肝癌及癌旁肝组织胰岛素样生长因子Ⅰ型受体表达的检测

目的检测胰岛素样生长因子Ⅰ型受体（IGF-ⅠR）在肝细胞癌（HCC）、癌旁及正常肝组织中的表达,探讨HCC的发生机制。方法免疫组织化学染色SP法枪测31例HCC IGF-ⅠR表达。结果正常肝组织胞膜、胞质均显淡黄色,分布均匀。在HCC中,IGF-ⅠR呈异常高表达90．3％（28／31）,以膜及胞质混合型表达为主,其表达与肿瘤的大小、病理分级无显著性差异（P〉0．05）,在AFP、HBsAg、HCV抗原阴、阳性组问无显著性差异（P〉0．05）。肝内多发结节或单发结节合并门脉癌栓的HCC,IGF-ⅠR高表达与单结节HCC组间有显著性差异（P〈0．05）。HCC癌与癌旁组织均显著高于正常肝组织。结论IGF-ⅠR高表达可能与HCC的侵袭性行为有关。     

丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝（癌）细胞凋亡的关系

目的　探讨丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝(癌 )细胞凋亡的关系及其意义 .方法　采用免疫组织化学方法检测 HCV核心区抗原和 NS3区抗原在肝硬变 (L C)和肝细胞肝癌 (HCC)组织中的分布 ,同时对连续切片进行原位凋亡检测并计算凋亡指数 .结果　 HCV核心区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质或胞核中 ,在 L C组织中 ,核心抗原呈弥漫或灶状分布于肝细胞胞质 ,偶见胞核阳性的肝细胞 ,阳性率为 6 0 .7% ;核心抗原在癌组织中以核阳性分布为主 ,阳性率为 37.6 % ,癌旁肝组织以胞质阳性为多见 .HCC中 HCV核心抗原的核阳性率 (75 .0 % ,15例 / 2 0例 )明显高于其在 L C(17.7% ,6例 / 34例 )及癌旁肝组织 (11.8% ,2例 / 17例 )中的阳性率 (P<0 .0 5 ) ;在 HCC中 ,HCV核心抗原核转位表达的癌组织的 AI值 (0 .174± 0 .0 93)显著低于胞质阳性的癌组织 (0 .5 12± 0 .113,P<0 .0 1) . HCV NS3区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质中 ,在 L C和 HCC组织中的阳性率分别为 5 3.6 %和 39.6 % .未发现 HCV NS3区抗原的表达与肝(癌 )细胞凋亡的相关性 .结论　 HCV感染与我国 L C,HCC的发生关系密切 ,HCV核心抗原在肝癌组织中常发生核转位表达 ,这种核转位表达抑制了肿瘤细胞发生凋亡 ,从而促进肿瘤组织的进一步恶化     

肝细胞癌和癌旁肝组织中血管内皮生长因子表达与微血管密度的关系

用免疫组织化学法研究肝细胞癌 (HCC)及癌旁肝组织血管内皮生长因子 (VEGF)的表达与微血管 (MV)密度的关系。VEGF在癌旁肝组织中的阳性率较HCC中者为高 (85 .4 %vs.66 .7% ;P <0 .0 5) ;其表达强度在两者中差异无显著性 (P >0 .0 5) ;其阳性信号主要位于癌细胞、癌旁肝细胞和血管内皮细胞胞浆。HCC中MV密度明显高于癌旁肝组织 (P <0 .0 1 ) ,并随癌细胞分化程度的降低而升高。结果提示 ,在HCC发生发展过程中VEGF并非唯一刺激MV生成的因子 ;MV密度在判断HCC的预后和生物学行为方面可能较VEGF蛋白表达更有意义     

