镧对仔鼠海马核转录因子-κB表达影响

目的探讨亚慢性氯化镧(La Cl3)暴露对子代大鼠海马组织核转录因子-κB(NF-κB)表达的影响。方法健康成年雌性Wistar大鼠24只,随机分为对照组及0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组,染镧组仔鼠自雌鼠受孕至断乳后1个月通过自由饮水摄入镧;利用免疫组化法检测海马p-IKKα/β的分布和表达;应用Western blot法检测海马组织p-IκBα和p-NF-κBP65的表达。结果 0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马CA1区p-IKKα/β表达分别为(54.72±10.04)、(40.73±4.90)、(32.99±5.42),CA3区表达分别为(64.80±8.27)、(47.78±4.92)、(36.17±7.71),DG区表达分别为(303.67±34.78)、(166.83±29.8)、(87.01±17.40);CA1、CA3、DG区各染镧组仔鼠海马3区的p-IKKα/β表达与对照组比较,除DG区0.25%La Cl3组外其他各染镧组仔鼠海马p-IKKα/β表达均低于对照组(P<0.05);0.25%、0.5%、1.0%La Cl3组仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达IDV值分别为(0.58±0.06)和(0.46±0.06)、(0.49±0.07)和(0.36±0.08)、(0.36±0.09)和(0.25±0.08),均低于对照组的(0.68±0.05)和(0.56±0.08)(P<0.05),仔鼠海马p-IκBα和p-NF-κBp65蛋白表达均与La Cl3染毒剂量呈负相关(r=-0.994、-0.978,P<0.05)。结论亚慢性La C13染毒可引起子代大鼠海马细胞NF-κB活性降低,可能是镧引起学习记忆能力下降的机制之一。     

SiO2对肺泡巨噬细胞抗氧化物的影响与脂质过氧化

通过观察SiO_2,对巨噬细胞抗氧化系统的影响及与细胞损伤的联系,对SiO_2引起的巨噬细胞脂质过氧化的原因及其在细胞损伤过程中的作用进行了初步探讨。材料与方法应用气管灌洗技术收集豚鼠肺泡巨噬细胞,用     

活性氧对核因子-κB和低氧诱导因子-1的调控

氧是需氧生物必不可少的基本物质.需氧细胞在代谢过程中产生的活性氧(reactive oxygen species,ROS),不仅参与细胞的凋亡、坏死;还作为信号分子,参与细胞信号转导、激活转录因子、影响基因表达,以协调应答各种氧分压变化.     

核因子-κB与缺血缺氧所致疾病的关系

核因子-κB是细胞中一个重要转录调控因子，存在于多种类型的细胞中。机体组织器官受到缺血缺氧的创伤后，核因子-κB被激活，从胞浆中进入细胞核内，结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点，诱导基因转录，参与缺血缺氧导致心脏，肾脏，脑等重要器官的损伤，乃至危及生命。     

核因子-κB与缺血缺氧所致疾病的关系

核因子 κB是细胞中一个重要转录调控因子 ,存在于多种类型的细胞中。机体组织器官受到缺血缺氧的创伤后 ,核因子 κB被激活 ,从胞浆中进入细胞核内 ,结合到被诱导基因启动子序列上的κB位点 ,诱导基因转录 ,参与缺血缺氧导致心脏 ,肾脏 ,脑等重要器官的损伤 ,乃至危及生命。     

核因子-κB反义核酸对前炎症细胞因子表达的实验研究

目的研究核因子(NF)-κB反义寡核苷酸对NF-κB表达及其下游前炎症细胞因子表达的影响.方法将不同浓度经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(PS-AODN)导入培养的RAW 264.7细胞中(与脂多糖预孵育),设立空白对照组和错义寡核苷酸(MODN)组.采用免疫组织化学SABC法检测细胞中NF-κB p65、内皮细胞黏附因子(ICAM)、一氧化氮合酶(iNOS)的表达.结果AODN组的NF-κBp65,ICAM,iNOS表达较空白对照组及MODN组明显降低(P＜0.05),且在1.0～5.0 μmol/L范围内AODN的作用随其浓度增加而增加.结论AODN能有效阻抑NF-κB在脂多糖刺激下的表达,从而抑制各前炎症细胞因子的表达.     

