晚期糖基化终末产物受体在胰腺癌细胞增殖及 成瘤过程中的作用

目的 探讨晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation end products, RAGE）对胰腺癌PANC-1细胞增殖及转染后接种裸鼠在成瘤过程中的作用。方法 构建RAGE 短发夹RNA （shRNA),即shRNA RAGE -1、-2、-3质粒,转染胰腺癌PANC-1细胞后,采用八肽胆囊收缩素(CCK-8)法、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测shRNA RAGE 对细胞增殖、RAGE表达的影响,筛选干扰效果最好的shRNA RAGE 质粒;将转染了shRNA RAGE 质粒的PANC-1细胞接种于裸鼠皮下,观察成瘤时间,并测量计算肿瘤体积;采用RT-PCR和Western blot检测shRNA RAGE 对RAGE、基质金属蛋白酶 (matrix metalloproteinase, MMP)2和9（MMP-2和MMP-9）、核因子-κB（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells, NF-κB）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor, VEGF ）的mRNA及蛋白表达的影响,并采用免疫组化方法对肿瘤进行微血管计数,计算微血管密度。结果 转染shRNA RAGE 24 h后CCK-8检测细胞的吸光度（A）值低于对照组（ P<0.05）,且在转染48 h时最明显。RT-PCR和Western blot检测显示,shRNA RAGE -2质粒转染后下调RAGE表达效果最好。转染shRNA RAGE -2质粒的PANC-1细胞接种于裸鼠后,裸鼠成瘤时间、肿瘤体积低于shRNA RAGE -1,-3,裸鼠肿瘤组织RAGE 、MMP-2、 NF-κB、 MMP-9、 VEGF mRNA及蛋白表达低于shRNA RAGE -1,-3（ P<0.05）,其微血管密度也低于shRNA RAGE -1,-3（ P<0.001）。结论 RAGE参与了胰腺癌的发生发展过程。RAGE可影响胰腺癌肿瘤生长及微血管形成。     

β-catenin、Smad4在胰腺癌发生中的作用

目的探讨β-catenin、Smad4在胰腺癌发生、发展、转移、浸润过程中的作用。方法应用免疫组化方法检测β-catenin、Smad4在正常胰腺、胰腺癌组织中的表达。结果β-catenin在胰腺癌中的异常表达率为68.33%,明显高于正常组织(0),异常表达与年龄、性别、病理分化程度无关;与有无淋巴结转移、临床分期相关,有淋巴结转移的异常表达率明显高于无淋巴结转移,Ⅲ+Ⅳ期的异常表达率明显高于Ⅰ+Ⅱ期。Smad4在胰腺癌的阳性表达(33/60)明显低于正常组织(17/20),阳性表达与年龄、性别、病理分化程度、有无淋巴结转移、临床分期无相关性;在胰腺癌中β-catenin的异常表达与Smad4的阳性表达相关。结论β-catenin、Smad4共同参与了胰腺癌的发生,wnt/β-catenin通路和TGF-β/Smad通路可能存在交汇点。     

CUL4B、TRPM2在胰腺癌组织中的表达和临床意义

目的 探讨胰腺癌组织中E3泛素连接酶Cullin4B(CUL4B)、人瞬时受体电位M2(TRPM2)的表达及临床意义。方法 收集2019年3月—2020年3月在西安交通大学医学院附属3201医院接受手术治疗胰腺癌患者86例的癌组织和癌旁组织。采用免疫组织化学检测组织中CUL4B、TRPM2蛋白表达。采用实时荧光定量PCR检测组织中CUL4B、TRPM2 mRNA水平。Spearman秩相关分析CUL4B与TRPM2蛋白表达的关系。Kaplan-Meier曲线分析CUL4B、TRPM2蛋白表达对患者预后的影响。Cox比例风险模型分析胰腺癌预后影响因素。结果 胰腺癌组织中CUL4B、TRPM2蛋白阳性率及mRNA基因的相对表达量高于癌旁组织(χ²/t=70.245、60.224、15.741、10.976,P均<0.001)。胰腺癌组织中CUL4B与TRPM2蛋白表达呈显著正相关(r=0.720,P<0.001)。TNM分期ⅡB～Ⅲ期、淋巴结转移胰腺癌中CUL4B、TRPM2蛋白阳性率高于Ⅰ～ⅡA期、无淋巴结转移癌组织(χ²=16.5...     

