尖吻蝮蛇类凝血酶基因的克隆及生物信息学分析

为了获得蛇毒类凝血酶基因，本研究根据不同蛇毒类凝血酶cDNA5’和3’保守性序列设计了引物；通过RT—PCR从尖吻蝮蛇毒腺总RNA中扩增到1个808bp特异性片段，将该cDNA重组到pMD18-T载体中，利用生物信息学的方法对测序结果进行了分析。结果表明：该特异性片段中有一个783bp的开放阅读框架．其编码蛋白质序列与蛇的类凝血酶序列有98．5％的同源性，也具有蛇毒类凝血酶的典型特征。结论：本实验获得了一个新的尖吻蝮蛇类凝血酶基因。     

尖吻蝮蛇毒促凝组分的血栓形成研究

尖吻蝮蛇毒促凝组分的血栓形成研究刘敏涓，管锦霞，周立红，刘泽霖我们观察了尖吻蝮蛇毒类凝血酶组分对凝血酶凝固作用及时血栓弹力图的影响。报道如下。材料和方法１血液标本：正常人静脉血与０．１３ｍｏｌ／Ｌ枸橼酸钠以９：１混和。２试剂：尖吻蝮蛇毒促凝组分系尖吻...     

尖吻蝮蛇毒纤维蛋白溶解活性组分的纤溶作用

采用ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ离子交换色谱，Ｕｌｔｒｏｇｅｌ ＡｃＡ４４凝胶过滤色谱和ＦＰＬＣ快速蛋白色谱，从湖南产尖吻蝮蛇毒中分离，提取出一种纤维蛋白溶解活性组分。采用＾１２５Ｉ标记纤维蛋白原制成血凝块的方法，对此组分体外溶栓效果进行观察，同时测定了该组分在血浆中水解纤溶酶的特异底物Ｓ－２２５１的活力及纤维蛋白原含量的变化。结果表明，湖南产尖吻蝮蛇毒纤维蛋白溶解活性组分的体外有明显     

甲状腺切除术应用尖吻蝮蛇血凝酶的止血效果

目的探讨尖吻蝮蛇血凝酶对甲状腺切除患者的止血作用及安全性。方法 2013年1月至2014年6月采用前瞻、随机、盲法、对照研究设计,满足方案入选标准并获得知情同意的甲状腺疾病患者共60例,按随机数字表法分为两组,均行甲状腺部分切除术。观察组(30例)于术前20 min静脉注射尖吻蝮蛇血凝酶2 U,术后4 h再次注射2 U;对照组(30例)在相同时间给予生理盐水。观察记录术中出血量和术后24 h创面引流量;同时观察凝血功能变化和安全性。结果观察组术中出血量(40.6±19.5)g少于对照组的(54.1±22.3)g(t=2.496,P=0.015);术后24 h创面引流量(56.4±24.8)g少于对照组的(73.0±31.5)g(t=2.268,P=0.027);凝血功能指标两组相近(P均>0.05)。两组患者均未出现血栓等并发症,未出现研究药物相关的不良事件。结论尖吻蝮蛇血凝酶对甲状腺切除手术创面有较好的止血作用,且未增加血栓形成的风险,有较好的安全性。     

尖吻蝮蛇毒降压组分对血小板聚集及其胞浆游离钙浓度的影响

尖吻蝮蛇毒降压组分是从尖吻唤蛇毒中分离出来的具有扩张微小血管、降低血压作用的组分[1]。为了探讨其降压作用的机制，我们采用比浊法和Fura－2荧光测定法，探讨了其对人和兔血小板聚集及人血小板胞浆游离钙离子浓度的影响。材料和方法1材料降压组分（depressorcompoment，DPC）由本所提供；ADP、N，N一羟乙基哌嗪乙烷磺酸（HEPES）、刚跌美辛、前列腺素E；（PGE；）、Fura－2／AM、血小板活化因子（PAF）、钙离子载体人。ls，为Sigma公司产品；EG－TA为Fluka公司产品；TritonX－100为Room－Mass公司产品。2血小板聚集试验…     

纤凝止血泡沫气雾剂止血效果的实验研究

目的 探讨纤凝止血泡沫气雾剂对创伤出血创面的止血效果.方法 建立大鼠股动脉创伤出血模型、家兔股动脉创伤出血模型以及家兔肝创伤渗血模型,将自制纤凝止血泡沫气雾剂组、云南白药组和盐水组进行比较,观察止血时间和出血量.结果 纤凝止血泡沫气雾剂组止血时间显著缩短,出血量减少,止血效果可靠.结论纤凝止血泡沫气雾剂可作为创面止血材料.     

