非小细胞肺癌患者ALK,EGFR及KRAS基因的检测及临床病理特征

目的:研究汉族非小细胞肺癌患者中间变性淋巴瘤激酶(anaplastic lymphoma kinase,ALK)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)及Kirsten鼠肉瘤基因(Kirstenrat sarcoma,KRAS)突变的阳性率及其与临床病理特征的关系.方法:采用免疫组织化学(immunohistochemistry,IHC)的方法检测ALK融合基因异常表达,采用PCR检测EGFR基因和KRAS基因突变,采用x2检验及Fisher精确概率法进行数据分析.结果:共2 267例进行了ALK融合基因检测,其中1 655例同时进行了EGFR突变检测,951例同时进行了KRAS检测.ALK融合基因、EGFR基因及KRAS基因突变阳性率分别为7.28％(165/2 267)、48.58％(804/1 655)、11.40％(108/947).ALK基因突变多见于年轻、腺癌患者;EGFR基因突变多见于女性、腺癌患者;KRAS基因突变多见于老年、男性、腺癌患者.1 655例同时进行了ALK与EGFR检测的病例中,共6例存在双基因突变(0.36％);947例同时进行了ALK与KRAS检测,共4例存在双基因突变(0.42％);943例同时进行了EGFR与KRAS突变检测,未发现双突变病例.结论:非小细胞肺癌患者ALK,EGFR和KRAS基因的突变与患者的年龄、性别、组织学类型均存在相应的联系,个别病例可以出现ALK融合基因与EGFR或KRAS突变共存.     

Treatment and prognosis after progression in long-term responders to EGFR-tyrosine kinase inhibitor in advanced non-small cell lung cancer

Introduction

The aim of this study was to investigate the treatment and prognosis of advanced non-small cell lung cancer (NSCLC) patients after failure of long-term treatment with epidermal growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitor (EGFR-TKI).

Material and methods

We retrospectively analyzed all NSCLC patients with EGFR-TKI (gefitinib or erlotinib) treatment at our institution between 2011 and 2013 who progressed after at least stable disease on erlotinib or gefitinib for more than 6 months. Survival curves were plotted using the Kaplan-Meier method. The Cox proportional hazard model was used for multivariate analysis.

Results

In total, 521 patients were administered EGFR-TKI. Of these, 298 patients received EGFR-TKI with progression-free survival less than 6 months (group A), and the other 223 patients more than 6 months (group B). There was a significant difference in overall survival (OS) between group A and group B (7.2 months vs. 5.0 months, p < 0.0001). The median OS for group B patients was 5.0 months. Among the 223 patients in group B, 38 patients received chemotherapy with continued EGFR-TKI after failure of prior gefitinib or erlotinib treatment, 92 with chemotherapy alone and 93 with best supportive care. Patients who continued gefitinib or erlotinib had a significantly longer OS (median: 7.5 months), followed by chemotherapy (5.5 months) and best supportive care (4.0 months) (p < 0.001).

Conclusions

The prognosis of advanced NSCLC patients after failure of long-term treatment with EGFR-TKI was poor. Chemotherapy with continued EGFR-TKI beyond progression of long-term responders was feasible and led to prolonged OS in advanced NSCLC patients.     

非小细胞肺癌组织SOX4基因突变分析

目的研究不同病理类型和病理分期的非小细胞肺癌组织中SOX4基因序列突变情况,探讨SOX4基因在肺癌发生过程中的作用。方法PCR扩增肺癌及癌旁组织SOX4基因HMG-box,并对经单链构象多态性分析有差异的20例病例进行测序。DNA及氨基酸序列比较利用Clustal和DNAStar软件。结果90例肺癌组织标本中,有18例发生碱基突变。其中,鳞癌有7例,腺癌5例,腺鳞癌混合型6例,对照的癌旁组织中未检测出突变。临床Ⅱ、Ⅲ期的突变率明显高于Ⅰ期。结论SOX4基因突变与肺癌肿瘤的病理类型无关,但与其病理分期有很大关系,提示SOX4基因突变可能与肺癌的发展和转移有某种关系,为探索SOX基因突变与人类肿瘤发生之间的关系提供了分子依据。     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR和KARS基因突变的分子病理检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌患者肿瘤组织中EGFR和KRAS基因各亚型突变情况。方法：应用直接测序方法检测非小细胞肺癌石蜡组织中1273例EGFR基因和1062例KRAS基因突变情况。结果：非小细胞肺癌肿瘤组织中EGFR基因总突变率为36.68%(467/1273),外显子18、19、20和21的突变率分别为1.02%(13/1273)、18.93%(241/1273)、2.59%(33/1273)和15.95%(203/1273);EGFR基因各外显子之间双重突变共17例(1.34%),其中18外显子与20外显子双重突变3例(0.24%),19外显子与20外显子双重突变7例(0.55%),19外显子与21外显子双重突变4例(0.31%)和20外显子与21外显子双重突变3例(0.24%);EGFR基因各外显子内双重突变共2例(2.18%),均为21外显子双重突变。KRAS基因总突变率为3.01%(32/1062),外显子2的密码子5、12、13和25的突变率分别为0.09%(1/1062)、2.64%(28/1062)、0.18%(2/1062)和0.09%(1/1062),外显子3密码子61的突变率为0.09%(1/1062)。结论：非小细胞肺癌患者中EGFR基因存在较高的突变率,尤其为19和21外显子突变,其基因突变亚型分类能指导EGFR-TKI的肿瘤靶向治疗,KRAS基因突变率虽低但不容忽视,其基因突变预示着EGFR-TKI原发耐药。     

