黄芪三仙汤干预成骨细胞护骨素及护骨素配体的表达

背景：长期临床研究表明黄芪三仙汤对骨质疏松症有一定的治疗作用,基础实验研究也表明黄芪三仙汤能改善实验动物的生物力学指标。在此基础上实验拟从细胞分子水平上探讨黄芪三仙汤对成骨细胞的相关作用。 目的：观察黄芪三仙汤对体外培养成骨细胞护骨素、护骨素配体基因调节的作用,探讨黄芪三仙汤治疗骨质疏松的作用机制。 方法：制备黄芪三仙汤和仙灵骨葆胶囊含药血清及空白血清,对体外培养新生SD大鼠成骨细胞进行干预,应用细胞形态观察、MTT、Western blot分析法及蛋白浓度测定法,观察各含药血清对体外培养成骨细胞的增殖及成骨细胞护骨素、护骨素配体表达的影响。 结果与结论：经药物干预后成骨细胞变为长梭形、条索状,融合成片,分界较为模糊,细胞生长较密集。黄芪三仙汤可明显促进成骨细胞护骨素蛋白浓度的提高(P < 0.01),同时也提高了护骨素配体蛋白浓度(P < 0.01),而护骨素/护骨素配体浓度比例水平明显升高(P < 0.01)。结果可见黄芪三仙汤可能是通过调节成骨细胞分化调控因子护骨素、护骨素配体的表达来调节成骨细胞的增长,从而实现其对骨质疏松症的治疗作用。     

阳极氧化工艺对纯钛TA1表面形貌及力学性能的影响

研究阳极氧化工艺对纯钛TA1植入体表面氧化膜的表面形貌及力学性能的影响.结果表明:阳极氧化工艺可以在TA1基体表面形成不同颜色的均匀、致密的氧化膜.但是,随着阳极氧化电压升高、时间延长,膜层出现部分溶解现象,膜层中氧含量增加,基体中氢含量升高,材料的屈强比(σs/σb)增加,说明,氢元素向TA1基体扩散,导致材料的屈强比增大,不利于纯钛植入体塑性形变,植入人体一定时间后,有诱发材料疲劳断裂的可能性.     

三七总皂苷干预股骨头缺血性坏死兔成骨细胞护骨素基因的表达

背景：前期研究已明确三七总皂苷能抑制乙醇诱导的兔骨髓基质干细胞成脂分化。 目的：进一步观察三七总皂苷对兔成骨细胞的增殖和分化以及骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA表达的影响。 方法：白酒灌胃4周制备新西兰兔股骨头缺血坏死模型,随机分为生理盐水组、复方骨肽组和三七总皂苷组。通过组织块培养法提取各组兔成骨细胞,检测细胞的分化,骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体基因表达情况,检测各目的基因杂交信号的强弱。 结果与结论：三七总皂苷组兔碱性磷酸酶活性、钙结节计数及骨保护素、细胞核因子κB受体活化因子配体的表达强度、骨保护素mRNA/细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA均高于生理盐水组(P < 0.01);与复方骨肽组效果接近。证实三七总皂苷能够促进兔成骨细胞的增殖和分化,并能提高成骨细胞的骨保护素mRNA的相对表达量而对其细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA有抑制作用。     

