碱性成纤维细胞生长因子基因转染对人牙周韧带细胞的作用

背景：主要来源于因正畸或阻生拔除的健康牙培养而成的人牙周韧带细胞已成为牙周组织工程理想的种子细胞来源之一。 目的：了解采用重组腺相关病毒作为载体介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染对体外培养的人牙周韧带细胞增殖及细胞周期的影响。 方法：体外培养人牙周韧带细胞, 经重组腺相关病毒作为载体介导碱性成纤维细胞生长因子基因转染,分为3组：对照组、空载病毒组、碱性成纤维细胞生长因子转染组。用RT-PCR,Western blot检测人牙周韧带细胞在转染前后碱性成纤维细胞生长因子基因和蛋白的表达。应用细胞生长曲线、四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞生长的优化作用;采用流式细胞术测定细胞周期分布的变化。 结果与结论：对照组、空载病毒组未检测到碱性成纤维细胞生长因子mRNA和蛋白表达;碱性成纤维细胞生长因子转染组碱性成纤维细胞生长因子mRNA和蛋白水平均有表达,细胞的生长速度明显增快,细胞周期G₀/G₁期减少,S期细胞数增多。各组间比较差异有显著性意义(P < 0.05)。     

碱性成纤维细胞生长因子的生物活性分析

本文报告以人脐带内皮细胞原代培养技术,CAM及多聚物载体技术检测bFGF生物活性,结果表明bFGF是机体血管新生的强烈刺激剂。bFGF对血管、神经、结缔组织、骨与软骨细胞具有多向作用,深入研究其生物效应,对于促血管新生,动脉硬化及肿瘤防治,中枢神经创伤后修复,肢体再生,晶体再生,促创伤愈合,以及人工血管的开发应用等均具有重要的实际意义。     

碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展

介绍碱性成纤维细胞生长因子对骨干细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管形成的可能作用机理，及其与其它生长因子之间的相互作用。对碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展进行综述。     

碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展

介绍碱性成纤维细胞生长因子对骨干细胞、成骨细胞、破骨细胞和血管形成的可能作用机理,及其与其它生长因子之间的相互作用。对碱性成纤维细胞生长因子骨诱导作用的研究进展进行综述。     

碱性成纤维细胞生长因子对小鼠脾脏细胞凋亡的抑制作用

目的和方法：Ｘ射线照射结合无血清培养诱导小鼠脾细胞凋亡,采用流式细胞术定量分析碱性成纤维细胞生长因子对脾细胞凋亡的抑制作用,并采用淋巴细胞转化试验「＾３Ｈ」－ＴｄＲ掺入法检测ｂＦＧＦ对脾细胞的增殖效应。结果：小鼠经过不同剂量Ｘ射线照射,脾细胞再经过不同时程无血清培养,都出现了典型了亚二倍体ＡＰ峰,１μｇ＝ｍｌ和２μｇ／ｍＬ     

碱性成纤维细胞生长因子对瘢痕成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响。方法采用细胞培养、MTT、ELISA法、氯胺T和RT—PCR法检测bFGF在不同作用剂量下对瘢痕来源的成纤维细胞生长增殖和细胞外基质（ECM）合成的影响。结果（1）MTT检测bFGF对瘢痕成纤维细胞有明确的促增殖作用，并具有剂量相关性；（2）氯胺T法显示实验组和对照组HPr含量无显著性差异，RT—PCR法显示各组Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平无明显变化；说明bFGF对瘢痕成纤维细胞胶原蛋白的合成无促进作用；（3）ELISA法表明随着bFGF作用浓度的升高，FN的表达表现为增高趋势，且以100ng／ml浓度下作用最显著。结论bFGF可以促进创面愈合，但不引起瘢痕的过度形成。     

碱性成纤维细胞生长因子对离心管内培养骺板细胞生成软骨组织的作用

背景：采用离心管技术体外培养骺板细胞的报道已很多。 目的：观察碱性成纤维细胞生长因子对离心管内培养的骺板细胞生成类骺板组织的影响。 方法：获取3周龄新西兰白兔股骨远端的骺板组织,利用组织块纱巾培养法获得骺板细胞,加入含有10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子的DMEM培养液,连续培养4周。 结果与结论：离心管内聚集的骺板细胞在含有碱性成纤维细胞生长因子的DMEM培养液中形成类骺板样组织块。在组织块外周形成类似骺软骨的生发层,中心的骺板细增殖情况良好,向肥大细胞方向分化。类骺板样组织甲苯胺蓝及番红“O”染色阳性,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色呈强阳性。说明碱性成纤维细胞生长因子能够促进离心管中的骺板细胞形成富含蛋白聚糖及Ⅱ型胶原等细胞外基质的类骺板样软骨组织。     