血清CEA水平在EGFR-TKI治疗非小细胞肺癌的应用价值

目的：探讨血清癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)在表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗非小细胞肺癌的价值。方法：回顾性收集确诊非小细胞肺癌并使用EGFR-TKI治疗患者的治疗前后CEA水平、一般资料、病理亚型、分期、分子标记物和CEA对治疗决策的影响,并定期影像学评价,随访至进展生存期(progression-free survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)。通过Kaplan-Meier绘制生存曲线,log-rank检验比较不同CEA组间的生存差异, Cox回归分析预后因子。结果：本研究纳入2002年6月至2011年8月广东省肺癌研究所使用EGFR-TKI的非小细胞肺癌患者209例。分为3组：L组(CEA≤5,n=54),M组(520,n=103)。L组、M组和H组的中位PFS分别为19、17和13月(95% CI,14.61~19.39;P=0.018);中位OS分别为32、31和24月(95% CI,25.14~30.86;P=0.010)。治疗前低CEA的患者有显著延长的PFS和OS。CEA升高同时伴有影像学进展的45例,CEA升高无影像学进展证据的27例,两组的中位PFS分别为13月和14月(95% CI,10.51~15.49,P=0.195);中位OS分别为23月和28月(95% CI,19.81~30.19,P=0.156)。CEA升高无影像学进展的27例患者均随访至进展才改变治疗策略,中位无进展时间为24.3月(3~111月)。结论：治疗前血清CEA水平和EGFR-TKI治疗晚期非小细胞肺癌的预后呈负相关;治疗过程中CEA升高时,需结合影像学和症状来决定是否改变治疗策略。     

阿帕替尼治疗晚期非小细胞肺癌的疗效

目的:探讨阿帕替尼在晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的治疗效果.方法:选取2015年1月至2016年3月于各成员单位收治的72例晚期NSCLC患者纳入研究对象,给予患者口服阿帕替尼,500 mg/次,1次/d,治疗至肿瘤进展、患者死亡或者出现药物毒性不耐受为止.随访并观察患者客观缓解率(objective response rate,ORR)、疾病控制率(disease control rate,DCR)、无进展生存期(progression-free survival,PFS)和毒副反应发生情况.采用单因素分析比较不同临床特征与PFS的关系.结果:患者中位PFS为4.8个月(95%CI 4.7~5.0).单因素分析显示不同性别、年龄、活动状态(performance status,PS)评分、组织学类型、驱动基因突变情况、有无转移灶、转移灶数量、转移部位、治疗史、治疗线数和病程的患者PFS差异均无统计学意义(P>0.05).患者ORR为13.89%,DCR为83.33%.疗效瀑布图显示有54例患者病灶缩小,以肿瘤病灶直径减少30%作为治疗有效标准,则有10例患者表现为部分缓解(partial response,PR).有60例(83.33%)患者发生各类不良事件,其中22例(30.55%)≥III级.结论:阿帕替尼治疗晚期NSCLC疗效显著,安全性高,可在临床进行更加深入的研究和应用.     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织中驱动基因的分子病理检测分析

