抗氧化维生素对氧化低密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤的影响

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为模型、在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素对ｏｘＬＤＬ损伤的内皮细胞脂质过氧化及单核细胞粘附性的影响。结果表明,抗氧化维生素各组细胞培养液中丙二醛（ＭＤＡ）含量以及内皮细胞粘附的ＨＬ６０细胞数均明显低于ｏｘＬＤＬ组,提示维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素三种抗氧化维生素均可减轻ｏｘＬＤＬ对内皮细胞的脂质过氧化损伤,阻止单核细胞的粘附。这些可能是抗氧化维生素防治动脉粥样硬化的重要机理之一。     

抗氧化维生素对氧化密度脂蛋白作用的主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤？…

为深入探讨抗氧化维生素（维生素Ｅ、维生素Ｃ及β－胡萝卜素）对氧化低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）损伤内皮细胞的防治作用及可能机理,我们以体外培养的小年主支脉内皮细胞为模型,在培养的主动脉内皮细胞中加入不同剂量的抗氧化维生素,共同培养１２ｈ,再与终浓度为０．１ｇ／Ｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液,通过硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ６０）粘附计数法观察不同浓度的抗氧化维生素     

抗氧化营养素对主动脉内皮细胞脂质过氧化损伤的影响

探讨抗氧化营养素硒（Ｓｅ）、维生素Ｅ（ＶＥ）、维生素Ｃ（ＶＣ）及β－胡萝卜素（ＢＣ）防治动脉粥样硬化形成的可能作用及机制。方法：以原代培养的小牛主动脉内皮细胞（ＢＡＥＣ）为模型、以ｏｘＬＤＬ为损伤因素,利用硫代巴比妥酸荧光比色法（ＴＢＡ）和单核细胞（ＨＬ－６０）粘附计数法观察抗氧化营养素对ＢＡＥＣ脂质过氧化及单核细胞粘附性的影响。在体外培养的ＢＡＥＣ中加入不同剂量的抗氧化营养素：Ｓｅ的终浓度（μｍｏｌ）分别为１．０、５．０、１０．０;ＶＥ的终浓度（μｍｏｌ）分别为１２．５、２５．０、５０．０;ＶＣ的终浓度（μｍｏｌ）分别为２０．０、５０．０、１００．０;ＢＣ的终浓度（μｍｏｌ）分别为１．０、５．０、１０．０;共同培养１２ｈ后,再与终浓度为０．１ｍｇＰｒ／ｍｌ的ｏｘＬＤＬ继续培养２４ｈ,取贴壁细胞及培养液进行检测。结果：（１）抗氧化营养素组细胞培养上清液中脂质过氧化物（ＭＤＡ）的含量明显地低于ｏｘＬＤＬ组。其中Ｓｅ的三个剂量组培养上清液中ＭＤＡ分别降低了５．１１％、１５．２２％和１９．３６％;ＶＥ的三个剂量组降低１０．８９％、１８．０２％和２９．０９％;ＶＣ的三个剂量组降低了７．４２％、１７．２４％和２１．１?     

不同水平维生素E和β—胡萝卜素对Cu^2＋氧化修饰低密度脂蛋白的影响

研究不同浓度的维生素Ｅ（ＶＥ）和β－胡萝卜素（βＣ）对Ｃｕ＾２＋诱导的氧化修饰低密度脂蛋白（ＬＤＬ）作用的影响,通过测定硫代巴比妥酸反应物质（ＴＢＡＲＳ）、ＬＤＬ的电泳迁移率（Ｒｆ?以及荧光物质（Ｌｉｐｏｆｕｓｉｎ）扫描,反映ＬＤＬ的氧化修饰程度。结果表明：ＶＥ、βＣ均可减少ＴＢＡＲＳ的产生、减小ＬＤＬ的Ｒｆ,并且具有剂量－效应关系,随浓度增加,ＶＥ抑制作用加强而βＣ抑制作用减弱,而且ＶＥ对ＴＢＡ     