钛表面微弧氧化涂层的细胞生物活性

背景：微弧氧化技术可改善钛或钛合金的表面特征。 目的：研究纯钛表面微弧氧化涂层的表面性能及其对MC3T3-E1细胞早期黏附、增殖及成骨能力的影响。 方法：将46个直径10 mm、厚度2 mm圆盘状纯钛试件分为实验组和对照组。实验组置于含0.02 mol/Lβ-甘油磷酸二钠盐及0.2 mol/L乙酸钙的电解液中进行微弧氧化处理,对照组对试件进行机械抛光。扫描电子显微镜观察试件表面形貌,X射线能谱分析检测涂层表面钙磷比,X射线衍射分析检测涂层晶相构成。将MC3T3-E1细胞接种在两组试件表面,1,2,4 h电镜下观察细胞形态,在2,4,7 d通过CCK-8方法检测细胞增殖,并于7,14 d检测碱性磷酸酶活性。 结果与结论：经微弧氧化处理后,钛表面形成粗糙多孔的钙磷涂层,微弧氧化涂层主要元素为Ca、P、O及Ti,微弧氧化膜层主要由氧化钛、钛酸钙、磷酸钙及偏磷酸钙构成。电镜观察显示1 h 微弧氧化涂层表面细胞已伸出伪足,4 h呈现较典型的细胞形态。细胞在微弧氧化处理钛表面4,7 d的细胞增殖和7,14 d的碱性磷酸酶活性高于对照组。表明微弧氧化技术生成的粗糙多孔钙磷涂层能显著促进MC3T3-E1细胞的早期黏附、增殖及成骨活性。     

纯钛表面微形态可影响成骨细胞生长及β1整合素表达

背景：目前微弧氧化和渐热处理是常见的两种钛种植体表面化学成分改性方法。 目的：观察纯钛表面微形态对成骨细胞生长的影响。 方法：将原代培养的小鼠成骨细胞与不同表面处理的钛片：纯钛组、微弧氧化组、碱热组、微弧氧化碱热处理组共同培养。 结果与结论：扫描电镜观察微弧氧化碱热处理组表面附着细胞呈扁平的多边形,且有更好的伸展,成骨细胞中β1整合素表达显著高于其他3组(P < 0.05)。提示微弧氧化碱热处理组更有利于成骨细胞的黏附和β1整合素的表达。     

人甲状旁腺素对新生大鼠成骨细胞护骨素基因表达的影响

目的研究人甲状旁腺激素(hPTH)对新生大鼠成骨细胞护骨素(OPG)基因表达的影响,探讨PTH对成骨细胞的作用机制.方法采用新生SD大鼠的颅骨行成骨细胞的原代培养,用hPTH于培养的不同阶段用不同浓度和不同方式进行刺激,以ELASA测定成骨细胞的分化指标;RT-PCR测定OPG基因的表达.结果与hPTH间歇刺激组相比,hPTH持续刺激组可明显抑制成骨细胞的分化成熟,且可明显抑制OPG mRNA的表达.这一作用在培养后6 d即出现,持续至第18 d.此外,hPTH抑制OPGmRNA的表达,以100ng/ml浓度最明显.结论持续PTH刺激可明显抑制成骨细胞的分化成熟和OPG基因的表达,这可能与慢性肾衰继发性甲状旁腺亢进骨病的发生密切相关.     

纯钛种植体表面微弧氧化涂层的生物相容性

背景：各种纯钛种植体表面微弧氧化涂层效果不尽相同。 目的：观察3种不同微弧氧化涂层种植体钛片对小鼠成骨细胞的细胞增殖、碱性磷酸酶活性和β1-integrin的基因表达水平的影响。 方法：采用国际常用小鼠成骨细胞系(MC3T3-E1),3种不同涂层钛片作为影响因素,纯钛作为对照,采用MTT法和电镜法观察细胞附着和细胞增殖,PNPP法测定碱性磷酸酶的活性,RT-PCR法检测β1-integrin在小鼠成骨细胞中的表达。 结果与结论：MTT值、碱性磷酸酶值、β1-integrin的基因表达水平和电镜观察均显示含钙、磷、镁、锌元素的二氧化钛涂层钛片生物相容性最好,含钙磷盐的二氧化钛涂层钛片次之,二氧化钛涂层钛片最差。小鼠成骨细胞在其多孔,含有钙、磷、镁、锌元素表面的黏附及增殖最优。     

