通过前房相关免疫偏离阻止实验性自身免疫前葡萄膜炎

目的 实验性自身免疫性前葡萄膜炎（ＥＡＡＵ）是研究人前葡萄膜炎的有用模型。本研究旨在观察前房相关免疫偏离（ＡＣＡＩＤ）能否阻止ＥＡＡＵ发生。方法 将溶于磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）的牛黑色素蛋白（ＢＭＰ）注射于大鼠右眼前房;对照组动物仅注射ＰＢＳ。７d后使用且加完全福氏佐剂（ＣＦＡ）的ＢＭＰ和百日咳毒素免疫所有动物。通过临床 观察和组织病理学检测葡萄膜炎的严重程度和发病率。通过由注射ＢＭＰ刺激的足垫水肿反     

前房相关性免疫偏离的研究进展

前房相关性免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation,ACAID)是一种机体主动的下调性免疫反应.其临床意义在于:(1)通过诱导ACAID提高角膜、视网膜等眼组织移植的成功率;(2)通过诱导ACAID防治葡萄膜视网膜炎,避免发生疱疹性角膜基质炎;(3)通过消除ACAID避免其不利影响.本文就acaid的研究进展作一综述.     

前房相关性免疫偏离研究进展

前房相关性免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation．ACAID)是一种机体主动的下调性免疫反应，它有以下几个特点：(1)抑制抗原特异性迟发型超敏反应；(2)抑制补体结合性抗体的分泌；(3)产生抗原特异性致敏的细胞毒T淋巴细胞；(4)产生抗原特异性非补体结合性抗体。其临床意义在于：(1)通过诱导ACAID提高角膜、视网膜等眼组织移植的成功率；(2)通过诱导ACAID防治葡萄膜视网膜炎。避免发生疱疹性角膜基质炎；(3)通过消除ACAID避免其不利影响。     

Possibility of inducing anterior chamber-associated immune deviation by TGF-beta2 treatment of monocytes isolated from Behcet's patients

Murine macrophages treated with TGF-beta2 are capable of inducing anterior chamber-associated immune deviation (ACAID), and these macrophages are characterized by impaired IL-12 production and CD40 expression, consequently failing to promote Th1 cell differentiation. In this study, we investigated whether human monocytes can also acquire the specific functions by TGF-beta2 treatment, even when the monocytes are isolated from patients with Behcet's disease (BD). Adherent monocytes isolated from peripheral blood mononuclear cells (PBMC) of 16 BD patients and 16 healthy controls, were cultured overnight with or without 5 ng/ml of TGF-beta2. Then, TGF-beta2-treated or untreated adherent cells were co-cultured with allogeneic CD4(+) T cells obtained from healthy subjects. TGF-beta2 treatment inhibited the abilities of adherent monocytes obtained from BD patients to stimulate the proliferation and IFN-gamma production of allogeneic CD4(+) T cells. The reduced IFN-gamma production was also confirmed by IFN-gamma mRNA expression in the co-cultured T cells. IL-12 production and CD40 molecule expression by adherent monocytes obtained from BD patients were strikingly reduced by TGF-beta2 treatment. These results suggest a possibility that adherent monocytes isolated from BD patients may acquire a property to induce ACAID by treatment with TGF-beta2.     

前房接种角膜抗原和角膜移植物诱导的前房相关免疫偏离

目的 观察角膜抗原和角膜移植片诱导前房相关免疫偏离的可能性。方法 分别将角膜抗原和带有完善内皮层的角膜移植片接种于新西兰兔眼结膜下和前房。７天后,使用添加完全弗氏佐剂的角膜抗原或植片供体脾细胞免疫动物。１周后,评估抗原特异性迟发型超敏反应的诱导情况。     

