肝素抗涎腺腺样囊性癌细胞裸鼠肺血管粘附研究

目的　通过观察肝素对人涎腺腺样囊性癌肺高转移细胞株 (ACC -M )细胞在裸鼠肺、肝组织的粘附影响 ,证实其对腺样囊性癌肺高转移细胞肺粘附的抑制作用。方法　裸鼠腹腔注射肝素后 ,经尾静脉注入氚标胸腺嘧啶核苷 (3 HTdR)标记的ACC -M细胞 (3 H -ACC -M ) ;分别检测细胞注射后 2h、6h、18h肺、肝组织单位重量的每分钟同位素脉冲数 (CPM )。结果　单位重量肺组织每分钟放射性计数CPM值 :空白对照组 2h、6h、18h分别为 1875 .75± 11.5 3、164 4.5 0± 2 7.2 0和 14 66.5 0± 12 5 .95 ;2 0 0单位肝素组 2h、6h、18h分别为 912 .0 0± 118.5 5、918.0 0± 44 .0 6和 766.60± 77.66。同一时间肝素组肺组织CPM值明显低于对照组 ,有显著性差异 (P <0 .0 0 1)。单位重量肝组织CPM值在空白对照组和肝素组的相同时间点无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　肝素腹腔注射后可明显降低肺组织内ACC -M细胞对血管内皮细胞粘附数量 ,但对相同时间肝组织内ACC -M细胞粘附数量无显著影响 ,提示肝素具有抑制腺样囊性癌肺转移的作用     

P-选择素单抗抗唾液腺腺样囊性癌细胞裸鼠肺粘附的研究

目的观察P-选择素单克隆抗体(MonoantibodytoP-selectin,PS1)对腺样囊性癌肺高转移细胞肺粘附的抑制作用。方法裸鼠尾静脉注射P-选择素单抗后,经尾静脉注射氚标胸腺嘧啶核苷(3HTdR)标记的ACC-M细胞,分别检测细胞注射后2h、6h、18h的单位重量肺、肝组织每分钟核素脉冲数(CPM)。结果空白对照组单位重量肺组织在2h、6h、18h的CPM值分别是1875.75±11.53、1644.50±27.20和1466.50±125.95;P-选择素单抗组肺组织2h、6h、18h的CPM值分别是941.50±68.47、875.00±47.06和787.25±65.38。相同时间P-选择素单抗组肺组织CPM值明显低于对照组,两组间有显著性差异(P<0.001)。空白对照组单位重量肝组织的CPM值与P-选择素单抗组相比,2h、6h、18h各相同时间两组间无显著性差异(P>0.05)。结论P-选择素单抗静脉应用后,可减少肺组织内ACC-M细胞的粘附数量,但对相同时间肝组织内ACC-M细胞数量无显著影响。P-选择素单抗可能在抑制腺样囊性癌肺转移中发挥作用     

血管生成抑制剂TNP-470抑制腺样囊性癌转移的实验研究

目的观察血管生成抑制剂TNP-470对人涎腺腺样囊性癌肺转移的抑制作用.方法将腺样囊性癌ACC-M细胞接种于裸鼠尾静脉(1×106/鼠).将20只裸鼠随机分成对照组和治疗组,自第2天起分别给予溶剂(3%酒精)和TNP-470(40mg/kg),隔天给药1次,共用4周.接种后6周末处死动物,检测对照组和治疗组的肺转移率及含转移灶的肺重量,观察转移情况.结果对照组和治疗组肺转移率分别为90%和40%(P＜0.025);含转移灶的肺重量分别为0.2138g±0.0667g和0.1685g±0.0445g(P＜0.05).结论血管生成抑制剂TNP-470能明显抑制腺样囊性癌的肺转移.     