纯钛种植体表面改性对骨结合的影响

背景:研究表明,对种植体表面进行化学、物理、生物化学等改性,可以显著提高种植体表面的生物学活性和骨结合强度。目的:综述并比较不同纯钛表面改性方法对骨结合的影响。方法:以纯钛、种植体、种植、种植体表面、表面改性、生物活性、生物相容性、骨结合、研究进展为中文关键词,以pure titanium,implants,plant,the surface of the implant,surface modification,biologica activity,biocompatibility,osseointegration,research progress为英文关键词,用计算机检索CNKI数据库、万方数据库和Pub Med数据库。结果与结论:钛具有稳定的化学性能、良好的生物相容性及较高的抗断裂强度,因而在种植修复中被广泛应用,但钛种植体是一种生物惰性材料,直接植入人体后的生物相容性和生物学活性较差,影响其与骨的结合。为提高种植体骨结合强度,目前最为有效的方法是对纯钛表面进行改性。大多数研究表明,经过改性后的种植体具有一定的骨诱导作用,可促使骨细胞在其表面黏附、增殖、分化及矿化。钛种植体经过物理、化学、生物化学等改性处理后,其表面形貌、化学成分、表面粗糙度及亲水性能等发生改变,从而提高了种植体的生物相容性和生物活性,促进了骨结合的发生。     

阳极氧化伴水热处理制备纯钛羟基磷灰石薄涂层

为了解纯钛阳极氧化伴水热处理的技术路线及羟基磷灰石薄涂层在体内的成骨效应，以钛片为阳极，β－磷酸甘油钠和醋酸钙为电解质，经200－400V直流电解15min，维持电流密度≤50mA/cm^2，而后经280℃－300℃水热处理2h，取光滑，喷砂表面作对照，分别植入12只兔股骨内，枯术后4，8，16周取出带种植体骨块制作磨片，观察新骨生成情况及术后8周光滑和涂层种植体的界面超微结构，并作表面能谱分析，结果发现水热处理后，钛片表面出现了羟基磷灰石涂层，动物实验显示涂层种植体8周后编织骨的转化和成熟较快，未见剥脱的羟基磷灰石碎片，其表面的钙，磷含量在种植后增加明显，这说明阳极氧化伴水热处理可以制备出纯钛表面羟基磷灰石薄涂层，其早期促编织骨形成作用明显，可以加快编织骨转化成板层骨。     

成骨生长肽促进钛表面大鼠成骨细胞的增殖分化

背景：成骨生长肽具有促进多种基质细胞增殖活性,成骨活性,免疫原性低,自身调节极其敏感,提取制作工艺简单等众多优点。 目的：体外观察成骨生长肽对大鼠颅盖骨来源成骨细胞在钛金属表面增殖分化的影响。 方法：将体外培养的新生SD大鼠颅盖骨成骨细胞以5×10⁷ L^-1细胞浓度接种于6孔板中的纯钛试件表面,分别加入0(空白对照),10^-10,10^-9,10^-8,10^-7 mol/L的成骨生长肽,干预1,3,5,7,9 d后应用MTT法检测纯钛试件表面成骨细胞的增殖活性,应用酶联免疫法检测成骨细胞内碱性磷酸酶活性。 结果与结论：与空白对照组比较,各浓度成骨生长肽组纯钛试件表面成骨细胞增殖活跃(P < 0.05),且最佳作用浓度为10^-9 mol/L(P < 0.05);各浓度成骨生长肽组细胞内碱性磷酸酶活性增强(P < 0.05),且最佳作用浓度为10^-8 mol/L (P < 0.05)。表明成骨生长肽可促进钛片表面成骨细胞的增殖活性,增强细胞内碱性磷酸酶活性。     

