γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病中的表达

研究表明,氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要发病机制之一。肺组织中重要的抗氧化剂谷胱甘肽(GSH)对纠正氧化失衡,保护肺组织免受氧化损伤起关键作用。γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)是GSH合成的限速酶,调控GSH生成的速度和量。为此,我们的实验初步探讨γGCS在大鼠COPD中的作用。材料与方法　雄性Wistar大鼠14只,平均体重(2 0 0±2 0 )g ,随机分为COPD组和对照组,每组7只。每天熏香烟及2次气管内滴入2 0 0 μg脂多糖法制作COPD大鼠动物模型[1] 。按文献[2 ]方法测定γGCS活性。免疫组织化学法测定肺组织c fos、c j…     

Nrf2调控γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达与慢性阻塞性肺疾病

Nrf2（NF-E2 related factor）在参与细胞抗氧化应激和外源性有毒物质诱导的主要防御机制中发挥重要的作用，是外源性有毒物质和氧化应激的感受器。细胞质Keap1蛋白是Nrf2的负调节因子。Nrf2能调控Ⅱ相解毒酶基因如γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）的表达。氧化／抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病的主要发病机制。谷胱甘肽（GSH）是肺内主要的抗氧化剂，而γ-GCS是GSH的限速酶，因此通过Nrf2途径调控细胞内γ-GCS的表达具有重要作用。     

转化生长因子β1在慢性阻塞性肺疾病γ谷氨酰半胱氨酸合成酶表达调控中的作用

谷胱甘肽（GSH）作为肺最主要的抗氧化剂在肺部抗氧化损伤中发挥着重要作用，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是GSH生物合成的限速酶。慢性阻塞性肺疾病以患者肺内GSH水平降低和转化生长因子（TGF）哏浓度升高为特征。TGF-β1是GSH合成强有力的抑制因子，这种抑制作用在一定程度上是通过对γ-GCSh编码基因转录过程的调控实现的。TGF—β1下调γ-GCSh表达的分子机制可能与活化蛋白（AP）-1有关。     

γ-GCS和慢性阻塞性肺疾病

氧化 /抗氧化失衡是COPD主要发病机制之一 ,谷胱甘肽 (GSH)是细胞内重要的抗氧化剂 ,对维持肺上皮细胞完整和抗氧化损伤起关键作用。γ 谷氨酰半胱氨酸合成酶 (γ GCS )是GSH合成的限速酶 ,调节细胞内GSH水平。γ GCS活性及基因表达对COPD均有重要意义。     

丝裂原活化蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在大鼠慢性阻塞性肺疾病肺组织中的表达

我们前期的研究表明了γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GSC)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)和支气管哮喘(简称哮喘)中的重要作用。本组实验探讨细胞外信号调节激酶(ERK)、c-Jun氨基末端激酶(JNK)、p-p38与γ-GCS在大鼠COPD中的作用。     

慢性阻塞性肺疾病中氧化应激与γ-谷氨酰半胱氨酸合酶

氧化／抗氧化失衡在慢性阻塞性肺疾病的发病中起重要作用,吸烟是引起氧化／抗氧化失衡的主要危险因素,一方面通过核转录因子κB(NF-κB)途径,引起具有伤害作用的促炎症介质基因表达增加,造成组织损伤;另一方面通过活化蛋白(AP-1)引起保护性抗氧化的γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)活化,它可以上调谷胱甘肽(GSH)的生成,增加机体的抗氧化能力。γ-GCS是决定GSH合成的限速酶。对γ-GCS的研究,尤其足对γ-GCS表达的调控已成为抗氧化研究的执点。     

γ-谷氨酰半胱氨酸合酶在慢性阻塞性肺疾病中的作用

氧化/抗氧化失衡是慢性阻塞性肺疾病(COPD)主要发病机制之一,谷胱甘肽(GSH)是肺组织中重要的抗氧化剂,γ-谷氨酰半胱氨酸合酶(γ-GCS)是GSH合成的限速酶,其可调节细胞内GSH的水平。γ-GCS的表达及其基因调控对抗氧化治疗COPD起重要作用。     

丝裂原活化蛋白激酶、蛋白激酶B和γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病患者肺组织中的表达

我们前期研究表明，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）是体内重要抗氧化剂谷胱甘肽（GSH）的限速酶，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）发病中起重要作用。我们观察COPD患肺组织中γ-GCS与蛋白激酶的表达，探讨丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）蛋白激酶B（PKB）信号通路与γ-GCS在COPD发病中的作用。     

