发育中大鼠视觉与听觉皮质胼胝体联系的轴突形态学研究

用顺行示踪剂 BDA标记研究了发育中大鼠视觉与听觉皮质胼胝体轴突的形态学。 BDA应用于出生后第 4d的视觉皮质后 ,整个视觉皮质包括 17区内侧部 、 层已可见一些标记的胼胝体轴突。第 5～ 8d时 ,许多标记的胼胝体轴突已到达皮质浅层 ( ～ 层 )。第 13 d时 ,17区内侧部又不见胼胝体轴突 ,表明早期此区的胼胝体轴突为暂时性的 ;17/ 18界区则含大量胼胝体轴突 ,并在 层和 / 、 、 层分别形成致密的和稀疏的终末丛。第 17d时 ,致密的终末丛可见于上述各层 ,与成年的分布模式类似。 BDA应用于听觉皮质后 ,标记的胼胝体轴突见于对侧听觉和视觉皮质 (即同源性和异源性胼胝体轴突 )。第 13～ 2 8d期间 ,虽然同源性胼胝体轴突的形态逐渐变化 ,但它们显示类似的明显的柱状构筑。第 13～ 2 4d,一定数量的异源性胼胝体轴突可见于整个视觉皮质包括 17区内侧部。但至第 2 8d,这些轴突大多被排除 ,并且此时的轴突标记模式已类似成年。提示 ,视觉皮质大多数异源性胼胝体轴突是暂时性的     

大鼠延髓网状背侧亚核下行投射终末在脊髓灰质的分布

本研究应用PHA－L顺行追踪技术研究了大风延髓网状背测亚核（SRD）至脊髓灰质下行投射的终止部位。结果表明：SRD发出的下行纤维走行于脊髓的背外侧京中，从高位至低位，脊髓灰质中的PHA－L顺标终末的密度逐渐降低。SRD的下行投射终未在脊髓中具有明显的同侧分布优势，主要终止在同侧脊历灰质的Ⅳ～Ⅶ层和X层，Ⅰ、Ⅱ层中只有少量的标记终末，对侧脊髓灰质中除了在Ⅳ层和X层中有中等密度的颁标终末分布外，其余各层中几乎无标记终未、PHA－L顺标终未与BSI-B4标记的初级传入C纤维终末在Ⅰ．Ⅱ层内重叠公布．本研究为SRD在调控脊髓的伤害性信息传递方面也起重要作用这一论点提供了直接的形态学依据．     

成年和发育中大鼠胼胝体轴突含生长抑素的免疫组织化学证据

本实验用免疫组织化学ＡＢＣ法发现大鼠胼胝体内存在生长抑素免疫反应阳性轴突．此阳性轴突可见于生后不同发育阶段及成年大鼠的胼胝体内．出生时胼胝体内此轴突的数量很少；生后１周内其密度逐渐增高，至第２周初期达到高峰，此时胼胝体内可见大量生长抑素阳性轴突．然而，至第２周末，生长抑素阳性胶胝体轴突的密度已下降至接近成年时的水平，即仅有少量此纤维存在于胼胝体内。这些结果提示在大鼠早期生后发育过程中许多生长抑素阳性胼胝体轴突是暂时性的．结合本文作者等以往对成年和发育中大鼠和猫的与胼胝体联系的神经介质的研究结果，可以认为胼胝体中的活性物质是多样的，在哺乳动物大脑皮质发育中可能起着不同的作用。     

胼胝体与视皮质17区神经元发育的比较观察

为探讨胼胝体与视皮质１７区神经元超微结构发育的相互关系，选用Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，随机分为摘除左侧眼球、右侧眼球、双侧眼球及正常对照４组，用电镜法对胼胝体与视皮质１７区神经元超微结构的发育进行比较观察。结果表明：（１）同期胼胝体有髓，无髓经纤维中的线粒体等超微结构的形态变化与视皮质１７区神经元中线粒体等变化的程度相似；（２）胼胝体及视皮质１７区神经元的发育均依赖于视觉传入冲动的刺激。（３）胼胝体     