尖吻蝮蛇血凝酶对照氨甲环酸氯化钠防治围手术期失血有效性的真实世界研究

目的 比较尖吻蝮蛇血凝酶和氨甲环酸氯化钠在真实世界中用于住院患者围手术期止血的有效性。方法 根据溯直医疗数据库(SuValue^?)中2016年1月1日至2020年12月31日使用尖吻蝮蛇血凝酶或氨甲环酸氯化钠的就诊记录构建研究型数据库。按不同干预措施将患者分别纳入研究组和对照组,进行1∶1倾向性评分匹配,比较两组的有效性差异。结果 两组各纳入858例患者,两组患者的基线特征无统计学差异(P>0.05)。研究结果显示,尖吻蝮蛇血凝酶组患者的住院时长、红细胞压积下降值、平均估计手术出血量、血红蛋白下降值均低于氨甲环酸氯化钠组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论 基于当前真实世界证据,尖吻蝮蛇血凝酶在住院患者围手术期止血的有效性优于氨甲环酸氯化钠。     

尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ通过促进半胱天冬酶3表达诱导K562/A02细胞凋亡

本研究探讨尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(component I from Agkistrodon acutus venom,AAVC-Ⅰ),对人慢性髓系白血病(CML)细胞生物学特性的影响.选择K562/A02细胞株为对象,培养体系中加入不同浓度的AAVC-Ⅰ(6.25 - 100 μg/ml),用CCK-8法检测K562/A02细胞增殖活性,Giemsa和Hochest 33258染色法观察细胞形态学的变化,流式细胞术检测K562/A02细胞凋亡情况,酶显色活性分析法检测caspase 3酶活性的变化.结果表明,AAVC-Ⅰ能够抑制K562/A02细胞的体外增殖,呈时间和剂量依赖性,48h时半数抑制浓度为30.988 μg/ml.AAVC-Ⅰ作用K562/A02细胞48 h后,镜下可见胞核固缩及凋亡小体的形成.流式细胞术分析显示,随着作用药物的浓度由0增高到50μg/ml,细胞凋亡率也由0.88％升高到53.66％.相比对照组,各实验组caspase 3凋亡蛋白的表达呈浓度依赖性增加(P＜0.05).结论:AAVC-Ⅰ能够有效地抑制人红白血病K562/A02细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与caspase 3蛋白的高表达促进K562/A02细胞凋亡有关.     

尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ通过促进半胱天冬酶3表达诱导K562/A02细胞凋亡

本研究探讨尖吻蝮蛇毒抑瘤组分Ⅰ(component I from Agkistrodon acutus venom,AAVC-Ⅰ),对人慢性髓系白血病(CML)细胞生物学特性的影响。选择K562/A02细胞株为对象,培养体系中加入不同浓度的AAVC-Ⅰ(6.25-100μg/ml),用CCK-8法检测K562/A02细胞增殖活性,Giemsa和Hochest 33258染色法观察细胞形态学的变化,流式细胞术检测K562/A02细胞凋亡情况,酶显色活性分析法检测caspase 3酶活性的变化。结果表明,AAVC-Ⅰ能够抑制K562/A02细胞的体外增殖,呈时间和剂量依赖性,48 h时半数抑制浓度为30.988μg/ml。AAVC-Ⅰ作用K562/A02细胞48 h后,镜下可见胞核固缩及凋亡小体的形成。流式细胞术分析显示,随着作用药物的浓度由0增高到50μg/ml,细胞凋亡率也由0.88%升高到53.66%。相比对照组,各实验组caspase 3凋亡蛋白的表达呈浓度依赖性增加(P<0.05)。结论:AAVC-Ⅰ能够有效地抑制人红白血病K562/A02细胞增殖并促进其凋亡,其机制可能与caspase 3蛋白的高表达促进K562/A02细胞凋亡有关。     