γ-GCS和慢性阻塞性肺疾病

氧化／抗氧化失衡是COPD主要发病机制之一，谷胱甘肽(GSH)是细胞内重要的抗氧化剂。对维持肺上皮细胞完整和抗氧化损伤起关键作用。γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)是GSH合成的限速酶，调节细胞内GSH水平。γ-GCS活性及基因表达对COPD均有重要意义。     

核因子相关因子2及其蛋白激酶与γ谷氨酰半胱氨酸合成酶在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织的表达

本室前期研究结果显示，γ谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-GCS）作为体内重要抗氧化剂谷胱甘肽的限速酶，在慢性阻塞性肺疾病（COPD）的抗氧化机制中发挥了重要的作用。红系衍生的核因子相关因子2（NRF2）是新近发现的氧化应激反应重要的转录激活因子，在氧化应激反应中处于核心地位。国外报道蛋白激酶B（PKB）、非典型蛋白激酶c（aPKC）信号通路可能在不同的角度对NRF2的生物学功能进行调节。目前对NRF2的信号转导通路的研究很少涉及到整体的模型，不同实验室在不同的组织细胞中所得结果不同。我们通过检测COPD大鼠肺组织中PKB、aPKCλ/l、NRF2和γ-GCS的表达及相关作用，以探讨其在COPD抗氧化机制中的作用。     

谷氨酰半胱氨酸连接酶调节基因多态性与慢性阻塞性肺疾病易感性的关系

目的探讨谷氨酰半胱氨酸连接酶调节(GCLM)基因多态性与血浆γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)活性及慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法应用聚合酶链反应(PCR)及限制性片段长度多态性分析(RFLP)方法检测106例稳定期吸烟的COPD患者(COPD组)、124名健康吸烟者(C组)及132名健康不吸烟者(H组)GCLM基因-588C/T和-23G/T多态性位点基因型,并用双酶法检测血浆γGCS活性。结果-588CC与-23GG、-588CT与-23GT、-588TT与-23TT基因型在个体间分布一致。COPD组-588位点CC基因型和C等位基因频率(62.3%、79.2%)显著低于C组(84.7%、91.9%)和H组(78.8%、89.0%,P均<0.01)。吸烟者-588T等位基因相对于C等位基因患COPD的比值比(OR值)为3.0,95%可信区间为1.7～5.3。C组[(282±58)U/mg·prot]和COPD组[(224±54)U/mg·prot]血浆γGCS活性显著高于H组[(157±26)U/mg·prot,P<0.01],其中C组高于COPD组(P<0.01)。H组-588CC与CT/TTγGCS活性比较差异无统计学意义[(158±27)、(153±25)U/mg·prot,P>0.05],而C组[(292±54)、(225±45)U/mg·prot]和COPD组[(245±52)、(188±36)U/mg·prot]中-588CCγGCS活性显著高于CT/TT(P<0.01)。结论GCLM-588C/T、-23G/T位点多态性与血浆γGCS活性及COPD易感性相关。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠磷脂酰肌醇-3激酶、蛋白激酶B及γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶表达研究

目的通过观察COPD大鼠中磷脂酰肌醇-3激酶（phosphoinositide-3 kinases,P13K）、蛋白激酶B（protein kinaseB,PKB）与γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（gamma glutamylcysteine synthetase,γ-GCS）的表达,研究P13K、PKB通路和rGCS的关系及其在COPD中可能的参与机制。方法30只健康雄性Wistar大鼠随机分COPD组和对照组。采用每日熏香烟和两次气管内注入脂多糖法制作COPD大鼠模型。检测大鼠肺组织中7-GCS活性,原位杂交检测肺组织中rGCSmRNA的表达,免疫组织化学分析肺组织中P13K、PKB与γ-GCS蛋白水平。结果COPD组大鼠肺组织中γ-GCS差异（P〈0．01）。P13K、PKB与γ-GCS免疫组织化学在COPD组可见肺泡、支气管活性明显高于对照组,组间差异有统计学意义（P〈0．01）。原位杂交示COPD组大鼠支气管,肺泡上皮细胞与小动脉平滑肌细胞7-GCSmRNA广泛表达,与对照组有显著性壁细胞及小血管平滑肌细胞胞浆中皆有蛋白阳性信号表达;图象定量分析示大鼠COPD组P13K、PKB与γ-GCS蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01）。直线相关分析得出P13K、p—PKB蛋白表达与γ-GCS活性、mRNA及蛋白表达呈正相关。结论COPD大鼠肺组织7-GCS蛋白和mRNA表达增高,P13K、p-PKB蛋白也有相应高表达,提示P13K、PKB和γ-GCS可能在COPD的发病机制中发挥作用,且可能参与了γ-GCS的信号转导通路。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠主要脏器γ-GCS活性及其mRNA表达变化