腺病毒介导HSV-TK/GCV与IL-2基因对人涎腺腺样囊性癌的抑制作用

目的探讨腺病毒介导的单纯疱疹病毒胸苷激酶（Herpes simplex virus thymidine kinase/ganciclovir,HSV-TK/GCV）与白细胞介素-2（interleukin-2,IL-2）基因联合应用对涎腺腺样囊性癌的抑制和杀伤作用。方法将0.2 ml细胞浓度为2×107/ml的涎腺腺样囊性癌高转移细胞株（salivary adenoid cystic carcinoma cell line withhigh tendency of lung metastasis,ACC-M）的细胞悬液接种于20只裸鼠皮下,建立涎腺腺样囊性癌裸鼠移植瘤模型。随机将20只荷瘤裸鼠分为A组：HSV-TK/GCV和IL-2联合基因治疗组（TK（IL-2组）;B组：HSV-TK/GCV组（TK组）;C组：空病毒组（EGFP组）;D组：ACC-M组;每组5只。分别于瘤体内注射TK（IL-2;TK;EGFP和无菌生理盐水。注射48小时后,对A、B、C组裸鼠每日腹腔注射GCV,D组每日腹腔注射生理盐水,连续10天。最后一次给药后第二天处死裸鼠,观察各组裸鼠的肿瘤体积和瘤重的变化,计算肿瘤生长抑制率;对移植瘤进行组织病理学观察;应用流式细胞仪检测移植瘤的细胞凋亡情况。结果在A组和B组中,ACC-M的生长均受到显著抑制。治疗后体积数减少,与ACC-M组比较差别有极显著性（P〈0.01）。A组和B组抑瘤率分别为91%和76%;光镜下观察A组和B组均出现了明显的细胞凋亡;流式细胞仪检测A组和B组有明显的凋亡峰出现,凋亡率分别为30.55±0.23和13.53±0.32;C组凋亡率为10.07±0.31,D组凋亡率为8.34±0.41%。除C、D组之间差别无明显性外,其余各组之间差别均有极显著性（P〈0.01）。A组和B组的细胞S期比例明显增加,G2/M期比例明显降低。结论 HSV-TK/GCV联合IL-2基因对ACC-M移植瘤有明显抑制作用,抑瘤效果优于单独应用HSV-TK/GCV系统。     

TIP30对ACC-M裸鼠移植瘤抑制作用

目的:观察肿瘤抑制基因TIP30对涎腺腺样囊性癌高转移细胞(ACC-M)致裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法:设计CMV启动子序列的特异引物及Taqman探针进行实时PCR,制备AdTIP30/ACC-M病毒液.BALB/c nu/nu鼠30只(4周龄,体重18～20 g),随机分3组,各10只,AdTIP30/ACC-M、ACC-M及AdLaeZ/ACC-M分别注射小鼠背部皮下,观察肿瘤生长情况.结果:实时PCR测定AdTIP30/ACC-M病毒滴度为3.01×1010/ml,AdTIP30/ACC-M组移植瘤出现时间要比ACC-M组及AdLacZ/ACC-M组推迟4 d,肿瘤生长缓慢(P＜0.01).结论:实时PCR测定重组腺病毒滴度快速、简便、滴度高.抑癌基因TIP30能够显著抑制涎腺腺样囊性癌高转移细胞在裸鼠体内生长.     

阿斯匹林抗ACC-M裸鼠肺转移的实验研究

目的 应用ACC-M裸鼠肺转移模型研究阿斯匹林对腺样囊性癌细胞转移的抑制作用。方法 裸鼠尾静脉注射肿瘤细胞前后各7天连续服用分别含1mg％、10mg％和50mg％阿斯匹林饮用水或消毒饮用水14天,接种肿瘤后6周处死动物,比较各实验组与对照组的裸鼠肺重量和肺转移灶面积比。结果 服用含1mg％和 50mg％阿斯匹林饮用水的实验组与对照组相比较,两项指标的差别均有显著性（P<0.05）。结论 阿斯匹林对腺样囊性癌细胞ACC-M裸鼠肺转移有抑制作用。     