目的：探讨非小细胞肺癌患者肿瘤组织中驱动基因EGFR、KRAS、ALK、ROS1、c-Met和Her-2基因各亚型改变情况。方法：应用Taqman-ARMS方法检测273例非小细胞肺癌石蜡组织中EGFR基因、KRAS基因、ALK基因、ROS1基因、c-Met基因和Her-2基因改变情况。结果：非小细胞肺癌肿瘤组织中EGFR基因总突变率为36.26%(99/273),外显子18、19、20和21的突变率分别为0(0/273)、16.12%(44/273)、4.49%(15/273)和17.95%(49/273);EGFR基因各外显子之间双重突变共12例(4.40%);KRAS基因总突变率为4.76%(13/273);ALK融合基因总阳性率为9.16%(25/273);ROS1融合基因总阳性率为2.20%(6/273);c-Met基因总扩增率为3.66%(10/273);Her-2基因总突变率为0.73%(2/273);各驱动基因双突变共存型11例(4.03%),其中EGFR基因突变与ALK融合基因阳性共存型2例(0.73%),EGFR基因突变与KRAS基因突变共存型3例(1.10%),EGFR基因突变与c-Met基因扩增共存型6例(2.20%)。结论：非小细胞肺癌患者中EGFR基因19和21外显子突变和ALK融合基因均存在较高的突变率,基因突变亚型分类能指导精准医学的个体化靶向治疗,KRAS、ROS1、c-Met、Her-2基因改变以及驱动基因双突变共存型基因突变率虽低但不容忽视。     

中国人非小细胞肺癌EGFR和K-RAS基因突变情况的研究

目的研究中国人非小细胞肺癌表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因和K-RAS基因突变情况。方法通过PCR扩增和基因测序的方法检测了101例中国人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLCs)EGFR第18、19和21外显子及K-RAS密码子12、13的突变情况,并观察分析了其突变与肺癌临床特征及吉非替尼(gefitinib,商品名:易瑞沙/Iressa)药物治疗肺癌的疗效间的关系。结果共检测到26例EGFR突变(25.7%),3例K-RAS突变(2.9%),并发现腺癌患者、非吸烟患者和女性患者EGFR突变率较高(分别为44.2%、65.7%和48.3%)。10例服用吉非替尼有效的患者9例伴有EGFR突变。结论中国人肺癌的EGFR突变率高于西方人,吉非替尼疗效与EGFR突变有关。     

Molecular pathology of non-small cell lung cancer

Our increasing understanding of the molecular pathogenesis of non-small cell lung cancer (NSCLC), particularly adenocarcinomas, has opened the door to ‘personalised medicine’ and the advent of new therapeutic strategies. Over the last few years new drugs, or classes of drugs, have been licensed and entered clinical practice for use in advanced NSCLC. The activity of these drugs is dependent on the presence of specific molecular or protein changes in cancer cells which are usually identified using ‘companion diagnostic tests’ specifically designed for this purpose. Pathologists and Pathology Departments have had to forge new links with Clinical Scientists in order to facilitate these additional investigations on the, often limited, tissue obtained for diagnosis. This collaboration plays a critical role in providing the link that allows integration of the traditional morphological diagnosis with the results of these new ‘companion diagnostic’ tests to guide patient management.     

EGFR Polymorphism as a Predictor of Clinical Outcome in Advanced Lung Cancer Patients Treated with EGFR-TKI

Purpose

Mutations in the epidermal growth factor receptor (EGFR) have been confirmed as predictors of the efficacy of treatment with EGFR-tyrosine kinase inhibitors (TKIs). We investigated whether polymorphisms of the EGFR gene were associated with clinical outcomes in non-small cell lung cancer (NSCLC) patients treated with EGFR-TKI.

Materials and Methods

A polymorphic dinucleotide repeat in intron 1 [CA simple sequence repeat in intron 1(CA-SSR1)] in intron 1 and single nucleotide polymorphisms (SNP-216) in the promoter region of the EGFR gene were evaluated in 71 NSCLC patients by restriction fragment length polymorphism and DNA sequencing. The relationship between genetic polymorphisms and clinical outcomes of treatment with EGFR-TKIs was evaluated.

Results

SNP-216G/T polymorphisms were associated with the efficacy of EGFR-TKI. The response rate for the SNP-216G/T tended to be higher than that for G/G (62.5% vs. 27.4%, p=0.057). The SNP-216G/T genotype was also associated with longer progression-free survival compared with the GG genotype (16.7 months vs. 5.1 months, p=0.005). However, the length of CA-SSR1 was not associated with the efficacy of EGFR-TKI.

Conclusion

SNP-216G/T polymorphism was a potential predictor of clinical outcomes in NSCLC patients treated with EGFR-TKI.     