目的:研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠血浆、肺、心、肝、和肾组织中氧化/抗氧化水平,及γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性及其表达在各器官组织中的差异和变化。方法:健康雄性Wistar大鼠14只,随机分COPD模型组和对照组,每组7只。采用每日熏香烟和两次气管内滴入脂多糖(LPS)法制作COPD大鼠模型。检测大鼠血浆、肺、心、肝和肾组织中还原型谷胱甘肽(GSH)、活性氧(ROS)、总抗氧化力(T-AOC)和γ-GCS活性。用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肺、心、肝和肾组织中γ-GCS mRNA的表达。结果:COPD组大鼠心、肝中GSH、ROS、T-AOC和γ-GCS活性均显著增高(P均<0.05),但未显示出明显氧化/抗氧化失衡。肺中GSH和ROS提高,而T-AOC下降明显(P均<0.05),表明提高的GSH不足以抵御氧化作用,明显存在氧化/抗氧化失衡。血清中ROS增高,GSH和T-AOC下降明显,显示系统性氧化/抗氧化失衡。COPD大鼠肺组织γ-GCS mRNA表达较对照组显著增高(P<0.05),而心、肝、肾组织中γ-GCS mRNA表达与对照组无明显差异(P>0.05)。结论:COPD大鼠肺内存在氧化/抗氧化失衡,肺组织是γ-GCS表达的主要部位,在抗氧化损伤中可能发挥重要作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者同型半胱氨酸水平变化及意义探讨

目的 探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者不同病期血浆同型半胱氨酸、血浆谷胱甘肽(GSH)水平的变化,以了解同型半胱氨酸在COPD患者发生、发展过程中的作用及其临床意义.方法 2006年1月至2008年6月收集46例COPD急性发作期患者(COPD急性发作期组)、45例COPD缓解期患者(COPD缓解期组)及38例健康受试者(健康对照组).测定各组的多项指标:吸烟指数、体质量指数、血浆同型半胱氨酸、血浆GSH、肺功能和动脉血气.结果 ①COPD急性发作期组血浆同型半胱氨酸高于健康对照组和COPD缓解期组,(31.93±26.19) μmol/L vs (10.79±2.32) μmol/L,(21.98±9.13) μmol/L,三组比较差异有统计学意义(F=13.08,P＜0.01).②COPD缓解期组血浆GSH明显低于健康对照组和COPD急性发作期组,(71.72±76.36) mg/L vs (166.38±63.51) mg/L,(145.18±80.41) mg/L,三组比较差异有统计学意义(F=19.11,P＜0.01).③COPD患者不论急性发作期,还是缓解期,血浆同型半胱氨酸与GSH均呈明显负相关(COPD急性发作期:r=0.579,P＜0.01;COPD缓解期:r=-0.721,P＜0.01);COPD急性发作期血浆GSH与第一秒用力呼气容积/用力肺活量呈正相关(r=0.488,P＜0.05).结论 COPD患者存在高同型半胱氨酸血症,血浆同型半胱氨酸参与COPD的氧化应激.     

支气管哮喘豚鼠肺内γ谷氨酰半胱氨酸合成酶重链表达调控和地塞米松对其的影响

支气管哮喘(简称哮喘)是以慢性气道炎症和气道高反应性为特征的疾病。炎性细胞在气道局部产生大量活性氧/氮簇(ROS/RNS) ,造成氧化/抗氧化失衡,使病情进一步加重。呼吸道表面液体(RTLF)中丰富的还原型谷胱甘肽(GSH)是肺内抗氧化保护体系中最主要的成分。γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γGCS)是由重链(γGCSh)和轻链(γGCSL)构成的异二聚体,是GSH合成限速酶。糖皮质激素是哮喘治疗的一线药物。但哮喘患者肺内γGCS活性、GSH水平及糖皮质激素对其影响尚少见报道。材料与方法　( 1)豚鼠模型的建立:雄性健康豚鼠(南华大学实验动物部提供)…     

