不同pH值的赫氏干燥培养基对鼠疫菌生长影响观察

摘要:目的　观察不同pH值的赫氏干燥培养基对鼠疫菌生长的影响,从中筛选鼠疫菌生长的最适pH值。方法　同一批号的赫氏干燥培养基分别加入到pH值为6.2、6.6、7.0、7.4、7.8、8.2的蒸馏水溶液中,121℃30 min高压灭菌后倾注平皿。通过进行鼠疫菌强毒141标准株和鼠疫菌弱毒EV 76巴黎株菌落计数实验,观察不同pH值的赫氏干燥培养基对鼠疫菌生长的差异。结果　不同pH值的赫氏干燥培养基对鼠疫菌的生长均有影响且其差异有统计学意义（EV76χ2＝190.804,P＜0.05;141χ2＝151.742,P＜0.05）。EV76株鼠疫菌和141株鼠疫菌在pH值7.0的赫氏干燥培养基中活菌数值最大。结论　赫氏干燥培养基对鼠疫菌生长的最适pH值为7.0。     

neuB1失活空肠弯曲菌突变株灭活全菌苗经鼻免疫小鼠的实验研究

[目的]探讨neuB1失活空肠弯曲菌0:19突变株灭活全菌苗的免疫原性及其对抗野生株攻击的免疫保护性.[方法]以neuB1失活空肠弯曲菌0:19突变株灭活菌体,经鼻途径以不同剂量免疫Balb/C小鼠,ELISA法检测小鼠肠腔灌洗液和血液中的抗体滴度;并以5×109 cfu野生株进行攻击,计算疾病指数.[结果]免疫后7 d肠腔灌洗液中的抗CJ特异性slgA和21 d血清中特异性IgG及IgA滴度均显著增高;免疫组的疾病指数分别由0.90降至0.30～0.34,保护率为62%～67%.[结论]neuB1失活CJ 0:19突变株灭活全菌苗经鼻免疫,能诱导动物产生有效的体液免疫应答,具有显著的免疫原性;能有效保护免疫小鼠免受野生株的攻击,基于该突变株良好的免疫活性且无分子模拟所致的神经毒性,有望成为理想的全菌候选疫苗.     

嗜酸乳杆菌NCFM和乳双歧杆菌HN019联用对小鼠肠道菌群的调节作用

目的探究嗜酸乳杆菌NCFM和乳双歧杆菌HN019联用对Balb/c小鼠肠道菌群的调节作用。方法使用低、中、高剂量的嗜酸乳杆菌NCFM和乳双歧杆菌HN019混合菌粉灌胃雄性Balb/c小鼠14 d,收集0、7、14 d小鼠粪便,梯度稀释后平板培养计数粪便中双歧杆菌、乳杆菌、肠杆菌、肠球菌、产气荚膜梭菌的数量以及双歧杆菌与肠杆菌的比值(B/E值)。结果益生菌低剂量组小鼠第7天肠道双歧杆菌、乳杆菌数量显著高于基质对照组(P0.05);低、中剂量组小鼠第7天肠道产气荚膜梭菌数量显著低于干预前(P0.05);高剂量组小鼠肠道B/E值显著高于空白对照组和基质对照组(P0.05)。结论嗜酸乳杆菌NCFM和乳双歧杆菌HN019联用对Balb/c小鼠肠道菌群具有很好的调节作用。     

