灯盏花素对缺血再灌注小鼠脑细胞凋亡的保护作用

 目的探讨灯盏花素对脑缺血再灌注诱导细胞凋亡损伤的保护机制。方法小鼠采用双侧颈总动脉结扎法建立重复全脑缺血再灌注模型。术后24或48h,制备石蜡切片(HE染色)检测脑组织海马CA1区锥体细胞形态学变化;用紫外分光光度计检测脑组织一氧化氮合成酶(NOS)活性;用琼脂糖凝胶电泳技术检测DNA损伤情况,同时用RT-PCR技术检测缺血再灌注过程中小鼠海马CA1区凋亡蛋白抑制剂XIAP(X-chromosome linked inhibitor of apoptosis protein)mRNA的表达。结果全脑重复缺血再灌注可以使海马CA1区幸存的锥体细胞数量减少(P<0.01),提高NOS活性,并增加DNA片段化程度,同时伴随着XIAP mRNA表达显著下调(P<0.01)。5,20和80mg·kg^-1灯盏花素能剂量依赖性减少缺血小鼠海马CA1区神经细胞的死亡(P<0.05,P<0.01),降低NOS(P<0.01)活性,并抑制DNA片段化的产生以及XIAP mRNA表达的下调(P<0.05,P<0.01)。结论灯盏花素可通过抑制神经细胞凋亡而减轻缺血再灌注引起的脑损伤。     

灯盏花素对离体家兔心脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的观察灯盏花素对缺血再灌注离体兔心的保护作用.方法采用Langendorff离体心脏灌注,建立离体家兔心肌缺血再灌注模型,观察灯盏花素对冠脉流量、流出液中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量和心脏组织病理学的影响.结果灯盏花素(10,25 mg/L)可明显增加缺血再灌后冠脉流量,减少心肌细胞内CK、LDH的漏出,对抗心肌组织病理学改变.结论灯盏花素对离体家兔缺血再灌注损伤的心肌具有保护作用.     

灯盏花素对沙土鼠脑缺血损伤的保护作用

本研究通过夹闭沙土鼠双侧颈总动脉２０ｍｉｎ后再灌流１天或者７天造成脑缺血再灌流损伤模型观察烧盏花素对沙土鼠脑缺血再灌损伤的保护作用。结果表明灯盏花素能降低缺血后脑组织钙含量,减少海马ＣＡＩ区神经元的死亡数量,增加神经元的密度。结果揭示灯盏花素对沙土鼠脑缺血再灌操作损伤具有保护作用。     

灯盏花素对家兔心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨灯盏花素对家兔心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的保护作用.方法 将19只家兔随机分为假手术组(6只)、模型组(7只)、治疗组(6只).以穿线结扎左冠状动脉前降支制备大鼠心肌缺血/灌注模型,治疗组于结扎前5min于耳缘静脉注射灯盏花素,观察各组心肌超微结构,右室血清乳酸(LA)、游离脂肪酸(NEFA)和心肌组织中LA、NEFA、三磷酸腺昔(ATP)水平的变化.结果 与假手术组比较、模型组血清及心肌组织中LA、NEFA水平明显升高(P＜0.05或P＜0.01),心肌组织中ATP含量显著降低(P＜ 0.01),心肌超微结构损害明显;与模型组比较,治疗组血清及心肌组织中LA、NEFA水平明显降低(P＜0.05或P＜ 0.01),心肌组织中ATP含量显著增高(P＜0.01),心肌超微结构损害减轻.结论 灯盏花素可通过改善心肌能量代谢障碍和保护线粒体结构对MIRI起到保护作用.     