自制手背静脉穿刺点止血夹的临床效果评价

目的评价自制手背静脉穿刺点止血夹的止血效果。方法 2013年7月,便利抽样法选取在解放军总医院进行手背静脉输液患者120例为研究对象,按就诊先后将其分为A、B、C三组,每组40例。A组患者输液完毕后由护士按压止血,B组患者自行按压止血,C组患者使用自制手背静脉穿刺点止血夹。比较各组穿刺点辅料渗血情况和24h后有无皮下淤斑。结果三组患者穿刺点出血情况的差异和24h后穿刺点皮下淤血情况的差异均有统计学意义(均P0.05)。结论自制手背静脉穿刺点止血夹能有效按压手背静脉穿刺点,达到护士按压水平,优于患者自行按压。     

载氨甲环酸多孔淀粉的制备及其止血性能评价

本研究通过物理和化学两种机制协同增强止血剂的止血性能,研发一种安全高效、方便使用的新型院前急救止血产品。实验以多孔淀粉（PS）为载体,以氨甲环酸（TA）为载药组分,制备了载氨甲环酸多孔淀粉（TAPS）。以吸水率评价TAPS的吸附性能,以体外促凝血试验和体内止血试验评价TAPS的止血性能。体外促凝血试验用Lee-White法测定全血凝固时间。实验设空白对照、PS、TAPS3组,每组10个样本。体内止血试验采用雌性SO大鼠（27）只,随机分为Ps、云南白药和TAPS组,每组9只动物,建立大鼠肝脏创伤出血模型,测定完全止血时间。结果表明：每克PS载TA不超过0．02g时不影响Ps的吸水率;TAPS与Ps对全血凝固时间的影响无统计学差异（P〉0．05）;TAPS用于大鼠肝脏左叶创伤的完全止血时间为236．67±55．00s,优于云南白药（P〈0．05）和PS组（P〈0．01）,止血效果有显著性差异。结论：Ps能够载药并释放药物成分发挥作用,每克PS载TA不超过0．02g时不影响Ps的物理吸水促凝血性能,载TA能够增强Ps的止血效果,TAPS通过物理和化学两种止血机制协同作用提高了止血产品的效能。     

蝮蛇咬伤患者临床护理路径的构建

目的构建适用于蝮蛇咬伤患者的临床护理路径(clinical nursing pathway,CNP)。方法 2011年12月至2012年4月,采用目的抽样法选择16名医疗及护理专家为咨询对象,在查阅文献、质性访谈、病历回顾的基础上,构建CNP初步框架,形成专家咨询问卷,应用德尔菲法对专家进行两轮咨询。结果两轮咨询问卷的回收率分别为100.0%和93.8%,权威系数均为0.86;一、二级条目的协调系数分别为0.336、0.304(P0.01);重点护理方案中2个一级条目合并、出路径标准中增加1个二级条目、评估及观察记录单中增加2个二级条目,最终确立的蝮蛇咬伤CNP。主要包括路径出入标准、CNP表单、重点环节的护理方案、评估与观察记录单、健康教育记录单。结论 2轮咨询结果具有可靠性,所构建的蝮蛇咬伤CNP能为专病护理干预方案的选择提供参考。     

腹蛇咬伤后早期三棱针多点打孔排毒法治疗效果临床观察

目的:观察腹蛇咬伤后咬伤部位早期三棱针打孔法排毒的治疗效果。方法:根据患者中毒时间、病情严重程度采用配伍设计,选取2011-07我部接诊腹蛇咬伤手患者30例,按病情严重程度分级后再分别分入三棱针打孔组、切开排毒组和对照组。入院后同时给予抗腹蛇毒血清、抗感染及中医中药等治疗。观察终点:患者患肢肿胀消褪时间、伤口部位感染、脓肿形成及坏死等情况、其它严重并发症如心肌酶升高、血小板减少及住院时间。结果:①三棱针打孔组、切开排毒组患肢肿胀消退时间明显小于对照组(P<0.05),但前两组间无差异。②三棱针打孔组皮肤感染、脓肿形成及坏死明显低于其他两组。③其他并发症各组间无显著差异。④三棱针打孔组住院时间明显短于切开排毒组和对照组(均P<0.05)。结论:腹蛇咬伤后咬伤部位早期三棱针打孔法排毒疗法可显著缩短患者患肢肿胀消褪及住院时间,并显著减轻伤口局部感染、脓肿及坏死情况的发生;与传统的伤口切开排毒法相比有明显的优势。     