碱性成纤维细胞生长因子在恶性肿瘤细胞中表达状况及其意义

目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)在癌细胞中表达及其意义。方法：采用SP免疫组化法检测癌组织181例,癌旁组织66例bFGF表达状况。结果：癌组织和癌旁组织bFGF阳性率分别为95．58％和62．12％,两者差异显著（P＜0．005）,（＋）的阳性率分别为48．55％和63．41％,（＋＋）分别为41．62％和36．59％（＋＋＋）分别为9．83％和0％。（＋）和（＋＋）的阳性率之间无显著性,（＋＋＋）差异显著（P＜0．025）,乳头状腺癌bFGF阳性率及表达强度显著低于低分化癌,腺癌和粘液腺癌（P＜0．05）,癌细胞转移组和无转移组bFGF阳性率无显著性差异（P＞0．05）,但（＋＋＋）阳性率前者显著高于后者（P＜0．05）,结论：各种癌组织表达bFGF高于癌旁组织,分化较差的癌细胞高于分化较好的癌细胞,癌转移组表达bFGF( )阳性高于无转移组。bFGF与癌发生发展和转移有着内在联系。     

肝细胞癌组织中碱性成纤维细胞生长因子和微血管密度检测

目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、微血管密度(MVD)与肝细胞癌(HCC)的关系,为临床诊断、判断病程及预后、寻找新的治疗方法提供理论依据.方法:使用免疫组化法检测41例肝细胞癌手术切除标本(其中包膜完整者12例,不完整者29例;无癌栓者13例,有癌栓者28例;病理分级Ⅰ Ⅱ级者17例,Ⅲ Ⅳ级者24例)和5例正常肝组织中bFGF和MVD的表达.结果:5例正常肝组织中bFGF和MVD均无表达.HCC组织中bFGF阳性率为70.7%,bFGF表达与肝癌分化程度、有无癌栓、包膜是否完整有关(P＜0.05),HCC组织中MVD为21.02±9.57.bFGF表达与MVD值有关(P＜0.01).在高侵袭转移组与低侵袭转移组间,bFGF阳性率分别为86.4%和52.6%,差异有统计学意义(P＜0.05);2组MVD值分别为24.62±9.98,16.79±9.22,差异有统计学意义(P＜0.01).结论:HCC组织中bFGF呈高表达,与HCC肿瘤血管生成有关,检测bFGF、MVD有助于判断肿瘤侵袭转移能力.     

β-catenin在肝癌中的表达和意义

目的β-catenin在胞内异常表达常见于多种原发性肿瘤,本研究拟观察β-catenin在原发性肝癌中的表达,探讨β-catenin在原发性肝癌发生发展中的作用。方法免疫组织化学Envsion法检测33例肝细胞癌及其癌旁组织,22例胆管细胞癌,20例转移性癌及20例正常肝组织中β-catenin蛋白的表达。结果β-catenin蛋白在肝细胞癌胞膜/胞质/胞核的阳性表达率分别是72%(24/33),76%(25/33)和39%(13/33);在胆管细胞癌胞膜/胞质/胞核的阳性表达率分别为86%(19/22),86%(19/22)和45%(10/22);在转移性癌胞膜/胞质/胞核的阳性表达率分别是80%(16/20),90%(18/20)和40%(8/20);在癌旁和正常肝组织中胞膜/胞质/胞核的表达率分别是58%(19/33),67%(22/33),0%(0/33)和60%(12/20),70%(14/20),0%(0/20)。β-catenin蛋白胞膜/胞质/胞核在肝细胞癌和胆管细胞癌中的表达与癌旁和正常肝组织胞膜/胞质/胞核的表达两两比较差异有统计学意义(P=0.000)。结论β-catenin的过表达提示其在原发性肝癌的发生发展过程中起着促癌的作用。     