灯盏花素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的探讨灯盏花素对大鼠肾脏缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响。方法 48只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、缺血再灌注组、硝苯地平组、灯盏花素组。肾脏缺血60min再灌注24h,检测大鼠血清尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)水平,TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况,免疫组化方法检测肾组织Bax和Bcl-2蛋白表达。结果与假手术组比较,缺血再灌注组大鼠血清BUN和Cr浓度增高(P0.05),肾细胞凋亡指数升高,Bax蛋白表达明显上调(P0.05),Bcl-2蛋白表达和Bcl-2/Bax比值明显下降(P0.05)。与缺血再灌注组比较,灯盏花素组血清BUN和Cr水平降低(P0.05),肾细胞凋亡指数降低,Bax蛋白表达下调,Bcl-2蛋白表达上调,Bcl-2/Bax升高(P0.05)。结论灯盏花素可以抑制大鼠肾脏缺血再灌注细胞凋亡,其机制可能与改变Bax和Bcl-2蛋白的表达有关。     

灯盏花素对缺血再灌注鼠脑损伤的脑保护作用研究

目的：探讨灯盏花素对鼠脑梗塞面积、神经功能缺失征象及鼠脑缺血边缘区神经细胞凋亡的影响。方法：采用TTC染色、临床神经功能评分、流式细胞分析和原位末端标记等方法，分别对缺血、缺血再灌注及灯盏花素治疗组鼠脑梗塞面积、神经功能缺失征象、鼠脑缺血边缘区神经细胞的凋亡进行观察和比较。结果：24只大鼠缺血／再灌后TTC染色可见右侧顶叶皮质出现恒定苍白梗塞灶，灯盏花素治疗组于相同时间点脑梗塞面积较缺血／再灌组明显减小；缺血／再灌组大鼠均有明显的神经功能缺失征象，而药物治疗组12只大鼠中只有3只出现轻度的神经功能缺损。假手术组仅有极少量神经细胞凋亡，缺血90min／再灌12h、24h组缺血边缘区神经细胞凋亡明显增多，灯盏花素治疗组于相同时限内细胞凋亡较缺血／再灌组显著关少（P＜0.01）。结论：蛋白激酶C抑制剂灯盏花素能明显减小鼠脑缺血后脑梗塞面积，减轻脑缺血后神经功能缺损，显著减少缺血边缘区神经细胞凋亡数量，减缓缺血区神经元损害，具有显著的脑保护作用。     

灯盏花素对缺血再灌注大鼠心肌超微结构及细胞凋亡的保护作用

摘要 目的：探讨灯盏花素(breviscapine)对缺血再灌注大鼠心肌的保护作用及其机制。方法：40只SD大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注组（IR组）, 灯盏花素组。灯盏花素组大鼠于术前1周分别腹腔注射不同剂量的灯盏花素（25、50 mg.kg-1.d-1）,另2组给等量生理盐水。制备心肌缺血再灌注模型。采用Annexinv-PI双染,流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况;电镜观察各组大鼠心肌超微结构的变化。结果：灯盏花素可明显降低缺血再灌注大鼠心肌细胞的凋亡率（P＜0.05,P＜0.01）,且较IR组心肌细胞超微结构损伤程度减轻。结论：灯盏花素对缺血再灌注心肌细胞具有保护作用,其机制可能是通过抑制心肌细胞凋亡来实现的。     

灯盏花素对自然衰老小鼠的脑保护作用

目的 观察灯盏花素对自然衰老小鼠学习记忆能力、脑组织生化指标及脑细胞形态的影响,探讨灯盏花素对老龄小鼠的脑保护作用.方法 选用雄性自然衰老KM小鼠,用跳台仪测试学习记忆能力;用生化法测定SOD、MDA和AchE;脑组织切片,观察海马神经元损伤状况.结果 灯盏花素能明显降低小鼠错误次数,延长错误潜伏期;显著提高脑组织SOD活性,降低MDA含量;明显降低脑组织AchE活性;减少海马CA1区细胞的损伤.结论 灯盏花素能改善老龄小鼠的学习记忆功能,对自然衰老小鼠具有脑保护作用,其机制可能与提高SOD活性、降低脑组织脂质过氧化物的含量、抑制AchE活性有关、保护海马CA1区神经元有关.     