维生素E对肿瘤坏死因子损伤主动脉内皮细胞的防治作用

目的：观察维生素Ｅ对肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）损伤内皮细胞的保护作用,探讨维生素Ｅ抗动脉粥样硬化形成的可能机理。方法：以体外培养的小牛主动脉内皮细胞为模型,在培养的内皮细胞中分别加入浓度为１２．５、２５．０和５０．０μｍｏｌ／Ｌ的维生素Ｅ和浓度为４００Ｕ／ｍｌ的ＴＮＦα共同培养７２ｈ,收集培养的内皮细胞,分别观察维生素Ｅ对经ＴＮＦ作用的内皮细胞的形态、生长增殖、细胞周期及凋亡的影响。结果：１．相差显微镜观察可见,正常主动脉内皮细胞为多角形,呈单层铺石状紧密排列;而ＴＮＦ组,细胞普遍收缩、拉长,由原来的上皮型变为成纤维细胞型,有较多的细胞脱落并形成大片脱失区,细胞边界尚清楚,形状亦较规则;加维生素Ｅ组（ＴＮＦ＋ＶＥ）内皮细胞形态损伤程度明显轻于ＴＮＦ组,表明ＶＥ可显著减轻ＴＮＦ对内皮细胞形态的损伤作用;２．噻唑蓝比色分析法检测发现,ＴＮＦ组的细胞增殖抑制率为２３．１％,显著高于３个ＴＮＦ＋ＶＥ组（抑制率分别为１９．４％、１５．５％及１０．１％）,细胞抑制率随维生素Ｅ浓度的增加有降低趋势,表明维生素Ｅ可明显降低ＴＮＦ对内皮细胞增殖的抑制作用;３．流式细胞仪分析法检测细胞周期各时相发现,ＴＮＦ组处于Ｇ１期的细胞数要明?     

矽肺与抗氧化剂、抗氧化酶关系的探讨

目的：探讨矽肺与抗氧化剂、抗氧化酶的关系。方法：检测了７３例矽肺患者和６０例健康对照者的血浆维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）含量及红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）、过氧化氢酶（Ｅ－ＣＡＴ）、谷胱甘肽过氧化物酶（Ｅ－ＧＳＨ－Ｐｘ）活性。结果：与对照组比较,患者组的Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ、Ｅ－ＳＯＤ、Ｅ－ＣＡＴ、Ｅ－ＧＳＨ－Ｐｘ平均值均显著降低（Ｐ＜０．００１）;各检测值与患者病程、病情、肺功能状态均有相关;逐步回归表明患者病程、病情、肺功能状态与Ｐ－ＶＥ、Ｅ－ＳＯＤ值相关最为密切。结论：矽肺患者体内氧化抗氧化平衡严重失调,氧自由基反应病理性加剧。     

微量元素硒对动脉粥样硬化家兔内皮素的影响

用放免分析方法，对服Ｓｅ的动脉粥样硬化（ＡＳ）家兔血浆内皮素（ＥＴ）水平进行测定。结果表明，Ｓｅ组家兔血浆ＥＴ水平明显低于对照组，同时血清胆固醇（Ｃｈ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ）及过氧化脂质（ＬＰＯ）含量降低，高密度脂蛋白（ＨＤＬ）明显增高，全血谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）和血清超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力也明显提高。提示，Ｓｅ可通过抗氧化作用保护内皮细胞免遭过氧化损伤，减少ＥＴ释放，抑制ＡＳ形成和发展。     

吸烟对抗氧化类维生素和抗氧化酶活性的影响

为探讨吸烟与抗氧化类维生素及氧自由基的关系，我们检测了８７１例健康吸烟者和３４８例健康非吸烟者血浆维生素Ｃ（Ｐ－ＶＣ）、维生素Ｅ（Ｐ－ＶＥ）、β－胡萝卜素（Ｐ－β－ＣＡＲ）、过氧化脂质（Ｐ－ＬＰＯ）含量及红细胞超氧化物歧化酶（Ｅ－ＳＯＤ）活性。结果表明，与非吸烟组比较，吸烟组的Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ、Ｅ－ＳＯＤ显著降低，Ｐ－ＬＰＯ显著升高；６５例相同年龄男性吸烟者的Ｐ－ＶＣ、Ｐ－ＶＥ、Ｐ－β－ＣＡＲ和Ｅ－ＳＯＤ均随吸烟史及吸烟量的增加而降低，Ｐ－ＬＰＯ随吸烟史及吸烟量的增加而升高，并均呈一定程度的直线相关；提示吸烟者体内的氧化和抗氧化平衡严重失调，氧自由基反应和脂质过氧化反应明显加剧。     