重组人乳铁蛋白对小鼠沙门菌感染抑制效果

目的研究转基因水稻来源的重组人乳铁蛋白(rhLF)在小鼠体内抑制沙门菌感染的效果。方法选择Balb/c小鼠建立沙门菌感染模型; 将Balb/c小鼠按体重随机分为2组,即沙门菌对照组和rhLF干预组,每组12只;染菌前2h,rhLF干预组小鼠经口灌胃20 mg/mL rhLF 0.3 mL,对照组小鼠经口灌胃0.3 mL PBS;之后每天灌胃相同量的rhLF(6 mg/d)或PBS;每天观察小鼠一般情况;7 d后,心脏穿刺取小鼠血液观察菌血症,取肝脏和脾脏组织进行细菌计数分析,取肝脏、脾脏、肾脏和小肠进行病理观察。结果各组小鼠体重变化、生存情况在组间无明显差异(P>0.05);2组小鼠的肝脏重和肝体比值、脾脏重和脾体比值相似(P>0.05);rhLF干预组小鼠的血液、肝脏和脾脏的染菌率和染菌量与对照组相比,呈现降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);病理分析显示rhLF干预组小鼠的炎症程度有减轻,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论6 mg/d的rhLF不能明显减轻小鼠沙门菌感染的炎症程度。     

重组沙门菌载体HIV-12F5表位疫苗毒力及分布

目的研究表达Ⅰ型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)2F5表位的重组沙门菌(SA-2F5)对BALB/c小鼠的半数致死量(LD₅₀),并观察其在小鼠体内的生物学分布。方法BALB/c小鼠随机分8组,以0,104~1010菌落形成单位(CFU)重组菌灌胃,30d后用改良寇氏法测定LD₅₀;BALB/c小鼠随机分2组,灌胃给予107CFU重组沙门菌或磷酸盐缓冲液(PBS),分别于感染后第3,9,16,30 d,无菌操作取各组肝、脾、肠系膜淋巴结,检测重组沙门菌在小鼠体内的分布。结果SA-2F5对BALB/c小鼠的LD₅₀为1.45×10⁹CFU;感染后第3d,肝、脾、肠系膜淋巴结活菌数依次为5.38×10⁴,4.87×10⁴,9.08×10³CFU。第9d各脏器活菌数分别降至7.35×10²,7.50×10²及3.00×10²CFU。第16d各脏器活菌数基本与第9d相当。之后各脏器中活菌数持续下降,至第30d肝、脾内检测不到活菌,肠系膜淋巴结内活菌为2.1×10²CFU。结论重组沙门菌SA-2F5毒力显著降低,在小鼠体内具有良好的生物学分布。     

豚鼠感染鼠疫菌脏器的病理改变

目的探讨豚鼠感染鼠疫菌主要实质性脏器的病理改变。方法强毒鼠疫菌25 cfu/ml感染成体实验豚鼠鼠蹊部皮下。病死豚鼠立即取材,未病死豚鼠14 d分别处死并取材。取肝、脾、肺、肾及心等实质性脏器分离培养鼠疫菌,并制作病理切片观察病理改变。结果感染鼠疫菌的实验豚鼠肝、脾、肺、肾及心脏均分离出鼠疫菌;其组织巨检均有明显病理变化,镜检除心脏外均有明显的病理变化,呈炎性细胞增多,充血、出血、部分坏死等急性炎症变化。结论强毒鼠疫菌引起实验豚鼠急性炎症反应,豚鼠肝、脾、肺、肾、心等实质性脏器的病理变化显著。     

壳聚糖-DNA疫苗预防空肠弯曲菌感染的实验研究

目的研究壳聚糖-DNA疫苗预防空肠弯曲菌感染的效力。方法采用壳聚糖分别包裹空肠弯曲菌主要外膜蛋白和黏附蛋白编码基因cadF和peblA的真核表达重组质粒pcDNA3．1（＋）-cadF和pcDNA3．1（＋）-peblA,制备壳聚糖-DNA疫苗。以未干预、空质粒、单纯壳聚糖组为对照,分别将含60μg DNA的不同效价疫苗于实验开始的0、7、14和21d滴鼻免疫BALB／c小鼠,末次免疫后8周采用空肠弯曲菌HS：19重复攻击的方式进行灌胃攻击。攻击后,对该疫苗的临床保护效率和防御空肠弯曲菌感染的效应进行评价。结果空肠弯曲菌壳聚糖-DNA疫苗滴鼻免疫小鼠后,不仅诱导了高水平的血清IgA和IgG抗体,而且诱导了高水平的黏膜IgA抗体,末次免疫后第4周其P／N值分别达20．58、30．13和6．87,末次免疫后第8周其肠壁SIgA免疫组织化学染色显示呈“＋＋＋”反应。并且,其诱导的特异性免疫应答能有效保护免疫后小鼠免遭空肠弯曲菌的感染攻击,其疫苗的有效性高达93．70。结论壳聚糖-DNA疫苗能有效预防空肠弯曲菌的感染攻击。     