5-脂氧合酶通路在ApoE基因敲除小鼠动脉硬化中的作用

目的探讨5-脂氧合酶(arachidonate 5-Lipoxygenase,5-LO)通路在ApoE-/-小鼠动脉硬化中的作用。方法将8周龄ApoE-/-雄性小鼠24只[体质量(22.42±1.21)g]随机分为2组:对照组(n=12,普通饲料)、动脉硬化模型组(n=12,高脂饲料)。16周后,病理检测分析校正斑块面积(PA/LA);RT-PCR和Western blot法检测主动脉中5-LO的表达;酶联免疫法检测白三烯B4(leukotriene B4,LTB4)和白三烯D4(leukotriene D4,LTD4)的血清水平。结果建模成功,动脉硬化模型组粥样斑块形成。动脉硬化模型组较对照组小鼠主动脉中5-LO的mRNA的表达[(0.61±0.0)vs(0.18±0.03),P<0.01]及蛋白表达[(1.53±0.18)vs(0.52±0.40),P<0.01]明显升高,血清LTB4水平[(34.79±4.47)vs(12.07±2.35),P<0.01]及LTD4水平[(2 862.48±48.77)vs(2 357.10±53.57),P<0.01]显著升高。动脉硬化模型组血清LTB4(r=0.954,P<0.01)、LTD4(r=0.946,P<0.01)水平与校正斑块面积成正相关。结论 5-脂氧合酶通路在动脉粥样硬化发病机制中起着重要作用。     

胰腺癌缺失基因(DPC4)对胰腺癌的调控机制研究

胰腺癌是临床上常见的一种消化道恶性肿瘤,近年来其发病率呈上升趋势。该文从抑癌基因DPC4的起源、结构和功能、抑癌基因DPC4对胰腺癌的调控机制等角度对抑癌基因DPC4与胰腺癌的关系进行综述。     

Smad4蛋白在胰腺癌中的表达研究

目的运用组织芯片技术,检测Smad4在胰腺癌旁组织及癌旁组织中蛋白水平的表达,明确Smad4蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义。方法选取经手术、病理证实的胰腺癌及癌旁组织各162例,构建胰腺癌组织芯片,采用免疫组化染色法检测胰腺癌及癌旁组织中Smad4蛋白的表达。结果 Smad4在胰腺癌和癌旁组织中的表达定位于细胞质和细胞核,在癌旁组织细胞质内显著高于癌组织(P<0.05),而在癌组织细胞核内显著高于癌旁组织(P<0.05)。胰腺癌及癌旁组织Smad4与肿瘤大小、病理分级均无相关性(均P>0.05);而癌旁组织中胞核Smad4的染色指数与淋巴结转移呈负相关(P<0.05)。结论 Smad4与胰腺癌的发生、发展有关,且与淋巴结转移与否相关,该基因有望成为胰腺癌早期诊断的分子指标。     

B型超声在胰腺癌早期诊断中的应用研究

目的 探讨胃肠减张、充分饮水后B型超声检查对早期胰腺癌的诊断作用。方法 对139例临床疑诊为胰腺疾病患者随机分成2组,并分别进行常规B型超声检查和行胃肠减张再充分饮水后行B型超声检查,比较两种方法对胰腺癌的诊断率。结果 常规B超探查仅30例患者有早期胰腺癌;经胃肠减张充分饮水后行B型超声探查则发现56例患者有早期胰腺癌,两组在诊断上有差异显著性。结论 胃肠减张再充分饮水后行B超检查,具有无创伤、简便易行等优点,可显著提高胰腺癌的诊断率,可作为诊断早期胰腺癌的首选方法。     