富硒香菇活性多糖对实验大鼠免疫缺陷干预及其影响因素研究

为证明含富硒香菇多糖（Ｓｅ－ＬＥＮ）对大鼠免疫调节及Ｔ细胞亚群增殖的提升作用。通过建立免疫缺陷 Ｓｅ－ＬＥＮ干预。采用流式细胞术观察Ｔ细胞亚群等的变化。结果表明：干预组对淋巴细胞、ＣＤ３＋、ＣＤ４＋的增殖有明显的促进作用,脾指数、胸腺指数明显增加。１／５常剂量组上述结果低于对照,接近模型组,促进ＬＹＭ增殖的起始时间于干预１周后即可产生,提示：Ｓｅ－ＬＥＮ具有增强细胞免疫调节功能,显著地促进ＣＤ４＋     

β-胡萝卜素对白血病HL-60细胞凋亡及细胞周期分布的影响

目的：　探讨β－胡萝卜素抑制白血病细胞增殖的机制。方法：　体外培养白血病细胞株ＨＬ－６０,培养时添加１０μｍ ｏｌ／Ｌ、５０μｍ ｏｌ／Ｌ、１００μｍ ｏｌ／Ｌβ－胡萝卜素作用２４ｈ、４８ｈ、７２ｈ 后,用台盼蓝拒染法进行活细胞计数,绘制细胞生长曲线;应用流式细胞术分析细胞周期分布,同时利用流式细胞术结合ＤＮＡ 凝胶电泳检测白血病细胞凋亡。结果：　细胞生长曲线显示１０～１００μｍ ｏｌ／Ｌ的β－胡萝卜素均对白血病细胞株ＨＬ－６０ 有显著性抑制作用,且呈剂量效应关系。流式细胞术结果显示５０μｍ ｏｌ／Ｌ的β－胡萝卜素处理ＨＬ－６０ 细胞２４ｈ 后,出现Ｓ期阻滞,并诱导５．５９％ 的细胞凋亡。ＤＮＡ 凝胶电泳结果同样显示β－胡萝卜素能够诱导白血病ＨＬ－６０ 细胞凋亡。结论：　β－胡萝卜素对于髓系白血病细胞株ＨＬ－６０ 细胞的增殖具有显著性抑制作用,其机制可能是干扰的白血病细胞ＤＮＡ代谢;β－胡萝卜素诱导白血病细胞凋亡也是其抑制白血病的重要途径之一。     

维生素E和β胡萝卜素对巨噬细胞氧化修饰低密度脂蛋白的影响

目的 :　研究维生素 E(VE)、β胡萝卜素 (βC)对巨噬细胞 (MΦ )介导的低密度脂蛋白 (LDL)氧化修饰能力的影响。方法 :　于培养成熟的 MΦ中分别加入不同剂量的 VE(40、1 0 0、2 0 0 μmol/L)和 βC(0 .5、1 .0、2 .0 μmol/L) 37℃孵育 2 4 h,通过测定培养物上清液中硫代巴比妥酸反应物 (TBARS)、荧光物质 (Lipofusin)、LDL电泳迁移率 (Rf)及共轭二烯 (Dienes)的形成 ,反映LDL的氧化修饰程度。结果 :　体外补充 VE可以显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,随剂量增大作用加强 ;βC低剂量组 (0 .5μmol/L)可显著降低培养物上清液中 TBARS、荧光物质以及共轭二烯的形成 ,明显抑制 LDL的电泳迁移率 ,其余各组无明显影响。结论 :　 VE、βC均可抑制 MΦ介导 LDL氧化修饰的能力 ,并具一定的量效关系 ,提示在 MΦ氧化修饰 LDL的可调节因子中 ,抗氧化营养素是一种有效措施     