两种吸收性止血材料应用于眼眶手术中的护理观察

目的探讨两种吸收性止血材料(止血纱布和明胶海绵)在眼眶手术中局部创面贴敷止血的效果及术后护理方法。方法对手术中利用止血纱布(39例)或明胶海绵(50例)局部创面贴敷止血的眼眶病患者进行回顾性分析。结果止血纱布的止血成功率为100%,平均止血时间为(9.5±2.1)min,平均出血量为(112±13)ml,2例患者发现有脓肿、肿瘤样征象;明胶海绵的止血成功率为88%,平均止血时间为(21.1±4.9)min,平均出血量为(392±61)ml,4例患者出现视力检测异常。结论可吸收止血纱布组织相容性好,使用方便、安全,止血效果可靠,是眼眶手术局部止血的理想材料,且便于术后护理。     

血必净对蝮蛇咬伤后心肌损伤患者的保护作用

目的：观察血必净注射液对蝮蛇咬伤患者血清心肌酶值的影响,探讨其对心肌的保护作用。方法：64例蝮蛇咬伤后心肌酶值增高的患者,按照治疗方法的不同,分为观察组32例,对照组32例。对照组给予常规治疗,观察组除常规治疗外,予血必净注射液50ml静脉滴注1次/d,疗程7d。分别于治疗前及治疗后第1、4、7天晨采静脉血,测定血清心肌酶值,包括门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和肌酸激酶同工酶（CK-MB）,并进行对比。结果：治疗前和治疗后第1天,2组结果差异无统计学意义;第4天观察组血清AST、LDH、CK、CK-MB水平明显低于对照组,2组比较差异有统计学意义;第7天观察组有8例个别心肌酶值未恢复正常,而对照组有17例,差异有统计学意义。结论：蝮蛇咬伤患者应用血必净注射液对心肌损伤的恢复有积极作用。     

Prehospital Application of Hemostatic Agents in Iraq and Afghanistan

Introduction: Hemorrhage is the leading cause of death on the battlefield. Development of chitosan- and kaolin-based hemostatic agents has improved hemorrhage control options. Sparse data exists on the use of these agents in the prehospital, combat setting. We describe recent use of these agents and compare patients receiving hemostatic to the baseline population. Methods: We used a series of emergency department (ED) procedure codes to identify patients within the Department of Defense Trauma Registry (DODTR) from January 2007 to August 2016. We only included patients for whom the DODTR specified the hemostatic agent utilized (chitosan or kaolin). We defined a serious injury by body region as an Abbreviated Injury Score (AIS) of 3 or greater. Results: Our predefined search codes captured 28,222 patients. Of those, 258 (0.9%) patients had documented hemostatic use: 58 chitosan, 201 kaolin, and one subject received both. Patients undergoing hemostatic agent application were more likely to be injured by gunshot wound or explosive. Patients with hemostatic application had higher median composite Injury Severity Scores (10 vs. 9, p < 0.001), and higher AIS for the abdomen, extremity and superficial body regions with higher rates of blood product utilization. Proportions of patients suffering traumatic amputations and undergoing tourniquet application were higher in the hemostatic agent group than the baseline population (11.6% vs. 6.7%, p = 0.002 and 43.4% vs. 13.8%, p < 0.001, respectively). Conclusions: Hemostatic agents were infrequently utilized to manage traumatic hemorrhage during the recent conflicts in Afghanistan and Iraq. Hemostatic agent use was more frequent in casualties with gunshot wounds, traumatic amputations, concomitant tourniquet application, and greater blood product administration.”     

