尿素酶检测幽门螺杆菌980例临床分析

自 1 98 3年澳大利亚学者 Marshall等首次从胃炎患者的胃粘膜中分离出幽门螺杆菌 ( HP)以来 ,国内外大量研究证实 ,HP感染与消化性溃疡及慢性胃炎的发病密切相关。随着对 HP研究的不断深入 ,各种检测手段也不断进步和发展 ,为了探索 HP的感染情况 ,我们于 2 0 0 0年 1 1月至 2 0 0 2年 1月对980例消化性溃疡及慢性胃炎患者进行尿素酶试验 ,现报道如下。1　材料和方法1 .1　一般资料 :本组 980例 ,男性 5 83例 ,女性 397例 ,年龄最小 1 6岁 ,最大 86岁 ,平均年龄 42 .3岁。所有病例均在进行内镜检查时做尿素酶试验 ,并进行活检 ,活检部位…     

幽门螺杆菌培养方法及其尿素酶纯化的研究

目的探讨大量培养H.pylori的方法，提取纯化尿素酶．方法固体培养复苏和传代时分别观察不同添加剂（10％SB、10％SBS和0．1％β-CD）、暴露时间（1h和3h）和抽气负压（-0．075Mpa、-0．070Mpa和-0．065Mpa）对H.pylori培养的影响；液体培养时观察四种添加剂（5％CBS、10％CBS、10％SBS和0．1％β-CD）对H．pylori培养的影响．比较各培养方法的效费关系．用旋涡振荡和冻融法粗提尿素酶，再用阴离子交换、疏水相互作用和阳离子交换三步层析法纯化，测定酶活性，计算总蛋白回收率．用SDS-PAGE及Western blotting鉴定．[第一段]     

幽门螺杆菌尿素酶分子生物学研究进展

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)是上消化道疾病的主要致病菌,它的感染不但与B型胃炎和消化性溃疡的发生有密切关系,而且与非溃疡性消化不良,MALT淋巴瘤和胃癌的发生也有重要关系[1,2],并已被世界卫生组织列为胃癌等肿瘤发生的相关致病[3].     

尿素酶在检测与治疗幽门螺杆菌感染中的作用

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori.HP)感染与人类胃肠疾病有着密切关系。Graham报告全世界约50％的成年人胃窦粘膜有HP感染,Marshall发现95％以上的十二指肠溃疡病患者有HP感染。李瑜元等报道国人15～22岁健康自愿者和13～88岁有症状者HP感染发生率分别为49.4％和64.5％,HP感染发生率:慢性胃炎63.6％,胃溃疡71.9％,十二指肠溃疡73.1％。根除HP感染也可减少胃十二指肠溃疡的复发。部分学者认为HP感染不仅仅是慢性胃炎和消化性溃疡的重要发病因素之一。Julie研究109例胃癌,发现84％的胃腺癌患者过去(平均时间14.2年)有HP感染,认为HP感染是增加胃腺癌危险性的原因之一。     

幽门螺杆菌细菌培养与尿素酶试验对幽门螺杆菌检测敏感性比较

目的:比较快速尿素酶试验(Rapid urease test,RUT)及细菌培养两种方法对幽门螺杆菌(H.pylori)检测的差异.方法:收集有上消化道症状178例患者,内镜下取胃窦近幽门口处黏膜行RUT及H.py1ori培养,分析BUT及细菌培养两种方法对幽门螺杆菌检测的敏感性.结果:H.pylori感染率82.5%...     

幽门螺杆菌尿素酶的研究进展

自从 1 983年澳大利亚医生Marshall和Warren从慢性活动性胃炎患者的胃粘膜中取样培养出幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)以来 ,越来越多的研究证实 :Hp是慢性胃炎和消化性溃疡的主要病因 ,是胃癌及MALT淋巴瘤的重要危险因素。Hp的致病机制十分复杂 ,其毒力因子包括空泡毒素VacA、毒素相关蛋白CagA、热休克蛋白HSP、尿素酶、粘附素、鞭毛等。但有资料表明 :如果Hp不能定植于胃粘液层 ,就不能在裸鼠体内引起胃炎[1] ,说明Hp必须首先定植于胃粘膜层才能进一步发挥其它致病因素的致病作用。影响Hp定植的因素很多 ,尿素酶可能是其中研…     