非小细胞肺癌组织表皮生长因子受体基因第19外显子突变研究

目的 研究非小细胞肺癌的表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因第19外显子突变情况.方法 提取72例手术切除肺癌基冈组DNA,用巢式PCR扩增EGFR基因第19外显子并测序,分析EGFR基因第19外显子突变及其与I临床特征的相关性.结果 检测到13例肿瘤组织存在EGFR基因第19外显子多核苷酸的缺失突变,共有4种突变类型,突变率为18.1%,所检测的突变均为杂合型;EGFR基因第19外显子突变与肺腺癌、女性患者与不吸烟者相关.结论 EGFR基因第19外显子存在多核苷酸的框架缺失突变,以女性、腺癌和不吸烟患者为主.     

非小细胞肺癌中RET融合基因的研究进展

存在于1%~2%的非小细胞肺癌患者中的RET融合基因具有鲜明的临床病理学特征,且RET抑制剂对其治疗有效,提示RET融合基因已成为该类患者个体化分子靶向治疗的新靶点。本文将对RET融合基因的特点及其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者中的表达和治疗的研究进展进行阐述。     

Brk在非小细胞肺癌中的表达及与Ki67表达的关系

目的探讨乳腺肿瘤激酶(breast tumorkinase,Brk)在非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)的表达及与临床病理因素,Ki67表达之间的关系。方法采用免疫组织化学S-P法检测105例NSCLC及相应癌旁正常肺组织中Brk和Ki67的表达,采用Western Blot方法检测30例新鲜肺癌组织及其癌旁正常肺组织中Brk的表达情况。结果 Western Blot结果显示NSCLC中Brk蛋白表达水平显著高于癌旁正常肺组织(P<0.01)。免疫组织化学结果发现Brk在NSCLN的细胞浆阳性率为51.4%(54/105),明显高于其在癌旁正常肺组织的细胞浆阳性率18.1%(19/105,P=0.003)。Brk在NSCLC细胞浆的阳性表达与肿瘤的大小(P=0.042),淋巴结转移(P=0.012),TNM分期(P=0.042)正相关;Ki67的表达与肿瘤的大小正相关(P=0.033);Brk在细胞浆中的表达与Ki67表达呈正相关(r=0.217,P=0.026)。结论 Brk在NSCLC的细胞表达上调,与肿瘤大小,淋巴结转移,TNM分期正相关;Ki67表达与肿瘤的大小正相关;Brk与Ki67的协同表达可能是促进NSCLC进展的重要因素。     

EGFR mutation testing on cytological and histological samples in non-small cell lung cancer: a Polish,single institution study and systematic review of European incidence

The targeted treatment of advanced non-small-cell lung cancer (NSCLC) depends on confirmation of activating somatic EGFR mutation. The aim of the study was to evaluate the incidence of EGFR mutations in NSCLC detected in cytological and histological material and present literature review on European EGFR mutation incidence. 273 patients with confirmed NSCLC were entered into the study: 189 histological, paraffin-embedded materials, 12 fresh and 72 fixed cytological specimens. DNA was extracted from both types of material and the EGFR mutation in exons 18-21 was analyzed by direct sequencing. In addition the EGFR gene copy number in cases with sufficient histological material (110 patients) was evaluated by fluorescent in situ hybridization (FISH) technique. The percentage of EGFR somatic mutations was 10.62%. FISH positive results (amplification or high polysomy of EGFR gene) were identified in 33 patients (30.0%). The strongest clinicopathological correlation with the EGFR mutation was found for histological type (adenocarcinoma; p < 0.01), gender (females; p < 0.01) and FISH positive result (p < 0.05). This is the first, single institution study that estimates the EGFR mutation incidence in the Polish population. Cytological material recovered from fixed preparations and stained with hematoxylin and eosin showed DNA quality comparable to fresh tumor cells and histological samples.     

贝伐单抗联合化学药物治疗耐药晚期非小细胞肺癌

目的：探讨贝伐单抗联合化学药物治疗耐药晚期非小细胞肺癌（non—smallcelllung ca11cer,NSCLC）的疗效及安全性。方法：对2011年1月至2012年9月收治的9例耐药晚期NSCLC患者给予贝伐单抗联合化疗治疗,其中多西他赛联合贝伐单抗3例、培美曲塞二钠联合贝伐单抗5例、紫杉醇联合贝伐单抗1例。每例患者均完成2个周期以上治疗,观察其近期疗效及安全性。结果：9例患者中,3例部分缓解。无进展生存期2～12个月,总生存期4～16个月。主要不良反应有骨髓抑制、下肢静脉血栓、充血性心力衰竭、血压升高、消化道反应以及脱发。结论：贝伐单抗联合化疗治疗耐药晚期NSCLC取得较好疗效,毒性可以耐受。     