豚鼠感染鼠疫菌后的病理观察

摘要:目的　用不同剂量的141株鼠疫菌对实验豚鼠鼠蹊部皮下接种后引起的病理特征变化,并进行其组织形态学观察。方法　采用141株鼠疫菌分25个（低剂量组）、100个（中剂量组）、5 000个（高剂量组）三个剂量组接种成体实验豚鼠鼠蹊部皮下,接种后,有病死的立即取材、未病死的14 d分别处死实验豚鼠取材。取肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及心脏等实质性脏器固定灭菌做病理切片,HE染色,光镜下观察,同时对所取的脏器材料做鼠疫细菌学培养和鼠疫噬菌体裂解实验,以确定各脏器是否含菌,豚鼠是否是特异性死亡。结果　接种不同剂量141株强毒鼠疫菌的实验豚鼠的肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和心脏均分离出鼠疫菌;其组织巨检均有显著的病理变化,镜检除心脏外均有明显的病理变化,且呈不同程度的充血、出血、脂肪变性及组织坏死表现。结论　141株鼠疫菌的不同剂量组均引起实验豚鼠急性炎症反应,豚鼠肝、脾、肺、肾、心等实质性脏器的病理变化显著,并随接种剂量增大而出血及组织坏死逐渐严重。     

rTgPrx蛋白滴鼻免疫小鼠抗弓形虫感染作用

目的观察重组弓形虫过氧化物还原蛋白(rTgPrx)滴鼻免疫小鼠诱导的免疫应答及抗弓形虫感染作用。方法6周龄BALB/c小鼠75只,随机分为5组,实验组分别用10,20,30,40μg rTgPrx〔溶于20μL磷酸盐缓冲液(PBS)中〕滴鼻免疫小鼠3次,各间隔2周;对照组用等量磷酸盐缓冲液;末次免疫后14 d,用1×104个速殖子/只灌胃攻击全部小鼠;攻击后30 d,眼静脉丛采血,颈椎脱臼处死小鼠,ELISA检测血清IgG和肠液IgA,分离并计数肠上皮内淋巴细胞(IEL)和脾淋巴细胞,分离并计数肝、脑组织内弓形虫速殖子。结果40μg rTgPrx组血清IgG、IEL及脾淋巴细胞数量均高于对照组(P0.05),40μg组肝、脑组织内虫荷(速殖子数)明显低于对照组及10,20和30μg组(P0.05)。结论rTgPrx滴鼻免疫小鼠可诱导黏膜部位和系统免疫应答和抗弓形虫感染作用,40μg组的免疫保护作用优于其他剂量组。     

嗜酸乳杆菌在短肽肠内营养液中存活力的研究

目的:研究嗜酸乳杆菌在短肽EN液中的存活力.方法:将5%嗜酸乳杆菌菌悬液加入12%短肽EN液中,置于37℃厌氧培养箱中培养,分别在0、4、8、12、14、16、20和24 h时间点取样进行活菌计数、吸光度值(A600)、酸度和pH值测定.结果:在短肽EN液中接种嗜酸乳杆菌后,活菌数在培养0～16 h间呈上升趋势. 14 h活菌数即达2.1×108 cfu/mL以上;16 h活菌含量达到最高峰,为9.6×109 cfu/mL,之后呈下降趋势.A600随培养时间的延长而增加,在培养0～16 h间,A600增加较快,16 h后增长缓慢.酸度随培养时间的延长而增加,pH值随培养时间的延长而下降.在培养0～14 h间,pH值下降较快,14 h后下降缓慢.结论:嗜酸乳杆菌能在12%的短肽EN液中较好地存活,发酵时间应控制在14～16 h期间.     