β-胡萝卜素对心肌细胞缺氧损伤的保护作用研究

目的 :　研究β-胡萝卜素在离体心肌细胞缺氧损伤时的保护作用。方法 :　建立幼鼠心肌细胞缺氧损伤模型 ,观察乳酸脱氢酶 ( LDH)、氧自由基 ( OFR)、超氧歧化酶 ( SOD)、丙二醛( MDA)等项过氧化物造成心肌损伤的检测指标 ,并对经 β-胡萝卜素预处理的心肌细胞缺氧模型进行观察。结果 :　乳鼠心肌细胞经 2 h缺氧损伤后 LDH,MDA,OFR,SOD等项指标均与对照有显著性差异 ( P<0 .0 1 )。用 β-胡萝卜素预处理的心肌细胞缺氧后经检测其保护作用随浓度梯度增强。结论 :　 1 0 -2和 1 0 -1mmol/L的 β-胡萝卜素对心肌细胞缺氧具有抗氧化保护作用。     

β-胡萝卜素拮抗促癌剂抑制细胞间隙连接通讯的机理探讨

运用荧光探针标记方法和放射免疫分析方法分别研究了细胞内游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）和ｃＡＭＰ的变化与促癌剂ＴＰＡ抑制细胞间隙连接通讯（ＧａｐＪｕｎｃ－ｔｉｏｎａｌＩｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒＣｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ，ＧＪＩＣ）功能的关系，以及β－胡萝卜素对这些变化的影响。结果表明：ＴＰＡ使［Ｃａ２＋］ｉ显著升高，ｃＡＭＰ水平显著降低，与对照组均有显著差异；β－胡萝卜素对［Ｃａ２＋］ｉ和ｃＡＭＰ的作用分别表现为降低和升高趋势，并对ＴＰＡ升高［Ｃａ２＋］ｉ、降低ｃＡＭＰ有一定的拮抗作用。提示：ＴＰＡ升高〔Ｃａ２＋〕ｉ、降低ｃＡＭＰ，影响间隙连接通道蛋白质磷酸化，这可能是其抑制细胞ＧＪＩＣ功能的重要原因之一，而β－胡萝卜素对［Ｃａ２＋］ｉ和ｃＡＭＰ的影响可能是其拮抗促癌剂抑制ＧＪＩＣ的部分作用机制。     

富含类胡萝卜素蔬菜在改善儿童维生素A营养状况中的作用研究

目的：　选择维生素Ａ（ＶＡ）摄入量较低的儿童,进行为期１０ 周干预,测定总体内ＶＡ贮存是否受富含类胡萝卜素蔬菜摄入量的影响。方法：　健康儿童４１ 名,年龄５．３～６．５ 岁。分为两组,即补充黄绿色蔬菜组（干预组）和常规蔬菜组（对照组）。对照组维持原来膳食方式（当地秋冬季以浅色蔬菜为主）,平均浅色蔬菜摄入量为２２４ｇ／ｄ,而干预组为３４ｇ;干预组增加黄绿色蔬菜摄入量,平均摄入黄绿色蔬菜为２３８ｇ／ｄ,对照组为５６ｇ。实验前后,分别给每个儿童口服３ｍ ｇ 生理剂量ＶＡ－ｄ８ 或ＶＡ－ｄ４。在给予标记的ＶＡ后,将每组儿童分成两组,分别于第３ 天或第２１ 天采静脉血,测量实验前后儿童体内ＶＡ总贮存。结果：　对照组实验前视黄醇－ｄ８ 的平均百分丰度与实验后第３ 天和第２１ 天的ＶＡ－ｄ４ 平均百分丰度有显著差异,而干预组,无显著差异。实验前后,给予口服标记量后第２１ 天,对照组循环中标记视黄醇丰度变化大于干预组。干预组平均总体ＶＡ贮存无变化,而对照组有降低趋势,干预组可防止每个儿童视黄醇贮存的丢失２７μｍ ｏｌ。干预组儿童ＶＡ前体类胡萝卜素摄入量（全反式－β－胡萝卜素和其它ＶＡ 前体类胡萝卜素）高于对照组,分别多了１８６ ５９０μｇ     