微弧氧化技术与钛合金表面成骨细胞增殖及骨向分化能力

文题释义：微弧氧化技术：是金属材料表面处理的一种技术,将金属材料(如,镁、铝、钛等)置于特定电解液中,通过弧光放电过程中瞬时的高温和高压条件产生结合于金属表面的陶瓷膜层,该种方法制备的涂层材料具有高硬度、耐磨的特点。 种植体：是针对于人体自身牙齿缺失而植入上下颌骨内的人工牙根。性能优良的种植体需要同时具备高强度、耐降解、生物相容性好的特性。目前复合材料类如金属表面添加陶瓷涂层材料,具有上述多种材料特性而被临床选择。背景：采用普通电化学法可在钛及其合金表面制备纳米级羟基磷灰石涂层,但该涂层吸收降解缓慢,需要8-12周的时间。而微弧氧化可在复杂表面形成均匀薄膜,有利于细胞黏附和骨组织长入。目的：探索微弧氧化羟基磷灰石涂层钛合金对成骨细胞增殖及骨向分化能力的影响。方法：采用电化学法与微弧氧化法分别制备羟基磷灰石涂层钛合金材料,检测两种材料表面的接触角。将成骨细胞系hFOB1.19接种于两组羟基磷灰石涂层钛合金材料表面,培养48 h时,采用扫描电镜观察细胞在材料上的形态变化;培养1,12,24,48,72 h时,采用MTT法检测细胞增殖;培养1,3,5 d时,比较两组材料表面细胞计数与碱性磷酸活性;培养第5天,采用Western Blotting检测细胞内骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白4表达。结果与结论：①微弧氧化组材料表面的接触角小于电化学组[(66.5±2.2)°,(52.8±2.1)°,P=0.001 5)];②扫描电镜显示,电化学组成骨细胞形态不规则,胞体皱缩不饱满,与材料贴合较差;微弧氧化组细胞充分伸展,形态扁平,与材料贴合紧密;③微弧氧化组12-72 h的细胞增殖快于电化学组(P < 0.05),培养3,5 d的细胞计数多于电化学组(P < 0.05);④微弧氧化组培养1,3,5 d的细胞碱性磷酸酶活性高于电化学组(P < 0.05);⑤微弧氧化组骨形态发生蛋白2和骨形态发生蛋白4表达均高于电化学组(P < 0.05);⑥结果表明,微弧氧化羟基磷灰石涂层钛合金材料可促进成骨细胞的增殖及骨向分化能力。ORCID: 0000-0003-2787-4667(王艳玲)中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程     

镍钛泡沫合金对成骨细胞生物活性的影响

目的 观察镍钛泡沫合金（PNT）在体外实验对细胞的生物安全性。方法 选择PNT和镍钛致密合金（NiTi）材料（中南大学材料科学工程学院提供）,以及纯钛（Ti）（宁波慈北医疗器械有限公司,中国）;MC3T3-E1来源于中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。用PNT、NiTi、Ti 3种合金的浸提液,培养小鼠前成骨细胞MC3T3-E1。用CCK-8法检测细胞的增殖活性,碱性磷酸酶法测定细胞的分化能力,流式细胞术检测细胞早期凋亡情况。结果 PNT组细胞增殖能力在第1天、第3天、第7天均明显小于NiTi组（P <0.001）和Ti组（P <0.001）。PNT组细胞分化能力在第1天、第3天、第7天均明显小于NiTi组（P <0.001）和Ti组（P <0.001）。PNT组细胞的凋亡细胞百分比在第1天、第3天、第7天均明显高于NiTi组细胞（P=0.001）和Ti组细胞（P <0.001）。结论 PNT对细胞的增殖和分化的影响明显大于NiTi组和Ti组,更明显地抑制了细胞的增殖与分化能力,更容易导致细胞早期凋亡。     

纯钛种植体的表面预备

钛的优良特性早已被公认为首选牙用种植材料，其表面氧化膜是形成骨融合的关键。为了进一步增加其耐腐蚀性和生物相容性，人们采取了多种方式进行表面处理，最终达到在植入体的不同部位产生不同的粗糙表面，以利于不同细胞在不同地方的附着，尽量提高其表面能，增加其生物活性，同时，达到避免各种污染物对纯钛种植体影响的目的。另外，由于无法控制种植体的表面电荷，因此，可以忽略其对种植体的影响作用     