P~(16)蛋白和PCNA在肝细胞性肝癌中的表达及意义

目的 :探讨肝细胞性肝癌 (HCC)中抑癌基因P16 蛋白及增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达、相关性及其与肿瘤临床病理的关系。方法 :采用免疫组化SP法检测 4 5例HCC及癌旁肝组织中P16 蛋白及PCNA。结果 :①P16 蛋白及PCNA在HCC中的阳性表达率分别明显低于、高于癌旁肝组织 (P <0 .0 5)。②高分化、中分化HCC中P16 蛋白的阳性表达率明显高于低分化HCC(P <0 .0 5) ;高分化HCC中PCNA的阳性表达率明显低于中分化及低分化HCC(P <0 .0 5)。③P16 蛋白与PCNA在未转移组HCC中的阳性表达率分别明显高于、低于转移组HCC(P <0 .0 5)。④临床Ⅰ期与Ⅲ期HCC比较 ,P16 蛋白的阳性表达率及PCNA的阳性表达率均有显著性差异 (P <0 .0 1 )。⑤P16 蛋白及PCNA在HCC中的表达与肿瘤直径无关。⑥HCC中P16 蛋白与PCNA的表达间存在明显负相关关系 (r =-0 .57,P <0 .0 5)。结论 :P16 基因及PCNA的表达与HCC的增殖、分化、转移状态及临床分期有关 ,且存在明显负相关关系 ,其表达状况可以作为判断HCC恶性程度及预后的有用指标。     

Notch1胞内段在鼻咽癌组织及鼻咽癌细胞株中的表达研究

目的探讨Notch1胞内段(NIC)在非角化性鼻咽癌组织和细胞株中的表达。方法采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫组化染色方法对鼻咽癌标本及不同分化程度鼻咽癌细胞株进行检测。结果 RT-PCR检测显示不同鼻咽癌细胞株中NIC基因均有表达,但分化程度高的CNE1细胞株表达最明显;同期进行的免疫组化染色结果与之相似;对鼻咽癌标本的免疫组化染色结果显示:鼻咽癌组织中NIC的表达高于鼻咽慢性黏膜炎症组织(P=0.005),而且NIC的表达强度与细胞分化程度密切相关(P<0.05),与患者性别、年龄无相关性(P>0.05)。另外,在未分化型鼻咽癌中,癌巢内几乎无阳性表达,淋巴细胞阳性表达多;而在分化型鼻咽癌中癌细胞阳性表达明显,可见于胞膜、胞质及胞核。结论 Notch信号系统参与鼻咽癌的发生,其中Notch1的表达与鼻咽癌的分化程度相关。     

血管内皮生长因子及受体在肝癌组织中的表达及其与转移和复发的关系

目的 :研究血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (fit 4 )与肝细胞肝癌 (HCC)转移和复发的关系。方法 :对 5 0例肝癌组织进行免疫组化染色 ,观察VEGF、VEGF c及fit 4在肝癌组织中的表达。结果 :VEGF、VEGF c及其fit 4在肝细胞肝癌中均呈高表达 ,分别为 74 %、6 2 %、4 4% ,与肝硬化及正常肝组织表达相比差异有显著统计学意义 (P <0 .0 1) ;VEGF(或VEGF c)、fit 4的表达强度和表达率与肝癌的转移和门静脉癌栓形成率呈正相关 ,与患者的生存率呈负相关 ,P <0 .0 5。结论 :VEGF、VEGF c、fit 4在肝癌血管生成、癌细胞转移和复发中起重要作用。     

NM23-H1基因产物在膀胱移行细胞癌的表达及临床意义

目的　探讨NM2 3-H1在膀胱移行细胞癌的表达与其生物学行为的关系及临床意义。方法　免疫组化SABC法检测 4 0例膀胱移行细胞癌中NM2 3-H1的表达情况。结果　NM2 3-H1总阳性率为 75 % ,复发癌阳性表达率为 4 6 % ,初发癌 89%。NM 2 3-H1表达水平随膀胱移行细胞癌细胞分化程度增高而增高 (P <0 .0 5 )。Ta -T1期表达水平高于T2 -T4期 (P <0 .0 5 )。初发癌表达水平高于复发癌 (P <0 .0 5 )。结论　NM2 3-H1表达水平与膀胱移行细胞癌组织学分级、临床分期及复发密切相关 ;NM 2 3-H1的检测能为判断膀胱移行细胞癌的恶性程度和复发提供依据。     