灯盏花素对缺血再灌注大鼠脑组织ATPase活性的保护作用

采用大鼠缺血再灌注模型，观察灯盏花素对脑组织ＡＴＰａｓｅ活性改变的影响。结果表明，灯盏花素能降低脑组织含水量，抑制脑组织Ｎａ＾＋－Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ和Ｃａ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ活性的降低。提示该药可通过保护ＡＴＰａｓｅ活性对缺血再灌注脑组织产生保护作用。     

灯盏花素对大鼠全脑缺血再灌注后海马神经元L型钙通道的影响

目的观察灯盏花素对大鼠全脑缺血再灌注后海马神经元L型钙通道平均开放概率和开放时间的影响。方法制作全脑缺血大鼠模型,再灌注1．5 h、3．0 h、4．5 h和6．0 h,急性分离海马CA1区神经元,采用膜片钳技术细胞贴附式方法记录神经细胞膜上单通道Ca~(2 )电流,分析L型钙通道平均开放概率和开放时间,在此基础上观察灯盏花素对其影响。结果不同浓度的灯盏花素能降低海马神经元L型钙通道的平均开放概率和开放时间,且在缺血再灌注3．0 h内作用明显。结论灯盏花素对脑缺血再灌注脑损伤有一定的保护作用。     

大剂量岷当归配伍川芎对脑缺血再灌注损伤的神经保护作用

目的:通过观察大剂量岷当归配伍川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经功能评分、脑梗死体积及脑组织中ICAM-l、COX-2基因表达的影响,研究不同剂量岷当归配伍川芎对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用及机制。方法:将60只雄性Wistar大鼠60只,随机分为6组,即假手术组、模型组、尼莫地平组、岷当归高剂量+川芎组、岷当归中剂量+川芎组、岷当归低剂量+川芎组,每组各10只。模型采用大脑中动脉缺血模型。在造模前12小时、30分钟各给药1次,缺血后12、24、36、48小时各给药1次。缺血再灌注48小时将大鼠处死,留取标本。对各组大鼠进行行为学评估,采用TTC染色法检测各组大鼠脑梗死体积,免疫组化及RT-PCR检测ICAM-l、COX-2m RNA的相对表达。结果:神经功能评分、梗死面积比率岷当归+川芎治疗组与尼莫地平组均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。ICAM、COX-2m RNA表达模型组与假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05),各治疗组与模型组比较,差异有统计学意义(P0.05);岷当归高剂量+川芎组与岷当归中剂量+川芎组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:高、中剂量组岷当归与川芎配伍可以抑制脑缺血再灌注损伤过程的炎症反应,改善神经缺损症状,在一定程度上缩小缺血再灌注损伤后大鼠脑组织梗死体积,降低炎症因子在脑缺血再灌注损伤中的表达,从而减轻脑细胞的损伤。     

灯盏花素抑制大鼠心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡

目的:观察灯盏花素(breviscapine,bre)对大鼠心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡的影响并探讨其机制。方法:采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型。40只SD大鼠随机分为正常对照组(control)、缺血再灌注组(ischemiareperfusion,IR)和灯盏花素组。灯盏花素组大鼠于术前1周分别腹腔注射不同剂量的灯盏花素(25、50 mg.kg-1.d-1),另2组给予等量生理盐水。缺血30min、再灌注2h后,采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,western blotting检测Caspase-3蛋白表达的变化。结果:缺血再灌注组凋亡指数和Caspase-3蛋白表达较正常对照组明显升高(P<0.01),灯盏花素组各指标较缺血再灌注组降低(P<0.05,P<0.01)。结论:灯盏花素对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,其机制与通过下调Caspase-3基因表达抑制心肌缺血再灌注损伤诱导的细胞凋亡有关。     

灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤的保护作用及机制研究

 目的 探讨灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤的保护作用及其机制。方法 40只小鼠随机分为对照组、模型组、护肝片组、灯盏花素高和低剂量共5组。除对照组外,其余各组每天采用异烟肼和利福平灌胃造成肝损伤模型,2 h后,对照组和模型组分别予以等体积生理盐水灌胃,其余各组分别予以护肝片、灯盏花素灌胃,连续2周。分别检测各组小鼠肝指数和血清谷丙转氨酶（ALT）的活性;肝组织匀浆丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及肝组织病理学变化。结果 灯盏花素和护肝片组均可明显降低肝损伤小鼠肝指数、血清ALT活性、肝匀浆MDA的含量,并能显著提高肝匀浆SOD的活性。肝组织病理学检查,灯盏花素组明显减轻肝细胞变性和坏死。结论 灯盏花素对抗结核药致小鼠肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