新生猫视皮质胼胝体神经元的DiI示踪研究

采用ＤｉＩ示踪法研究了新生猫视皮质的胼胝体神经元的分布和形态．ＤｉＩ标记的胼胝体神经元普遍分布于视皮质各区,包括在成年时缺乏胼胝体联系的１７区内侧部．这些标记的神经元位于除Ⅰ层外的皮质各层中,但大部分位于Ⅲ展并有成簇分布的倾向．ＤｉＩ标记的胼胝体神经元,特别是位于Ⅱ／Ⅲ层者大多呈“Ｇｏｌｇｉ样”标记,其树突走行和各级分支,甚至树突棘均清晰易辨．上述结果除证实以往用其他方法证明的新生猫视皮质胼胝体神经元的分布外,还显示了标记神经元的详细形态特点,表明ＤｉＩ示踪法是研究发育中的神经通路起源细胞及其突起形态的一种简单而有效的手段．     

鼠脑胼胝体NPY及SOM免疫阳性轴突的生后发育

目的　探讨成年哺乳动物胼胝体联系的电特性及神经化学性质。方法　本文用NPY及SOM抗体免疫组织化学方法研究大鼠发育中胼胝体轴突的化学特性。结果　NPY及SOM阳性轴突均出现于自新生至成年鼠的胼胝体中 ,但在同龄鼠中SOM阳性轴突较少于NPY阳性轴突 ,NPY及SOM阳性轴突的密度开始时逐渐增高然后达到高峰后最后下降至成年水平 ,在成年鼠胼胝体中只有少数NPY及SOM阳性轴突。结论　这些结果提示许多NPY及SOM阳性胼胝体轴突在生后发育早期是暂时性的 ,这结果也提示胼胝体联系纤维的功能在生后发育过程中可能与成年不同。本结果还提示 ,发育中及成年哺乳类胼胝体联系是化学异源性的。     

猫丘脑腹后外侧核内皮质—丘脑纤维终末与丘脑—皮质投射神经元之间的突触连接

用ＣＢ－ＨＲＰ逆行追踪与顺行溃变相结合的方法，对描丘脑腹后外侧核内的来自大脑皮质体感Ⅰ区的皮质—丘脑纤维终末与丘脑—皮质投射神经元之间的突触连接进行了电镜观察。向猫大脑皮质体感Ⅰ区内注射ＣＢ－ＨＲＰ５ｈ后，电解损毁原注射部位，术后动物存活４ｄ。电镜下发现丘脑瓜后外侧核内存在５种突触连接方式；（１）溃变的轴突终未与ＨＲＰ标记神经元胞体形成轴－体突触；（２）溃变的轴突终末与ＨＲＰ标记的树突形成轴—树突触；（３）溃变的轴突终末和其它突触前成分共同与中央树突形成汇聚型的突触复合体；（４）溃变的轴突终末与未标记树突形成的轴—树突触；（５）正常的轴突终末与ＨＲＰ标记神经元形成对称型的轴—体突触。     

猫视皮层17区一氧化氮合酶阳性神经元的生后发育

用ＮＡＤＰＨ ｄ 黄递酶组化技术观察了生后不同年龄段猫视皮层１７ 区中一氧化氮合酶阳性神经元的生后发育状况。结果显示： 生后１ 周内,一氧化氮合酶阳性细胞仅出现于皮层的第５／６ 层以及皮质下板（白质）中,皮质板中极少;生后２ 周时,一氧化氮合酶阳性细胞见于２／３ 和４ 层;在随后的发育中,２／３ 层与４ 层中阳性细胞逐渐增多,第５ 周时呈现与成年动物相似的分布模式。一氧化氮合酶阳性细胞的发育模式反映了皮质板的形成过程,即“由内向外”的皮层片层成熟模式;成年动物的皮层１７ 区中一氧化氮合酶阳性细胞远远高于幼年。猫视皮层１７ 区中一氧化氮合酶阳性细胞发育的时空表达模式与猫视皮层发育的关键期无明显吻合关系,推测视皮层中内源性一氧化氮与视皮层的眼优势柱的可塑性无关,为Ｒｅｉｄ 等和Ｒｕｔｈａｚｅｒ 等的电生理学研究结果提供了形态学证据。     

