尼克酰胺对NOD鼠糖尿病的影响及机制探讨

1型糖尿病（T1DM）的发病机制是由于T淋巴细胞介导的胰岛β细胞自身免疫性破坏，研究认为，NOD鼠β细胞死亡的主要方式是凋亡，尼克酰胺（NA）能防止细胞毒因子和淋巴细胞对β细胞的攻击，减少β细胞凋亡。本研究从细胞因子和凋亡途径的角度，探讨NA预防NOD小鼠胰岛炎与糖尿病的作用机制。     

枸杞多糖对外源一氧化氮损伤下小鼠胰岛细胞的保护作用

目的研究枸杞多糖对外源性的一氧化氮损伤下小鼠胰岛的保护作用。方法体外培养小鼠胰岛细胞NIT-1，用硝普钠和不同浓度枸杞多糖对它们的细胞活性、NO浓度、SOD活性、MDA含量、细胞凋亡率变化及凋亡相关基因bcl-2和bax进行检测。结果不同浓度枸杞多糖组可以明显抑制NO引起的胰岛细胞的活性下降、凋亡率增加、SOD浓度下降、NO和MDA含量增加，bcl-2mRNA表达降低，baxmRNA表达显著增加，抑制作用随枸杞多糖浓度的增加而增强。     

尼克酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂的抗肿瘤作用研究进展

尼克酰胺磷酸核糖转移酶(nicotinamide phosphoribosyltransferase,NAMPT)是哺乳动物细胞烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamide adenine dinucleotide,NAD)补救合成通路的限速酶。NAMPT通过合成NAD,参与调节细胞内重要的生理病理过程。近年研究发现,NAMPT与肿瘤发生、发展有着密切关系,抑制NAMPT可以起到有效的抗肿瘤作用。NAMPT已成为抗肿瘤药物研究新靶点,其抑制剂FK866、GMX1778作为抗肿瘤药,已经进入临床试验。NAMPT抑制剂作用机制的研究主要包括诱导细胞凋亡、细胞自吞噬、抑制细胞增殖、血管生成等。本文综述了NAMPT抑制剂的抗肿瘤作用及机制研究。     

IL—1β诱导的NO产生没有参与其细胞毒性作用

目的：研究白细胞介素－1β（IL－1β）对原代培养大鼠肝细胞的作用并进一步观察IL－1β是否通过诱导NO产生发挥作用的。方法：所有实验使用雄性Wistar大鼠（5－7周龄，体重170－230g），无菌条件下原位胶原酶灌注肝脏分离肝细胞。观察IL－1β的细胞毒性作用（对肝细胞LDH释放的影响），以及IL－1β诱导产生的NO是否参与了这一作用。结果：IL－1β显促进了原代培养大鼠肝细胞LDH的释放，这种作用是剂量和时间依赖的；IL－1β剂量和时间依赖地诱导iNOS的表达和NO的产生，L-Arginine（NO合成底物）显促进了IL－1β刺激的NO产生，L－NMMA和L－NAME（iNOS抑制剂）完全抑制了IL－1β刺激的NO产生；IL－1β诱导的NO产生不影响IL－1β对肝细胞LDH释放的促进作用。结论：IL－1β对于原代培养大鼠肝细胞具有细胞毒性作用，而其诱导产生的NO没有参与这一作用。     

月季花水提物对外源性一氧化氮损伤的胰岛细胞的保护作用

目的观察月季花水提物对外源性一氧化氮损伤的胰岛细胞的保护作用。方法采用外源性一氧化氮(NO)作用于离体胰岛细胞5 h,给予不同浓度的月季花水提物,观察细胞存活率、超氧化物岐化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)、NO等指标变化情况。结果外源性一氧化氮作用于离体胰岛细胞后,胰岛细胞存活率下降,SOD活力下降,MDA、NO含量升高,胰岛素分泌功能降低,胞内DNA含量下降。给与不同质量浓度(1、0.1、0.01 g.L-1)的月季花水提物则可减少NO、MDA释放,提高SOD水平,显著提高细胞存活率,提高胰岛素分泌功能量,对由外源性NO导致的DNA含量降低有一定的抑制作用。结论月季花水提物能够提高胰岛细胞的抗氧化能力,对外源性NO造成的胰岛细胞损伤有很好的保护作用。     