矽肺患者外周血的单核细胞核转录因子-κB水平

目的观察矽尘接触者和矽肺患者外周血单核细胞核转录因子-κB(NF-κB)水平的变化,探讨NF-κB在矽肺发生发展中的作用。方法采用ELISA法对100名不接触粉尘的对照人群,200名接触矽尘1年以上的接尘工人,32名矽尘作业观察对象(原诊断0+患者)及79例矽肺患者,检测其外周血单核细胞胞核蛋白中的NF-κB水平。结果矽肺组NF-κB水平较对照组和接尘组明显升高,接尘组NF-κB水平较对照组明显升高,差异均有统计学意义;在不同期别矽肺患者中NF-κB水平随矽肺期别升高也有升高的趋势。多元回归分析也表明NF-κB水平与接尘情况和矽肺的病情有关。结论接尘组和矽肺组外周血单核细胞NF-κB均有升高,此种升高除与矽肺的发病有关外,与矽肺的严重程度也有关,提示对外周血单核细胞NF-κB水平的监测可能成为矽肺发病预测、预后评估的生物标志物,而适当干预NF-κB的活化可能是矽肺防治新的干预靶点。     

氯胺酮在体外循环中对核因子-κB及其他炎性介质表达的影响

目的观察氯胺酮在体外循环(CPB)中对核因子-κB(NF-κB)活性表达的影响及与TNF-α、IL-1活性表达的相关性。方法选择2008年全年CPB心内直视下瓣膜置换术手术患者24例,随机分成对照组和氯胺酮组,每组12例,氯胺酮组在诱导后和CPB流转开始前分别缓慢静脉滴注氯胺酮1 mg/kg,对照组静脉滴注同等容量的生理盐水,通过ELISA法-双抗体夹心法测定麻醉诱导后CPB前(T1)、CPB后30 min(T2)、CPB后1 h(T3)、CPB后4 h(T4)、手术结束(T5)、手术结束后24 h(T6)的NF-κB及TNF-α、IL-1的表达。结果两组患者在T3、T4时NF-κB及TNF-α、IL-1的表达较T1有明显增高,但氯胺酮组活性表达较对照组显著降低。结论氯胺酮在CPB中应用能够抑制NF-κB及其他炎性介质的活性表达。     

二氧化硅致人单核细胞THP-1核因子-κB活化定位改变的研究

目的 探讨矽肺发病过程中SiO2诱导对人单核细胞株THP-1核因子-κB(NF-κB)活化的影响。方法 采用间接免疫荧光细胞化学法结合激光共聚焦显微镜(LSCM，Zeiss 510)检测THP-1细胞NF-κB p65亚基(NF-κB／p65)定位；Western-blot法测定THP-1细胞核蛋白中NF-κB／p65水平。结果 免疫荧光分析显示，异硫氰酸荧光素(FTTC)标记的NF-κB／p65在胞浆区为绿色荧光，而进入了丙亚基碘(PI)红色荧光标记的胞核区时则红绿两色叠加成黄色荧光。正常细胞NF-κB／p65主要分布于胞浆区，核区很少，而100μg/mlSiO2刺激30min后NF-κB／p65荧光标记集聚于核区，胞浆区少见。Westem-blot结果显示，对照组(0μg/mlSiO2)THP-1细胞核蛋白中有低水平NF-κB／p65表达,100μg/ml和200μg/ml SiO2作用15min和30min，THP-1细胞核蛋白中NF-κB／p65表达增加，并随着剂量的增加和时间的延长，NF-κB／p65水平相对增加。NF-κB／p65激活剂脂多糖(LPS)处理的THP-1细胞NF-κB／p65定位情况和核蛋白水平与上述结果相似。结论 SiO2刺激可引起THP-1单核细胞NF-κB核转位活化。     

核因子-κB在胚胎发育、毒物致畸中研究进展

胚胎及胚胎微环境的细胞因子对于维持正常妊娠很重要,其精细调控细胞的增殖、分化和凋亡.核转录因子-κB是调节凋亡的关键因子,通过对多种基因表达的调节,对妊娠的维持,胚胎发育有重要作用.该文对核转录因子-κB家族的基本组成结构和核转录因子-κB在胚胎发育及毒物致畸中的作用作以综述.     