碱性成纤维细胞生长因子的研究进展

bFGF是一种作用广泛的细胞因子，其最显著的作用是促进细胞分裂，因此在肿瘤的发生发展、促进损伤组织修复等方面受到关注。除了通过经典的受体途径发挥作用外，高分子量bFGF还具有核转位现象，其核转位只发生在G1-S过渡期。应用酵母双杂交系统发现了能与bFGF发生相互作用的蛋白质，为研究bFGF作用的分子机制提供了有益的线索。     

血小板源性生长因子对体外培养内皮细胞碱性成纤维细胞生长因子水平的影响

目的 :观察血小板源性生长因子 (PDGF)对于培养脐静脉内皮细胞碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)水平的影响 ,探讨PDGF促进新生血管形成的机制。方法 :通过内皮细胞的培养和免疫组织化学等方法检测PDGF对缺氧和常规培养内皮细胞bFGF水平的影响以及不同浓度PDGF促bFGF表达的作用。结果 :缺氧培养与常规培养均能增加内皮细胞胞浆bFGF水平 ,且呈剂量依赖性。结论 :PDGF可能通过直接促血管形成生长因子bFGF的介导作用间接促进新生血管的形成。     

基因重组碱性成纤维细胞生长因子对大鼠视网膜神经节细胞的影响

目的:研究基因重组碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)对大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)的影响。方法:大鼠在视神经部分损伤后,球后注射生理盐水、维生素B₁₂、rbFGF,伤后4周进行轴突定量、视网膜神经节细胞定量以及RGCs凋亡的检测,观察视神经损伤修复情况。结果:伤后4周时,生理盐水和维生素B₁₂对RGCs无挽救作用,800U、1600U和2400U的rbFGF对RGCs挽救率分别为24.5%、27.3%、28.5%,800UrbFGF组、1600UrbFGF组和2400UrbFGF组未发生溃变的轴突数分别是损伤未治疗组的2.03、2.43、2.31倍。流式细胞仪检测结果显示:rbFGF治疗7d后,RGCs凋亡率显著减少。结论:rbFGF可提高视网膜神经节细胞的存活率,减少轴突溃变,有抗凋亡作用,对视神经损伤有显著的促功能修复作用。     

人牙周膜干细胞与牙周膜细胞生物学特性的比较

背景：牙周膜干细胞生物作用是目前牙周病治疗研究的热点,牙周膜成纤维细胞是其分化的终末功能细胞之一,也是其主要的支持细胞,两者生物学特性的差异研究鲜有报道。 目的：比较牙周膜干细胞与牙周膜细胞生物学特性的差异。 方法：用组织块法体外对牙周膜细胞以及单细胞克隆分离纯化后的人牙周膜干细胞两种细胞分别进行显微镜下形态观察,CCK8法检测并绘制2种细胞的生长曲线。流式细胞分析比较2种细胞的细胞周期以及细胞表面标记物的表达、实时PCR对2种细胞碱性磷酸酶、增殖细胞核抗原和Scleraxis基因进行检测。 结果与结论：牙周膜干细胞与牙周膜成纤维细胞外观差别明显,人牙周膜干细胞的生长曲线培养前5 d要低于牙周膜细胞,但在5 d后明显高于牙周膜细胞。人牙周膜干细胞与牙周膜细胞的细胞周期分别为41.1%和23.9%。表面标记物检测结果显示2种细胞虽有相似的表达,但在表达率差异有有显著性意义。实时荧光定量PCR结果显示,人牙周膜干细胞在碱性磷酸酶、增殖细胞核抗原以及Scleraxis基因的表达检测均高于牙周膜细胞。表明牙周膜干细胞在成骨增殖等生物学功能上比牙周膜细胞具有更强的潜能。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

Effect of FDC-SP on the phenotype expression of cultured periodontal ligament cells

Introduction

Recently, a novel protein, follicular dendritic cell secreted protein (FDC-SP), has been identified in human periodontal ligament (PDL) tissue and a biomolecular study suggested that the expression of FDC-SP might be associated with the expression of the PDL phenotype. The purpose of this study was to test the effect of FDC-SP on the proliferation and phenotype of PDL cells.