实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的发病特点

背景 Lewis大鼠是建立实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）动物模型的常用种系,对其发病特点,尤其是EAU大鼠眼部超微结构改变的研究尚未见报道. 目的 观察EAU大鼠的发病体征及其眼部超微结构的改变. 方法 选取SPF级6～8周龄雌性Lewis大鼠18只,采用随机数字表法随机分为对照组6只和模型组12只.模型组大鼠后肢足底、两侧腹壁和躯干上皮下各注射含有光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP,1177-1191）和结核菌素（TB）的完全弗氏佐剂（CFA）乳化液,对照组大鼠不作处理.注射后观察两组大鼠饮食、体温和活动情况,每天裂隙灯显微镜下观察大鼠眼部炎症表现,于免疫后12d获取大鼠眼组织标本,对虹膜、睫状体和视网膜进行常规组织病理学检查,并分别在扫描电子显微镜和透射电子显微镜下观察虹膜、睫状体和视网膜的超微结构改变.结果 模型组大鼠免疫后采食量为（190.00± 18.03）g,明显少于对照组的（285.33±28.02）g,差异有统计学意义（t=4.955,P=0.012）;模型组和对照组大鼠的饮水量分别为（241.67±18.56）ml和（289.67±18.18）ml,差异有统计学意义（t=3.201,P=0.033）;模型组大鼠体温升高,精神倦怠.裂隙灯显微镜下观察发现,模型组大鼠免疫后6d出现虹膜充血、前房积脓和瞳孔膜闭,免疫后12d眼部炎症最严重,炎症评分为（3.83±0.41）分,而对照组大鼠眼前节未见异常.组织病理学检查发现,模型组大鼠前房、虹膜、睫状体组织和玻璃体腔内均可见大量淋巴细胞、中性粒细胞和单核巨噬细胞浸润.扫描电子显微镜下可见模型组大鼠虹膜肌纤维粗细不均,睫状体上皮表面粗糙及RPE细胞绒毛疏松.透射电子显微镜下观察可见,模型组大鼠虹膜单核巨噬细胞浸润,睫状体上皮细胞膜褶皱蓬松及排列紊乱,视网膜Müller细胞中有髓样小体,RPE细胞中有线粒体空泡出现,而对照组大鼠虹膜、睫状体及     

诱导供体特异性前房相关免疫偏离对高危角膜移植排斥反应的影响

目的:探讨诱导供体特异性的前房相关免疫偏离(anterior chamber-associated immune deviation,ACAID)对高危角膜移植排斥反应的影响。方法:采用新西兰白兔眼角膜建立碱烧伤眼模型,实验动物随机分为4组,A:正常角膜常规角膜移植组(正常对照组);B:碱烧伤常规角膜移植组(碱烧伤对照组);C:正常角膜诱导ACAID的角膜移植组(正常诱导组)。D:碱烧伤后诱导ACAID的角膜移植组(碱烧伤诱导组)。B,D组进行左眼碱烧伤,烧伤后1mo进行角膜移植。C,D组在角膜移植前2wk于右眼前房注入可溶性抗原以预先诱导供体特异性ACAID。A,B组右眼前房注等量平衡盐溶液。术后记录植片存活时间;对角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)生长情况进行评分;记录移植排斥指数(rejection index,RI);角膜固定、包埋后制作切片行HE染色。结果:A、C组角膜植片长期存活,碱烧伤对照组植片平均存活25.13±0.64d,碱烧伤诱导组角膜植片平均存活时间为38.25±1.28d。与碱烧伤对照组相比,碱烧伤诱导ACAID组角膜植片平均存活时间显著延长,两组植片存活时间的差异具有统计学意义(P=0.00)。结论:诱导供体特异性ACAID可以延长碱烧伤高危眼角膜植片的存活时间。     