膜突蛋白促进乳腺癌细胞侵袭转移的机制研究

 目的 探讨膜突蛋白与乳腺癌细胞侵袭转移的关系。方法 应用免疫组织化学法、RT-PCR和Western blot等技术,检测转移与非转移性乳腺癌组织以及不同转移潜能人乳腺癌细胞系中膜突蛋白的定位及表达;应用RNAi技术结合体外侵袭运动实验,探讨膜突蛋白缺失对乳腺癌细胞侵袭运动能力的影响及相关分子机制。结果 免疫组织化学结果显示,膜突蛋白定位于细胞膜与细胞质,且在转移组中的表达高于非转移组,差异具有统计学意义(P=0.001,χ²=17.536)。Western blot结果显示,膜突蛋白的表达与乳腺癌细胞转移潜能呈正相关。此外,Transwell实验结果显示,膜突蛋白表达缺失显著抑制了乳腺癌细胞的侵袭和迁移能力,且对侵袭潜能高的乳腺癌细胞的抑制更为显著。膜突蛋白缺失后,细胞中MTDH mRNA与nm-23 mRNA水平明显降低;vimentin蛋白表达增加、E-cadherin和MMP-9蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 膜突蛋白高表达与乳腺癌转移潜能增强呈正相关,可能通过影响MTDH和nm-23表达、增强上皮间质转化、增加MMP-9分泌等来增强乳腺癌细胞的侵袭转移能力。     

同位素标记相对与绝对定量技术筛选出Vinculin蛋白在进展期胃癌组织中低表达及其预后意义

 目的 应用同位素标记相对与绝对定量蛋白组学（isobaric tags for relative and absolute quantification,iTRAQ）技术鉴定和筛选进展期胃癌复发转移相关的差异蛋白;检测筛选出的目标蛋白Vinculin表达水平及其预后意义。方法 应用iTRAQ技术在正常胃黏膜组织组、胃癌复发组和胃癌未复发组,检测差异表达的蛋白。然后选取差异性表达显著的Vinculin蛋白,采用免疫组织化学（immunohistochemistry,IHC）技术在110例人胃癌组织标本中检测其表达情况,并统计分析Vinculin蛋白表达量与临床病理学指标的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析,探究Vinculin蛋白表达与胃癌患者生存期的关系。结果 Vinculin蛋白主要表达于细胞质中近胞膜处;在110例人胃癌组织标本中,Vinculin蛋白阳性表达46例（41.8%）,缺失表达64例（58.2%）。统计结果显示,Vinculin蛋白缺失表达与淋巴结转移（P=0.018）、肿瘤TNM分期（P=0.022）、血管侵袭（P=0.002）显著正相关。Kaplan-Meier生存曲线分析结果显示,Vinculin缺失表达与胃癌患者不良预后正相关（P=0.011）。结论 Vinculin蛋白缺失表达与肿瘤转移和预后不良相关,提示其表达可以作为预测胃癌侵袭转移的潜在指标。     