Survivin在腺样囊性癌细胞ACC-2以及ACC-M中的表达

目的：探讨Survivin在腺样囊性癌（ACC）细胞系中的表达情况及其表达与ACC远处转移的相关性。方法：培养人涎腺腺样囊性癌（ACC-2）和肺转移腺样囊性癌（ACC-M）细胞,观察其形态学特征,采用MTr法检测细胞的生长活性,并采用SP法检测细胞中Survivin的表达。结果：ACC-2和ACC-M细胞均表现有明显的上皮样和腺样细胞的特征。ACC-M细胞的生长活性高于ACC-2细胞,且Survivin在ACC-M细胞中的表达也强于ACC-2细胞。结论：Survivin与涎腺ACC肺部转移的发生具有高度相关性。     

口腔组织病理学

正常口腔黏膜上皮细胞端粒酶活性的观察；人胎儿骨髓基质干细胞的分离、体外培养和鉴定；腹膜腔注射肝素对ACC-M细胞在裸鼠肺、肝组织分布的影响；人乳牙破骨细胞降钙素受体mRNA的表达；小鼠牙胚的鸡胚培养模型的建立；采用水平双相凝胶电泳法对福赛斯拟杆菌蛋白分离的初步研究；     

人涎腺腺样囊性癌神经侵袭动物模型的建立

目的　建立人涎腺腺样囊性癌神经侵袭的动物模型 ,为研究腺样囊性癌神经侵袭的发生、发展提供实验依据和条件。　方法　将人涎腺腺样囊性癌细胞肺高转移株ACC M细胞注射入裸鼠眶下区皮下 ,分别于注射后7d、11d、14d、2 1d、2 8d、动物自行死亡或 5 6d时用HE染色方法观察肿瘤生长和神经侵袭的情况 ,并测量眶下神经管内神经侵袭的长度。结果　 85 7%的荷瘤裸鼠发生眶下管内神经侵袭。 7d、11d、14d、2 1d、2 8d和自行死亡组神经侵袭长度分别为 0 0 9mm、(0 2 7± 0 0 2 )mm、(0 38± 0 0 5 )mm、(0 6 8± 0 18)mm、(1 0 7± 0 36 )mm和 (2 1± 0 77)mm。结论　该模型是研究腺样囊性癌神经侵袭的良好模型 ,11～ 2 1d作为观察时限为宜 ,尤以 14d最佳     

吴茱萸碱抑制涎腺腺样囊性癌细胞系ACC-M增殖的实验研究

目的:研究吴茱萸碱对涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖的影响。方法:用终浓度为0.01、0.1、1、10、100μg/ml的吴茱萸碱处理ACC-M 24、48、72 h后,应用MTT比色试验、倒置显微镜、Giemsa染色、Annexin-V-FITC和流式细胞仪检测和观察ACC-M的生长抑制率和凋亡情况。结果:吴茱萸碱(1μg/ml以上)对ACC-M细胞具有时间-浓度依赖性生长抑制作用,最大生长抑制率可达89%。吴茱萸碱可诱导ACC-M细胞凋亡,凋亡率随处理时间延长和药物浓度增加而上升,各组间有显著差异。吴茱萸碱同时可引起ACC-M细胞坏死。结论:吴茱萸碱可以诱导细胞凋亡和/或坏死,从而抑制涎腺腺样囊性癌ACC-M细胞增殖。     

TNP-470联合顺铂抗腺样囊性癌生长和肺转移的实验研究

目的　研究血管生成抑制剂TNP 470联合顺铂 (CDDP)对口腔腺样囊性癌生长及肺转移的抑制作用。方法　分别将建株的口腔腺样囊性癌肺转移细胞株 (ACC M)细胞悬液注射至裸鼠皮下和尾静脉 ,建立口腔腺样囊性癌皮下移植瘤及实验性肺转移模型。从移植后的第 3周开始 ,于裸鼠对侧皮下注射TNP 470 30mg/kg,隔日 1次 ,共7次。CDDP分别在第 3周和第 4周腹腔给药各 1次 ,剂量为 5mg/kg。停药后第 2d处死裸鼠。测量肿瘤大小 ,称重并计数肺转移结节数。以兔抗人Ⅷ因子相关抗原抗体免疫组化染色后 ,计数皮下瘤块血管密度。结果　与单用TNP 470相比 ,TNP 470联合CDDP对口腔腺样囊性癌生长和肺转移的抑制作用更强 ,但对皮下移植瘤的血管密度影响无明显差异。结论　TNP 470联合CDDP对口腔腺样囊性癌生长和肺转移有明显的抑制作用。     