纯钛种植体的表面预备

钛的优良特性早已被公认为产选牙用种植材料，表面氧化膜是形成骨融合的关键。为了进一步增加其耐腐蚀性和生物相容性，人们采用取多种方式进行表面处理，最终达到在植入体的不同产     

纯钛表面不同厚度微弧氧化膜的形貌及相结构分析

本研究采用微弧氧化(micro-arc oxidation,MAO)技术,并通过控制微弧氧化处理时间,在经过抛光和清洗的商业纯钛表面分别获得5、10和20μm的TiO2及相关钛氧化物陶瓷膜层。利用扫描电镜(scanning electron microscopy,SEM)分析表征膜层厚度及表面形貌,X线衍射(X-ray diffraction,XRD)分析表征膜层晶相组成。结果表明:5μm厚的MAO膜,表面呈多孔状,较为平整,孔径较小。XRD谱线中除了突出的钛基体衍射峰外,只出现了锐钛矿的衍射峰。膜厚为10μm时,表面形貌与5μm相似,但孔径大小分布更为均匀,在2μm左右。XRD谱线中钛峰强度下降,出现了金红石型TiO2的衍射峰,但仍以锐钛矿型TiO2占主导地位。膜厚为20μm时,表面孔径进一步增大,达到4～6μm,同时可见陶瓷层表面有的地方出现了破损和裂纹。XRD谱线中钛峰弱小,金红石和锐钛矿型TiO2的衍射峰仍然分别存在,但所占比例发生变化,同时还出现了Ca(Ti2P3O12)2、CaTi O3的衍射峰。除此之外,不同膜层厚度的表面粗糙度也有较大差异。膜层厚度的改变能够显著影响MAO陶瓷层的特性,通过改变...     

钛及钛合金表面生物活性改性及效果评价

背景：钛及钛合金是常用的医用生物材料,其具有良好的生物相容性,但其缺乏骨诱导的能力,其与骨组织之间只是一种机械性的接触。 目的：概述钛及其合金表面生物活性改性的方法及对于改性后效果评价的方法,为临床应用提供参考。 方法：应用计算机检索PubMed数据库,CNKI数据库中关于钛及钛合金表面生物活性改性的文章,英文检索词为“titanium,titanium alloy,coating,bioactivity,bone”,限定文献语言种类为“English”,中文检索词为“钛,钛合金,涂层,活性改性,骨组织”,限定文献语言种类为中文。 结果与结论：在表面生物活性改性的方法中,主要有等离子体喷涂法、微弧氧化法、溶胶-凝胶法及生物仿生法等。钛及钛合金表面的活性涂层已经从单一涂层发展到复合涂层、梯度涂层、纳米梯度涂层,同时多种改性技术的联合运用,也让钛及其合金表面的涂层性能更加完善。对于改性后的效果研究,主要以模拟体液浸泡、成骨细胞培养,亲骨荧光素染色及放射影像学观察为主。对钛及钛合金进行表面生物活性改性是个复杂的工程,既要考虑改性后涂层骨诱导的能力,同时也需要兼顾涂层与基体结合强度的问题。只有对涂层组层进一步研究并利用多种技术对钛及钛合金表面进行处理,才能使其表面的涂层活性更高,并且结合牢固。     

护骨素的研究进展

护骨素是近年发现的肿瘤坏死因子家族的新成员具有犯制破骨细胞分化及骨吸收活性的一种分泌型糖蛋白。护骨素与其护骨素配基之间竞争性结合机制是调控破骨细胞分化、增殖、凋亡及发挥重作用过程中最重要的信号通路,是雌激素调节破骨细胞生成和抗骨吸收的作用途径之一。对其研究将促进因破骨细胞活性增强导致骨吸收、骨破坏为特点的疾病的病因、预防和治疗等研究的深入。     