一氧化氮对大鼠胰岛细胞胰岛素分泌的影响

目的：研究一氧化氮(NO)对胰岛细胞分泌胰岛素的影响及其机制。方法：①采用经胰管注射胶原酶技术分离大鼠胰岛，葡聚糖(Ficoll)不连续密度梯度方法离心纯化胰岛；②用硝普钠(SNP)作为NO供体，硫酸亚铁(FeS04)作为NO抑制剂，放射免疫法检测胰岛细胞胰岛素分泌量。结果：NO明显抑制胰岛细胞胰岛素基础分泌和葡萄糖刺激的胰岛素释放，FeSO4能阻断这种作用(P值均＜0．05)。结论：NO能明显抑制大鼠胰岛细胞的分泌功能，这可能是体内胰岛细胞损害的因子之一。     

白介素-10对肝纤维化大鼠星状细胞表达细胞间黏附分子-1的影响

目的:探讨外源性白介素-10(IL-10)对肝纤维化大鼠星状细胞(HSC)表达细胞间黏附分子-1(ICAM-1)的影响.方法:60只♂性SD大鼠随机分为生理盐水对照组8只(N组)、CCl4组28只(C组)和IL-10干预组24只(Ⅰ组),建立正常对照、CCl4诱导肝纤维化模型及IL-10干预模型.造模第7周和第11周,采用链霉蛋白酶E、Ⅳ型胶原酶经门静脉离体灌流消化,11%Nycodenz密度梯度离心分离HSC.半定量RT-PCR法检测各组HSC的ICAM-1 mRNA表达水平.结果:成功构建纤维化大鼠模型并分离肝星状细胞.造模第7周、第11周新分离的HSC中,N组的ICAM-1不表达,C组与I组均检出ICAM-1表达,C组表达均明显高于Ⅰ组(P＜0.01);造模第11周,Ⅰ组的ICAM-1表达水平较第7周有明显下降(P＜0.01),C组较第7周则明显增多(P＜0.01).结论:ICAM-1随实验性大鼠肝纤维化进展表达升高;IL-10可通过抑制HSC ICAM-1表达,在抗纤维化中发挥作用.     

吡格列酮对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用分析

目的 探讨吡格列酮对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用.方法 将雄性Wistar大鼠30只随机抽取10只作为空白对照组,其余腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型.将成模大鼠(20只)随机分为糖尿病对照组和吡格列酮组.吡格列酮组给予吡格列酮10mg·kg-1·d-1灌胃,其余2组给予等量生理盐水灌胃.16周后3组大鼠断尾测空腹血糖(FPG),心包取血测空腹胰岛素水平(FINS)和糖化血红蛋白(HbAlc).观察3组大鼠FPG、FINS、HbAlc、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平并比较.结果 与糖尿病对照组相比,吡格列酮组FPG、HbAlc、FINS、HOMA-IR水平降低(P＜0.05);糖尿病对照组、吡格列酮组FPG、HbAlc、FINS、HOMA-IR水平较空白对照组升高(P＜0.05).结论 吡格列酮对胰岛β细胞有一定的保护作用.     

甲壳低聚糖对2型糖尿病造模大鼠胰岛β细胞的保护作用

目的观察甲壳低聚糖(COS)对2型糖尿大鼠胰岛β细胞的保护作用。方法试验大鼠经腹腔注射STZ 2周后,挑选葡萄糖耐量异常者继续给予高糖高脂饲料喂养,同时试验组用COS灌胃给药。分别在第0、4、8、12周剪尾取血测定空腹血糖及胰岛素水平,第16周末,股动脉取血,分离胰腺并固定做HE染色和胰岛原位细胞凋亡检测。结果 COS组空腹血糖、胰岛素水平和胰岛β细胞凋亡比例明显低于模型组。结论甲壳低聚糖具有改善胰岛素抵抗,保护胰岛β细胞的作用。     

吡格列酮对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用分析

目的探讨吡格列酮对糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用。方法将雄性Wistar大鼠30只随机抽取10只作为空白对照组,其余腹腔注射链脲佐菌素（STZ）建立糖尿病大鼠模型。将成模大鼠（20只）随机分为糖尿病对照组和吡格列酮组。吡格列酮组给予吡格列酮10mg·kg-1·d-1灌胃,其余2组给予等量生理盐水灌胃。16周后3组大鼠断尾测空腹血糖（FPG）,心包取血测空腹胰岛素水平（FINS）和糖化血红蛋白（HbAlc）。观察3组大鼠FPG、FINS、HbAlc、胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）水平并比较。结果与糖尿病对照组相比,吡格列酮组FPG、HbAlc、FINS、HOMA-IR水平降低（P〈0.05）;糖尿病对照组、吡格列酮组FPG、HbAlc、FINS、HOMA-IR水平较空白对照组升高（P〈0.05）。结论吡格列酮对胰岛β细胞有一定的保护作用。     