分析前质控在止凝血检查中的重要性探讨

随着现代医学的不断发展,医学检验水平的不断提高,止凝血检查在医院临床急救和抗凝及溶栓监测,术前检查,出血性疾病,血栓性疾病诊断和治疗等方面具有越来越重要的临床意义,一份检测分析报告的完成要受到许多环节和多种因素的影响,其中质量控制对保证止凝血试验的准确性十分重要,全面质量控制包括分析前质控、分析中质控、分析后质控,由于止凝血检查试验与其它的检验项目有所不同,其检测具有特殊性,故分析前质控成为影响检验报告结果准确性最为重要的因素,该文从病人信息的处理,标本的采集保存和血浆的分离,试剂的准备,仪器设备的准备,检验人员的配备等方面对止凝血检查的重要性进行讨论。     

An Alternative Hemostatic Dressing: Comparison of CELOX, HemCon, and QuikClot

Objectives:  Uncontrolled hemorrhage remains a leading cause of traumatic death. Several topical adjunct agents have been shown to be effective in controlling hemorrhage, and two, chitosan wafer dressing (HemCon [HC]) and zeolite powder dressing (QuikClot [QC]), are being utilized regularly on the battlefield. However, recent literature reviews have concluded that no ideal topical agent exists. The authors compared a new chitosan granule dressing (CELOX [CX]) to HC, QC and standard dressing in a lethal hemorrhagic groin injury.
Methods:  A complex groin injury with transection of the femoral vessels and 3 minutes of uncontrolled hemorrhage was created in 48 swine. The animals were then randomized to four treatment groups (12 animals each). Group 1 included standard gauze dressing (SD); Group 2, CX; Group 3, HC; and Group 4, QC. Each agent was applied with 5 minutes of manual pressure followed by a standard field compression dressing. Hetastarch (500 mL) was infused over 30 minutes. Hemodynamic parameters were recorded over 180 minutes. Primary endpoints included rebleed and death.
Results:  CX reduced rebleeding to 0% (p < 0.001), HC to 33% (95% CI = 19.7% to 46.3%, p = 0.038), and QC to 8% (95% CI = 3.3% to 15.7%, p = 0.001), compared to 83% (95% CI = 72.4% to 93.6%) for SD. CX improved survival to 100% compared to SD at 50% (95% CI = 35.9% to 64.2%, p = 0.018). Survival for HC (67%) (95% CI = 53.7% to 80.3%) and QC (92%; 95% CI = 84.3% to 99.7%) did not differ from SD.
Conclusions:  In this porcine model of uncontrolled hemorrhage, CX improved hemorrhage control and survival. CELOX is a viable alternative for the treatment of severe hemorrhage.     

凝血异常对急性颅脑损伤预后意义的研究

目的 研究凝血异常对评估急性颅脑损伤伤情及预后的价值。方法 以PT、TT、KPTT、PC、Fg、D-二聚体、PLM活性、PAI等8项指标,对75例急性颅脑损伤患者于伤后24 h内、1 w、2 w时进行检测,与正常对照组比较;再按伤情轻重、损伤类型及转归等进行组间比较。结果 ①凝血异常,伤后24 h内为90.67％,DIC为10.6％,伤后2 w为68.97％。②伤后24 h内凝血异常为7项(P<0.001);1,2 w D-dimer显著异常(P<0.001)。③凝血异常在脑内血肿组,GCS≤8分组及死亡组均较对照组显著。早期6-7项异常,以D-dimer PLM及PAI最为显著(P<0.01);1,2 w此3项仍显著(P<0.01)。④24 h内凝血异常>3项,且以D-dimer、PLM、PAI为主,则迟发脑内出血发生率高。⑤早期D-dimer水平>8 mg/L,死亡率高(63.13％)。结论 凝血异常,在急性颅脑损伤中表现明显高达90.67％。早期血液高凝与继发纤溶亢进并存,后期以纤溶亢进为主。早期凝血异常指标>3项,且以纤溶指标为主时,伤情严重,迟发脑出血发生率高,死亡率高。提示凝血异常对评估脑外伤预后极有价值。