唑来膦酸对大鼠成骨细胞护骨素及肿瘤坏死因子α mRNA表达的影响

背景：唑来膦酸属于第3代双瞵酸盐类药物,在临床上被广泛应用于治疗骨吸收增加类疾病,其对破骨细胞的作用及影响已取得了共识,而对于成骨细胞的影响尚有争议。 目的：观察唑来膦酸对大鼠成骨细胞增殖、分化和护骨素及肿瘤坏死因子α mRNA表达的影响。 方法：体外培养新生24 h内SD大鼠颅盖骨来源的成骨细胞,用10^-5~10^-9 mol/L唑来膦酸进行干预,分别于干预后第3,5,7天采用MTT法来测吸光度值,以检测唑来膦酸对大鼠成骨细胞增殖的影响;硝基苯基质动力学法和RT-PCR在干预后72 h,测量细胞碱性磷酸酶活性和护骨素及肿瘤坏死因子α mRNA的表达。 结果与结论：较高浓度(10^-5 mol/L)的唑来膦酸明显抑制成骨细胞增殖, 10^-7~10^-9 mol/L唑来膦酸不影响成骨细胞的分化。10^-5~10^-9 mol/L唑来膦酸能使成骨细胞护骨素mRNA表达增加,肿瘤坏死因子α mRNA表达下降。说明唑来膦酸在低浓度时不影响成骨细胞的增殖及分化,其可通过调节成骨细胞护骨素、肿瘤坏死因子α mRNA的表达,来发挥其抗骨吸收的作用。     

阳极氧化活化处理纯钛经皮种植体的体内外实验研究

为解决经皮器械在负重条件下的长期稳定和经皮密封问题，本文对比研究了阳极氧化表面以及光滑表面的纯钛种植体经皮植入动物体内的情况．并同时将人皮肤表皮细胞接种于这两种表面上进行培养，初步探讨了阳极氧化活化处理后的纯钛金属作为经皮植入体的可能性。结果表明：经皮部分钛金属的光滑表面与阳极氧化的微观粗糙表面对于术后炎性反应的影响无明显差异，阳极氧化活化表面不仅能与骨形成牢固结合，而且也可以与皮下组织紧密贴附。同时，在体内种植体表面形成的钙磷层可能也是形成经皮密封的原因之一，阳极氧化活化钛的微孔粗糙表面对表皮也有一定的锁合固定作用。因此阳极氧化的表面活化方法有可能成为有效的解决经皮生物密封的活化方法之一。     

表面粗糙度对种植体钛片表面成骨细胞的影响

目的探讨种植体表面粗糙度对成骨细胞增殖、分化、功能及基因表达的影响。方法种植体钛片分为3组,表面粗糙度(Ra)分别为0.175μm(1组)、1.00μm(2组)及1.689μm(3组)。将人成骨肉瘤细胞系MG63细胞接种于3组材料表面,利用激光共聚焦显微镜观察细胞在各组钛材料表面黏附铺展形态,采用MTY法、碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素活性检测评价成骨细胞在钛片表面黏附、增殖和分化水平,通过RT- PCR检测细胞内Cbfa1mRNA表达。结果Mg63在各组材料表面均生长良好,4h时各组细胞均附着,第2组细胞可见突起,24h时各组细胞均伸展,形态不规则。各组细胞在1、5、10d,第2组ALP及骨钙素(OC)活性均逐渐增高,在15d有所下降,在5、10d,ALP及OC活性显著高于其他两组(P<0.05)。第2组的Cbfal mRNA表达高于其他两组(P<0.01)。结论种植体表面适度粗化能够促进成骨细胞的功能,1.00μm是比较适宜的表面粗糙度。