埃克替尼治疗37例晚期非小细胞肺癌疗效分析

目的：探讨埃克替尼治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的疗效及毒副作用。方法：回顾性分析未行表皮生长因子酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗的晚期NSCLC患者37例,给予盐酸埃克替尼125 mg,3次/d,口服治疗,直到病变进展或不能耐受。随访12个月,评估疗效并观察药物毒副反应。结果：本组37例患者均可评价疗效,客观缓解率(objective response rate,ORR)为56.7%(21/37),疾病控制率(disease control rate,DCR)为84.6%(35/37),中位无进展生存期(median progression free survival,mPFS)为6个月(95%CI：5.27~6.74)。不良反应主要为皮疹和腹泻,多为Ⅰ、Ⅱ度,均可耐受。结论：盐酸埃克替尼治疗晚期肺腺癌安全、有效,不良反应可耐受。     

荧光原位杂交技术检测非小细胞肺癌EGFR基因扩增

目的探讨荧光原位杂交(FISH)技术检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)表皮生长因子受体(epider-mal growth factor receptor,EGFR)基因扩增的临床应用价值。方法采用FISH技术检测57例人NSCLC石蜡组织标本中EG-FR基因扩增水平。对于EGFR基因扩增阳性的患者采用酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)药物进行治疗,其余患者采用传统化疗进行治疗。结果 57例NSCLC患者中有18例EGFR基因扩增阳性(31.58%),其中12例为高多体性扩增(66.67%),5例为成簇扩增(27.78%),以肺腺癌为主(72.22%)。TKIs靶向药物治疗有效率(RR)、中位生存时间(MST)和1年生存率分别为61.11%1、3.5个月和55.56%,对照组分别为35.89%、7.6个月和33.33%,差异均有显著性(P<0.05),前者的疾病控制率(DCR)高于后者,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论使用FISH技术检测NSCLC患者EG-FR基因扩增水平可以为临床采用TKIs药物治疗提...     

埃克替尼对非小细胞肺癌EGFR 18外显子突变的临床疗效

目的:探讨埃克替尼对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)EGFR 18外显子G719X/E709X/G724S的临床疗效.方法:回顾性分析24例埃克替尼治疗EGFR 18外显子少见突变的NSCLC患者,服用至病情进展或出现不可耐受的毒副作用,比较疗效.结果:24例G719X/E709X/G724S突变患者中G719X突变19例,中位无进展生存时间2.8个月,E709X突变3例,中位无进展生存时间3.1个月,G724S突变2例,中位无进展生存时间3.5个月.G724S突变患者生存时间稍长.复合突变与单纯突变相比,复合突变中位无进展生存时间更长(G719X突变3.3个月Vs.2.6个月,P=0.029;E709X突变7.2个月vs.2.7个月,P=0.225).结论:埃克替尼在EGFR基因18外显子少见突变的疗效上比传统敏感突变未见明显优势,但复合突变比单纯突变临床获益更多.     

埃克替尼对非小细胞肺癌EGFR 20外显子突变的临床疗效分析

目的:探讨埃克替尼对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)EGFR 20外显子S768I/20-ins/T790M/V769M突变的临床疗效.方法:回顾性分析58例埃克替尼治疗EGFR 20外显子少见突变的NSCLC,服用至病情进展或出现不可耐受的毒副反应,并观察疗效.结果:58例S768I/20-ins/T790M/V769M突变患者中S768I突变20例,中位生存时间3.2个月,20-ins突变18例,中位生存时间1.6个月,T790M突变21例,中位生存时间1.6个月,V769M突变1例,生存时间3.2个月.S768I突变和V769M突变患者生存时间稍长.单纯突变与复合突变相比,复合突变中位生存时间更长(S768I突变2.2个月vs.3.3个月,P=0.174;T790M突变2.45个月vs.2.9个月,P=0.845).结论:埃克替尼在EGFR基因20外显子少见突变的疗效上比传统敏感突变未见明显优势,但复合突变比单纯突变临床获益更多.     

ROS1融合基因在非小细胞肺癌中的研究进展

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的分子靶向治疗是目前的研究热点,继EGFR、ALK基因等靶点之后不断有新的肿瘤标志物被发现。ROS1基因重排作为一种新发现的NSCLC亚型,其发生率约占NSCLC的1%~2%,优势人群通常为年轻、不吸烟的肺腺癌患者,这些临床特征与ALK重排的NSCLC患者类似。本文将NSCLC中发现的ROS1融合基因的研究进展及其在NSCLC中的临床、功能和结构特征进行阐述。