大鼠孤束核内NT-LI成分生后发育和衰老变化的光镜和电镜观察

用免疫细胞化学和电镜相结合技术,在光镜和电镜水平对生后4天、15天、30天、90天、300天和760天6组大鼠孤束核内神经降压肽样免疫反应(NT-LI)成分的生后发育和衰老变化进行了定量研究。光镜下孤束核内NT-LI胞体和终末主要分布于最后区平面,多见于背侧亚核、内侧亚核和连合核内。电镜下内侧亚核内可见NT-LI胞体、树突、轴突及终末。6组大鼠孤束核内NT-LI细胞均数和内侧亚核内NT-LI终末密度及其突触密度均以生后4天至15天间增长最快,NT-LI细胞数在生后15天达到最高,NT-LI终末及突触密度在生后90天达到最高。三者在生后300天时均明显减少。发育期内侧亚核内NT-LI终末构成的突触以Gray Ⅰ型为主,至老年期则变为Gray Ⅱ型占优势。发育期内侧亚核内以含清亮囊泡伴颗粒囊泡的NT-LI终末为主,老年期此类终末明显减少。只含清亮囊泡的NT-LI终末从生后至老年变化不明显。     

神经生长因子对老年鼠穹窿海马伞损伤后齿状回胆碱能突触重构的作用

损伤老年鼠左侧穹窿海马伞，造成隔-海马胆碱能系统损害模型。用免疫电镜和形态计量学分析NGF对齿状回分子层受体（NGFr）阳性突触和胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性轴突终未的影响。结果显示：损伤一个月后，损伤侧齿状回分子层NGFr阳性突触前终末、实触后致密物和ChAT阳性轴突终末面积和周长都有不同程度的缩小；脑室注射NGF，损伤侧齿状回分子层NGFr阳性突触和ChAT阳性实触终末都有一定的恢复．提示NGF对齿状回分子层受损的NGFr阳性突触和ChAT阳性轴突终未的重构具有促进作用。     

视觉对胼胝体发展影响的超微结构研究

选生后一周未睁眼Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０只，随机分为摘除石侧眼球、在侧眼球、双侧眼球及正常对照四组，各组１０只，对胼胝体正中矢状断面的超微结构进行了研究。结果表明：１．胼胝体由有髓及无髓神经纤维组成；２．胼胝体各部均有轴－轴突触存在；３．胼胝体发育受视觉的影响。     

脑源性神经营养因子在大鼠海马CA3区发育过程中的表达

采用免疫组织化学ＡＢＣ 法,研究脑源性神经营养因子在大鼠海马ＣＡ３ 区发育过程中的表达,观察其免疫反应产物的分布。结果表明：脑源性神经营养因子阳性物质在生后零天（Ｐ０）组位于ＣＡ３ 区细胞周围间质内;Ｐ１０,Ｐ１５ 和Ｐ２０ 组脑源性神经营养因子免疫反应产物位于锥体细胞内,幅射层内可见阳性苔藓纤维终末,这些终末随生后日龄增加而增加。Ｐ３０ 组脑源性神经营养因子免疫反应产物仅见于细胞周围间质内,未见细胞胞浆内有阳性物质分布,但偶见脑源性神经营养因子阳性细胞核位于ＣＡ３ 区锥体细胞层,辐射层内有较多的苔藓纤维阳性终末。本研究结果提示,发育早期大鼠海马ＣＡ３ 区脑源性神经营养因子分布于细胞周围间质而生后１０ 至２０ 天发育期间,ＣＡ３ 区锥体细胞合成脑源性神经营养因子并可沿神经元轴突顺行运输、传递信息。     

大白鼠皮质脊髓束的生后发育

本研究共用18只大白鼠。用Fink-Heimer氏法,研究皮质脊髓束的生后发育。损毁一侧感觉运动皮质,追踪溃变的皮质脊髓轴突,生后1天入延髓锥体。生后5天至对侧颈髓背索。7天至胸髓。9天至腰骶髓。表明皮质脊髓束有一生后发育过程。动物年令愈小发育速度愈快。随动物年令的增长,发育的速度逐渐减慢。约至生后30天,皮质脊髓束接近成年动物水平。     