上皮性钙粘蛋白与肝细胞癌侵袭、转移的关系研究

目的探讨上皮性钙粘蛋白(E-Cadherin)在人肝细胞癌(HCC)中的表达及其与肝癌侵袭、转移性的关系。方法选择56例有完整随访资料的原发性肝细胞癌及相应癌旁组织标本、20例正常肝组织标本,用 RT-PCR 方法检测 E-Cad-herin mRNA 的表达;用免疫组织化学方法检测 E-Cadherin 的表达。结果 1.E-Cadherin 在肝细胞癌组织中的表达低于癌旁组织和正常组织,差异有显著性意义(P<0.05);癌旁组织和正常组织中 E-Cadherin 的表达无显著性差异(P>0.05);2.E-Cadherin 在肝癌组织中的表达与术后复发时间呈正相关(P<0.05;R~2=0.786),与病理分期呈负相关(P<0.05;R~2=0.678);3.癌组织中 E-Cadherin 表达与肝外转移呈负相关(P<0.05;R~2=0.704);4.癌旁组织中 E-Cadherin 表达与术后复发时间呈正相关(P<0.05;R~2=0.742)。结论 E-Cadherin 与肿瘤的分化程度,侵袭转移能力,复发倾向相关,在临床中有望作为肿瘤分化、复发、转移的评估指标之一。     

原发性肝癌血清雌二醇含量与肝组织雌二醇受体的初步研究

应用放免法测定肝癌组,肝硬化组及正常对照组血清雌二醇的含量,并对10例肝癌,18例肝硬化进行了雌二醇受体的组织化学检查。结果表明;雌二醇受体主要分布于肝癌的癌细胞浆内,受体阳性例数较肝硬化例明显减少,着色强度明显减弱。肝癌患者血清雌二醇含量明显低于肝硬化及正常对照组。肝癌血清雌二醇含量与组织内雌二醇受体阳性细胞百分比无平行关系。认为不能以血清雌二醇含量估计组织内相应受体的多少。     

Occludin表达与人肝细胞癌发生和发展的关系

目的: 探讨紧密连接蛋白occludin表达与人肝细胞癌发生和发展的关系。方法: 运用免疫组化技术检测occludin在人肝细胞癌中的表达,并进行苏木精-伊红(HE)染色观察细胞结构。结果: occludin主要定位于肝细胞膜,且癌旁肝组织的表达阳性率明显高于肝细胞癌(P<0.01).癌旁肝组织occludin表达++~++级强度显著高于肝细胞癌(P<0.005)。occludin在10例分化较好(Ⅰ、Ⅱ级)的肝细胞癌及其癌旁组织中的表达,其阳性率差异无显著性(P>0.05),但33例分化较差(Ⅲ、Ⅳ级)的肝细胞癌中,occludin在癌旁组织中表达的阳性率高于癌组织(P<0.05)。结论: 肝细胞癌与癌旁肝组织相比,occludin表达阳性率及其强度均明显下降,其改变在肝细胞癌的发生发展中可能起重要作用。     

法呢基转移酶在原发性肝癌中的表达

Background  Primary liver cancer (PLC) is a common malignant tumor. Over the past decade, although farnesyltransferase (FTase) has emerged as a significant target for anticancer therapies and has become a hotspot of cancer research, its exact mechanism of action remains unknown. The aim of this study was to investigate the expression of FTase in PLC and its role in the development of PLC.

Methods  Expression of FTase was detected by real-time fluorescent quantitative-polymerase chain reaction (FQ-PCR) in cancer and surrounding normal tissues from 32 patients with PLC.

Results  Expression of FTase mRNA in PLC was significantly higher than that in normal hepatic tissues (P <0.001). Overexpression of FTase was as high as 87.5%. The positive rate for FTase mRNA in the high tendency to metastatic recurrence group was obviously higher than that in the low tendency to metastatic recurrence group (P=0.02). The positive rate for FTase mRNA in patients with metastatic recurrence during postoperative follow-up was also significantly higher than that in those without metastatic recurrence (P=0.01).

Conclusions  The level of FTase mRNA expression in cancer tissues is much higher than in normal tissues. FTase may play an important role in the genesis and development of PLC and may be one of the reliable markers for the metastatic activity gained by liver tumor cells. FTase could be used clinically in predicting metastatic recurrence of PLC.     