幽门螺杆菌尿素酶B基因的限制性片段长度多态性分型和生物信息学分析

目的：对不同来源野生型幽门螺杆菌（Hp）菌株的尿素酶B基因进行限制性片段长度多态性（RFLP）分型和生物信息学分析。方法：采用HaeⅢ单酶切法对国内临床分离的Hp菌株、动物模型适应株及国际标准Hp菌株尿素酶B（ureB）基因进行RFLP分型，同时进行基因测序和序列同源性对比及进化树分析等生物信息学研究。结果：HaeⅢ单酶切结果显示，14株Hp 1．7kb ureB基因均呈现出2～5种带型，可分为五组，其中两种国际标准株NCTC11637、NCTC11639和三种临床分离野生株拥有相同的RFLP带型，其他国内临床分离株和动物适应株分属于四种不同的RFLP带型组。ureB基因序列同源性比对表明，各种Hp菌株间核苷酸序列同源性均〉96．6％，氨基酸序列同源性均〉98％，其中CCS9801、CCS9806、M3及M10菌株之间的核苷酸和氨基酸序列同源性为100％。核苷酸序列进化树分析显示，2株国际标准株与国内临床分离株及动物适应株分处于不同进化分支，为平行进化关系；而在氨基酸序列进化树中转变为非平行关系。结论：不同Hp菌株尿素酶B在基因和蛋白质水平均高度保守和同源。     

新型冠状病毒IgM-IgG抗体检测试剂盒的制备及对15例患者临床应用初试

目的 开发一种快速检测SARS-CoV-2病毒的IgM-IgG抗体的胶体金免疫层析检测试剂盒,并优化研发及应用策略,分析IgM-IgG抗体联合检测在新冠病毒检测中的临床应用价值。 方法 表达纯化SARS-CoV-2病毒S蛋白的RBD和NTD结构域,通过胶体金制备工艺包被抗原及多克隆抗体,制备IgM-IgG抗体检测试剂盒;收集15例阳性患者的血清进行抗体检测分析,计算试剂盒检测的阳性率,分析SARS-CoV-2抗体IgM-IgG对病毒响应的过程。 结果 在15例核酸RT-PCR检测阳性的患者血清样本中,IgM-IgG联合抗体检测的阳性率为73.33%,其中IgM阳性占总标本数的53.33%,IgG阳性占总标本数的60.00%;5例境外人员中有3例为抗体阳性;对患者的流行病学分析发现,病毒感染1周以上的患者共7例,抗体检测全部为阳性;抗体检测试剂盒的灵敏度73.33%,特异性95.00%。 结论 IgM-IgG联合抗体检测法具有快速、方便、易操作等特点,可以作为核酸检测的辅助手段对疑似患者(尤其是境外人员及无症状患者)进行初筛;且IgM-IgG的检测结果可以作为推测患者病毒感染过程的依据;快速检测IgM-IgG抗体将为COVID-19疾病的诊断和治疗提供帮助。     

消化道幽门螺旋杆菌首选检测方法及临床根除方案探讨

【目的】探讨13C尿素呼气试验(13C-urea breath test,13CUBT)作为消化道幽门螺旋杆菌检测的首选方法,以及有效根除幽门螺旋杆菌的治疗方案。【方法】在我中心门诊11个月共收集321例消化道疾病的患者,每例患者均采用13CUBT(研究组)和胶体金免疫层析法(gold colloid immunochromatographic method,GICA,对照组)检测幽门螺旋杆菌(helicobacter pylori,Hp)的感染,然后比较2种检测方法的结果。对13CUBT阳性患者使用改良(早晚空腹服药,2周疗程)的三联法(质子泵抑制剂+抗菌素)与四联法(质子泵抑制剂+抗菌素+枸橼酸铋剂)治疗与跟踪方案。【结果】13CUBT组和GICA组检测阳性率为经配对χ2检验后,差异有统计学意义(χ2=130.7,P<0.05)。三联法的Hp根除率达84%,四联法Hp累计根除率达95%以上。【结论】13CUBT的敏感性显著高于胶体金免疫层析法,是理想的检测Hp感染的首选方法。改良的治疗方案对Hp的根治有非常满意的效果。     

免疫快检卡-幽门螺杆菌粪便抗原检测的临床评价

目的评估免疫快检卡试验诊断幽门螺杆菌(Hp)感染的准确性.方法108例因上消化道症状接受胃镜检查的患者行免疫快检卡试验和快速尿素酶试验、组织学方法检测Hp.两项试验阳性定为Hp感染.结果免疫快检卡的敏感性为96.67%,特异性为85.29%,准确性为92.55%,阳性预测值为92.06%,阴性预测值为93.55%..结论免疫快检卡是一种准确、快速、方便、无创的检测方法.     