PMNS在小鼠阴道假丝酵母菌感染中的作用

目的:通过对阴道假丝酵母菌病小鼠模型血液和阴道灌洗液中多形核中性粒细胞(PMNS)与cfu(菌落形成单位)计数的研究,探讨PMNS代表的先天免疫在小鼠阴道假丝酵母菌病中的作用。方法:构建1次感染和2次感染阴道假丝酵母菌病小鼠模型,在感染后的第2、7、14天检测小鼠血液和阴道灌洗液中PMNS和cfu计数。对照组为正常小鼠。结果:无论是1次感染还是2次感染的小鼠,阴道灌洗液及血液中PMNS(在白细胞中的比例)和cfu计数均在感染后的第7天最高。对感染后的相同时间进行比较,接受2次感染的小鼠,其阴道灌洗液及血液中PMNS和cfu计数比接受1次感染小鼠的含量均增高,而且阴道灌洗液中的含量均高于血液。对照组阴道灌洗液PMNS和cfu计数均未检测到,血液中的含量低于其他两组。结论:PMNS在对抗阴道假丝酵母菌病中起保护作用,特别是对于2次感染,且局部作用大于系统作用。说明PMNS所代表的先天免疫在宿主防御机制中起一定的作用。     

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬乳胶颗粒实验条件筛选

目的 建立和完善可靠、敏感、稳定的评价腹腔巨噬细胞吞噬功能方法。方法 取小鼠腹腔巨噬细胞与乳胶颗粒在不同培养条件下混合后定量加入24孔板,37℃,5%CO2培养箱中孵育后,荧光显微镜下计数吞噬百分率和吞噬指数。结果 随培养时间(0.5,1,2,4h)延长,腹腔巨噬细胞吞噬乳胶颗粒的吞噬百分率增加,不同培养时间的吞噬百分率之间差异均有统计学意义(P<0.05);随小牛血清浓度(2.5%,5%,10%)和乳胶颗粒浓度(0.25‰,0.5‰,1‰,2‰)增加,腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数升高,不同浓度小牛血清和乳胶颗粒下腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数之间差异均有统计学意义(P<0.01);贴壁处理后的腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数显著高于未经贴壁处理的细胞(P<0.01);在Balb/c、C57、昆明(KM)、ICR4种品系小鼠中,Balb/c小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率显著高于其他品系小鼠(P<0.01)。结论 乳胶颗粒浓度为1‰、血清浓度为2.5%～5%、细胞贴壁2h后吞噬培养2h,选用Balb/c小鼠为该实验的最佳实验条件。     

绵羊李斯特菌在小鼠体内的感染增殖规律及诱导的细胞因子分泌

目的 研究绵羊李斯特菌（Li）静脉接种和滴鼻接种C57BL/6J小鼠后,细菌在小鼠体内感染增殖规律及诱导的细胞免疫应答水平,为Li作为一种新型疫苗载体提供科学依据。 方法 采用寇氏法测定Li静脉接种和滴鼻接种C57BL/6J小鼠的半数致死剂量（LD50）; 以0.1×LD50剂量静脉或滴鼻接种小鼠,测定不同时间点小鼠肝、脾和肺中的细菌载量、组织病理学改变,以及肝和脾组织匀浆液中IFN-γ、肺组织匀浆液中IFN-γ、TNF-α和IL-6的含量。 结果 Li静脉接种和滴鼻接种小鼠的半数致死剂量分别为6.3×106 （cfu）和2.5×108（cfu）。Li静脉感染小鼠后能够在肝、脾和肺中增殖,引起组织细胞坏死和炎性浸润并诱导IFN-γ分泌水平上调,三种器官中肝的各指标变化最显著。Li滴鼻感染小鼠后主要在肺部增殖,引起肺部病理损害并诱导肺组织IFN-γ、TNF-α和IL-6分泌水平上调。 结论 静脉接种Li可以在小鼠体内引起全身性多器官的病理和免疫反应,而滴鼻接种Li可以针对性地在小鼠肺部引起病理和免疫反应;Li可以作为一种新型疫苗载体。     