核因子-κB与肾脏的缺血再灌注损伤

核因子-κB是核因子中重要的一组蛋白质,核因子-κB过度活化在肾缺血再灌注损伤中起着重要作用.许多以抑制核因子-κB活化为目的的实验方法,试从分子水平、基因水平为防治肾脏的缺血再灌注损伤提供新途径.该文就核因子-κB与肾脏缺血再灌注损伤的关系与窒息后肾脏的缺血再灌注损伤的防治及与麻醉药物、一氧化氮、抗凋亡、血管扩张药物、热休克蛋白、促红细胞生成素肾保护作用的关系,基因工程法防治肾脏缺血再灌注损伤等方面的进展进行综述.     

窒息新生鼠脑核因子-κB的表达及地塞米松的影响

【目的】观察核因子-κB（nuclear factor kappa B，NP-κB）在窒息新生大鼠窒息后不同时间脑组织内表达的动态变化及地塞米松（dexamethasone，DXM）早期干预的影响。【方法】出生7d新生大鼠随机分为：对照组，窒息组和DXM预处理组；制备新生大鼠窒息模型，并于窒息后1、3、5和7d取脑组织行石蜡切片。采用免疫组织化学方法检测窒息新生鼠脑组织NF-κB p65活性表达水平及应用DXM预处理后NF-κB p65活性变化情况，用苏木精-伊红染色观察窒息后脑组织形态学变化。【结果】窒息组新生鼠脑组织NF-κB的表达较对照组显著增强（P〈0．05），以5d时升高最明显；给予DXM预处理后，NF-κB的表达减弱（P〈0．05），窒息组神经元有凋亡现象，DXM预处理组凋亡神经元明显减少。【结论】窒息新生鼠脑组织NF—κB表达增加，凋亡神经元增多，窒息后5d时NF-κB的活性达高峰；DXM可抑制窒息新生鼠NF-κB的表达，减少神经元的凋亡。DXM可能通过抑制NF-κB活性减轻窒息脑损伤。     

米非司酮对孕7～9周人胎盘绒毛核因子-κB及环加氧酶的影响

目的:观察米非司酮对妊娠7～9周人胎盘绒毛中核因子(NF)-κB及环加氧酶COX表达的影响,探讨其药物流产机理。方法:采用免疫组化法检测NF-κB、COX-1及COX-2在米非司酮药物流产组与负压吸宫对照组(均孕7～9周各12例)胎盘绒毛中的表达。结果:NF-κB和COX-2在药物流产组滋养细胞中阳性表达均较对照组强(均P<0.01);COX-1在两组表达无明显差别(P>0.05)。结论:米非司酮用于人孕7～9周药物流产时,可通过激活核转录因子NF-κB使COX-2表达增多,进而可能通过影响前列腺素的合成等作用产生不利于妊娠的结果。     

雌马酚通过抑制核转录因子-κB表达水平诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡

目的研究雌马酚对雌激素受体表达阴性的人乳腺癌细胞株MDA-MB-231的作用。方法用MTT法测定雌马酚干预对MDA-MB-231细胞活力的影响;光学显微镜观察雌马酚对细胞形态的影响;流式细胞术及免疫细胞化学法检测雌马酚对细胞凋亡的作用。结果雌马酚可以抑制MDA-MB-231细胞的活力(P<0.05)。雌马酚可抑制NF-κB的表达而诱导细胞凋亡。结论雌马酚可通过降低NF-κB的表达诱导MDA-MB-231凋亡。     