三氧化二砷对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠的治疗作用

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠模型的治疗作用。方法将光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）R14多肽免疫大鼠随机分为高剂量As2O3组、低剂量As2O3组、环孢素A（CsA）组和生理盐水组4组,每组5只,分别腹腔注射5 mg/kg As2O3、0.5 mg/kg As2O3、2 mg/kg CsA及生理盐水0.2 mL。裂隙灯显微镜观察大鼠眼前房炎症情况,第14天时处死大鼠,光学显微镜观察大鼠眼球的病理变化程度,免疫组织化学观察大鼠眼球中CD3＋T细胞的浸润情况,TUNEL法检测大鼠视网膜组织的凋亡。结果生理盐水组和0.5 mg/kg As2O3组可见明显的虹膜充血、血管扩张和脓性渗出,5 mg/kg As2O3组和CsA组前房炎症反应程度明显较轻,与生理盐水组比较,5 mg/kg As2O3组和CsA组的临床评分明显降低,差异均有统计学意义（tAs2O3 5 mg=-0.656,P=0.042;tCsA=-1.308,P=0.002）。组织病理学评分显示各组间差异有统计学意义（F=11.297,P=0.000）。与生理盐水组比较,As2O3组和CsA组的CD3＋T细胞浸润明显减少。TUNEL检测细胞凋亡在各组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论腹腔注射As2O3可以明显抑制EAU大鼠的临床表现、病理改变及CD3＋T细胞的浸润,未增加病变部位细胞的凋亡。     

眼免疫赦免的两面性及其临床意义

眼的免疫赦免卢因于眼自身对全身免疫反应诱导和表达的修饰。将抗原接种于眼前房可以诱导一种偏离形式的全身性免疫反应,称为前房相关免疫偏离。ＡＣＡＩＤ的主要特征是：（１）怕特异性迟发型超敏反应和补体结合性抗体反应的缺陷;（２）产生独特的调节性Ｔ细胞亚群。     

The role of the immune system in uveitis induced in animals

The etiological diagnosis in many cases of uveitis is hampered by the lack of insight into the pathogenesis of the disease. Animal models might provide clues for the understanding of the ocular and systemic processes leading to this invalidating disease. The immune system seems to play an important role in the pathogenesis of uveitis. Four main topics i.e. autoimmune phenomena, circulating immune complexes, effects of systemic endotoxin and bacterial or viral uveitis are reviewed. Autoimmune phenomena might cause the recurrence of uveitis after presentation of slightly altered self-antigens to the immune system. The endotoxin induced uveitis might be the initial event of recurrent episodes of uveitis caused by the deposition of immune complexes. Endotoxin might play a role in the so called HLA-B27 positive uveitis, mediated through tumour necrosis factor and interleukin-1. In this paper the characteristics of these animal models are described. Attention has been paid to those situations where several of these mechanisms combine in the pathogenesis of ocular diseases.     

Fas／FasL系统及其在葡萄膜炎中的意义

Fas是一种具有重要功能的跨膜糖蛋白,为肿瘤坏死因子受体超家族的成员之一,其自然配体为FasL(Fas Ligand)。Fas与FasL或Fas单克隆抗体结合可诱导Fas^ 细胞的凋亡。Fas系统诱导的细胞凋亡可消除自身反应性淋巴细胞,诱导活化T、B细胞凋亡,参与免疫赦免形成,从而维持机体生理平衡和自身免疫耐受。Fas/FasL系统的异常在自身免疫性葡萄膜炎发生中可能起着一定的作用,自身免疫性淋巴细胞对Fas/FasL系统诱导的凋亡有较大抵抗性,这可能是葡萄膜炎慢性化和复发的重要机制之一。     

^99Tc—MDP对兔实验性葡萄膜炎的治疗作用

目的探讨^99锝-亚甲基二膦酸盐（^99Tc-MDP,云克）对兔实验性葡萄膜炎的治疗作用。方法实验兔22只随机分为生理盐水组、地塞米松组、云克组。ELISA法测定实验性葡萄膜炎兔动物模型造模前、造模后5d、给药治疗后10d、停药后5d、4个不同阶段白细胞介素（IL-2）、干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的血清质量浓度;浊度法及细胞技术池测定不同治疗阶段房水蛋白及房水细胞计数,于不同阶段摘除眼球行组织病理学观察。结果与生理盐水组比较,地塞米松组及云克组均可使兔血清IL-2、IFN-γ、TNF—α水平和房水细胞计数、房水蛋白质量浓度降低,差异均有统计学意义（P〈0．05）,地塞米松组与云克组2组间差异无统计学意义（P〉0．05）。地塞米松组及云克组在治疗后眼球的组织病理学显示炎症较治疗前减轻。结论云克在一定程度上有降低兔实验性葡萄膜炎血清IL-2、IFN-γ、TNF-α质量浓度及房水细胞计数、房水蛋白质量浓度以及减轻眼球炎症的作用。     