nm23-h1抑制腺样囊性癌高转移细胞株肺转移的实验研究

目的:研究nm23-h1对腺样囊性癌细胞株(adnoid cystic carcinoma cell line-M,ACC-M)的肺转移是否具有抑制作用。方法:20只裸鼠,随机分为两组,实验组每只裸鼠经尾静脉注入5×106个用阳离子脂质体介导nm23-h1质粒体外转染所得阳性表达的ACC-M细胞,对照组注入等量的未转染ACC-M细胞,1周及4周时处死动物获取肺标本,常规组织学观察。结果:1周时实验组未见转移,而对照组有少量小转移灶;4周时实验组肺内仍未见转移灶,对照组可见大量灰白色转移结节。结论:nm23-h1对ACC-M的肺转移具有抑制作用。     

The biological behaviour of human adenoid cystic carcinoma cells transduced with interleukin-2-gene

Adenoid cystic carcinoma (ACC) of the salivary glands is a highly infiltrative malignant tumour with a tendency for lung metastasis. Gene therapy could be a potentially effective therapy for ACC and its metastasis. The aims of the study were: To transduce interleukin-2 (IL-2) gene into an ACC cell line with predisposition for lung metastasis (ACC-M); to compare the bioactivity of the gene-transduced cells and the parent cell line in vitro and in vivo. The IL-2 gene was transduced via a bicistronic retroviral vector into the ACC-M cells. The growth rate and DNA cell cycles of the parent ACC-M, the control viral vector AmGCEN, and the gene transduced AmIL-2 cell cultures were compared quantitatively and by flow cytometry, respectively. The tumourigenic ability of the three cell lines was verified by inoculation in athymic nude mice. The tumours developed were extracted and compared quantitatively and histologically. There was no difference in the growth rate and the DNA count between the ACC-M, AmGCEN, and AmIL-2 cell cultures. In the animal experiment, both the ACC-M and AmGCEN cells stimulated lung metastasis in all the mice, whereas there was no tumour found in the 1 x 10(6) AmIL-2 cells inoculation. On 3 x 10(6) AmIL-2 cells stimulation, three out of six mice developed tumours but the mass and volume of the tumours were smaller than the other two groups. Under light microscopy, the ACC-M tumours were mainly poorly differentiated with minimal cellular matrix, whereas the AmIL-2 tumours were well differentiated with ample matrix. The transduction of IL-2 gene can reduce the tumourigenicity of ACC-M cells and induces tumour cell differentiation in mice. The IL-2 gene can be a potential effective gene for the treatment of adenoid cystic carcinoma of salivary glands and its lung metastasis.     

人腺样囊性癌细胞系体外NT-3分泌水平的测定

目的研究体外培养的ACC细胞系中神经营养素-3（neurotrophin-3,NT-3）的分泌情况。方法应用酶联免疫吸附测定法检测NT-3在ACC细胞系体外的分泌水平。收集ACC-M、ACC-2、M3SP4、L929 4个细胞系无血清培养的上清液,用ELISA法检测上清液中NT-3的含量。将各组细胞培养上清液中NT-3的分泌水平采用SNK-q检验进行实验组之间、实验组与对照组之间的多重比较。结果阴性对照组未检测到NT-3的表达;ACC-M、ACC-2细胞培养上清液中NT-3的分泌水平与阴性对照组比较有显著统计学意义（P〈0.01）;M3SP4,及L929细胞培养上清液中NT-3的分泌水平与阴性对照组比较无显著统计学意义（P〉0.05）。ACC的两个细胞系ACC-M、ACC-2细胞分别与其他细胞系（人粘液表皮样癌高转移M3SP4细胞系、小鼠肺纤维瘤L929细胞系）NT-3的分泌水平两两比较均存在显著性差异（P〈0.01）。ACC-M细胞培养上清液中NT-3的含量与ACC-2细胞比较无显著性差异（P〉0.05）。结论体外培养的ACC细胞能分泌一定浓度的NT-3,NT-3可能在ACC的嗜神经侵袭中发挥重要作用。     