G蛋白、钙离子依赖性蛋白激酶调控γ-GCS与慢性阻塞性肺疾病

氧化/抗氧化失衡是造成慢性阻塞性肺疾病（COPD）慢性损伤的重要原因，无论在急性发作期还是在缓解期，均存在两者作用失衡，当正常的氧化/抗氧化平衡破坏后就造成氧化应激。谷胱甘肽是肺内抵御内、外源性氧化剂持续危害的主要物质，γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶（γ-glutamylcysteine synthetase ，γ-GCS）是谷胱甘肽合成的限速酶，决定谷胱甘肽合成的量和速度。胞外刺激通过不同信号转导途径调控γ-GCS的活性，调节谷胱甘肽的合成，参与抗氧化作用。γ-GCS的信号通路研究在COPD的临床应用中具有非常重要的意义。     

睡眠对慢性阻塞性肺疾病患者上气道阻力的影响

目的 探讨睡眠对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者上气道阻力及呼吸动力学的影响.方法 选择19例COPD急性加重期住院患者,治疗后病情稳定,通过食道-胃囊管法,检测气道开口压、食道压和胃内压,层流速仪测呼吸流速和容量改变.同步监测多导睡眠图,采集患者在清醒、睡眠仰卧及侧卧位呼吸动力学的变化.结果 睡眠时吸气峰流速、平均吸...     

白细胞介素8 mRNA在慢性阻塞性肺疾病患者气道黏膜中的表达

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是危害人体健康的常见病，随着COPD气道炎症的深入研究，证实白细胞介素8(IL-8)在COPD的发生发展过程中起着重要作用。我们的实验观察了IL-8 mRNA表达水平，初步探讨其在COPD急性发作期气道炎症中的作用。     

慢性阻塞性肺疾病患者中枢呼吸驱动和气道阻力的研究

目的：探讨在（1）上呼吸道感染所致急性咳嗽组（无阻塞组）；（2）慢性阻塞性肺疾病所致气道轻度阻塞组；（3）慢性阻塞性肺疾病所致气道中度阻塞组；（4）慢性阻塞性肺疾病所致气道重度阻塞组患者的中枢呼吸驱动（P0．1），最大通气时的中枢呼吸驱动（P0．1MAX），最大口腔吸气压（PI MAX），最大口腔呼气压（PE MAX），中枢呼吸驱动储备（P0．1／P0．1MAX），有效吸气阻抗（P0．1／Vt/Ti)以及4Hz振荡频率下呼吸阻力（Rfo4Hz),4Hz振荡频率下吸气末阻力（Rin4Hz),4Hz振荡频率下呼气末阻力（Rex4Hz)的水平：以及上述呼吸驱动指标与4Hz振荡频率下呼吸阻力诸指标之间的关系。方法；本研究共包括216例男性患者，其年龄在35－60岁之间，分为以下各组：（1）上呼吸道感染所致急性咳嗽组；（2）慢性阻塞性肺疾病所致气道轻度阻塞组；（3）慢性阻塞性肺疾病所致气道中度阻塞组；（4）慢性阻塞性肺疾病所致气道重度阻塞组。以上呼吸道感染所致急性咳嗽组为对照组，目的在于尽量排除至中枢呼吸驱动的影响。比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK－q检验，两因素之间的相关性分析采用直线相关分析。结果：PIMAX，PEMAX在各个组之间无显著性差异，P0.1,P0.1MAX,P0.1/P0.1MAX,P0.1/Vt/Ti以及呼吸阻力诸指标均发生了不同程度的改变；呼吸阻力诸指标与P0.1,P0.1/P0.1,MAX,P0.1/Vt/Ti明显相关。结论：慢性阻塞性肺疾病患者平时处于高中枢呼吸驱动，高有效吸气阻抗和低中枢呼吸驱动储备状态，遇感染，心衰等应激情况时将易于发生呼吸衰竭，而改善呼吸阻力将有助于缓解慢性阻塞性疾病患者的高中枢呼吸驱动，高有效吸气阻抗和低中枢呼吸驱动储备状态。     

Bach1/Nrf2竞争性调控与慢性阻塞性肺疾病

氧化应激是慢性阻塞性肺疾病（COPD）的主要发病机制之一。谷胱甘肽（GSH）是肺内主要的抗氧化剂，γ-谷氨酰半胱氨酸合酶（γ-GCS）是GSH合成的限速酶。细胞核内Bach1和Nrf2（NF-E2-related factor 2）的平衡能够上调或下调抗氧化酶的基因表达。Keap1、PERK（PKR-like ER kinase）和糖原合成酶激酶3B也可以通过对Nrf2的调控影响γ-GCS的表达。因此Bach1／Nrf2竞争性调控对慢性阻塞性肺疾病的发病和治疗有重要作用。