利妥昔单抗对实验性自身免疫性葡萄膜炎小鼠的抗炎作用及其机制

目的　探讨利妥昔单抗（RTX）对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）小鼠的抗炎作用及其机制。 方法　取SPF级6～8周龄健康雌性C57BL/6J小鼠27只,使用光感受器间维生素A类结合蛋白1-20(IRBP_1-20)建立EAU小鼠模型,将EAU小鼠随机分为PBS对照组、50 mg·kg^-1 RTX实验组和100 mg·kg^-1 RTX实验组,每组各9只小鼠,PBS对照组小鼠腹腔注射PBS,50 mg·kg^-1 RTX实验组和100 mg·kg^-1 RTX实验组小鼠每千克体重分别腹腔注射50 mg RTX和100 mg RTX。造模后第21天,对各组小鼠进行眼底图像的采集与视网膜组织HE切片的制作,通过小动物视网膜成像仪采集各组小鼠眼底图像并参照Caspi临床评分标准进行炎症评分,将HE染色切片置于显微镜下观察并进行拍照,参照Caspi组织病理学评分标准进行评分。采用实时荧光定量PCR检测各组小鼠视网膜组织白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-4和IL-10的mRNA相对表达量。采用SPSS 21.0软件进行统计学分析。结果　眼底图像显示:PBS对照组EAU小鼠眼底出现多发性血管炎,血管扩张,视网膜脉络膜出现多发病灶及少量线样病变;50 mg·kg^-1 RTX实验组EAU小鼠眼底发生轻度血管炎,视网膜出现个别局部病灶,无线样病变;100 mg·kg^-1RTX实验组EAU小鼠视网膜局部出现个别病灶,无线样病变。PBS对照组、50 mg·kg^-1 RTX实验组和100 mg·kg^-1RTX实验组EAU小鼠眼底图像Caspi临床评分分别为（1.944±0.808）分、（1.667±0.791）分、（1.667±0.829）分,三组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。PBS对照组、50 mg·kg^-1 RTX实验组和100 mg·kg^-1RTX实验组EAU小鼠视网膜组织病理学评分分别为（1.563±1.116）分、（1.063±0.623）分、（1.250±0.655）分,三组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。实时荧光定量PCR检测结果显示,50 mg·kg^-1 RTX实验组和100 mg·kg^-1 RTX实验组小鼠视网膜组织IL-6、IL-10 mRNA相对表达量以及IL-10/IL-6比值均高于PBS对照组（均为P<0.05）;100 mg·kg^-1 RTX实验组小鼠视网膜组织IL-6、IL-10 mRNA相对表达量以及IL-10/IL-6比值均高于50 mg·kg^-1 RTX实验组（均为P<0.05）。结论　腹腔注射RTX可一定程度缓解EAU小鼠视网膜组织的炎性病变,其机制可能与RTX提高小鼠视网膜组织IL-10/IL-6比值有关。     