瓦斯爆炸伤对大鼠肺组织核因子κB及细胞间黏附分子-1表达的影响及意义

目的研究瓦斯爆炸伤肺组织中核因子κB（NF-κB）及细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达及二者之间关系.方法建立瓦斯爆炸伤大鼠模型,用地高辛标记NF-κB cDNA探针检测肺组织NF-κB mRNA的表达,用免疫组化SP法检测肺组织NF-κB及ICAM-1的表达.结果瓦斯爆炸伤后各实验组大鼠肺组织中NF-κB mRNA及其蛋白表达、ICAM-1的蛋白表达均较对照组明显增多,在伤后2h增多最明显.肺组织病理学检查显示,瓦斯爆炸伤后,部分气管黏膜上皮脱落、管壁明显充血、水肿、中性粒细胞浸润;肺泡出血、水肿、大量炎细胞浸润.电镜示Ⅱ型肺泡上皮细胞变性脱落,改变明显.结论瓦斯爆炸伤致NF-κB活化,并促进ICAM-1的表达,与急性肺损伤关系密切.     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的 探讨SiO2对矽肺患者的肺泡巨噬细胞(AM)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1表达的影响.方法 收集矽肺患者肺泡AM,体外经SiO2刺激3、6、12、18、24、36 h,分别用明胶酶谱法和免疫细胞化学方法检测AM中TIMP-1、MMP-9蛋白表达和MMP-9活力.结果 实验组AM中6、12、18、24 h MMP-9的蛋白表达增强,在18 h时最高(积分吸光度值为0.386±0.037),与同期对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组12、18、24、36h AM中MMP-9活力的表达增强,在24 h最强(吸光度值3.061±0.153),与同期对照组相比,差异均有统计学意义(P＜0.05).实验组与对照组各时间点TIMP-1蛋白表达比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论 体外SiO2刺激矽肺肺泡AM可影响MMP-9蛋白及其活力的表达.     

二氧化硅对人肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞IL-1β表达意义

目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)条件培养上清对人胚肺成纤维细胞(FB)白细胞介素(IL)-1β表达的影响。方法用酶联免疫吸附法检测离体经或不经SiO2刺激的矽肺患者AM在3、6、12、18、24、36 h上清中IL-1β的表达,取IL-1β表达高峰点的AM上清作为条件培养上清。采用免疫细胞化学法检测AM条件培养上清刺激FB于不同时间点(3、6、12、18、24、36、48 h)其细胞内IL-1β的表达。结果经SiO2刺激的矽肺患者AM上清中IL-1β的表达量明显升高(P<0.01),12 h达高峰;活化的矽肺患者12 h AM条件上清可以促进FB表达IL-1β增高(P<0.05);18 h表达最高,以后逐渐下降。结论在本实验条件下,经离体细胞培养,提示SiO2可通过上调AM和FB中IL-1β的表达,参与矽肺纤维化的形成过程。     

迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数的建立

目的建立迁移率改变法检测核转录因子-κB实验参数,为准确检测核转录因子-κB奠定基础。方法分子探针标记,细胞的分离、培养和核转录因子的提取,NF-κB聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。结果实验条件为300V,电泳18分钟后,对分子探针活性没有影响,分子探针与核转录因子结合特异性良好,电泳条带清晰。结论本文建立的方法省时、简便,敏感性高、特异性强。     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

Objective To investigate the effect of SiO2 on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)in human silicofic alveolar macrophages (AM).Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and exposed to silicon dioxide for 3h,6h,12h,18h,24h and 36h.The expression of the MMP-9 in the AM were detected with zymography and immunological method and the expression of the TIMP-1 in the AM with immunological method.Results The expressions of MMP-9 in the AM increased clearly along with the time,reached peak at 24 h when detected with zymography (average optical density:3.061±0.153 vs 2.851±0.164,P＜0.05);and reached peak at 18h when detected with immunological method (average optical density:0.386±0.037 vs 0.322±0.034,P＜0.05).The expression of the TIMP-1 in the AM did not vary when detected with immunological method (P＞0.05).Conclusion SiO2 may affect the expression of MMP-9 and MMP-9 activity in the cultured AM.     

SiO2刺激矽肺肺泡巨噬细胞对MMP-9和TIMP-1表达的影响

Objective To investigate the effect of SiO2 on the expression of matrix metalloproteinase-9 (MMP-9)and tissue inhibitor of metalloproteinase-1 (TIMP-1)in human silicofic alveolar macrophages (AM).Methods Human alveolar macrophages were collected from a silicotic patient by bronchoalveolar lavage and exposed to silicon dioxide for 3h,6h,12h,18h,24h and 36h.The expression of the MMP-9 in the AM were detected with zymography and immunological method and the expression of the TIMP-1 in the AM with immunological method.Results The expressions of MMP-9 in the AM increased clearly along with the time,reached peak at 24 h when detected with zymography (average optical density:3.061±0.153 vs 2.851±0.164,P＜0.05);and reached peak at 18h when detected with immunological method (average optical density:0.386±0.037 vs 0.322±0.034,P＜0.05).The expression of the TIMP-1 in the AM did not vary when detected with immunological method (P＞0.05).Conclusion SiO2 may affect the expression of MMP-9 and MMP-9 activity in the cultured AM.