玫瑰单胞菌新疆分离株致病性研究

目的利用BALB/c小鼠作为动物模型,对玫瑰单胞菌分离株的致病性进行实验研究,了解该菌的致病能力及其在BALB/c小鼠体内的主要侵袭部位以及病变特征。方法选取6周龄的BALB/c小鼠40只,腹腔注射感染剂量106/ml玫瑰单胞菌XTD509的细菌悬液0.5 ml,观察染菌动物的临床表现以及体温、体重变化情况,分别收集感染后不同时间的肝、脾、肺、肾、膀胱、脑、淋巴结以及血液等标本,进行细菌分离,观察感染后不同时间细菌在各组织脏器中的分布;进行病理切片,观察感染后不同时间细菌对动物各脏器的损伤情况;测定感染后不同时间动物血液中白细胞水平,以确定动物在感染后的免疫反应。结果 BALB/c小鼠在感染玫瑰单胞菌XTD509后,均表现出明显的精神不振、厌食、饮水减少、发热等症状,40%(12/30)BALB/c小鼠在48 h内死亡。病理检查发现感染小鼠的肝、脾、肾、膀胱、淋巴结及脑组织都有病变,早期的病变器官主要为泌尿系统的肾脏和膀胱,且病变呈进行性发展。在感染早期从染菌小鼠的病变器官及血液中都分离到了与感染菌株完全同源的菌株。结论根据动物实验结果及科赫法则,可确认玫瑰单胞菌分离株XTD509对BALB/c小鼠具有较强的...     

肌幼虫可溶性生抗原免疫小鼠抗旋毛虫感染作用

目的 观察不同剂量旋毛虫肌幼虫可溶性抗原(muscle larvae soluble antigen,MLSAg)滴鼻免疫小鼠诱导的抗旋毛虫感染作用,确定MLSAg滴鼻免疫适宜剂量.方法 C57BL/6J小鼠50只,随机分为5组.分别用5,10,20,30μg MLSAg溶于20 μl生理盐水滴鼻免疫小鼠2次,间隔2周;对照组用0.9%NaCl 20μl滴鼻.末次免疫后7 d,用旋毛虫肌幼虫150条/只灌胃攻击全部小鼠,观察健康状况,记录体重.攻击后28 d,检测血清和肠液IgG、IgA.计数舌肌、咬肌、膈肌及后肢肌肉的虫荷.结果 攻击后对照组小鼠体重逐渐减轻,而4个免疫组小鼠体重仍呈增高趋势.5,10,20和30 μg组小鼠血清IgG水平分别为1.255,1.281,1.394和1.441;血清IgA水平分别为1.108,1.282,1.262和1.326,均高于对照组(1.158,1.035).肠液IgA水平分别为1.974,2.026,2.057和2.015明显高于对照组(1.785);10,20和30μg组小鼠肌肉虫荷均明显低于对照组及5μg组(P＜0.05).结论 不同剂量MLSAg滴鼻免疫小鼠均可诱导抗旋毛虫感染,滴鼻免疫剂量以20μg为佳.     