实验性自身免疫性葡萄膜炎T淋巴细胞亚群与Treg细胞的表达研究

目的　探讨实验性自身免疫性葡萄膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ,ＥＡＵ）新西兰兔模型外周血单个核细胞（ｐｅ-ｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄｍｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｃｅｌｌｓ,ＰＢＭＣ）Ｔ淋巴细胞亚群的变化及其与疾病特征的相关性。方法　选取健康成年雄性新西兰大白兔４０只作为动物模型,用２０ｇ·Ｌ－１牛血清蛋白（ｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ,ＢＳＡ）静脉注射和玻璃体内注射法建立ＥＡＵ模型,并观察模型眼炎症反应及ＰＢＭＣＴ淋巴细胞亚群特征。结果　ＣＤ４＋Ｔ细胞在ＥＡＵ兔的外周血中比例明显增加,且随时间的进展呈进行性增加,并与炎症反应呈正相关,相同的趋势可见于ＣＤ４＋／ＣＤ８＋Ｔ细胞比例。此外,Ｔｒｅｇ细胞趋势与ＣＤ４＋Ｔ细胞及ＣＤ４＋Ｔ／ＣＤ８＋Ｔ细胞比例相反,与炎症反应呈负相关。结论　ＣＤ４＋Ｔ细胞的优势性选择性克隆增殖及Ｔｒｅｇ细胞的降低有可能引发免疫功能紊乱并导致针对自身组织的免疫应答失去有效的负性调控,导致ＥＡＵ的发生及进行性加重。     

Th17/Treg细胞与自身免疫性葡萄膜炎的研究进展

葡萄膜炎是一组常见的由自身免疫紊乱导致的眼部炎症性致盲性眼病,现代研究认为主要是由CD4⁺T 细胞介导产生。CD4⁺T 细胞主要分为Th1,Th2,Th17和 Treg 细胞(CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺调节性T细胞)四个亚群。以往研究主要集中在Th1,Th2细胞亚群,近年来研究表明,Th17 细胞是诱导自身免疫性葡萄膜炎发病的主要原因,而Treg细胞是负向调控葡萄膜炎的主要因素。因此,Th17和 Treg 细胞在葡萄膜炎的发病及病程演变过程中发挥重要作用,本文就Th17 细胞、Treg 细胞与自身免疫性葡萄膜炎的相关研究进展进行综述。     

龙胆泻肝汤对葡萄膜炎大鼠关键炎症细胞因子表达的影响

目的 探讨龙胆泻肝汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎(experimental autoimmune uveitis,EAU)大鼠关键炎症细胞因子表达的影响.方法 Lewis大鼠随机分为对照组(6只)、EAU组(18只)和LXT组(18只).光感受器间维生素A结合蛋白(interphotoreceptor retinoid-binding protein,IRBP)免疫EAU组和LXT组大鼠,对照组大鼠注射等量不含IRBP的乳化液.使用实时荧光定量PCR及ELISA方法检测血液、淋巴结和脾脏中IFN-γ、IL-17、TNF-α和IL-10细胞因子在EAU大鼠体内治疗前后的变化情况.结果 LXT组大鼠全血中IFN-γ mRNA表达在第8天虽然高于对照组(P=0.000),但已显著低于EAU组(P=0.000);LXT组IL-17 mRNA在第12天达峰值,显著低于EAU组(P=0.000),且均显著高于对照组(P=0.000);TNF-α mRNA仅在第12天显著高于对照组(P=0.000),但低于EAU组(p=0.000);IL-10 mRNA表达在第16天高于EAU组(P =0.042).LXT组大鼠淋巴结和脾脏中IFN-y、IL-17和TNF-α mRNA表达在第12天显著低于EAU组(均为P =0.000);LXT组淋巴结中IL-10 mRNA表达在第8天开始显著高于对照组(P=0.001),且在整个炎症期均维持在较高水平;LXT组脾脏IL-10 mRNA表达在第12天达峰值,且高于对照组和EAU组(均为P=0.000).LXT组大鼠血清中IFN-y、IL-17和TNF-α蛋白表达水平在第12天和第16天均低于EAU组(均为P＜0.05);EAU组和LXT组血清中IL-10蛋白表达在第12天均高于对照组(均为P ＜0.05),第16天达峰值,但LXT组IL-10蛋白含量更高.结论 龙胆泻肝汤通过抑制IFN-γ、IL-17和TNF-oα相关炎症因子的表达发挥其抗炎作用,促进IL-10的表达,加速自身免疫炎症的恢复.龙胆泻肝汤可通过多种途径在EAU的治疗中发挥免疫调节作用.     

龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎的治疗作用

目的　探讨龙胆泻肝汤对大鼠实验性自身免疫性葡萄膜炎（ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌａｕｔｏ-ｉｍｍｕｎｅｕｖｅｉｔｉｓ,ＥＡＵ）的治疗作用。方法　Ｌｅｗｉｓ大鼠随机分为对照组６只、ＥＡＵ组１８只和ＬＸＴ组１８只,光感受器间维生素Ａ结合蛋白免疫ＥＡＵ组和ＬＸＴ组大鼠。观察大鼠生理特征及眼部炎症变化,出现葡萄膜炎症时给予ＬＸＴ组大鼠龙胆泻肝汤灌胃;免疫后１２ｄ比较各组大鼠眼组织病理学差异;免疫后每隔４ｄ检测房水蛋白及血清中白蛋白、球蛋白变化。结果　成功制备了ＥＡＵ大鼠模型;免疫后５ｄ大鼠开始出现葡萄膜炎症状,１２ｄ炎症最重。ＥＡＵ大鼠肛温在１ｄ、７ｄ、１０ｄ和１２ｄ高于对照组（Ｐ＝０．０２０、０．０００、０.０１５、０．００１）;免疫后１２ｄ,ＥＡＵ组房水蛋白浓度为（３６．０３±３．２３）ｇ?Ｌ－１,ＬＸＴ组为（２４．６７±２．６０）ｇ?Ｌ－１,差异有显著统计学意义（Ｐ＝０．０００）;组织病理学显示ＥＡＵ组视网膜结构破坏程度明显高于ＬＸＴ组（Ｐ＝０．０００）。ＥＡＵ组免疫后４ｄ、８ｄ及１２ｄ白蛋白均低于对照组（Ｐ＝０．０４５、０．０００、０.０３３）,ＬＸＴ组４ｄ和８ｄ白蛋白低于正常（Ｐ＝０.０４５、０．００５）,但１２ｄ时恢复至正常;１２ｄ时ＥＡＵ组球蛋白明显高于正常（Ｐ＝０．０４７）,ＬＸＴ组未见明显异常。结论　龙胆泻肝汤能有效减轻ＥＡＵ大鼠前房炎症,减少炎症细胞浸润,保护眼部组织结构,增强机体抗氧化能力,调节免疫状态,对ＥＡＵ发挥治疗作用。     

前房相关免疫偏离形成中IDO的表达及意义

目的探讨吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)在前房相关免疫偏离(ACAID)形成中的作用。方法分别将卯白蛋白(OVA)及其与完全弗氏佐剂的混合液注入BALB/C小鼠前房及后足垫内,皮内注射OVA观察迟发型超敏反应,评价ACAID的形成。分别于小鼠前房注射OVA后第3、7、10和14d处死动物,取其脾脏,采用免疫组织化学和Westernblot法检测小鼠脾脏组织中IDO的表达及其动态变化。结果正常小鼠脾脏组织中有少量IDO表达;前房注射OVA后第7、10和14dIDO表达量明显增加(P<0.05)。免疫组织化学显示的阳性细胞数量变化与Western-blot检测的蛋白动态变化相一致。结论在ACAID形成过程中IDO表达显著性增加,提示它可能参与了ACAID的形成。     

视网膜下腔相关的免疫偏离

目的 确立视网膜下腔是不足具有支持针对视网可沉吟性抗原（Ｓ抗原）刺激诱导偏离式免疫反应的能力。方法 将视网膜Ｓ抗接种于Ｗｉｓｔａｒ大鼠的眼前房和视网腊膜下腔。抗原接种后７天,使用Ｓ抗原和安全福氏佐剂免疫受主动物。然后,通过足部刺激评估迟发型超原接种后７天,使用Ｓ抗原和完全福氏佐剂免疫受主动物。然后,通过足部刺激评估这发型超敏反应（ＤＴＨ）。结果 前房和视网膜睛腔注射Ｓ抗原的运行动物发生抗原特异性Ｄ