活率的影响。  方法：取第4代体外培养脐血间充质干细胞,用含氯化高铁血红素的培养液培养24 h,免疫组织化学法检测细胞血红素氧化酶1的表达;将细胞经LacZ报告基因标记后经冠状动脉植入犬心肌梗死区域。 结果与结论：经含氯化高铁血红素培养液培养后的脐血间充质干细胞血红素氧化酶1表达明显上调,并持续2周以上;移植犬梗死心肌区后可长期存活,存活能力明显增强。结果表明氯化高铁血红素可诱导上调犬脐血间充质干细胞血红素氧化酶1的表达,血红素氧化酶1可明显提高脐血间质干细胞梗死心肌移植后的细胞存活率。 关键词：血红素氧化酶1;脐血;间充质干细胞;细胞移植;存活率 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2012.06.017     

血红素氧化酶-1mRNA及其蛋白表达在动脉粥样硬化发病中的变化

目的研究在动脉粥样硬化发病过程中内源性一氧化碳的合成酶血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ和蛋白表达的变化规律。方法通过原位杂交、免疫组化染色等指标观察动脉粥样硬化发病过程中内源性一氧化碳的合成酶血红素氧化酶－１基因及其蛋白的变化规律。结果１发现动脉粥样硬化的发展过程中主动脉及冠状动脉壁的血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ表达有逐渐增高的趋势。并且血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ主要分布于主动脉和冠状动脉内皮细胞。２发现在动脉粥样硬化的发展过程中血红素氧化酶－１蛋白在主动脉和冠状动脉壁的表达也有逐渐增高的趋势。并且血红素氧化酶－１免疫组化主要在主动脉和冠状动脉的内皮细胞呈阳性。结论内源性一氧化碳的合成酶血红素氧化酶－１ｍＲＮＡ及其蛋白表达在动脉粥样硬化发病过程中呈逐渐增高的趋势。     

赶黄草配伍葛花对乙醇诱导下L-02肝细胞的影响

目的:探究赶黄草配伍葛花制备的含药血清对乙醇诱导的L-02肝细胞的影响及其可能机制。方法:分别制备不同配比含药血清后,将L-02肝细胞分为6组进行实验:空白对照组,模型组,赶黄草配伍葛花1∶1组、2∶1组和1∶2组,凯希莱组。MTT法检测含药血清对乙醇诱导的L-02细胞存活率的影响;酶标法检测培养液中丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)及受损细胞中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的水平;realtime PCR法和Western blot检测赶黄草配伍葛花对L-02肝细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、核因子E2相关因子2(Nrf2)和血红素加氧酶1(HO-1)mRNA及蛋白表达的影响。结果:与空白对照组相比,模型组ALT、AST及MDA水平明显升高,SOD活性明显降低(P0.01);与模型组相比,各药物组ALT、AST及MDA水平明显降低,SOD活性明显升高(P0.01)。机理研究中,与空白对照组相比,模型组TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达显著升高,Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达显著降低(P0.01);与模型组相比,各配伍组TNF-α和IL-6的mRNA和蛋白表达显著降低,Nrf2和HO-1的mRNA和蛋白表达显著升高(P0.01)。结论:赶黄草配伍葛花含药血清可能通过下调TNF-α和IL-6的表达,上调Nrf2和HO-1的表达,从而降低L-02肝细胞的炎症反应并减轻氧化应激,进而发挥治疗酒精性肝损伤的作用。     

远期缺血预适应激活热休克蛋白27、促红细胞生成素、血红素加氧酶1对肾脏缺血再灌注损伤的影响**

背景：缺血再灌注损伤是临床导致急性肾衰竭等其他疾病的重要原因,其机制为多因素、多途径的复杂的病理过程。 目的：观察肾脏进行预处理后激活热休克蛋白、促红细胞生成素和血红素加氧酶1对肾脏缺血再灌注损伤的影响。 方法：雄性C57BL/6小鼠90只随机分成3组。缺血再灌注组为右肾切除,左肾缺血25 min再灌注24 h;预适应组为双侧肾脏缺血20 min再灌注8 d后再进行缺血再灌注。假手术组开腹游离肾蒂。 结果与结论：血清肌酐和尿素氮检测预适应组和假手术组明显低于缺血再灌注组(P < 0.01);MPO染色发现缺血再灌注组大量中性粒细胞浸润(P < 0.01);PAS染色发现预适应组肾组织病理情况轻于缺血再灌注组(P < 0.05);TUNEL染色分析结果表明预适应组和假手术组细胞凋亡数明显少于缺血再灌注组(P < 0.01);预适应组热休克蛋白27 mRNA表达明显高于缺血再灌注和假手术组(P < 0.05),热休克蛋白27 mRNA于第8天时最强,促红细胞生成素、血红素加氧酶1 mRNA在24~    48 h达到峰值A,然后逐渐下降,第8天后达到峰值B,B>A,并且高于假手术组(P < 0.01)。提示远期缺血预适应激活热休克蛋白27、促红细胞生成素、血红素加氧酶1,能减少炎症因子浸润、促进肾小管细胞修复和抑制细胞凋亡从而参与肾脏内源性保护机制。     

大鼠肢体缺血-再灌注后脑HO-1表达的变化及意义

目的:观察肢体缺血-再灌注(I-R)后脑组织内诱导型血红素氧合酶(HO-1)表达的变化及意义。方法:夹闭大鼠双侧股动脉根部4h、开放2-24h复制肢体I-R模型。反转录多聚酶链反应检测脑内HO-1mRNA表达的变化;免疫组化染色法标记HO-1蛋白的组织分布;用锌原卟啉抑制HO-1活性后,光镜观察脑组织的病理学变化。结果:肢体I-R后脑组织HO-1mRNA表达水平明显高于各对照组,再灌12h表达至峰值,再灌至24h仍显著高于各对照组(P＜0.01)。肢体I-R组大脑皮质、海马等区出现大量弥散分布的HO-1免疫阳性胶质细胞,皮质及海马部分锥体细胞呈HO-1免疫阳性;抑制HO-1活性,I-R组脑组织损伤加重。结论:肢体I-R后,脑组织内胶质细胞及神经元HO-1基因表达上调,所诱生的HO-1对神经元具有保护效应。