河南省食管癌高低发区居民维生素营养状况

血样采于河南省食管癌高发区林县,鹤壁市和低发区范县的居民。年龄40～50岁的男女各半。林县人分无癌家族史和有癌家族史两组。林县食管癌标准化死亡率男性为161/10万,女性为102/10万;范县男性为26/10万,女性为7/10万;鹤壁市男性为128/10万,女性为 95/10万。 林县,范县受检者V_A水平0.3μg/ml左右,胡萝卜素0.45～1.29μg/ml。V_c水平低于2μg/ml者,林县占受检者的23％,范县只有16％。V_(B2)水平有90％的受检者AC大于1.20,50％的人在1.41～1.80之间。GSH含量随V_(B2)营养的改善而增高。鹤壁市居民有癌组,胡萝卜素水平低于正常组,增生组。V_A水平有癌组也低于增生组,均有显著差异。V_(B2)水平有70％受检者缺乏,增生组缺乏者竟达86.4％,提示V_(B2)在食管增生患者中,有较严重的缺乏。而吸烟能使V_C水平降低。 这次测定结果仅是对食管癌与维生素营养的关系作一初步了解。其中核黄素在食管癌高发区居民中缺乏较为广泛而严重。补充维生素及改良饮食习惯对防癌将有一定意义。     

有机酸对人血管内皮细胞保护作用的机制研究

目的: 研究氯原酸(CHA)、抗坏血酸(AA)、柠檬酸(CA)和苹果酸(MA)四种有机酸(OA)对单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)和单核细胞聚集刺激因子(M-CSF)的影响及其抗氧化作用,探讨有机酸保护人血管内皮细胞的作用机制。 方法: 在体外原代培养人脐静脉内皮细胞(EC)中,分别加入不同剂量(10,20,40 mg/L)的CHA、AA、CA和MA,以及氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL,100 mg/L),观察四种OA对ox-LDL引起人血管EC损伤的保护作用。另观察单纯CHA和AA(40 mg/L)对EC的直接作用。 结果: (1)ox-LDL组的TBARS值明显升高,是正常LDL组的14.85倍;加OA各组TBARS值有不同程度的降低,并呈明显的剂量效应关系,其中CHA和AA作用较强,CA和MA作用较弱。(2)ox-LDL组MCP-1和M-CSF较LDL组显著升高;加OA组(40 mg/L)MCP-1和M-CSF分别显著低于ox-LDL组;单纯CHA和AA组分别低于空白对照组。 结论: OA对EC的保护作用与其抗氧化作用有关,而且可能与对EC分泌MCP-1和M-CSF的影响有关。     

β-胡萝卜素和核黄素对大鼠脂质过氧化的影响

目的：进一步探讨亚硝胺通过脂质过氧化而致癌的可能途径,以及研究β－胡萝卜素（β－Ｃ）和核黄素（ＶＢ２）通过抑制脂质过氧化反应而影响亚硝胺致癌的可能途径。方法：将５０只二级ＳＤ雄性大鼠随机分成５组。实验组在每日灌胃二甲基亚硝胺（ＮＤＭＮ）１．７５ｍｇ／ｋｇ的基础上,每日分别给予β－Ｃ２５ｍｇ／ｋｇ和／或ＶＢ２１８ｍｇ／ｋｇ补充,实验期为２８天。实验结束时,收集血液,摘取肝脏和肾脏,测红细胞和肝肾匀浆ＳＯＤ活性,全血ＧＳＨ－Ｐｘ活性,血清和肝肾匀浆ＭＤＡ含量,血清ＲＯＯＨ以及全血Ｈｂ含量。结果：１．ＮＤＭＮ可使ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性下降（Ｐ＜０．０５）,ＭＤＡ和ＲＯＯＨ产生增多（Ｐ＜０．０５）。２．添加β－Ｃ后,ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性有明显提高（Ｐ＜０．０５）,ＭＤＡ和ＲＯＯＨ的含量明显降低（Ｐ＜０．０５）。３．添加ＶＢ２后,肝ＳＯＤ和全血ＧＳＨ－Ｐｘ活性均有明显提高（Ｐ＜０．０５）,但ＭＤＡ和ＲＯＯＨ的含量没有差异（Ｐ＞０．０５）。４．同时补充β－Ｃ和ＶＢ２后,各项指标的变化与单纯β－Ｃ组基本一致。结论：脂质过氧化也是亚硝胺致癌的途径之一;一定剂量的β－Ｃ可对抗ＮＤＭＮ引发的脂质过氧化;核黄素对提高抗氧化?