Material and methods

Periodontal ligament cells obtained following the 3^rd passage were exposed to various concentrations of FDC-SP. The cell proliferation was monitored by 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide(MTT) assay. Then, as a measure of osteogenic activity, the alkaline phosphatase (ALP) activity was recorded after 4, 7, and 14 days using p-nitrophenylphosphate as a substrate. Finally, total RNA was extracted and RT-PCR was performed for gene analysis.

Results

The results indicated that PDL cells exposed to 50 ng/ml FDC-SP could proliferate more rapidly. RT-PCR results showed that the mRNA expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) was obviously upregulated and the mRNA expression of osteocalcin (OCN) and bone sialoprotein (BSP) were downregulated in PDL cells exposed to FDC-SP. Moreover, two groups of PDL cells exposed to FDC-SP showed a significant decrease of ALP activity during all the culture days.

Conclusions

In sum, the findings observed in this study suggest that FDC-SP in PDL cells could positively affect the proliferation and act as a fibroblastic phenotype stabilizer by inhibiting their differentiation into mineralized tissue-forming cells.     

碱性成纤维细胞生长因子诱导非贴壁骨髓基质细胞向成骨细胞分化

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对非贴壁骨髓前体细胞(NASP)的增殖分化作用。方法：分离骨髓前体细胞体外培养，用碱性磷酸酶化学染色及图象分析测定细胞克隆数；采用免疫组化(ABC法)进行骨钙素及碱性磷酸酶(ALP)测定，研究bFGF对NASP的促增殖作用。结果：bFGF能促进NASP细胞增殖，诱导NASP细胞产生碱性磷酸酶及骨钙素。结论：bFGF主要作用于非贴壁生长的基质前体细胞，bFGF能增加骨的数量，促进骨样组织形成。     

人生长激素对人牙周膜干细胞增殖及成骨分化的影响

背景:生长激素已被证明对于非牙源性间充质干细胞的增殖和骨向分化有促进作用,但对于人牙周膜干细胞的生物学效应还不明确.目的:探讨人生长激素对人牙周膜干细胞增殖以及成骨分化的影响.方法:用含0(对照组),10,100,200μg/L人生长激素的α-MEM完全培养基干预第3代人牙周膜干细胞,分别在第1,3,5,7天采用CCK...     