灯盏花素对小鼠顺铂肾损害的防治作用

目的:观察灯盏花素对小鼠顺铂肾损害的防治作用及可能的作用机制.方法:将昆明小鼠随机分为空白组、模型对照组、灯盏花素25,50 mg· kg-1治疗组共4组.除空白组外,其余各组以顺铂8 mg·kg-1单次ip制备小鼠肾脏损害模型,两个治疗组随即分别给予25,50 mg· kg-1的灯盏花素ig,1次/d,连续给药7d.观察小鼠肾脏的改变及检测血清中肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)的变化,检测血清及肾皮质中丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:与空白组对照比较,模型对照组肾脏损害严重,SCr及BUN含量升高(P＜0.01),血清及肾皮质MDA升高而SOD降低(P＜0.01).而各灯盏花素组小鼠肾脏病变较模型对照组明显改善,剂量依赖性降低Scr及BUN含量(P＜0.05,P＜0.01),使血清及肾皮质MDA含量降低而SOD活性升高(P＜0.05).结论:灯盏花素可减轻顺铂引起的肾毒性,其机制可能与抑制顺铂肾损害所致血液和肾皮质脂质过氧化反应增强有关.     

葛根素对去卵巢小鼠学习记忆和突触结构的影响

 目的研究葛根素对雌激素剥夺小鼠学习记忆和突触结构的影响。方法卵巢摘除(Ovx)或假手术(Sham)后一周,雌性小鼠给予4周的葛根素(Pur,40,120mg·kg^-1,ip)或苯甲酸雌二醇(EB,4μg·d^-1,sc)治疗。分别用Morri′s水迷宫和穿梭箱检测小鼠的空间记忆和主动回避行为;通过制备超薄切片电镜观测学习记忆相关脑区海马CA1和前皮层的突触超微结构变化。结果Ovx小鼠经120mg·kg^-1 Pur治疗后,在水迷宫中搜寻平台的平均路径显著缩短(P<0.05),主动逃避电击的次数明显增多(P<0.01)。同时,葛根素增加Ovx小鼠海马和前皮层的突触后密度(PSD)厚度,并减小突触间隙宽度,但对突触界面曲度、突触活性带长度没有明显作用。结论长期Pur治疗可通过影响海马和前皮层突触结构改善雌激素剥夺小鼠的记忆损伤。     

天麻总提物对小鼠学习记忆能力的影响

目的观察天麻总提物对小鼠学习记忆能力的获得、巩固、再现功能的影响,为临床研发新药提供依据。方法昆明种雄性小鼠随机分为正常组、模型组、对照组、天麻总提物组,各给药组给予相应药物灌胃,灌胃容积为0.2 mL/10 g,正常组与模型组给予等容积蒸馏水灌胃,连续16 d。于给药11 d后复制东莨菪碱、氯霉素、乙醇致小鼠记忆获得、巩固、再现功能障碍模型,采用Morris水迷宫进行定位航行实验及空间探索实验,测定小鼠逃避潜伏期和空间搜索距离,以及原平台象限时间百分比和距离百分比。结果天麻总提物能明显缩短模型小鼠逃避潜伏期及搜索距离(P0.05,P0.01),显著增加原平台象限时间和距离百分比(P0.01)。结论天麻总提物能具有改善模型小鼠记忆获得、促进记忆巩固及记忆再现的作用。     