2种免疫层析技术用于4种传染病及其病原体检测的研究

[目的]寻求能够快速定性,定量检测4种传染病及其病原体的试验方法。[方法]应用双抗体夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测炭疽杆菌芽孢(以下简称炭疽芽孢)、鼠疫杆菌、肠出血性大肠埃希菌O_(157)：H_7(以下简称EHEC O_(157)),评价方法的灵敏性、特异性。通过分别检测模拟掺入3种菌/芽孢的“白色粉末”和检测3种细菌的强毒株,评价在实际环境样品检测中的应用。应用双抗原夹心法,建立胶体金免疫层析法、上转磷光(UCP)免疫层析法检测鼠疫F1抗体、SARS病毒抗体,检测239份青海鼠疫疫区人员血清、1236份新疆鼠疫疫源地鼠血清,检测18份恢复期SARS病人血清和9份健康对照者血清,以及206份出入境健康人员血清,考核2种检测抗体的方法在实际样品检测中的应用。通过比较炭疽杆菌、鼠疫杆菌、大肠埃希菌O_(157)以及鼠疫杆菌抗体、SARS病毒抗体的胶体金免疫层析方法、UCP免疫层析方法,比较我们建立的2套系统与加拿大RAMP系统检测炭疽杆菌的能力。[结果]UCP免疫层析方法能在35min内完成检测,炭疽芽孢检测掺入“白色粉末”的样品灵敏性为1×10~4cfu/ test,炭疽芽孢最低检测限为1×10~5cfu/ml(原溶液芽孢浓度),多种不同的芽孢菌及其它细菌共38种54株检测说明该法特异性良好,仅与腊样芽孢杆菌有交叉反应,特异性为97％；鼠疫杆菌检测灵敏性为5×10~4cfu/ml,最低检测菌数为5×10~3cfu/test,在10~7cfu/ml水平上未发现与30余种细菌有交叉反应,包括最近缘假结核耶尔森菌；EHEC O_(157)检测灵敏性为1×10~3cfu/ml,仅与弗氏枸橼酸杆菌有交叉反应,特异性为98％。胶体金免疫层析方法能在10min内完成检测,炭疽芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O_(157)检测灵敏度分别为1×10~6cfu/ml、1×10~5cfu/ml、1×10~5cfu/ml,“白色粉末”等环境样品最低可检测敏感性为1×10~5cfu,1×10~4cfu,1×10~4cfu/test。胶体金免疫层析方法分别应用于炭疽、鼠疫强毒株的检测,检测限为5×10~4cfu/test和7×10~4cfu/test。在实际血清样品检测中,与间接血凝方法对比,鼠疫抗体UCP和胶体金免疫层析方法有更好的敏感性。血清样品检测显示,SARS抗体的胶体金和UCP免疫层析方法均有较好的特异性和敏感性。[结论]2种免疫层析方法都有快速、敏感、特异的特点：上转磷光免疫层析方法可实现定量检测,敏感性优于胶体金免疫层析法；炭疽检测与加拿大RAMP检测系统相当；胶体金免疫层析法具有简便、直观、易行的特点。2种免疫层析方法均适合于炭疽芽孢芽孢、鼠疫杆菌、EHEC O_(157)、鼠疫杆菌抗体、SARS抗体的现场检测和筛查。     

2017年河北省分离鼠疫菌的毒力研究

目的研究河北省鼠疫自然疫源地2017年动物鼠疫流行期间,分离的鼠疫耶尔森菌(简称鼠疫菌)对小白鼠和豚鼠的毒力。方法对小白鼠和豚鼠分组并选取2017年分离的鼠疫菌株(201701、201702、201703)为研究对象。将每株菌37℃培养24~36 h制成菌悬液,比浊7个不同浓度,分组进行腹股沟皮下注射,分笼饲养观察14 d,动物死亡后取腺、肝、脾、肺、心进行细菌培养,死亡动物以分离到鼠疫菌为特异性死亡,分别计算每株鼠疫菌对小白鼠和豚鼠的半数致死量(LD50)。结果3株鼠疫菌中,201702、201703株毒力均较强,对小鼠LD50分别为463.44、56.23;201701株毒力相对较弱,对小鼠LD50为2157.74。3株菌中201703对豚鼠有较强的毒力,LD50为316.23,201701、201702株对豚鼠毒力弱,LD50均为3162.28。结论2017分离的鼠疫菌毒力属于中等毒力,与河北省疫源地以前分离菌株毒力一致。     