Cloning of the Gene Encoding Urease Subunit.A in Helicobacter Pylori

Themostefficient ,economicalapproachwithlowriskofadversereactiontothepreventionandcon trolofHelicobacterpylori (H .pylori)infectionistousevaccine .UreaseanditssubunitAisproventobethemainvaccineagainsttheinfectionofH .pylori.Inordertoexpresstheureasesubuni…     

根除幽门螺杆菌治疗对Hp相关性溃疡患者疗程的影响

目的观察Hp相关性消化性溃疡（胃／十二指肠溃疡）根除Hp治疗的常用三联治疗方案7d疗程和14d疗程的疗效和安全性。方法将60例Hp检测（尿素酶法）阳性的消化性溃疡患者随机分为A组和B组各30例,A组治疗7d,B组治疗14d,观察Hp根除情况、溃疡愈合情况以及不良反应。结果临床总有效率B组明显优于A组（P〈0．01）。结论14d疗程明显优于7d疗程,药物不良反应无明显增加。     

幽门弯曲菌感染快速诊断试剂盒的研制及临床应用

介绍两种幽门弯曲菌(CP)感染快速诊断试剂盒的制备,用其检测244例胃粘膜标本,同时与细菌培养及组织学检查结果比较。试剂盒1号、3号对诊断CP感染的敏感性分别为97％和91％,均无假阳性。CP数量、试剂盒中尿素浓度与试剂盒的反应时间呈负相关。用试剂盒3号检测在10min之内即可出结果。具有敏感性强,特异性高及简便、快速的优点,尤其适于在内镜室内使用。     

携带幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗的构建

目的 构建含幽门螺杆菌(Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因重组减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗。方法 抽提Hp标准菌株CCUG17874基因组DNA,应用聚合酶链反应(PCR)技术从基因组DNA扩增ureB基因,克隆入pucmT载体,检测ureB基因序列,经过酶切、连接反应将其克隆入真核表达载体pIRES,转入感受态大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆,通过PCR和酶切反应进行鉴定。重组载体pIRES-ureB转入减毒鼠伤寒沙门菌LB5000,抽提质粒,再次转入SL7207,反复传代,鉴定重组核酸疫苗菌的稳定性。通过脂质体法将构建好的重组载体pIRES-ureB转染COS-7细胞,SDS-PAGE Western印迹法检测pIRES-ureB表达蛋白的免疫原性。结果 扩增出长约1700bp的ureB基因,测序结果表明扩增出的ureB基因与基因库Hp ureB序列一致,PCR和酶切鉴定结果证实ureB基因克隆人真核表达载体pIRES,并成功构建了Hp ureB基因的减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,重组核酸疫苗稳定,并且Westem印迹法检测到特异性的蛋白条带。结论 构建了具有免疫反应性的Hp UreB减毒鼠伤寒沙门菌核酸疫苗,为进一步探索其体内的免疫作用奠定了基础。     

蛋白芯片检测幽门螺杆菌抗体谱与胃十二指肠疾病的关系

目的应用蛋白芯片技术检测幽门螺杆菌（Hp）感染分布情况及其与胃十二指肠疾病的关系。方法用蛋白芯片技术检测806例有上消化道症状的患者血清中细胞毒素相关蛋白（cagA）、尿素酶（Ure）和空泡细胞毒素（VaeA）,对其中357例患者进一步行胃镜检查,证实其患有不同程度的胃十二指肠疾病。结果806例患者利用蛋白芯片技术对Hp检测,无感染者加．57％,感染者59．43％,感染者中I型占7．32％;357例进行胃镜检查,I型Hp感染者主要见于慢性萎缩性胃炎（7．88％）、十二指肠球部溃疡（14．29％）、胃癌（12．50％）,与其他胃十二指肠疾病比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;II型、中间型、其它型Hp感染者,在各种胃十二指肠疾病中分布差异无统计学意义;无Hp感染的胃十二指肠疾病中,胃溃疡占51．52％,与其它胃十二指肠疾病比较,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论蛋白芯片技术检测Hp感染分型与胃十二指肠疾病发病情况有关系,有助于指导临床判断Hp感染者是否需根除Hp治疗．     

13C尿素呼气试验对根除幽门螺杆菌疗效评估的研究

目的：探讨根除幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)治疗后疗效评估的最佳方法。方法：对50例血清HP细胞毒素相关基因(Cytotoxin associated gene A，CagA)抗体阳性和13C尿素呼气试验(13C-UBT)阳性患抗HP治疗后，进行13C-UBT与HP-CagA抗体测定。结果：50例HP感染患抗HP治疗后，HP-CagA抗体阳性例数48例(96％))13C-UBTb阳性例数8例（16％)。结论：13C-UBT是抗HP治疗临床疗效监测的最佳方法。