轴突稳定及细胞骨架

<正> 胼胝体是研究大脑皮质轴突发育的一个好模型。猫脑胼胝体内的轴突数量在初生时最多,而在生后的早期发育过程中就减少70%。这一发现及解剖学的束路追踪研究结果提示大脑半球间的纤维联系在生后的早期发育过程中有一个明显的重组合过程。同时也对轴突的保留或取消的机制提出了若干问题。细胞骨架对轴突的生长及稳定可能有重要作用。在轴突消失的末期,胼胝体轴突内出现神经细丝的大分子量亚单位(H-NF),这一发现表明H-NF对轴突稳定有作用,因为H-NF已被证明对神经细丝的交连有作用。另外,H-NF的磷酸化也被认为是轴突成熟的标     

钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ在大鼠生后海马发育中的表达

目的 探讨Wistar大鼠生后海马发育过程中钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）的表达。 方法 应用免疫荧光方法检测CaMKⅡ在生后不同时期大鼠海马CA1、CA3区和齿状回（DG）中的表达情况（n =48）。结果 CaMKⅡ于生后各期海马CA1区和DG的表达逐渐增强，生后第10天（P10）达高峰期，此后逐渐减弱；于CA3区的表达在P4和P10时均较高。其中，CaMKⅡ在CA3区的表达高于在CA1区和DG的表达，在多形层和分子层的表达高于在锥体细胞层或颗粒细胞层的表达。结论 CaMKⅡ在CA1、CA3区和DG中的表达具有特异性的时空分布模式，这可能与其在生后发育过程中的突触发生，树突、轴突形成，海马的成熟以及学习记忆功能相关。     

大鼠扣带皮质V层锥体细胞的电生理学和形态学特征的研究

本文用细胞内记录、Ｂｉｏｃｙｔｉｎ注入和细胞内染色相结合的方法，在大鼠离体脑片上，对扣带皮质Ｖ层锥体细胞的基本电生理学特性和形态学特征进行了研究．注入Ｂｉｏｃｒｔｉｎ的锥体细胞位于扣带皮质１区（Ｃｓｌ区）和２区（Ｃｇ２区），Ｃｇ１区和Ｃｇ２区性体细胞的电生理学特性不同，特别是后电位有差异。Ｃｇ１区锥体细胞的锋电位出现后有显著的快速后超极化跟随；Ｃｇ２区神经元的快速后超极化较小，但出现中等范围后超极化和会极化后电位。两区锥体细胞在形态学特征上也存在差异，Ｃｇ１区锥体细胞的顶树突比Ｃｇ２区者长，且在皮质浅层内分支较少；而Ｃｇ２区锥体细胞的顶树突则有较多分支。Ｃｇ２区锥体细胞的基树突比Ｃｇ１区神经元者延伸范围广且密集。所有的锥体细胞都有一条伸入皮质下白质的主轴突，Ｃｇ１区神经元的轴突侧支主要沿顶树突在垂直方向上分布，而Ｃｇ２区神经元的轴突侧支则延伸至较广泛的区域．     

大鼠额叶皮质至顶盖的投射——WGA-HRP法研究

本实验用WGA-HRP法研究了大鼠额叶皮质至顶盖的投射。观察到额叶皮质内、外侧部均发出纤维投射到上丘,并有一定局部定位关系。当WGA-HRP注入额叶皮质外侧部,上丘中标记纤维和终支主要分布于中、深层的外侧部。当WGA-HRP注入额叶皮质内侧部,上丘中标记纤维和终支主要出现于中、深层的内侧部。两侧上丘均有标记,但同侧较多。额叶皮质至顶盖的投射路经内囊和大脑脚。为了追踪这些纤维的起源,将WGA-HRP注入上丘,结果在8、10、24和32区皮质的第V层观察到标记神经元。     