胰岛素样生长因子-1对小鼠胰岛细胞凋亡的保护作用

目的：探讨胰岛素样生长因子-1（IGF-1）对第三丁基过氧化氢（tBHP）诱导小鼠胰岛β细胞株MIN6凋亡的保护作用。方法：体外培养小鼠胰岛β细胞株MIN6,分为：对照组、tBHP（25μmol/L）组、IGF-1（100ng/mL）组和IGF-1＋tBHP组。丫啶橙-溴化乙锭（AO-EB）荧光染色法及原位末端标记法（TUNEL）镜下观测各实验组细胞凋亡情况,Griess法检测各实验组细胞内NO水平。结果：25μmol/LtB-HP作用1h可诱导MIN6细胞凋亡,并使细胞内NO含量明显增加。预先经过100ng/mLIGF-1作用24h后,tBHP诱导的MIN6细胞凋亡明显减少,同时细胞内NO含量亦显著降低。结论：IGF-1对tBHP诱导凋亡的小鼠胰岛β细胞株MIN6有一定的保护作用,其机制可能与IGF-1减少tBHP诱导的NO合成有关。     

可溶性细胞间黏附分子-1、白介素-1β与绒毛膜羊膜炎的关系

目的探讨可溶性细胞间黏附分子-1（sICAM-1）、白细胞介素-1β（IL-1β）与绒毛膜羊膜炎的关系。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测未足月胎膜早破组56例、足月胎膜早破组38例孕妇的血清中sICAM-1、IL-1β、C反应蛋白（CRP）、白细胞（WBC）的水平,并进行胎膜的病理检查。结果未足月胎膜早破组的绒毛膜羊膜炎的发生率明显高于足月胎膜早破组（P〈0．05）;发生绒毛膜羊膜炎的胎膜早破孕妇的血清中sICAM-1、IL-1β、CRP、WBC水平明显高于非绒毛膜羊膜炎的胎膜早破孕妇（P〈0．05）;血清sICAM-1比CRP、WBC指标有更高的敏感性、特异性,血清IL-1β比CRP、WBC指标亦有更高的敏感性,特异度类似。结论检测孕妇血清的sICAM-1、IL-1β水平是早期诊断绒毛膜羊膜炎的良好指标。     

水飞蓟宾保护胰岛β细胞的作用及机制

水飞蓟宾是从水飞蓟中提取的一种黄酮类天然化合物,已用于多种疾病的治疗.近年来研究显示,水飞蓟宾对胰岛β细胞具有抗氧化、抗炎、改善糖脂毒性、增加胰岛素敏感性,改善胰岛素抵抗的作用,有可能成为潜在的糖尿病防治药物.     

黄芩苷对离体大鼠心肌缺血的保护作用

目的：研究黄芩苷对离体大鼠心肌缺血的保护作用及其机制。方法：将36只SD大鼠分为3组：对照组（n=12）灌流110min，模型组（n=12）灌流25min缺血25min再灌注1h，给药组（n=12）灌流20min后换含5mg／L黄芩苷灌流液灌流5min，后同模型组。监测血流动力学及冠状动脉流出量。测定冠脉流出液中CK及LDH水平？心肌内p38mapk、NF-κ表达量及TNF-α、IL-6水平分别以免疫组化及ELISA法检测。结果：给药组较模型组心功能明显改善：冠脉流出量增多；冠脉流出液中心肌酸磷酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）均有下降（P〈0．05）；心肌组织TNF-α及IL-6含量降低（P〈0．05）；p38mapk、NF-κB表达减弱。结论：黄芩苷对离体大鼠心肌缺血具有保护作用，可能与降低心肌p38mapk、NF-κB等与缺血相关的酶从而下调心肌TNF-α及IL-6表达有关。     

Exendin-4对h IAPP诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用

目的 探究Exendin-4对人源胰岛淀粉样多肽（h IAPP）诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其可能的作用机制。方法 体外培养胰岛β细胞INS-1E,加入2.5、5、10、20μmol/L的hIAPP培养48 h,建立hIAPP诱导细胞凋亡模型。20、50、100 nmol/L Exendin-4预处理24 h,CCK-8法检测细胞活力,筛选有效的药物剂量。随后实验分为空白组、Exendin-4组、h IAPP模型组、h IAPP+Exendin-4组以及阳性对照组。LDH释放检测法分析膜通透性变化;化学发光法测定细胞内腺苷三磷酸（ATP）水平;JC-1荧光探针法检测线粒体膜电位的改变;Western blot检测线粒体凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax以及Bad的表达。结果 20μmol/L的hIAPP可以明显抑制INS-1E细胞增殖,增加LDH的释放,增加细胞内ATP的消耗,增加去极化线粒体膜电位比例,下调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,上调促凋亡蛋白Bax和Bad的表达（均P<0.05）。与hIAPP组相比,h IAPP+Exendin-4组能够显著提高细胞活力,减少LDH释放,...     