乙酰葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的抗脂质过氧化作用

 目的探讨异黄酮类化合物乙酰葛根素对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法采用大脑中动脉阻塞法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型。测定脑组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛的含量和总抗氧化能力,并进行神经生物学评分。结果乙酰葛根素能使脑缺血大鼠的神经功能缺损评分明显低于缺血再灌组(P<0.01)。乙酰葛根素能明显降低缺血再灌注损伤后脑组织中的丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力。氯化三苯四氮唑染色显示,缺血再灌组在大脑皮质、基底节等均出现梗死灶。乙酰葛根素对缺血性脑梗死有改善作用。结论乙酰葛根素具有脑保护作用,其作用机制可能与抗氧自由基、抗脂质过氧化作用有关。     

五味子醇甲对记忆障碍模型小鼠学习记忆的影响

 目的 观察五味子醇甲对记忆障碍模型小鼠学习记忆的改善作用并探讨其机制。方法 在整体水平,五味子醇甲（0.5、1.0、2.0 g·kg-1·d-1）连续灌胃14 d后,以戊巴比妥钠（20 mg·kg-1）建立小鼠记忆障碍模型,采用Morris水迷宫法检测小鼠学习记忆能力;测定脑组织超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、一氧化氮（nitric oxide,NO）、过氧化氢酶（catalase, CAT）的活性;免疫组化分析核转录因子-κB（NF-κB）、乙酰胆碱转移酶（choline acetyltransferase, ChAT）、脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor ,BDNF）的表达。在细胞水平,以PC12为靶细胞,以过氧化氢（H₂O₂）诱导细胞凋亡,以五味子醇甲（0.3,0.6,1.2 μmol·L-1）进行预保护24 h,检测PC12细胞活性及细胞上清液中NO的变化;细胞免疫化学染色检测PC12细胞中bcl-2的表达;Western blot方法检测bax的表达。结果 与模型组比较,五味子醇甲可延长小鼠有效区停留时间、增加小鼠穿越平台的次数;提高小鼠脑内CAT的活性、SOD活性并降低NO含量（P＜0.05,P＜0.01）。免疫组化结果显示,五味子醇甲可增加海马区ChAT蛋白表达、BDNF的蛋白表达、抑制NF-kB蛋白的核表达,与模型组比较有统计学差异（P＜0.05,P＜0.01）。五味子醇甲可提高PC12细胞的存活率并降低其细胞上清液中NO的浓度,与H₂O₂模型组比较有差异（P＜0.05,P＜0.01）;细胞免疫化学染色提示五味子醇甲可增加bcl-2的表达量,Western blot 结果表明,高剂量组五味子醇甲可降低bax蛋白表达量。结论 五味子醇甲具有改善记忆障碍模型小鼠学习记忆的作用,其机制可能与抑制NF-κB的核转录、增加BDNF的表达而有效降低脂质过氧化产物水平有关;亦可通过增强海马区ChAT的表达,增加ACh递质的合成;或是在细胞水平调节Bcl-2家族蛋白的表达等多种途径有关。     

吴茱萸次碱对脑缺血再灌注小鼠的保护作用及作用机制研究

目的:观察吴茱萸次碱(Rut)对脑缺血再灌注(I/R)损伤小鼠的学习记忆能力的保护作用及作用机制。方法:采用改进的Himori法暂时性阻断两侧颈总动脉制备小鼠脑I/R损伤模型,采用跳台实验,观察腹腔注射吴茱萸次碱(84,252,504μg.kg-1)对脑I/R损伤小鼠的学习记忆能力的保护作用,并于缺血再灌注后48 h测定小鼠脑组织中一氧化氮(NO)的含量、一氧化氮合酶(NOS)和诱导性一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果:脑缺血再灌注后,小鼠学习记忆能力降低,脑组织中NO的含量,NOS和iNOS的活力升高。腹腔注射吴茱萸次碱可不同程度的改善脑I/R损伤造成的学习记忆能力障碍;吴茱萸次碱可降低NO的含量,NOS和iNOS的活力;与模型组比较,吴茱萸次碱(504μg.kg-1)可显著改善小鼠的学习记忆功能障碍,降低NO的含量,NOS和iNOS的活力(P<0.01)。结论:吴茱萸次碱对脑缺血再灌注(I/R)损伤小鼠的学习记忆能力具有保护作用,其机制可能与降低NO的含量,影响NOS和iNOS的活力有关。