Reelin在小鼠穿通纤维及大脑连合纤维寻径中的作用

目的通过对比野生型小鼠和Reeler小鼠穿通通路及连合纤维的发育,探讨Reelin在穿通通路及连合纤维寻径中的作用。方法共取野生型小鼠(WT)和Reelin基因缺失小鼠(Reeler),从胚龄16 d(E16)至出生7d(P7)各年龄点,共123例。采用Di I/Di O离体示踪技术对不同年龄点的WT小鼠及Reeler小鼠的穿通通路及连合纤维进行顺行和逆行示踪。结果 1.穿通通路主要由内嗅皮质第Ⅱ层和第Ⅳ层神经元所发出,在E16时进入海马腔隙分子层,P1时穿通纤维出现在齿状回,P7时穿通纤维形成致密纤维束终止于齿状回外分子层2/3;Reeler小鼠的穿通通路出现明显的发育延迟并且投射纤维分布紊乱;2.穹隆连合纤维主要由海马CA3锥体细胞,门细胞及内嗅皮质Ⅱ~Ⅳ层神经元发出,在E16时形成;Reeler小鼠穹隆纤维与WT小鼠在发育中无明显区别;3.胼胝体连合纤维主要由新皮质Ⅱ~Ⅳ层神经元及纹状体神经元所投射,在E18时形成并向对侧皮质进行纤维投射,并且投射部位出现对称分布,P3时一侧胼胝体纤维到达对侧纹状体。Reeler小鼠胼胝体投射的皮质神经元向对侧新皮质投射出现延迟。结论 Reelin可能是穿通通路及连合纤维发育的导向因子。Reelin的缺失导致穿通通路发育延迟,并且连合纤维在皮质的细胞来源及穿通通路细胞来源紊乱。     

大鼠脊髓内囊泡膜谷氨酸转运体1和囊泡膜谷氨酸转运体2阳性纤维和终末在生后发育中的分布和表达变化

目的 探讨囊泡膜谷氨酸转运体1（VGLUT1）和VGLUT2阳性纤维和终末在生后第0天（P0）至第22天（P22）大鼠脊髓内的分布情况和表达变化。 方法 对生后发育P0～P22大鼠的颈膨大和腰膨大部位,进行VGLUT1和VGLUT2免疫组织化学染色。 结果 P0～P22大鼠颈膨大和腰膨大脊髓内均可观察到VGLUT1和VGLUT2阳性纤维和终末,但未观察到胞体样结构。VGLUT1和VGLUT2阳性纤维和终末的分布呈现明显的互补分布,尤其是以脊髓后角更加明显。其中,VGLUT1阳性纤维和终末在P0主要见于颈膨大和腰膨大脊髓后角Ⅲ～Ⅴ层,中间部和前角很微弱。脊髓发育至P3,不仅Ⅲ~Ⅴ层VGLUT1的表达进一步增强,且向外侧部扩展,并在后角基底部Ⅵ层和前角的外侧部（Ⅸ层）也可观察到较强的VGLUT1阳性纤维,呈现一条明显由背内向腹外的带状分布趋势。P7时此带状分布更加明显,并随着发育逐渐向内、外扩展,至P22时已广泛分布于除Ⅱ层之外的整个脊髓。而VGLUT2阳性纤维和终末在P0时即密集出现于脊髓后角Ⅰ～Ⅱ层以及前角的外侧边缘区域;之后随着发育,VGLUT2阳性纤维和终末的分布模式并未发生明显改变,但其密度逐渐有所增加,特别是Ⅰ～Ⅱ层内VGLUT2阳性产物的表达尤为明显。另外,在脊髓白质后索内可见VGLUT1阳性皮质脊髓后束纤维由颈髓（P3）逐渐下降至腰髓（P7）的发育过程。 结论 VGLUT1和VGLUT2阳性纤维和终末在脊髓发育过程中呈现明显不同,且表现出互补分布的特点,这对于进一步理解VGLUT1和VGLUT2在脊髓生后发育过程中不同功能特点可能有意义。     

迷走神经传入纤维在中枢的投射

HRP标记大白鼠的迷走神经传入纤维,入延髓后,穿过三叉神经脊束和脊束核的背侧时,发出少量终末纤维交织成网,终于三叉神经脊束核;大量纤维形成孤束,主要分布于两侧孤束核、迷走神经背核及最后区。还有一些纤维束下行于颈髓后角固有核,分布于固有核、胶状质、网状结构和灰质连合。在整个最后区、Cajal连合核、同侧孤束核及迷走神经背核都有丰富的HRP标记的传入纤维的终末分支、终球和途中扣结型末梢。对侧孤束核及迷走神经背核内的末梢较同侧为少。