Ferroportin in the progression and prognosis of hepatocellular carcinoma

Background

Hepatocellular carcinoma (HCC) is the fifth most common malignant tumor in men and the seventh in women and understanding the molecular mechanisms of HCC and establishing more effective therapies are critical and urgent issues. Our objective was to study the expression of ferroportin in hepatocellular carcinoma (HCC) tissue samples and the relationship between ferroportin expression and HCC characteristics.

Methods

Sixty HCC tissues and their corresponding para-cancer liver tissues (PCLT) were obtained from sixty HCC patients who had undergone hepatectomy in the Second Xiangya Hospital of Central South University. Ten normal liver tissue samples were also obtained as a control. Immunohistochemistry (IHC) was performed to analyze the ferroportin expression in HCC, and the relationship between ferroportin expression and HCC clinical pathological characteristics also was analyzed. For the evaluation of IHC results, the comprehensive scoring criteria were met according to the staining intensity and the number of positive staining cells. Western blotting was performed to detect the expression level of ferroportin in HCC cell lines.

Results

Ferroportin expression in HCC tissue was significantly lower compared to PCLT and normal liver tissue (P <0.05). Moreover, ferroportin expression was related to liver cancer cell de-differentiation, the severity degree in TNM staging, Edmondson-Steiner grading, intrahepatic metastasis and portal vein invasion. In addition, high expression of ferroportin was observed in normal human liver cell lines L02 and HL7702, whereas weak positive expression and even negative expression of ferroportin were observed in HCC cell lines FOCUS, MHCC-97H, HepG2 and SMMC-7721. Furthermore, among the four kinds of HCC cell lines, the expression level of ferroportin was the lowest in MHCC-97H cells.

Conclusions

Ferroportin expression level declines along with the progression of liver cancer, suggesting that the reduction of ferroportin may serve as an important marker for poor HCC prognosis and as a new therapeutic target.     

生长抑素受体亚型SSTR2、SSTR5在人原发性肝癌组织中的表达

目的研究生长抑素受体亚型SSTR2和SSTR5在人原发性肝癌组织中的表达情况。方法应用免疫组织化学方法分别检测25例原发性肝癌组织和14例癌旁肝硬化组织SSTR2、SSTR5的表达。结果18例（72％）肝癌组织至少表达一种生长抑素受体亚型,表达部位位于肝癌细胞的胞浆及胞膜,10例（71．4％）癌旁肝硬化组织至少表达一种受体亚型;肝癌的分化程度、TNM分期、血清AFP水平、乙肝病毒水平、肝功能Child．pugh分级等与受体的表达无明显相关性。结论72％原发性肝癌组织中表达生长抑素受体亚型SSTR2和（或）SSTR5,肝癌组织在受体的表达上存在差异性。     

鼠源性单克隆抗体Met4用于检测胃癌组织Met的表达及临床意义

目的:观察研究肝细胞生长因子受体Met在胃癌组织及相对应的淋巴结转移灶中的表达水平,同时比较分析抗Met单克隆抗体Met4和多克隆抗体C28在检测Met表达水平中的差别?方法:采用免疫组织化学间接法检测胃癌组织芯片中Met表达水平,比较Met4与C28的检测效能?结果:Met在细胞膜及胞浆阳性表达率在不同病理分级组间无统计学意义(P > 0.05)?Met4组Met的阳性染色部位于细胞膜(浆),而C28组Met阳性染色部位在细胞浆中,二者在Met亚细胞染色定位上有差别?Met4的阳性检出率(58.3%)高于C28阳性检出率(30.5%),具有统计学意义(P < 0.05)?Met4组21例胃癌原发灶Met阳性病例中14例淋巴结转移灶Met表达阳性,C28组11例原发灶Met阳性病例中6例淋巴结转移灶Met表达阳性?原发灶中Met阳性表达与转移淋巴结中Met的阳性表达有显著相关性(P < 0.05)?结论:Met阳性表达可能在肿瘤的淋巴转移过程起重要作用?Met4用于肿瘤的诊断及靶向治疗,具有良好的临床应用前景?