STAg不同途径免疫对小鼠弓形虫感染保护作用

目的 观察弓形虫可溶性速殖子抗原(soluble tachyzoite antigen,STAg)滴鼻、灌胃和皮下注射免疫小鼠诱导的抗弓形虫感染作用。方法 40只6~7周龄BALB/c小鼠随机分为4组,前3组分别以20μg STAg滴鼻、灌胃或皮下注射免疫小鼠2次,间隔2周,对照组不做处理。末次免疫后14 d,用速殖子2×10⁴个/只灌胃攻击所有小鼠,观察小鼠健康状况,记录体重,计算存活率。攻虫后30 d颈椎脱位处死小鼠,计数脾和脑组织速殖子。结果 滴鼻免疫小鼠的健康状况好于其他组,存活率(70%)高于皮下(60%)、灌胃(60%)和对照组(40%)。滴鼻组脾虫荷为369.48,皮下注射组脾虫荷为386.94,显著低于灌胃组(630.40)和对照组(664.93)(F=3.611,P<0.05)。滴鼻组(36.45)、灌胃组(34.85)和皮下注射组(40.22)脑虫荷差异无统计学意义(F=1.999,P>0.05),但均显著低于对照组(57.32)(F=1.999,P<0.05)。结论 20μg STAg滴鼻免疫小鼠诱导了较强的抗弓形虫感染作用,优于皮下和灌胃免疫。     

北京市售酸奶中益生菌的分离鉴定及耐药性检测

目的对北京市售酸奶中添加的益生菌种类及浓度、益生菌酸奶分离株对6种抗生素(青霉素、氨苄青霉素、庆大霉素、万古霉素、克林霉素及红霉素)的耐药性进行检测。方法采用直接稀释法分离酸奶样品中的益生菌并进行活菌计数,对分离到的菌株进行革兰染色和生化反应鉴定,同时采用肉汤稀释法测定分离菌株对6种抗生素的最小抑菌浓度。结果用MRS培养基、(36±1)℃、厌氧培养条件下从31种北京市售酸奶样品中共分离出52株菌,其中革兰氏阳性杆菌37株,革兰阳性球菌15株。生化反应鉴定结果将52株菌分为乳酸杆菌和嗜热链球菌2大类共6个种;活菌计数结果显示,12份样品(38.7%)中益生菌计数低于国家标准规定的1×106cfu/ml(g);19份样品(61.3%)中活菌计数符合国家标准规定;所有酸奶样品分离菌株对青霉素,氨苄青霉素均敏感,而对庆大霉素的敏感性较低,1株菌对克林霉素和红霉素耐药,4株菌对万古霉素耐药。结论采集的北京市售酸奶样品大部分产品中添加的益生菌种类及活菌数符合国家标准规定,部分产品生产用菌种对一种或多种抗生素耐药。     

左氧氟沙星和莫西沙星对鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度的测定

目的 根据美国临床和实验室标准协会（CLSI）药敏试验方法中的琼脂稀释法,测定美国食品和药物监督管理局( FDA)批准治疗鼠疫的2种药左氧氟沙星和莫西沙星对鼠疫耶尔森菌的最低抑菌浓度,确定鼠疫菌对这2种药物的敏感性及MIC90（可抑制90%细菌生长的药物浓度）,掌握这2种药物对鼠疫菌的抑菌浓度,为鼠疫的临床治疗提供基线数据。方法 利用琼脂平板稀释法测定左氧氟沙星和莫西沙星这2种抗生素分别对1 010株鼠疫菌的最低抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）。结果 所测的1 010株鼠疫菌中未发现对左氧氟沙星和莫西沙星具有单个或2种抗菌药物抗性的鼠疫菌株,其最低抗菌药物浓度MIC50分别为0.06和0.12 μg/ml,MIC90均为0.25 μg/ml。结论 利用琼脂稀释法测定左氧氟沙星和莫西沙星对鼠疫耶尔森菌最低抑菌浓度,有效的评价了鼠疫耶尔森菌对氟喹诺酮类代表药物左氧氟沙星和莫西沙星的敏感性,实验数据支持我国在鼠疫临床治疗中可以采用左氧氟沙星和莫西沙星为治疗药物。