B型超声在胰腺癌诊断中误诊病例探讨

目的进一步提高B型超声诊断胰腺癌的准确率。方法我院25例患者,使用PHILIPS HD7超声诊断仪多方位、多切面扫查上腹部,对发现包块处仔细探查并详细测量与记录。对经手术、病理和其他检查证实的胰腺癌患者的超声图像进行总结分析。结果 25例胰腺癌患者中,20例B型超声诊断为胰腺癌,5例误诊。5例误诊中定位错误3例,定性错误1例,误诊为胆管结石1例。结论胰腺癌的超声诊断,与超声仪器的性能、患者腹壁透声状况和肿块与周围粘连程度有关,在很大程度上也与检查者的经验和方法有关。     

ATF4在肿瘤中的研究进展

肿瘤的发生和发展是一个多因素、多步骤和多基因参与的过程,其中不仅仅涉及肿瘤本身,低氧、低葡萄糖、低氨基酸、低p H值的肿瘤微环境与肿瘤相互作用,导致应激反应如:缺氧诱导因子(HIFs)、未折叠蛋白反应(UPR)和腺苷酸活化蛋白激酶反应途径(AMPK)以维持肿瘤代谢平衡,参与肿瘤进展的血管生成、浸润、转移及治疗抵抗发生。ATF4是活化转录因子(ATF)家族代指一大组的基本区域亮氨酸拉链(b ZIP)转录因子成员之一,是调控促生存基因的转录因子,在正常组织的生长发育中起重要作用,能够调控多种相关基因的合成,参与自噬,氧化还原反应和细胞凋亡,近年来研究发现与正常组织相比,ATF4在多种肿瘤组织中表达升高,特别是在肿瘤组织乏营养区域即肿瘤微环境,提示在肿瘤微环境中ATF4参与维持肿瘤代谢平衡,使肿瘤细胞在乏营养下存活,和肿瘤的进展、多种抗肿瘤药物治疗耐药的发生相关,本文主要从ATF4的来源,在生长和发育中的作用,在肿瘤生物学中的作用,在肿瘤进展和药物耐药方面的作用机制作一综述,并对目前有一些以ATF4为相关靶点的抗肿瘤治疗研究方向及正在开发的药物作一探讨,为以ATF4为靶点的相关抗肿瘤研究提供研究思路。      

CTLA4Ig基因转染对大鼠胰岛移植的影响

目的 研究ＣＴＬＡ４Ｉｇ基因在糖尿病大鼠体内表达及其产物延长胰岛移植物存活的作用。方法 利用Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ载体包裹ＣＴＬＡ４Ｉｇ ｃＤＮＡ质粒后转染鼠胰岛和肌肉细胞，检测移植后ＣＴＬＡ４ｉＧ基因表达水平，观察ＣＴＬＡ４Ｉｇ基因表达在延长糖尿病鼠胰岛移植物和大鼠存活时间的作用。结果 Ａ组胰岛移植第７天２只大鼠血清ＣＴＬＡ４Ｉｇ呈阳性（阳性率２０％），分别为１４ｎｇ＝ｍｌ、３１ｎｇ／ｍｌ。Ｂ组胰     

三阴乳腺癌中MIR892B和CDK1的基因拷贝数变异与患者恶性进展的相关性分析

目的 探讨三阴乳腺癌(TNBC)中MIR892B和CDK1的基因拷贝数变异(CNV)与患者恶性进展的相关性.方法 从癌症基因组图谱数据库(TCGA)中,获得153例TNBC患者的全基因组CNV数据和预后数据.GISTIC2.0软件分析肿瘤中全基因组CNV情况,筛选出CNV的热点基因,并与患者5年进展预后进行相关性分析....     