杜仲提取物对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制研究

目的 观察杜仲提取物对缺血再灌注损伤大鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA表达的影响。方法 采用大鼠大脑中动脉线栓法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,造模前以杜仲提取物不同剂量连续ig给药14 d,缺血2 h,再灌注24 h后,观察杜仲提取物对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能症状,脑梗死范围改变,实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测脑缺血再灌注损伤大鼠海马TNF-α、IL-1β及iNOS mRNA的表达。结果 杜仲提取物可显著改善脑梗死范围(P<0.05),下调海马TNF-α、IL-1β及iNOS mRNA的表达(P<0.05)。结论 杜仲提取物可下调大鼠脑组织中TNF-α、IL-1β及iNOS mRNA的表达产生抗局灶性脑缺血再灌注损伤作用。     

利培酮与氯氮平对离体胰岛细胞凋亡的影响

目的:探讨利培酮和氯氮平对体外培养胰岛细胞凋亡的影响.方法:利用细胞培养技术,在一定的葡萄糖浓度(5.5mmol/L)和不同作用时间(1h或4 h)下,以1μmol/L利培酮和氯氮平分别作用于体外培养大鼠胰岛细胞,以单染法流式细胞仪检测作用后胰岛细胞的凋亡率,并与相应的对照组比较.结果:利培酮作用于胰岛细胞1h和4h后,细胞凋亡情况与对照组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；氯氮平作用于胰岛细胞1h和4h后,细胞凋亡情况与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.05)；氯氮平作用于胰岛细胞4h后与作用1h后相比,细胞凋亡差异无统计学意义(P＞0.05).结论:氯氮平可以诱导离体大鼠胰岛细胞凋亡,导致胰岛细胞DNA含量减少,而利培酮在本研究中引起离体胰岛细胞发生凋亡的现象不明显.     

白细胞介素1β转化酶抑制剂对胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的诱导

目的 探讨白细胞介索(IL)1β转化酶(ICE)抑制剂诱导急性胰腺炎腺泡细胞凋亡的作用.方法 120只SD大鼠随机分为假手术对照组(S)、胰腺炎组(P)和ICE抑制剂干预组(Ⅰ),每组40只.各组造模后在2、6、12和24 h 4个时间点分别检测10只大鼠.Ⅰ组于制模前48 h开始腹腔注射ICE抑制剂0.25 mg/100 mg体质量,间隔12 h注射一次.P组仪同时注射等量生理盐水.应用ELISA方法、细胞凋亡原位标记(TUNEL)染色等检测血清中淀粉酶、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β和胰腺细胞凋亡.结果 HE染色见胰腺组织中典型的细胞核固缩及凋亡小体形成.Ⅰ组各个时间点病理学评分和血淀粉酶、TNF-α、IL-1βp浓度均明显低于P组,胰腺细胞凋亡指数显著高于P组(P<0.01).结论 ICE抑制剂能减轻急性胰腺炎严重程度,其机制可能与其对炎症介质的抑制和诱导胰腺腺泡细胞的凋亡有关.     

白细胞介素1受体拮抗剂对胰腺炎大鼠胰腺细胞凋亡的诱导

目的 从胰腺腺泡细胞凋亡的角度探讨白细胞介素1受体拮抗剂(IL-1Ra)对急性胰腺炎腺泡细胞的诱导.方法 用牛黄胆酸钠建立大鼠急性坏死性胰腺炎模型,IL-1Ra腹腔注射诱导胰腺腺泡细胞凋亡,并应用细胞凋亡原位标记检测(TUNEL)染色,检测胰腺组织腺泡细胞的凋亡情况.结果 HE染色见胰腺组织中典型的细胞核固缩及凋亡小体形成.IL-1Ra干预后1、2、6、12 h胰腺细胞凋亡指数显著高于非治疗组相应时间点(P＜0.01).结论 IL-1Ra治疗急性胰腺炎的机制不仅限于对炎症介质的抑制,且能够通过诱导胰腺腺泡细胞的凋亡减轻胰腺炎的严重程度.