碱性成纤维细胞生长因子及胰岛素样生长因子1对精原干细胞增殖凋亡影响的机制

文题释义：碱性成纤维细胞生长因子：是细胞生长和分化的重要调节因子,具有促血管生成、细胞增殖、细胞趋化、细胞迁移等活性,在细胞分化和机体发育过程中发挥重要作用。碱性成纤维细胞生长因子通过与细胞膜表面的特异性配体结合,进而引发细胞内的一系列级联反应,从而产生各种生物学效应。 胰岛素样生长因子1：是多功能细胞增殖调控因子,主要分布在肝脏中,其与胰岛素样生长因子2、胰岛素及其受体一起构成了胰岛素样生长因子家族,其对细胞生长和代谢具有多效作用。 背景：生长因子作为体外细胞培养和体内细胞生长及增殖必需的调节因子,一直被广泛的关注。 目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)与胰岛素样生长因子1(insulin-like growth facter,IGF-1)联合作用对小鼠精原干细胞增殖、凋亡的影响。 方法：从6-8 d龄昆明雄性小鼠睾丸内分离培养精原干细胞并进行鉴定。将精原干细胞接种于经丝裂霉素C处理过的胚胎成纤维细胞饲养层上,分组干预：对照组加入正常DMEM培养基进行培养;bFGF、IGF-1组分别加入含20 μg/L bFGF、20 μg/L IGF-1的DMEM培养基进行培养;bFGF+IGF-1组同时加入含20 μg/L bFGF及20 μg/L IGF-1的DMEM培养基进行培养。采用CCK-8、EDU染色法分别检测精原干细胞增殖活性,流式细胞仪检测精原干细胞生长周期和细胞凋亡情况,Western blot检测增殖和凋亡相关蛋白PCNA、Bax、Bcl-2的表达。 结果与结论：①与对照组比较,bFGF组、IGF-1组、bFGF+IGF-1组吸光度值显著升高,与bFGF组、IGF-1组比较,bFGF+IGF-1组吸光度值进一步升高(P < 0.05),EDU染色得到与CCK-8实验一致的结论;②bFGF+IGF-1组S+G₂/M期细胞比例明显高于其他3组(P < 0.05),IGF-1组、bFGF组S+G₂/M期细胞比例高于对照组(P < 0.05);③与对照组比较,bFGF组、IGF-1组、bFGF+IGF-1组凋亡细胞降低;与bFGF组、IGF-1组比较,bFGF+IGF-1组凋亡细胞进一步降低;④与对照组比较,bFGF组、IGF-1组、bFGF+IGF-1组细胞中Bax蛋白相对表达水平显著下降(P < 0.01),Bcl-2和PCNA蛋白相对表达水平均显著升高(P < 0.05)。与bFGF组、IGF-1组比较,bFGF+IGF-1组细胞中Bax蛋白相对表达水平进一步下降(P < 0.01),Bcl-2和PCNA蛋白相对表达水平进一步升高(P < 0.05);⑤结果表明,bFGF、IGF-1通过上调PCNA和Bcl-2蛋白的表达,下调Bax蛋白的表达,促进细胞增殖,抑制细胞凋亡,二者联合作用效果最佳。 ORCID: 0000-0001-5693-3713(李宏) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

不同浓度肝细胞生长因子和成纤维细胞生长因子 对大鼠肝干细胞的增殖调控

目的：初步探讨不同浓度的肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)和成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factor, FGF)对大鼠肝干细胞增殖的调控作用。方法：先将大鼠肝胎细胞分别种植A、B培养板上进行肝细胞的体外培养。A组：培养液中含有HGF,浓度分为别1,5,10,20,40,80及100 ng/mL。B组：培养液中含有FGF,浓度分别为1,5,10,20,40,80及100 ng/mL。对照组不加细胞因子。由A、B两组剂量效应获得HGF和FGF的最佳浓度。再将细胞接种于C组培养板进行培养,培养液中含有最佳浓度HGF联合上述各浓度FGF, 并用四甲基偶氮唑盐比色法(mononuclear cell direct cytotoxicity assay, MTT)分别测两组的光密度值（optical delnsity, OD）,检测出HGF与FGF的最佳浓度组合。结果：HGF和FGF浓度与肝干细胞增殖效应呈剂量依赖性（dose-dependent）。当HGF浓度为20 ng/mL,FGF浓度为10 ng/mL时,为最佳浓度组合。结论：HGF和FGF均能对肝干细胞的增殖起促进作用,并且两者有一定协同作用。     

碱性成纤维细胞生长因子诱导人间充质干细胞向心肌样细胞分化

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在体外诱导人骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌样细胞分化中的作用,及其对MSCs增殖的影响。方法用含5-氮杂胞苷(5-aza)的培养基(A组)、含bFGF的培养基(B组)、含5-aza bFGF的培养基(C组)以及普通培养基(对照组)培养人骨髓MSCs。观察细胞形态的改变;免疫细胞化学法检测α-actin、cTnT和connexin-43的表达;RT-PCR法检测Nkx2·5、GATA-4和cTnT的mRNA水平;MTT法检测MSCs的增殖。结果A组和C组的部分细胞呈肌细胞样改变,表达蛋白α-actin,cTnT和connexin43;A组和C组的cTnT、Nkx2·5和GATA-4的mRNA水平明显高于对照组,B组的Nkx2·5和GATA-4的mRNA水平明显高于对照组;B组细胞增殖明显高于对照组,A组和C组细胞增殖明显低于对照组,但C组明显高于A组。结论bFGF能明显促进MSCs增殖,与5-aza合用能更好地诱导人MSCs向心肌样细胞分化。     

bFGF在人胚胎干细胞中自我更新的研究进展

人胚胎干细胞具有自我更新和多向分化的独特生物学特性。维持人和小鼠胚胎干细胞增殖的生长因子不同,白血病抑制因子（LIF）不能维持人胚胎干细胞的生长。目前已经确定了数种维持人胚胎干细胞（hESCs）自我更新的生长因子,其中碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）信号系统是人胚胎干细胞自我更新中最重要的调节因素之一。将从bFGF及其受体在人胚胎干细胞中的表达和作用的最新进展进行综述。     