Role of CXCL12/CXCR4 signaling axis in pancreatic cancer

Objective This review focuses on the state-of-the-art of CXCL12/CXCR4 signaling axis in pancreatic cancer and its role in tumor progression. Data sources Relevant articles published in English were identified by searching in Pubmed from 1997 to 2013, with keywords ＂CXCL12＂, ＂CXCR4＂ and ＂pancreatic cancer＂. Important references from selected articles were also retrieved. Study selection Articles about CXCL12/CXCR4 signaling axis in pancreatic cancer and relevant mechanisms were selected. Results Pancreatic cancer has been one of the most lethal human malignancies, with median survival less than one year and overall 5-year survival only 6%. Tumor cells from pancreatic cancer express high level of CXCR4. CXCL12, the ligand for CXCR4, is extensively secreted by neighboring stromal cells and other distant organs. CXCL12 primarily binds to CXCR4, induces intracellular signaling through several divergent pathways, which are involved in progression and metastasis of pancreatic cancer. Conclusions CXCL12/CXCR4 signaling axis may play an important role in the communication between pancreatic cancer cells and their microenvironment, which may have effect on tumor proliferation, invasion, angiogenesis, metastasis and chemoresistance. CXCL12/CXCR4 signaling axis may serves as a novel therapeutic target for pancreatic cancer.     

转染人血纤溶酶原Kringle 5基因对人胰腺癌PC3细胞的影响

目的　将人血纤溶酶原Kringle 5基因导入人胰腺癌PC3细胞 ,观察其对人胰腺癌PC3细胞系的基因治疗作用。方法　将外源性Kringle 5通过脂质体转染法导入人胰腺癌PC3细胞 ,筛选阳性克隆 ,同时设空质粒组及PC3细胞为对照。采用RT PCR、免疫组织化学、MTT、电镜、流式细胞术等方法 ,鉴定及检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及Kringle 5蛋白表达情况 ,并用血管内皮细胞增殖实验及裸鼠接种检测目的胰腺癌细胞株表达的Kringle 5蛋白抑制血管内皮细胞生长的活性及裸鼠移植瘤生长情况。结果　人血纤溶酶原Kringle 5基因及蛋白水平在胰腺癌PC3细胞系均可以稳定表达 ,能抑制ECV30 4血管内皮细胞生长及具有抑制裸鼠移植瘤生长的作用。结论　成功转染人Kringle 5基因的人胰腺癌PC3细胞可稳定表达Kringle 5蛋白 ,且具有抗血管内皮细胞增殖活性的良好作用 ,为进一步进行体内抗血管生成基因治疗奠定了基础。     

外泌体在前列腺癌进展中的作用

前列腺癌细胞主动分泌的外泌体是前列腺肿瘤细胞与间质细胞间信息传递的媒介,其通过改变原发灶和转移灶的微环境促进前列腺癌进展。具体而言,外泌体是通过其携带的具有生物活性的物质,如RNA、蛋白质等参与前列腺癌进展相关的分子事件。因此,在临床上,外泌体及其内容物有望成为预测前列腺癌进展的新型分子标志物和干预靶点。近年来,前列腺癌外泌体领域的相关研究逐年增多,并在预测前列腺癌进展方面显示出巨大价值,本文对此进行综述。     