丙泊酚与氢吗啡酮联合用于口腔颌面外科术后留置气管导管患者的临床研究

目的:探讨丙泊酚与氢吗啡酮联合用于口腔颌面外科术后留置气管导管患者镇静及镇痛的作用。方法:将口腔颌面外科术后留置气管导管患者40例患者按照随机原则分为丙泊酚-氢吗啡酮组(P-H组,20例)、丙泊酚-右美托咪定(P-D组,20例)。P-H组以异丙酚0.5～1mg/Kg·h^-1持续泵注复合氢吗啡酮4～8μg/kg·h^-1持续泵注;P-D组以异丙酚0.5～1mg/Kg·h^-1持续泵注复合右美托咪定0.2～0.6μg/kg·h^-1持续泵注。比较2组患者的Ramsay评分、心率、血压、呼吸等变化。采用SPSS16.0软件包对数据进行统计学处理。结果:在拔管前2组的动脉血pH值、氧分压、二氧化碳分压无显著差异;2组间各时点SPO2、MAP、RR、RAMSAY比较无显著差异,2组间HR在T2、T5、T6时点比较有显著差异(P<0.05)。结论:静脉泵注丙泊酚-氢吗啡酮可以取得静脉泵注丙泊酚-右美托咪定类似的临床疗效,且无减慢心率的作用。     

体温保护对口腔癌患者术后加速康复的影响

目的:探讨围术期体温保护对口腔癌患者术后加速康复的影响。方法:选择口腔癌根治术加同期游离皮瓣修复术患者98例为研究对象,分为保温组和对照组,每组各49例。保温组给予电阻式加温垫和温输液进行体温保护。记录2组患者各时间点核心体温;记录手术室温度,麻醉时间,麻醉用药,术中出血量、输血量、输液量、冲洗液量、尿量,手术时间,复苏时间,术后寒战发生率,术后感染率,非计划二次手术发生率及住院时间。结果:与麻醉前比较,2组患者麻醉后2、4、6 h,转入麻醉后监测治疗室(postanesthesia care unit,PACU)和转出PACU时的核心温度明显降低(P<0.05);保温组麻醉后2、4、6 h,转入PACU和转出PACU时的核心温度明显高于对照组(P<0.05)。与对照组比较,保温组术中出血量、输血量小(P<0.05),术后寒战发生率低(P<0.05),复苏时间短(P<0.05),术后总感染发生率低(P<0.05),住院时间明显缩短(P<0.05)。2组手术室温度,麻醉时间,麻醉用药,手术时间,术中输液量、冲洗液量、尿量及非计划二次手术发生率差异无统计学意义。结论:体温保护能够有效预防口腔癌患者围术期低体温的发生,降低术后感染率,缩短住院时间,从而促进患者加速康复。     

66例卡-梅现象患儿术前单次大剂量快速输注血小板时机探讨

目的 :探讨卡-梅现象(Kasabach-Merritt syndrome, KMP)患儿术前单次大剂量快速输注血小板的时机。方法 :回顾分析河南省血管瘤和脉管畸形诊疗中心2011年6月—2019年12月收治的66例KMP患儿,探讨术前不同时段单次大剂量快速输注血小板对术前1 h血小板的影响。其中,术前12+～24 h输注血小板患儿30例,术前6～12 h输注血小板患儿36例,均采用大剂量快速血小板输注,1/2～2/3治疗量,2～3 h之内快速输完。观察2组术前不同时段输注血小板对术前1 h血小板的纠正效果。采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析。结果:6～12 h组术前1 h血小板计数(platelet count,PLTC)均在正常范围,甚至高于正常范围;12+～24 h组有4例术前1 h PLTC低于正常范围;比较2组术前1 h PLTC及凝血4项,差异有统计学意义(P<0.05);术后2组PLTC差异无统计学意义(P>0.05)。在整个血小板输注过程中,无并发症发生,输血前、后心率差异无统计学差异。结论:术前6～12 h是KMP患儿术前大剂量快速血小板输注...