前列腺素E1联合碱性成纤维细胞生长因子干预人牙髓干细胞增殖和血管生成能力的变化

文题释义：前列腺素E1：是一种生物活性物质,广泛存在于体内各组织细胞,由BERGSRTOEM等于1960年首先分离获得,并详细研究了其分子结构,具有舒张血管、稳定细胞膜降低血小板黏附率、改善血液黏度及抗炎等作用,可促进骨髓间充质干细胞和神经干细胞的增殖、迁移,并促进细胞分泌血管内皮生长因子,进而促进血管生成。碱性成纤维细胞生长因子：是一种肝素黏合多肽,也是一种重要的潜在有丝分裂原,属于成纤维细胞生长因子家族,对细胞有丝分裂及分化具有很强的调节作用,特别是对中胚层和神经外胚层来源的细胞作用更强,可促进细胞生长,研究发现牙髓中的成纤维细胞可表达碱性成纤维细胞生长因子,在体外能明显促进人牙髓干细胞增殖。  摘要背景：前列腺素E1及碱性成纤维细胞生长因子可促使人牙髓干细胞增殖,但两者联合应用对人牙髓干细胞增殖和血管生成能力的影响还未见研究。目的：探究前列腺素E1联合碱性成纤维细胞生长因子对人牙髓干细胞增殖和血管生成能力的影响。方法：①体外分离培养人牙髓干细胞,经表面标志物检测鉴定后,分别以5,10,20,50,100 μg/L前列腺素E1及5,10,20,50,100 μg/L碱性成纤维细胞生长因子单独作用于体外培养的人牙髓干细胞,以未加药物处理的细胞作为空白对照组,采用CCK-8法分别在1,2,3 d检测人牙髓干细胞增殖情况,筛选最佳药物作用质量浓度和时间。②将体外培养的人牙髓干细胞分为4组：空白对照组、前列腺素E1组、碱性成纤维细胞生长因子组、前列腺素E1+碱性成纤维细胞生长因子组,采用CCK-8法检测人牙髓干细胞增殖情况,然后提取人牙髓干细胞条件培养基,以ELISA测定条件培养基中血管内皮生长因子、内皮抑素水平,以小管形成实验检测人牙髓干细胞条件培养基干预后人脐静脉血管内皮细胞的体外小管形成能力。结果与结论：①前列腺素E1、碱性成纤维细胞生长因子的最佳作用质量浓度均为20 μg/L,最佳作用时间为2 d;②与空白对照组相比,前列腺素E1组、碱性成纤维细胞生长因子组、前列腺素E1+碱性成纤维细胞生长因子组人牙髓干细胞相对增殖率、血管内皮生长因子水平、人脐静脉血管内皮细胞体外血管生成能力均显著升高(P < 0.05),内皮抑素水平显著降低(P < 0.05);前列腺素E1+碱性成纤维细胞生长因子组上述各指标均优于前列腺素E1组、碱性成纤维细胞生长因子组(P < 0.05);③结果表明,前列腺素E1联合碱性成纤维细胞生长因子可促进人牙髓干细胞增殖,增强人脐静脉血管内皮细胞体外小管形成能力。 ORCID: 0000-0002-7727-1883(项海东) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

流体剪切力对人牙周膜细胞作用的研究进展

为了明确流体剪切力对牙周膜细胞的作用以及为后续相关研究提供理论依据,通过查阅文献发现流体剪切力可通过miRNA-132/PI3K/mTOR信号通路、ERK/p38/JNK MAPK信号通路和Wnt/LEF-1信号通路促进牙周膜细胞成骨分化,此外,还可调控牙周膜细胞的增殖,抑制细胞的迁移,还可影响炎症因子COX-2的表达。未来可进一步研究流体剪切力对牙周膜细胞确切的增殖效应及其具体机制。