p38 MAPK信号通路在TLR4促进胰腺癌血管生成中的作用

目的 探讨Toll样受体-4(TLR4)和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路在胰腺癌血管生成中的作用.方法 以脂多糖(LPS)、TLR4-siRNA及p38 MAPK信号通路阻断剂SB203580分别作用于体外培养的胰腺癌PANC-1细胞,Western blot检测TLR4、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38)蛋白表达.收集各种因素处理后的PANC-1细胞培养液,观察其对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖、迁移和管腔形成的影响.结果 LPS组的HUVECs增殖率、迁移数目和管腔形成个数分别为(139.2±12.6)％、48.1±9.1和47.8±9.6,均显著高于对照组(P＜0.05).TLR4-siRNA组的HUVECs增殖率、迁移数目和管腔形成个数分别为(60.2±8.7)％、31.3±4.5和17.2±3.3,均显著低于对照组(P＜0.01);SB203580组的HUVECs增殖率[(79.6±8.9)％]、迁移数目(21.6±4.3)和管腔形成个数(23.5±4.3)均较对照组显著减少(P＜0.05);且TLR4-siRNA+ LPS、B203580+LPS组的HUVECs增殖率、迁移数目和管腔形成个数均分别显著低于LPS组(P＜0.01).与对照组相比,LPS组VEGF、p-p38蛋白表达均明显增加,TLR4-siRNA组、SB203580组TLR4、VEGF、p-p38蛋白表达明显减少;且TLR4-siRNA+ LPS组、SB203580+LPS组VEGF、p-p38表达较LPS组明显减少.结论 TLR4可促进胰腺癌的血管生成,其机制与激活p38 MAPK信号通路、促进VEGF表达有关.     

肿瘤局部组织微环境变化在恶性肿瘤演进中的作用

正常情况下，细胞生长在特定、适宜的组织微环境中，微环境变化在某种程度上调控着细胞的生物学行为变化。实体瘤的发生、发展、浸润和转移依赖于肿瘤组织局部的微环境变化。肿瘤局部组织微环境变化可诱导肿瘤细胞生物学行为发生改变。在肿瘤发生和演进过程中，肿瘤细胞必须逃避局部环境的控制并抵御失巢凋亡（anoikis）。肿瘤细胞的遗传不稳定性决定其表型具有一定的可塑性，肿瘤局部微环境变化可以诱导肿瘤细胞的表型及生物学行为发生改变，如促进肿唐细胞的增殖、抑制凋亡、促进肿瘤细胞的侵袭和转移。     

XAF1基因对胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响

目的探讨Ad5／F35腺病毒介导的X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1（XAFl）基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖和凋亡的影响。方法构建和包装Ad5／F35-XAF1重组腺病毒并感染胰腺癌细胞SW1990（Ad5／F35-XAF1组）,设立对照病毒感染组（Ad5／F35-Null组）和空白组。运用RT—PCR技术和Western blotting分析对感染细胞进行鉴定。流式细胞仪检测细胞凋亡并分析细胞周期,TUNEL法测定细胞凋亡率;MTT法检测细胞增殖。结果Ad5／F35-XAF1组SW1990细胞XAF1mRNA和蛋白表达水平均明显上调。与空白对照组和Ad5／F35-Null组比较,Ad5／F35-XAF1组细胞凋亡率明显增加,增殖活性明显降低,G2／M期细胞比例显著增加,组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论Ad5F35-XAF1重组腺病毒感染胰腺癌细胞SW1990后,能促进细胞凋亡并抑制细胞增殖。     

XAF1基因对胰腺癌细胞SW1990增殖和凋亡的影响

目的 探讨Ad5/F35腺病毒介导的X染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)基因对胰腺癌细胞株SW1990增殖和凋亡的影响.方法 构建和包装Ad5/F35- XAF1重组腺病毒并感染胰腺癌细胞SW1990(Ad5/F35-XAF1组),设立对照病毒感染组(Ad5/F35-Null组)和空白组.运用RT-PCR技术和Western blotting分析对感染细胞进行鉴定.流式细胞仪检测细胞凋亡并分析细胞周期,TUNEL法测定细胞凋亡率;MTT法检测细胞增殖.结果 Ad5/F35-XAF1组SW1990细胞XAF1mRNA和蛋白表达水平均明显上调.与空白对照组和Ad5/F35-Null组比较,Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率明显增加,增殖活性明显降低,G2/M期细胞比例显著增加,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 Ad5F35-XAF1重组腺病毒感染胰腺癌细胞SW1990后,能促进细胞凋亡并抑制细胞增殖.